兒童感染性肺炎患者血液中炎癥因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受體檢測(cè)與臨床意義分析*

孫　林，胡三強(qiáng)，宋傳濤　

(連云港市婦幼保健院檢驗(yàn)科，江蘇連云港　222000)

感染性肺炎是臨床兒科常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)感染性疾病，當(dāng)兒童免疫力降低時(shí)，可由細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體、立克次體、真菌和寄生蟲等入侵肺部引起炎癥反應(yīng)，以支原體、病毒、細(xì)菌的感染為主。調(diào)查研究顯示[1]，支原體感染在感染性肺炎所占比重可達(dá)到56.1%，病毒性感染可占14.9%，細(xì)菌性感染則占12.0%。該病的早期臨床特征以發(fā)燒、咳嗽、多痰、胸痛等為主，若診斷或治療不及時(shí)，便會(huì)出現(xiàn)氣喘、呼吸急促等，嚴(yán)重時(shí)可危及生命[2]，所以該病的早期準(zhǔn)確診斷及預(yù)防顯得尤為重要。目前，感染性肺炎的診斷方法以胸部X線結(jié)合纖維支氣管鏡檢查為主，但是有效檢出率受到限制。若能從疾病的病因及發(fā)病機(jī)制檢測(cè)角度著手，將在一定程度上提高疾病的檢出率[3]。由于感染性肺炎是以炎癥為病理特征的疾病，故患者在發(fā)病時(shí)，其機(jī)體內(nèi)炎癥介質(zhì)的水平會(huì)發(fā)生變化，如腫瘤壞死因子(TNF- α)及白細(xì)胞介素(IL)等[4，5]。另外，關(guān)于肺炎病原體診斷的方法報(bào)道有限[6，7]，因此，本研究選擇感染性肺炎患兒為研究對(duì)象，按照其感染的病原菌類型差異，分為病毒感染組、支原體感染組及細(xì)菌感染組，同時(shí)選擇30例健康兒童作為對(duì)照組，測(cè)定各組受試者血液中嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)數(shù)量、TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，嗜酸性細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)、免疫球蛋白E(IgE)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、VEGF- R1和VEGF- R2的水平，以期為感染性肺炎的診斷提供一定的參考。

1　材料與方法

1.1研究對(duì)象選擇2016年3月～2017年3月來(lái)連云港市婦幼保健院就診的80例感染性肺炎患兒，符合《兒科學(xué)》中感染性肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)過(guò)影像學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)心、肝、脾、腎等其他器質(zhì)性病變。將這些患兒納入觀察組，其中男性42例，女性38例，年齡1～14歲，平均年齡6.31±2.74歲，病程2～22天，平均病程8.45±3.75天。觀察組患兒經(jīng)病原微生物檢查后，根據(jù)病原菌的差異[8]，將肺炎患兒的感染類型分為病毒感染、支原體感染及細(xì)菌感染。支原體感染組患兒31例，男性16例，女性15例，年齡1～12歲，平均年齡6.15±2.18歲，病程3～21天，平均病程8.23±3.92天；病毒感染組患兒27例，男性14例，女性13例，年齡1～13歲，平均年齡5.95±2.88歲，病程2～19天，平均病程7.89±3.46天；細(xì)菌感染組患兒22例，男性11例，女性11例，年齡2～14歲，平均年齡6.84±2.21歲，病程4～22天，平均病程9.23±3.57天。選擇30例健康的兒童作為對(duì)照組，男性16例，女性14例，年齡1～14歲，平均年齡6.39±2.93歲。各組受試兒童一般資料之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2試劑和儀器全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀為邁瑞B(yǎng)C5380，試劑由邁瑞公司提供；TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2試劑盒均購(gòu)自南京建成生物科技有限公司。

1.3方法對(duì)照組和觀察組的所有受試兒童在夜間空腹8 h后，由醫(yī)護(hù)人員統(tǒng)一由同側(cè)手臂抽取靜脈血2 ml于含抗凝劑EDTA- K2的潔凈試管中，采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀測(cè)定其中EOS數(shù)量。另外抽取6 ml靜脈血于10 ml無(wú)抗凝劑的潔凈試管中，常溫靜置1.5 h后，分批置于離心機(jī)中，3 000 r/min 4℃下離心10 min，將上層血清取出于潔凈試管中保存。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2的水平，采用免疫散射比濁法測(cè)定血清中IgE的水平。各相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照各自試劑盒中提供的說(shuō)明書進(jìn)行。

2　結(jié)果

2.1觀察組和對(duì)照組血液中炎癥因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受體檢測(cè)見(jiàn)表1。觀察組患者血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，EOS，ECP，IgE，VEGF，VEGF- R1和VEGF- R2的水平均顯著高于對(duì)照組，兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.325～3.593，均P<0.05)。

表1 觀察組和對(duì)照組血液中炎癥因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受體檢測(cè)結(jié)果

2.2支原體感染組、病毒感染組和細(xì)菌感染組血液中炎癥因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受體檢測(cè)見(jiàn)表2。

表2 支原體感染組、病毒感染組和細(xì)菌感染組血液中炎癥因子，ECP，EOS，IgE，VEGF及其受體檢測(cè)結(jié)果

支原體感染組及病毒感染組患者血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，VEGF的水平顯著高于細(xì)菌感染組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，支原體感染組患者血清中VEGF- R1，VEGF- R2的水平顯著高于細(xì)菌感染組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。病毒感染組患者血清中TNF- α的水平顯著高于支原體感染組(P<0.05)，IL- 5，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2的水平顯著低于支原體感染組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3　討論

感染性肺炎為兒童呼吸道常見(jiàn)的感染性疾病，按照感染的病原體類型，將該疾病分為支原體感染性肺炎、病毒感染性肺炎及細(xì)菌感染性肺炎。支原體、病毒和細(xì)菌等微生物都可以通過(guò)呼吸進(jìn)入機(jī)體肺部，刺激機(jī)體內(nèi)的單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，使機(jī)體內(nèi)細(xì)胞免疫功能異常，從而釋放多種細(xì)胞因子，使血液中各因子的水平發(fā)生變化，導(dǎo)致機(jī)體正常生理功能失衡，最終引發(fā)肺部的一系列炎癥反應(yīng)。近年來(lái)越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)[9]，細(xì)胞免疫及體液免疫與感染性肺炎的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，特別是白細(xì)胞介素、TNF- α，VEGF等細(xì)胞因子。

白細(xì)胞介素是由多種細(xì)胞釋放，并且可同時(shí)作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子，其在炎癥反應(yīng)的發(fā)生和進(jìn)程中起著至關(guān)重要的作用。IL- 5主要由Th2輔助細(xì)胞分泌，可參與過(guò)敏反應(yīng)，并促進(jìn)EOS的生長(zhǎng)與分化。IL- 5與感染性肺炎相關(guān)的少量研究指出[10]，IL- 5在支原體感染性肺炎患者血清中的濃度較健康者高。另外，還有一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)[11]，IL- 5在細(xì)菌感染性肺炎患者血清中的水平比支原體感染患者高，說(shuō)明IL- 5可能是判別細(xì)菌感染性肺炎與支原體感染性肺炎重要的炎癥因子，本研究中的結(jié)果與該報(bào)道一致。IL- 6是免疫調(diào)節(jié)早期起作用的細(xì)胞因子，在單核巨噬細(xì)胞及T細(xì)胞受到刺激活化后，其分泌增加，進(jìn)而促進(jìn)B細(xì)胞分泌抗體。李新玲等[12]的研究顯示，慢性阻塞性肺疾病患者血清中IL- 6的濃度升高，且在伴隨肺炎衣原體感染的患者血清中的水平更高，由此說(shuō)明，IL- 6可能作為感染性肺炎的標(biāo)志性炎癥因子。IL- 8屬于超趨化因子家族的成員之一，可在一定程度上調(diào)控中性粒細(xì)胞的功能。陳棉等[4]研究顯示，支原體感染性患者血清中IL- 8濃度的高低反映了該疾病的嚴(yán)重程度。TNF- α可以促進(jìn)B細(xì)胞的增殖與分化及免疫球蛋白的分泌，增加血管的通透性，使炎癥反應(yīng)加劇，從而加重肺部損傷。有文獻(xiàn)表明[13]，血清中TNF- α的水平高低與肺炎患兒病情的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。VEGF為血管通透因子，與TNF- α的部分生理作用相似，其在機(jī)體內(nèi)水平升高后可以使得血管通透性增強(qiáng)，從而加劇肺部炎癥反應(yīng)，其在肺炎的診斷中具有重要的意義[14]。血清IgE為分泌型免疫球蛋白，可以由鼻咽與支氣管黏膜中的漿細(xì)胞分泌，繼而引發(fā)變態(tài)反應(yīng)。朱湘蕓等[15]研究顯示，支氣管哮喘患兒血清中IgE的水平會(huì)顯著升高，但是在伴隨著支原體感染性肺炎患者血清中更高，說(shuō)明血清中IgE水平的高低與感染性肺炎有著一定的聯(lián)系，可能作為感染性肺炎的鑒別指標(biāo)。

本研究結(jié)果顯示，感染性肺炎患兒血液中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2，EOS及IgE的水平顯著高于健康兒童(P<0.05)，且在三種病原體感染中，細(xì)菌感染組患兒血清中的TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8水平顯著高于病毒感染組及支原體感染組(P<0.05)，支原體感染組患兒血清中的VEGF，VEGF- R1，VEGF- R2水平則顯著高于細(xì)菌感染組與病毒感染組(P<0.05)。由此說(shuō)明TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8，ECP，EOS，VEGF及IgE參與了感染性肺炎發(fā)病的作用機(jī)制，且血清中TNF- α，IL- 5，IL- 6，IL- 8及VEGF的水平高低有助于感染性肺炎患兒病原體的判斷。

參考文獻(xiàn)：

[1]許姜姜，舒林華，鐘海琴，等．不同感染類型的兒童社區(qū)獲得性肺炎流行病學(xué)特征研究[J]．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2016，43(16)：2909- 2912．

Xu JJ，Shu LH，Zhong HQ，et al．An epidemiological study of different types of infection among children with community- acquired pneumonia[J]．Modern Preventive Medicine，2016，43(16)：2909- 2912．

[2]金姐，王立波，張明智，等．378例兒童支原體肺炎的臨床特點(diǎn)及纖維支氣管鏡治療[J]．重慶醫(yī)學(xué)，2015，44(34)：4815- 4817．

Jin J，Wang LB，Zhang MZ，et al．Clinical features and bronchoscopy treatment for 378 patients ofmycoplasmapneuoniaepneumonia in children[J]．Chongqing Medicine，2015，44(34)：4815- 4817．

[3]尹玉東，曲久鑫，楊春霞，等．國(guó)內(nèi)外社區(qū)獲得性肺炎中肺炎支原體檢出率及耐藥性不同原因分析[J]．中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志，2016，36(8)：721- 723．

Yin YD，Qu JX，Yang CX，et al．Analysis of the di- fference of the detection rete and resistance ofMycoplasmapneumoniaein our country and other countries[J]．Chinese Journal of Practical Internal Medicine，2016，36(8)：721- 723．

[4]許有才，趙世元．IL- 3在肺炎支原體感染小鼠體內(nèi)的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制[J]．現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(4)：102- 104．

Xu YC，Zhao SY．Expression of interleukin- 3 and their mechanisms in mice infected byMycoplasmapneumoniae[J]．Journal of Modern Laboratory Medicine，2015，30(4)：102- 104．

[5]Zhou J，Ren L，Chen D，et al．IL- 17B is elevated in patients with pneumonia and mediates IL- 8 production in bronchial epithelial cells[J]．Clinical Immunology，2017(175)：91- 98．

[6]馬志超，黃白麗，阮和球，等．降鈣素原聯(lián)合呼吸道病原體抗體檢測(cè)在小兒肺炎的診斷價(jià)值[J]．現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(2)：144- 145，148．

Ma ZC，Huang BL，Ruan HQ，et al．Diagnostic value of PCT combined with respiratory

pathogens detection in pneumonia in children[J]．Jo- urnal of Modern Laboratory Medicine，2015，30(2)：144- 145，148．

[7]徐祖龍，董蘇榮，張亞明．WBC，CRP和ESR聯(lián)合檢測(cè)在肺炎支原體肺炎中的意義[J]．現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(1)：153- 155，158．

Xu ZL，Dong SR，Zhang YM，et al．Significance of combining with WBC，CRP and ESR detection in patients withMycoplasmapneumoniaepneumonia[J]．Journal of Modern Laboratory Medicine，2015，30(1)：153- 155，158．

[8]宋明，趙芝娜，徐慰倬．肺炎支原體感染實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的研究進(jìn)展[J]．中國(guó)感染控制雜志，2016，15(11)：887- 893．

Song M，Zhao ZN，Xu WZ．Advances in laboratory detection ofMycoplasmapneumoniaeinfection[J]．Chinese Journal of Infection Control，2016，15(11)：887- 893．

[9]方慧英，周均華，張連豐，等．感染性肺炎新生兒體液與細(xì)胞免疫指標(biāo)的變化分析[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016，26(17)：4058- 4060．

Fang HY，Zhou JH，Zhang LF，et al．Changes of humoral immunity and cellular immunity indexes of neonates with infectious pneumonia[J]．Chinese Journal of Nosocomiology，2016，26(17)：4058- 4060．

[10]Wang L，Chen Q，Shi C，et al．Changes of serum TN F- α，IL- 5 and IgE levels in the patients ofMycoplasmapneumoniainfection with or without bronchial asthma[J]．International Journal of Clinical & Experimental Medicine，2015，8(3)：3901- 3906．

[11]溫建英．感染性肺炎患兒血清IL- 5和免疫球蛋白檢測(cè)結(jié)果分析[J]．醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐，2016，29(16)：2247- 2248．

Wen JY．The detection of serum IL- 5 and immunoglobulin in children with infectious pneumonia[J]．Journal of Medical Theory and Practice，2016，29(16)：2247- 2248．

[12]李新玲，吳振國(guó)，朱頎峰．慢性阻塞性肺疾病急性加重期血清白介素- 6表達(dá)變化與肺炎衣原體感染的相關(guān)性[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25(2)：247- 249．

Li XL，Wu ZG，Zhu QF．Correlation between change of expression of serum interleukin- 6 andChlamydiapneumoniaeinfections in patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease[J]．Chinese Journal of Nosocomiology，2015，25(2)：247- 249．

[13]李梅，陳正立，徐茜茹，等．肺炎支原體肺炎患兒血清中IL- 5，IL- 18和TNF- α檢測(cè)及與病情嚴(yán)重程度的研究[J]．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，42(14)：2661- 2662，2674．

Li M，Chen ZL，Xu QR，et al．The detection of serum IL- 5，IL- 18 and TNF- α and disease severity in children withMycoplasmapneumoniainfection[J]．Modern Preventive Medicine，2015，42(14)：2661- 2662，2674．

[14]Cheng HJ，Qiao HM，Liu L，et al．Clinical significance of IL- 5 and VEGF in BALF withMycoplasmapneumoniaepneumonia[J]．Paediatric Respiratory Reviews，2012，13(Suppl 1)：S61．

[15]朱湘蕓，王洵，趙弘卿．支氣管哮喘患兒血清TNF- α，IgE水平變化及其與肺炎支原體感染的關(guān)系[J]．山東醫(yī)藥，2017，57(1)：79- 80．

Zhu XY，Wang X，Zhao HQ．Changes of serum TN F- α and IgE levels in children with bronchial asthma and its relationship withMycoplasmapneumoniaeinfection[J]．Shandong Medicine，2017，57(1)：79- 80．