腸上皮細(xì)胞緊密連接蛋白的結(jié)構(gòu)功能及其調(diào)節(jié)

王希 廖呂釗 江榮林

人或動(dòng)物腸上皮細(xì)胞組成了十分重要的機(jī)械屏障，對(duì)維護(hù)完整的腸黏膜屏障功能具有重要意義。相鄰的上皮細(xì)胞間通過多種蛋白及分子構(gòu)成的連接復(fù)合體，從頂端到基膜依次為緊密連接（TJ）、黏附連接、橋粒連接和縫隙連接等，共同起著加強(qiáng)細(xì)胞間連接功能、組成傳遞信息通道的作用，其中以TJ最為重要。腸上皮細(xì)胞TJ與多種腸道疾病的發(fā)生、發(fā)展以及全身缺血缺氧后出現(xiàn)腸損傷、腸黏膜屏障功能受損等有著密切關(guān)系。近年來，關(guān)于TJ的功能結(jié)構(gòu)及其影響因素的研究日益增多，本文就腸上皮細(xì)胞TJ的蛋白組成、結(jié)構(gòu)功能、調(diào)節(jié)途徑及其影響因素作一系統(tǒng)闡述。

1 腸上皮細(xì)胞TJ功能及結(jié)構(gòu)組成

腸上皮細(xì)胞的TJ存在于靠近腸腔側(cè)的上皮細(xì)胞側(cè)面，是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的、由多種蛋白及分子組成、具有多種功能的復(fù)合體，屬于不通透連接。其功能主要有：（1）連接上皮細(xì)胞，封閉細(xì)胞間的空隙；（2）維持細(xì)胞極性，限制細(xì)胞不同液體間的脂質(zhì)和完整膜蛋白的自由擴(kuò)散；（3）維持通透性屏障，只能允許離子和可溶性小分子物質(zhì)通過，限制大分子及微生物通過，并可調(diào)節(jié)離子和大分子物質(zhì)跨細(xì)胞旁路的被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)。構(gòu)成TJ的蛋白及分子主要包括3種跨膜蛋白，即咬合蛋白（Occludin）、閉合蛋白（Claudins）、連接黏附分子（JAM）及閉合小環(huán)蛋白（ZOs，一種胞漿蛋白），見圖 1。

圖1 腸黏膜上皮細(xì)胞TJ模式圖

1.1 Occludin Occludin有2個(gè)亞型，結(jié)構(gòu)特點(diǎn)為經(jīng)過4次跨膜，形成2個(gè)細(xì)胞外環(huán)。相鄰細(xì)胞間Occludin胞外環(huán)相互結(jié)合，其胞內(nèi)域的氨基酸殘基富含大量電荷，與ZOs直接結(jié)合，再通過胞漿蛋白與骨架蛋白相互作用[1]。Occludin蛋白通過磷酸化來調(diào)節(jié)TJ復(fù)合體的定位及功能，從而影響TJ的滲透性，同時(shí)有調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附及維持細(xì)胞極性等功能。

1.2 Claudins 目前已發(fā)現(xiàn)Claudins有26種異構(gòu)體，聚合于細(xì)胞質(zhì)膜上構(gòu)成TJ復(fù)合物的主鏈，其每一分子均由4個(gè)右螺旋折疊結(jié)構(gòu)的跨膜結(jié)構(gòu)域和2個(gè)胞外環(huán)狀結(jié)構(gòu)組成，這2個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)的第一環(huán)大于第二環(huán)，有較強(qiáng)的疏水性，且氨基及羧基末端都存在于細(xì)胞內(nèi)，通過PDZ結(jié)合域與ZOs分子相連[2]。這2個(gè)細(xì)胞外環(huán)結(jié)構(gòu)是組成TJ的重要結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，且影響著TJ條帶形成及離子選擇通透性。

1.3 JAM JAM有4個(gè)異構(gòu)體，而表達(dá)于腸上皮細(xì)胞的是JAM-1、JAM-4。與其他TJ跨膜蛋白不同，JAM 家族分子是單次跨膜蛋白，N-端位于細(xì)胞膜外并具有2個(gè)免疫球蛋白樣環(huán)狀結(jié)構(gòu)，即二聚體結(jié)構(gòu)。在腸上皮細(xì)胞表面，一個(gè)JAM二聚體與相鄰細(xì)胞表達(dá)的另一個(gè)JAM二聚體相互作用，形成一個(gè)四聚體，構(gòu)成JAM間相連的結(jié)構(gòu)[3]，并通過其PDZ結(jié)構(gòu)域與ZOs形成非Ca2+依賴性連接。

1.4 ZOs ZOs蛋白有3種異構(gòu)體，屬于膜相關(guān)鳥苷酸激酶家族。ZOs位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)膜表面，一端與細(xì)胞質(zhì)內(nèi)Occludin蛋白末端連接，另一端與TJ和細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白相連。ZOs對(duì)TJ的組成及細(xì)胞屏障通透性的維持有著密切的關(guān)系[4]。

2 腸上皮細(xì)胞TJ的調(diào)節(jié)途徑

腸上皮細(xì)胞TJ作為信號(hào)中心，一方面調(diào)節(jié)細(xì)胞外環(huán)境與細(xì)胞內(nèi)之間的信息傳遞；另一方面，其本身亦受到細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)通路的調(diào)節(jié)，如絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、蛋白激酶 C（PKC）、肌球蛋白輕鏈激酶（MLCK）、Rho/Rho激酶、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄活化因子 3（STAT3）、Gα12、芳香烴受體（AhR）等，共同調(diào)節(jié)TJ蛋白的表達(dá)，控制TJ蛋白的組裝、分解、磷酸化，影響TJ的結(jié)構(gòu)與功能。

MAPK信號(hào)通路主要包括絲裂原活化蛋白（p38）、細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）等2條通路，共同參與TJ蛋白及腸上皮屏障功能的調(diào)控[5-6]。蛋白質(zhì)的磷酸化在TJ的組裝過程中起著重要作用，是維持和調(diào)節(jié)細(xì)胞旁通透性的關(guān)鍵，而磷酸化失調(diào)可導(dǎo)致TJ功能嚴(yán)重受損。PKC能使Occludin、Claudins磷酸化，是TJ重要的調(diào)節(jié)途徑[7]。促炎細(xì)胞因子，如血小板活化因子、IFN、IL-1等，通過激活NF-κB誘導(dǎo)MLCK介導(dǎo)的肌球蛋白輕鏈（MLC）磷酸化，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上的ZOs與Occludin蛋白分離，相鄰細(xì)胞的間隙增大，從而破壞TJ，增加腸道通透性[8]。有研究發(fā)現(xiàn)，抑制Rho活性可導(dǎo)致ZOs和Occludin蛋白在TJ處定位降低；相反，Rho激活后能使ZOs和Occludin蛋白在TJ處沉積，從而維持TJ的功能[1]。Gα12屬于三聚體G蛋白家族，通過SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合到ZO-1，Gα12活化能增強(qiáng)TJ蛋白的磷酸化，使TJ蛋白被破壞、Z0-1和Na+-K+-ATP酶的正常分布發(fā)生改變，細(xì)胞極性消失[9]。STAT3是介導(dǎo)細(xì)胞因子信號(hào)通路的重要轉(zhuǎn)錄因子，可與多種細(xì)胞因子相結(jié)合并通過酪氨酸激酶（JAK）/STAT3途徑發(fā)揮誘導(dǎo)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，通過調(diào)控基因表達(dá)來影響Claudin-1和Occludin 的水平[10]。吲哚并（3，2-B）咔唑-6-甲醛活化 AhR后，通過誘導(dǎo)一系列代謝酶的基因表達(dá)，從而影響TJ蛋白ZOs表達(dá)及其在上皮細(xì)胞間的分布[11]。

3 TJ結(jié)構(gòu)與功能的影響因素

3.1 腸道疾病相關(guān)影響 多種腸道疾病的發(fā)生，伴隨著腸上皮細(xì)胞TJ的損傷、腸屏障結(jié)構(gòu)及功能的破壞，出現(xiàn)病理性改變。

3.1.1 炎癥性腸病 炎癥性腸病包括潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病。在發(fā)病時(shí)，腸黏膜所產(chǎn)生的大量炎癥細(xì)胞因子、炎癥介質(zhì)等會(huì)損傷腸上皮細(xì)胞，從而誘導(dǎo)上皮細(xì)胞凋亡，并通過多個(gè)通路影響腸上皮細(xì)胞TJ蛋白的表達(dá)及分布，破壞TJ結(jié)構(gòu)，造成腸黏膜屏障功能受損[12-13]。此外，腸上皮細(xì)胞TJ結(jié)構(gòu)、蛋白表達(dá)和功能異常還被證實(shí)參與了乳糜瀉和腸道易激綜合征的發(fā)生、發(fā)展[14]。在認(rèn)識(shí)到TJ屏障功能受損可引起一系列腸道疾病的基礎(chǔ)上，已有學(xué)者開始探索如何增強(qiáng)腸上皮細(xì)胞TJ的屏障功能，以減輕和緩解炎癥性腸病的臨床表現(xiàn)。

3.1.2 腸道腫瘤 腸上皮細(xì)胞TJ蛋白表達(dá)異常，與腫瘤的發(fā)生、浸潤和轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)系。TJ的完整性遭到破壞，通透性隨之增加，營養(yǎng)因子通過TJ擴(kuò)散，促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的存活及擴(kuò)散。TJ的改變對(duì)腫瘤的診斷、治療及預(yù)后判斷都有著重要的意義，如在大腸癌患者癌組織中腸上皮細(xì)胞TJ蛋白中的Claudin-1明顯高于正常組織，其表達(dá)狀態(tài)與腫瘤的分化、轉(zhuǎn)移、分期有著密切聯(lián)系[15]；同樣，Claudin-3可促進(jìn)結(jié)腸癌的惡性轉(zhuǎn)化，其機(jī)制可能是由表皮生長因子激活ERK1/2等途徑而調(diào)控Claudin-3的表達(dá)[16]。

3.1.3 腸道感染 細(xì)菌引起的腸道感染同樣會(huì)影響腸上皮細(xì)胞TJ結(jié)構(gòu)及功能。腸道發(fā)生致病性大腸桿菌感染時(shí)，會(huì)改變TJ蛋白Occludin、ZOs及Claudins的分布，破壞腸上皮細(xì)胞TJ超微結(jié)構(gòu)，使得TJ的通透性增加[17]?；魜y弧菌能產(chǎn)生一種具有蛋白酶作用的毒素來消化Occludin，從而破壞TJ的完整性。白色念珠菌可通過激活NF-κB、MAPK信號(hào)通路來破壞腸上皮細(xì)胞TJ蛋白的表達(dá)及功能，增加其通透性，影響腸黏膜屏障功能[18]。人類腸道病毒71型是引起手足口病的主要病原體，感染后可使腸上皮細(xì)胞TJ蛋白ZOs表達(dá)減少，改變TJ的排列，增加TJ通透性，促進(jìn)病毒及有害毒素的移位[19]。HIV病毒感染時(shí)可誘發(fā)腸上皮細(xì)胞內(nèi)的NF-κB激活，減少ZO-1表達(dá)，進(jìn)而影響其他TJ蛋白的表達(dá)及合成，使得TJ結(jié)構(gòu)完整性遭到破壞，腸黏膜屏障通透性增加[20]。

3.2 缺血再灌注損傷 目前研究已經(jīng)證實(shí)，在多種病理?xiàng)l件下，如膿毒癥、感染性休克、嚴(yán)重創(chuàng)傷、腹部手術(shù)等引起腸黏膜缺血再灌注損傷，均會(huì)導(dǎo)致腸黏膜屏障結(jié)構(gòu)和功能受損。研究發(fā)現(xiàn)腸黏膜缺氧會(huì)引起腸黏膜炎癥，釋放大量的炎癥因子如 TNF-α、INF-γ、IL-1、IL-6和氧自由基等，這些炎癥因子進(jìn)一步加重缺氧，造成腸黏膜屏障功能受損[21]。研究發(fā)現(xiàn)TNF-α單獨(dú)作用即可引起腸黏膜屏障功能損害，其機(jī)制可能是通過誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞的MLCK蛋白表達(dá)，從而引起MLC磷酸化增加及TJ蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-1重新分布，最終導(dǎo)致腸黏膜屏障功能損害[22]。

3.3 腸道菌群 健康的人腸道內(nèi)各種細(xì)菌共生，形成了一個(gè)動(dòng)態(tài)的微生物區(qū)系，當(dāng)大量外源致病菌入侵腸道或腸道內(nèi)正常的微生物菌群被破壞時(shí)會(huì)引起腸道菌群失調(diào)，進(jìn)而通過多種方式破壞TJ，誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞凋亡、增加腸上皮細(xì)胞間的通透性，進(jìn)一步促進(jìn)病原菌、毒素等易位，引發(fā)內(nèi)源性感染。王宏剛等[23]在多黏菌素E誘導(dǎo)腸道菌群失調(diào)的研究中發(fā)現(xiàn)，各菌群的數(shù)量和比例發(fā)生明顯變化，雙歧桿菌、乳桿菌等有益菌受到抑制，腸桿菌、腸球菌等條件致病菌大量繁殖，從而黏附和定植于腸黏膜，破壞并突破腸上皮細(xì)胞TJ，導(dǎo)致細(xì)菌易位。此外，有研究證明益生菌等對(duì)病原菌感染、炎癥性腸病等多種原因引起的TJ破壞及腸黏膜損傷均具有保護(hù)與修復(fù)作用，其通過直接促進(jìn)腸上皮細(xì)胞TJ蛋白表達(dá)或間接通過抑制多種細(xì)胞因子如IL-6、IFN-γ、NO等信號(hào)傳導(dǎo)通路來調(diào)節(jié)TJ蛋白表達(dá)，進(jìn)而降低腸黏膜的通透性，阻止病原菌對(duì)腸黏膜屏障功能的損傷[24-27]。

3.4 激素影響 目前研究證明，多種激素參與腸上皮細(xì)胞的TJ及腸黏膜屏障功能的調(diào)節(jié)及修復(fù)過程。如生長激素（GH）、生長抑素（SST）、腎上腺髓質(zhì)激素（AM）、糖皮質(zhì)激素（GCS）、雌激素（EH）等。GH具有明顯促進(jìn)蛋白質(zhì)合成的作用，GH受體在腸道吸收細(xì)胞、隱窩基底柱狀細(xì)胞和腸道內(nèi)分泌細(xì)胞等均有大量分布。研究表明GH可激活MAPK/ERK、MAPK/JNK等通路，調(diào)節(jié)TJ蛋白磷酸化，進(jìn)而影響TJ結(jié)構(gòu)及功能[28]。腸上皮細(xì)胞是SST重要的靶細(xì)胞，表達(dá)多種生長抑素受體（SSTR），SST通過與腸上皮的SSTR結(jié)合而發(fā)揮生物作用，通過抑制MAPK/ERK通路的激活而明顯改善脂多糖引起的腸上皮細(xì)胞TJ蛋白表達(dá)及分布異常，并增加Occludin、ZOs的表達(dá)，改善腸上皮細(xì)胞屏障功能[29]。有研究表明，AM可通過下調(diào)肌球蛋白輕鏈的磷酸化而調(diào)節(jié)TJ蛋白表達(dá)，從而穩(wěn)定腸黏膜屏障功能[30]。田鑄等[31]發(fā)現(xiàn)在缺氧/復(fù)氧條件下，AM可上調(diào)TJ蛋白的表達(dá)，減輕腸上皮屏障功能的破壞，其機(jī)制可能與抑制NF-κB有關(guān)。GCS可通過激活GCS受體而抑制腸道炎癥，保護(hù)TJ結(jié)構(gòu)與功能的完整[32]。EH通過雌激素受體β（ERβ）上調(diào)Occludin和JAM-1的表達(dá)，從而降低細(xì)胞旁的通透性[33]。

3.5 中醫(yī)措施 在我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，中藥、針灸對(duì)腸上皮細(xì)胞TJ功能結(jié)構(gòu)的完整以及相關(guān)疾病的治療同樣發(fā)揮著獨(dú)特的作用。有研究發(fā)現(xiàn)，健脾清熱活血方藥可能通過增加Claudins的表達(dá)來促進(jìn)腸黏膜修復(fù)，以達(dá)到緩解潰瘍性結(jié)腸炎的效果[34]。翟金海等[35]發(fā)現(xiàn)，運(yùn)用清腸化濕方藥可抑制大鼠結(jié)腸組織中TNF-α水平，從而降低對(duì)Claudins的破壞，起到治療大鼠結(jié)腸炎的作用。Shang等[36]發(fā)現(xiàn)在治療克羅恩病患者的過程中，針刺天樞、氣海、足三里、上巨虛等穴位時(shí)，可增加TJ中Claudin-1、ZO-1表達(dá)，促進(jìn)TJ結(jié)構(gòu)及功能的修復(fù)。

4 總結(jié)與展望

腸上皮細(xì)胞TJ是構(gòu)成腸黏膜屏障中機(jī)械屏障的重要組成部分之一，對(duì)維持腸屏障結(jié)構(gòu)與功能的完整性具有重要意義。隨著對(duì)腸上皮細(xì)胞TJ的深入研究，尤其是對(duì)TJ結(jié)構(gòu)、功能機(jī)制以及其影響因素的探索，為感染、腫瘤、炎癥性腸病、缺血再灌注損傷等相關(guān)疾病的防治提供了新思路。在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，中藥、針刺相關(guān)穴位等對(duì)于維持腸上皮細(xì)胞TJ功能結(jié)構(gòu)的完整性同樣有著促進(jìn)作用，從而防治腸上皮細(xì)胞間TJ結(jié)構(gòu)功能異常相關(guān)疾病。今后在消化系統(tǒng)及危重病的臨床診治中，將有越來越多的措施關(guān)注與改善腸黏膜上皮細(xì)胞TJ，從而保護(hù)腸黏膜屏障功能并改善疾病預(yù)后。

[2]Suzuki H,Tani K,Fujiyoshi Y．Crystal structures of claudins:insights into their intermolecular interactions[J]．Annals of the New York Academy of Sciences,2017,1397(1):25-34．

[3]Zhao H,Hefen YU,Martin TA,et al．The role of JAM-B in cancer and cancer metastasis(Review)[J]．Oncology Reports,2016,36(1):3-9．

[4]Müller SL,Portwich M,Schmidt A,et al．The tight junction protein occludin and the adherens junction protein alpha-catenin share a common interaction mechanism with ZO-1[J]．Journal of Biological Chemistry,2005,280(5):3747-3756．

[5]Kim B,Breton S．The MAPK/ERK-Signaling Pathway Regulates the Expression and Distribution of Tight Junction Proteins in the Mouse Proximal Epididymis1[J]．Biology of Reproduction,2016,94(1):1-12,22．

[6]Pizzino G,Bitto A,Pallio G,et al．Blockade of the JNK signalling as a rational therapeutic approach to modulate the early and late steps of the inflammatory cascade in polymicrobial sepsis[J]．Mediators of Inflammation,2015(2015):591572．doi:10．1155/2015/591572．

[7]Wardill HR,Gibson RJ,Logan RM,et al．TLR4/PKC mediated tight junction modulation:Aclinical marker of chemotherapy-induced gut toxicity?[J]．Int J Cancer,2014,135(11):2483-2492．

[8]Cao M,Wang P,Sun C,et al．Amelioration of IFN-γ and TNF-α-Induced Intestinal Epithelial Barrier Dysfunction by Berberine via Suppression of MLCK-MLC Phosphorylation Signaling Pathway[J]．Plos One,2013,8(5):e61944．doi:10．1371/journal．pone．0061944．

[9]Meyer TN,Hunt J,Schwesinger C,et al．Galpha12 regulates epithelial cell junctions through Src tyrosine kinases[J]．Am J Physiol Cell Physiol,2003,285(5):C1281-1293．

[10]Morikawa T,Baba Y,Mai Y,et al．STAT3 Expression,Molecular Features,Inflammation Patterns and Prognosis in a Database of 724 Colorectal Cancers[J]．Clinical Cancer Research,2011,17(17):1452-1462．

[11]韓賓,盛百伐,張治草,等．小鼠腸急性缺血再灌注模型中芳香烴受體活化對(duì)腸黏膜屏障功能的影響[J]．第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2016,38(10):1090-1095．

[12]Wu RL,Vazquezroque MI,Carlson P,et al．Gluten-induced symptoms in diarrhea-predominant irritable bowel syndrome are associated with increased myosin light chain kinase activity and claudin-15 expression[J]．Laboratory investigation;a journal of technical methods and pathology,2017,97(1):14-23．

[13]Vivinus-Nébot M,Frin-Mathy G,Bzioueche H,et al．Functional bowel symptoms in quiescent inflammatory bowel diseases:role of epithelial barrier disruption and low-grade inflammation[J]．Gut,2014,63(5):744-752．

[14]Barmeyer C,Schulzke JD,Fromm M．Claudin-related intestinal diseases[J]．Seminars in Cell&Developmental Biology,2015,42:30-38．

[15]李燕,吳密璐,駱玉霜,等．緊密連接蛋白1和血管內(nèi)皮生長因子C蛋白與大腸癌的關(guān)系研究[J]．重慶醫(yī)學(xué),2016,45(7):909-911．

[16]de Souza WF,Fortunatomiranda N,Robbs BK,et al．Claudin-3 Overexpression Increases the Malignant Potential of Colorectal Cancer Cells:Roles of ERK1/2 and PI3K-Akt as Modulators of EGFR signaling[J]．Plos One,2013,8(9):e74994．doi:10．1371/journal．pone．0074994．

[17]張強(qiáng)．腸致病性大腸桿菌EPEC及其突變株UMD874感染對(duì)腸黏膜屏障功能及腸道菌群的影響[D]．南京大學(xué),2011．

[19]陳生林．腸道病毒71型感染人腸道細(xì)胞的入侵機(jī)制研究[D]．第二軍醫(yī)大學(xué),2016．

[20]Nazli A,Chan O,Dobson-Belaire WN,et al．Exposure to HIV-1 directly impairs mucosal epithelial barrier integrity allowing microbial tuanslocation[J]．PLoS Pathogens,2010,6(4):e1000852．doi:10．1371/journal．ppat．1000852．

[21]Lekkou A,Mouzaki A,Siagris D,et al．Serum lipid profile,cytokine production,and clinical outcome in patients with severe sepsis[J]．Journal of Critical Care,2014,29(5):723-727．

[22]Wang F,Graham WV,Wang Y,et al．Interferon-gamma and tumor necrosis factor-alpha synergize to induce intestinal epithelial barrier dysfunction by up-regulating myosin light chain kinase expression[J]．American Journal of Pathology,2005,166(2):409-419．

[23]王宏剛,張偉,朱維銘,等．多黏菌素E誘導(dǎo)腸道菌群失調(diào)對(duì)腸屏障功能和細(xì)菌易位的影響[J]．腸外與腸內(nèi)營養(yǎng),2012,19(2):102-106．

[24]Srutkova D,Schwarzer M,Hudcovic T,et al．Bifidobacterium longum CCM 7952 Promotes Epithelial Barrier Function and Prevents Acute DSS-Induced Colitis in Strictly Strain-Specific Manner[J]．Plos One,2015,10(7):e0134050．doi:10．1371/journal．pone．0134050．

[25]Smith IM,Baker A,Arneborg N,et al．Non-Saccharomyces yeasts protect against epithelial cell barrier disruption induced by Salmonella enterica subsp．enterica serovar Typhimurium[J]．Letters in Applied Microbiology,2015,61(5):491-497．

[26]Yu Q,Yuan L,Deng J,et al．Lactobacillus protects the integrity of intestinal epithelial barrier damaged by pathogenic bacteria[J]．Frontiers in Cellular&Infection Microbiology,2015,5:26．doi:10．3389/fcimb．2015．00026．

[27]Yang F,Wang A,Zeng X,et al．Lactobacillus reuteri I5007 modulates tight junction protein expression in IPEC-J2 cells with LPS stimulation and in newborn piglets under normal conditions[J]．BMC Microbiology,2015,15(1):1-11．

[28]Soendergaard C,Young JA,Kopchick JJ．Growth Hormone Resistance-Special Focus on Inflammatory Bowel Disease[J]．International Journal of Molecular Sciences,2017,18(5):1019．doi:10．3390/ijms18051019．

[29]雷姍．生長抑素對(duì)腸上皮細(xì)胞屏障功能的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D]．南方醫(yī)科大學(xué),2014．

[30]Yi Z,Fan H,Liu X,et al．Adrenomedullin improves intestinal epithelial barrier function by downregulating myosin light chain phosphorylation in ulcerative colitis rats[J]．Molecular Medicine Reports,2015,12(3):3615-3620．

[31]田鑄,周維均,茍亞軍．腎上腺髓質(zhì)素對(duì)腸上皮細(xì)胞缺氧/復(fù)氧后屏障功能的影響[J]．局解手術(shù)學(xué)雜志,2016,25(4):251-254．

[32]Fischer A,Gluth M,Weege F,et al．Glucocorticoids regulate barrier function and claudin expression in intestinal epithelial cells via MKP-1[J]．American Journal of Physiology Gastrointestinal&Liver Physiology,2014,306(3):218-228．

[33]Braniste V,Leveque M,Buisson-Brenac C,et al．Oestradiol decreases colonic permeability through oestrogen receptor beta-mediated up-regulation of occludin and junctional adhesion molecule-A in epithelial cells[J]．Journal of Physiology,2009,587(13):3317-3328．

[34]洪流東,黃會(huì)云,陳玉,等．健脾清熱活血類方藥對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜功能障礙及claudin-2、claudin-5的影響[J]．中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志,2015(9):599-603．

[35]翟金海,沈洪,倪菲菲,等．清腸化濕方對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠結(jié)腸炎結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白claudin-1的影響[J]．南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,29(2):151-154．

[36]Shang HX,Wang AQ,Bao CH,et al．Moxibustion combined with acupuncture increases tight junction protein expression in Crohn's disease patients[J]．World Journal of Gastroenterology,2015,21(16):4986-4996．