杏鮑菇菌糠飼料的發(fā)酵條件及其對山羊的飼喂效果

高旭紅 竇林敏 李佳騰 陳 磊 張恩平*

(1.西北農林科技大學動物科技學院，楊凌 712100；2.陜西國人菌業(yè)科技產業(yè)園有限公司，寶雞 721000)

飼料原料的匱乏和其成本問題一直是制約養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素，而且近年來越演越烈[1]。因此，盡快開發(fā)新型飼料資源迫在眉睫。我國作為食用菌生產大國，每年會生產上百萬噸的食用菌，與此同時會產生大約2.5倍于食用菌產量的菌糠。據不完全統(tǒng)計，2016年全國食用菌總產量已達2.57×107t，菌糠全年產量約6.43×107t。但由于菌類生產企業(yè)缺乏對菌糠資源再利用的意識和相關技術，通常將菌糠作為廢棄物丟棄或焚燒，既浪費了資源又造成環(huán)境污染。因此，開發(fā)合理利用菌糠資源的相關技術，特別是研發(fā)菌糠飼料化利用技術具有重要的生態(tài)意義和廣闊的市場前景。

菌糠飼料是以中上等品質的菌糠為主要原料，經過適當的生物處理和機械加工后制成的畜禽飼糧。諸多研究表明，在反芻動物飼糧中添加菌糠飼料飼喂后的經濟效益高于一些常規(guī)飼料(玉米秸稈[2]、玉米[3]、干稻草[4]、苜蓿干草[5]、小麥秸稈[6]、玉米芯[7])。但由于菌糠的成分主要由木屑、棉籽殼、玉米芯、農業(yè)秸稈等高纖維原料組成，導致其適口性差、消化率低，成為阻礙菌糠進一步利用的障礙[8]。而微生物發(fā)酵的飼料調制方式有效解決了這一問題，利用酶的生物催化功能降解杏鮑菇菌糠的纖維素和半纖維素成分，提高菌糠的柔軟性和膨脹度，產生易于反芻動物消化吸收的糖類、氨基酸、維生素等營養(yǎng)物質，以提高杏鮑菇菌糠的飼用性[9-10]。

杏鮑菇菌糠的飼料化應用有很大的潛力，其蛋白質含量和氨基酸組成與玉米接近，粗纖維含量又與粗飼料接近，是一種優(yōu)良的“中性”飼料。作為廉價、易開發(fā)的非常規(guī)飼料，菌糠不受季節(jié)影響全年均可供應。因此，本試驗使用EM原液對杏鮑菇菌糠與豆粕、麩皮復合基質進行發(fā)酵，以解決菌糠飼料適口性差、纖維含量高的問題；并以不同添加量的發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料配制馬頭山羊飼糧，研究發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料對馬頭山羊生產性能的影響，為開發(fā)反芻動物飼料資源，高效利用菌糠提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

杏鮑菇菌糠由陜西國人菌業(yè)產業(yè)科技園有限公司提供，主要原料為玉米芯等。麩皮、豆粕、食鹽和紅糖均購自陜西省楊凌市某市場。發(fā)酵原料營養(yǎng)水平見表1。發(fā)酵劑使用市售某品牌有效微生物群(EM)原液(內含乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌、放線菌和光合細菌，活菌數均≥1×107CFU/mL)。

表1 發(fā)酵原料營養(yǎng)水平

實測值 Measured values。

1.2 試驗設計

1.2.1 試驗1——杏鮑菇菌糠發(fā)酵試驗

麩皮和豆粕占發(fā)酵基質的干物質比例分別為4%和4%、4%和2%、2%和4%、2%和2%；使用EM原液為發(fā)酵劑，接種量為0.16%(干物質基礎)。將發(fā)酵原料與EM發(fā)酵液在飼料攪拌器中混合均勻并將含水量調節(jié)至30%左右裝袋密封，每袋裝1 kg，每個處理3個重復，常溫[(30±2) ℃]下發(fā)酵12 d，開袋取樣，評定發(fā)酵品質，選出最優(yōu)發(fā)酵基質組合用于生產發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料，利用其配制飼糧進行山羊飼養(yǎng)試驗。

1.2.2 試驗2——飼養(yǎng)試驗

飼養(yǎng)試驗于2017年4月23日—2017年6月6日在陜西省寶雞市裕隆生態(tài)養(yǎng)殖專業(yè)合作社進行。整個試驗期為45 d，包括5 d預試期和40 d正試期。選用體重為(27.98±4.95) kg的馬頭山羊(羯羊)60只，按同質原則隨機分為5組，包括3個試驗組和2個對照組，每組3個重復，每個重復4只羊。

試驗飼糧參照《肉羊飼養(yǎng)標準》NY/T 816—2004配制。在保證各組飼糧粗蛋白質和能量水平一致的情況下，試驗組飼糧使用發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料做原料，各組飼糧中比例分別為30%、45%、60%；對照組使用未發(fā)酵杏鮑菇菌糠做原料，各組飼糧中比例分別為30%和60%。試驗飼糧制成全混合顆粒料飼喂。試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

試驗開始前給試驗羊編號、驅蟲和防疫，并清理消毒圈舍。試驗羊實行全舍飼飼養(yǎng)，飼養(yǎng)管理條件相同，按重復分欄飼喂。每日08：00及17：00各投料1次，自由采食，自動飲水器飲水。次日飼喂前清掃料槽并稱量前1天剩余飼料，統(tǒng)計采食量。

表2 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

1)每千克預混料含 One kg of premix contained the following:VA 250 000 IU,VD 50 000 IU,VE 125 IU,VB3500 mg,VB912 mg,P 18 g,Mg 2 g,Mn 1.5 g,Zn 2 g,Cu 250 mg,I 50 mg,Co 15 mg。

2)消化能和代謝能為計算值，其余均為實測值。DE and ME were calculated values, while the others were measured values.

1.3 測定指標和測定方法

1.3.1 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的發(fā)酵品質評定

1.3.1.1 感官評定

參考青貯飼料品質評定的方法，分別從色澤、氣味、松軟程度等對發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料進行感官評定[11]。

1.3.1.2 發(fā)酵特性及營養(yǎng)成分分析

取3 g發(fā)酵飼料鮮樣，加入30 mL去離子水浸提40 min后用酸度計測定pH；取發(fā)酵飼料鮮樣用羥基聯(lián)苯比色法測定乳酸(lactic acid,LA)含量[12-13]；干物質回收率(dry matter recovery,DMR)和氣體損失率(gas loss rate,GL)，計算公式如下：

DMR(%)=(發(fā)酵后樣品質量×發(fā)酵后
樣品干物質含量)/(發(fā)酵前樣品
質量×發(fā)酵前樣品干物質含量)×100;GL(%)=(發(fā)酵后樣品質量-發(fā)酵后樣品
質量)/(發(fā)酵前樣品質量×
發(fā)酵前樣品干物質含量)×100。

發(fā)酵結束后將樣品置于鼓風干燥烘箱，65 ℃烘干至恒重，經24 h充分回潮后粉碎過40目篩，裝袋備用。干物質含量通過使用冠亞水分測定儀測出水分后計算得到；粗纖維含量按照GB/T 6434—1994測定；酸性洗滌纖維含量按照NY/T 1459—2007測定；中性洗滌纖維含量按照GB/T 20806—2006測定；半纖維素含量由中性洗滌纖維與酸性洗滌纖維含量的差值計算得到；粗灰分(Ash)含量按照GB/T 6438—2007測定；粗蛋白質含量按照GB/T 6432—1994測定；可溶性碳水化合物含量采用硫酸-蒽酮比色法[14]測定；有機物含量由干物質和粗灰分的差值計算得到。

1.3.1.3 黃曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的測定

黃曲霉毒素B1含量使用美國Beacon公司生產的黃曲霉毒素B1酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)快速檢測試劑盒檢測，方法按照產品說明書，使用儀器為美國熱電公司生產的Multiskan-FC型酶標儀。

1.3.2 山羊生產性能的測定

體增重：正試期第1天和最后1天早晨空腹分別稱取始重和末重，二者之差為體增重；平均日增重：體增重與試驗天數之比；料重比：干物質采食量與體增重之比；增重飼料成本：試驗期料重比與每千克飼料價格的乘積。

1.4 數據分析

試驗數據采用SPSS 20.0軟件進行單因素方差分析，用Duncan氏法進行多重比較，以P<0.05為差異顯著性標準。

2 結果與分析

2.1 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料感官評價

發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料均呈暗黃色，而未發(fā)酵的菌糠顏色發(fā)白。發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料均無霉變情況發(fā)生，質地松散，無黏手現象，有濃郁的酒香味和乳酸香味。

2.2 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的發(fā)酵特性及營養(yǎng)成分分析

由表3可知，豆粕和麩皮添加比例對發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的pH影響不顯著(P>0.05)。麩皮和豆粕添加比例分別為4%和4%、2%和2%時，發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的DMR顯著高于其他組2組(P<0.05)；麩皮和豆粕添加比例分別為4%和2%時，發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的GL顯著高于其他組(P<0.05)；麩皮和豆粕添加比例分別為4%和4%、2%和4%時，發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的乳酸含量顯著高于麩皮和豆粕添加比例為2%和2%時(P<0.05)。

麩皮和豆粕添加比例分別為4%和4%、4%和2%時，發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的粗纖維、中性洗滌纖維及酸性洗滌纖維含量顯著低于其他組(P<0.05)；麩皮和豆粕添加比例分別為2%和2%時，半纖維素量顯著低于其他組(P<0.05)；麩皮和豆粕添加比例分別為4%和2%、2%和2%時，粗灰分含量顯著高于其他組(P<0.05)；麩皮和豆粕添加比例分別為4%和4%、2%和4%時，粗蛋白質含量顯著高于其他2組(P<0.05)；麩皮和豆粕添加比例分別為2%和4%時，有機物含量顯著高于其他組(P<0.05)；麩皮和豆粕添加比例分別為2%和4%、2%和2%時，可溶性碳水化合物含量顯著高于其他2組(P<0.05)。

2.3 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的飼料衛(wèi)生檢測結果

由表4可知，發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料黃曲霉毒素B1的含量均在國家《飼料衛(wèi)生標準》GB 13078—2017的要求范圍(10～20 μg/kg)內。麩皮和豆粕的添加比例對黃曲霉毒素B1的含量影響不顯著(P>0.05)。

綜合考慮，豆粕和麩皮添加比例為4%和2%的發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料發(fā)酵品質最佳，且黃曲霉毒素B1含量較低，因此選擇此配方和發(fā)酵工藝進行生產發(fā)酵，并制作飼糧用于開展山羊飼喂效果的研究。

2.4 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料對山羊生產性能的影響

由表5可知，各組山羊的生產性能差異均不顯著(P>0.05)；但隨著發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料添加比例的增加，試驗羊的體增重及平均日增重有減少的趨勢，料重比有增加的趨勢。30%發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料添加組的體增重、平均日增重及干物質采食量上均高于30%未發(fā)酵杏鮑菇菌糠添加組，料重比低于30%未發(fā)酵杏鮑菇菌糠添加組，差異均不顯著(P>0.05)，飼料成本也差異不顯著(P>0.05)；60%發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料添加組的體增重、平均日增重及干物質采食量上均低于60%未發(fā)酵杏鮑菇菌糠添加組，料重比高于60%未發(fā)酵杏鮑菇菌糠添加組，差異均不顯著(P>0.05)，飼料成本也差異不顯著(P>0.05)。

綜合考慮，在飼糧中添加30%的發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料能夠獲得較好的飼喂效果。

表3 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的發(fā)酵特性及營養(yǎng)成分

同行數據肩標不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表4 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的黃曲霉毒素B1含量

表5 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料對山羊生產性能的影響

3 討 論

3.1 復合發(fā)酵對杏鮑菇菌糠飼料品質的影響

食用菌菌糠是食用菌生產后廢棄的固體培養(yǎng)基，又稱菌渣，是由菌絲體和棉籽殼、木屑、秸稈等農業(yè)廢料組成的復合物，其有機質含量高，各種養(yǎng)分齊全[15]。通過酶解作用等生物轉化過程，菌糠的風味和營養(yǎng)價值比發(fā)酵前有所提高[16]。現階段已有一些關于菌糠飼料發(fā)酵工藝的研究。班雯婷等[17]分別用枯草芽孢桿菌和產朊假絲酵母發(fā)酵靈芝菌糠，發(fā)現菌糠中木質纖維素的降解率達47.20%，粗蛋白質含量由6.12%增加至13.84%；李志濤等[18]得到提高發(fā)酵白靈菇菌糠粗蛋白質的最佳條件為：酵母菌、乳酸菌添加比例為1∶3，菌液添加量為3%，35 ℃下發(fā)酵15 d；徐淏等[19]以88%的杏鮑菇菌糠、2%的尿素、10%的麩皮為發(fā)酵基質組成，在料水比1∶2、溫度28 ℃、pH自然的條件下，先后接種靈芝和釀酒酵母發(fā)酵11 d，菌糠飼料的真蛋白質和粗多糖含量分別比接種前提高了68.54%和132.12%；李振等[20]研究表明，菌糠∶玉米粉為90∶10，乳酸菌∶酵母菌為1∶3、發(fā)酵溫度為28 ℃時菌糠飼料的粗蛋白質含量達到18.24%。

本試驗結果表明，豆粕和麩皮添加比例分別為4%和2%的發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料發(fā)酵品質最佳，且黃曲霉毒素B1含量較低；發(fā)酵后與發(fā)酵前相比粗纖維含量降低了8.78%，中性洗滌纖維含量降低了11.56%，酸性洗滌纖維含量降低了18.88%，粗蛋白質含量提高了19.32%，粗灰分含量提高了8.29%，黃曲霉毒素B1含量低至3.03 μg/kg。菌糠經過杏鮑菇的出菇過程已消耗了發(fā)酵基質中的一部分碳源和氮源，在制作發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料時添加適當比例的豆粕和麩皮補充消耗的營養(yǎng)物質，利于EM原液中的微生物更好地生長，加快菌種的生長速度和發(fā)酵進程[21]。發(fā)酵過程中有酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌等多種活菌及其代謝產物，使菌糠飼料味道醇香濃郁，適口性好[22]，產生的乳酸可抑制有害菌的生長，減少黃曲霉生長的可能性，有效地抑制黃曲霉毒素B1的產生。

3.2 發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料對山羊生產性能的影響

菌糠由于其原料組成中含有木屑、玉米芯等纖維素和木質素含量高的物質，使得其適口性差，導致動物采食量減少而影響生產性能。通過EM原液發(fā)酵，能改杏鮑菇菌糠的風味，降低纖維硬度，從而增強山羊食欲，提高生產力。目前，已有一些報道研究飼糧中添加菌糠飼料對育肥羊生產性能的影響，但其最適的添加比例各有不同。程云輝等[23]在波雜山羊飼糧中添加20%的杏鮑菇菌糠可使每只羊的收益增加3.3元。Fazaeli等[24]在肉羊飼糧中飼喂20%以下的麥秸菌糠，平均日增重和干物質采食量均差異不顯著，且不影響消化率。李大軍等[3]用5%～15%平菇菌糠替代育成綿羊精補料中的玉米，增重和綜合經濟效益最佳。李新等[25]在波爾山羊飼糧中添加20%的杏鮑菇菌糠可提高羊肉品質。郭萬正等[26-27]在波爾山羊羔羊飼糧中添加12%～20%的發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料，平均日增重可達到122～137 g/d，添加10%的金針菇菌糠，增重效果和經濟效益最佳。陸亞珍等[28]研究表明，在波雜山羊育肥期發(fā)酵菌糠的適宜添加比例為50%。

本試驗用發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料與未發(fā)酵杏鮑菇菌糠配制飼糧飼喂馬頭山羊，結果表明雖然各組增重效果差異不顯著，但隨著發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料添加比例的增加試驗羊的生產性能下降，說明其在山羊飼糧中的占比不宜太高；在最適添加比例(30%)時，飼喂發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的平均日增重和體增重均高于飼喂未發(fā)酵杏鮑菇菌糠，料重比低于飼喂未發(fā)酵杏鮑菇菌糠。這與劉志芳等[6]、郭萬正等[29]的研究結果一致。原因一是利用益生菌對杏鮑菇菌糠進行發(fā)酵后，礦物質元素轉化率提高，與菌體內的蛋白質、氨基酸、多糖等結合，大部分以有機態(tài)存在，易于吸收，有較高的利用率和生物學活性[30-31]；二是微生物發(fā)酵飼料中的有益菌群能在動物消化道繁衍，產生多種消化酶，增強山羊對纖維等大分子物質的降解作用，同時誘導動物機體內源消化酶的分泌，從而使發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的轉化率提高[32]。山羊對發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料表觀消化率的影響將另文報道。

4 結 論

①使用EM原液，添加4%豆粕和2%麩皮混和發(fā)酵，可提升發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料的發(fā)酵品質。

② 山羊飼糧中添加30%發(fā)酵杏鮑菇菌糠飼料可取得較好的飼喂效果。

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