符艷珍
(曲靖市環(huán)境監(jiān)測站 云南曲靖 655000)
微生物監(jiān)測工作是一項技術(shù)繁雜的工作,對相關(guān)技術(shù)人員的技術(shù)要求很高,且當(dāng)前實(shí)際微生物監(jiān)測缺乏相應(yīng)的監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn),這無疑增大了監(jiān)測的難度。從事微生物監(jiān)測工作的人員,最好應(yīng)該是微生物學(xué)畢業(yè),具有一定微生物檢查檢驗(yàn)的相關(guān)經(jīng)驗(yàn),也應(yīng)該掌握科學(xué)的消毒技巧,有色覺障礙的人員堅決不能從事該崗位。[1]如果沒有相關(guān)專業(yè)的背景,應(yīng)該至少跟經(jīng)驗(yàn)豐富的監(jiān)測人員陪同工作3年以上,才擁有相關(guān)的獨(dú)立微生物監(jiān)測工作的資格。
目前在水樣的實(shí)際提取過程中,我們可以采用玻璃瓶也可以采用聚丙烯耐熱塑料瓶,這些采樣容器在使用前,一定要經(jīng)過高溫殺菌,在洗凈后,對其用牛皮紙包裹,然后將其放入120攝氏度的高壓蒸汽鍋內(nèi),殺菌消毒20分鐘,如果兩周以內(nèi)沒有進(jìn)行使用,則應(yīng)該重新對其進(jìn)行殺菌。我們在實(shí)際采樣過程中,如果是江河水,應(yīng)該直接將其裝瓶,如果是水龍頭的水,采水前可先將水龍頭開至最大放水3至5分鐘,然后將水龍頭關(guān)閉,用酒精燈對水龍頭殺菌3分鐘,再打開龍頭,開足,放水1分鐘,以充分除去水管中的滯留雜質(zhì),采水時控制水流速度,小心接入瓶內(nèi)。采樣一定要避免滿瓶灌裝,,一般采樣8成滿就可以了。采樣好的樣品,應(yīng)該及時運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查,如果不及時進(jìn)行檢查的,應(yīng)該對其冷藏保存。
為了保證實(shí)驗(yàn)室的無菌性,我們經(jīng)常會使用紫外燈,對試驗(yàn)室的重點(diǎn)區(qū)域進(jìn)行照射,為了保證其殺菌效果,我們應(yīng)該定期對其殺菌質(zhì)量進(jìn)行檢查,通常是采用沉降菌試驗(yàn)的方法,培養(yǎng)皿在經(jīng)過20分鐘的照射后,再將其放入到培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24個小時,如果其細(xì)菌密度低于相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),即證明其是合格的。此外在進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)前,我們應(yīng)該對高壓滅菌箱、培養(yǎng)箱、純水裝置進(jìn)行滅菌質(zhì)量檢查,保證其達(dá)到使用標(biāo)準(zhǔn)。[2]微生物實(shí)驗(yàn)室普遍具有準(zhǔn)備間、緩沖間、無菌間,為了有效降低其細(xì)菌的數(shù)量,我們應(yīng)該定期對其進(jìn)行滅菌處理,尤其要對死角、接縫區(qū)域,進(jìn)行重點(diǎn)滅菌。
培養(yǎng)基的制作和使用時微生物檢測過程中的重要環(huán)節(jié),質(zhì)量合格的培養(yǎng)菌不僅要無菌標(biāo)準(zhǔn)要達(dá)標(biāo),其也應(yīng)該適合細(xì)菌的迅速增長。目前為了提高培養(yǎng)基的專業(yè)化,我們試驗(yàn)實(shí)一般都會選擇采購,采購后的培養(yǎng)基應(yīng)該及時進(jìn)行使用,超期的培養(yǎng)基應(yīng)該立即進(jìn)行處理。在培養(yǎng)基使用前,我們一定要先對其質(zhì)量進(jìn)行認(rèn)定,檢查其PH值是否合適,是否利于細(xì)菌的培養(yǎng)。在培養(yǎng)基存儲過程中,我們應(yīng)該貼標(biāo)簽示的管理,如果有條件,可以對其進(jìn)行電腦二維碼管理,且應(yīng)該將其保存在陰涼干燥的地方,避免陽光的直射。
在實(shí)際檢測前一定要保證各種實(shí)驗(yàn)設(shè)備的無菌性,應(yīng)該以無菌水物參照標(biāo)準(zhǔn),利用無菌水對培養(yǎng)基、稀釋水、沖洗水、玻璃器皿的無菌性進(jìn)行參考檢測。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)菌數(shù)量超標(biāo),應(yīng)該對各種試驗(yàn)設(shè)備、器材重新進(jìn)行滅菌處理。
精密度檢查是微生物檢測工作中重要的質(zhì)量控制手段。我們可以取待測水樣中的百分之十做雙樣分析,如果其對數(shù)差值大于3.27R,則代表試驗(yàn)的結(jié)果可信度低,我們應(yīng)該及時查找原因,并及時進(jìn)行解決,問題解決后,才能繼續(xù)進(jìn)行樣品測定。
在實(shí)際檢測過程中,由于試驗(yàn)程序復(fù)雜技術(shù)難度高,為了避免因?yàn)槿藶橐蛩卦斐傻脑囼?yàn)精度降低,我們應(yīng)該對樣品進(jìn)行分組檢測,每個小組最后都要提供一份檢測報告。如果檢測結(jié)果差別不大,我們可以認(rèn)為試驗(yàn)結(jié)果真實(shí)、可信,如果試驗(yàn)結(jié)果差異很大,我們應(yīng)該及時對其進(jìn)行原因分析,找出原因后,重新進(jìn)行樣品檢測。下圖是水中微生物實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測的一般過程。
圖1 微生物監(jiān)測的一般過程
隨著人們生活水平的逐漸提升,人們對引用水的要求越來越高。由于當(dāng)前水環(huán)境中微生物監(jiān)測還未形成統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)和統(tǒng)一的程序,因此這給實(shí)際監(jiān)測工作帶來了很大的難度。為了提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,我們應(yīng)該做好監(jiān)測技術(shù)人員的選擇、樣品的采集和運(yùn)輸、保證實(shí)驗(yàn)室良好的無菌環(huán)證結(jié)果真實(shí)可靠境、保證各種式樣裝備和器材達(dá)到使用標(biāo)準(zhǔn)、對試驗(yàn)精密度進(jìn)行檢驗(yàn),為了保,我們應(yīng)該進(jìn)行分組檢測,只有這樣,才能充分保證監(jiān)測結(jié)果的質(zhì)量。
[1]章亞麟等.環(huán)境水質(zhì)監(jiān)測質(zhì)量保證手冊[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2014.264-266.
[2]國家環(huán)保總局水和廢水監(jiān)測分析編委會.水和廢水監(jiān)測分析方法.4版[M].北京:中國環(huán)境出版社,2013.673-683.