血清骨橋蛋白、癌胚抗原及CK18的表達對胃癌的診斷價值

邢　鑫，張自森，郭彥偉，王利娟，張紅巧，鄭曉珂，張　劍，王亞楠

鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科 鄭州 450052

胃癌患者早期癥狀和體征不明顯，早期檢出率比較低，大多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時已是中晚期。胃癌的早期診斷和治療對延長胃癌患者的生存時間和提高其治愈率具有重要意義[1]。胃鏡和鋇餐檢查難以在體檢人群中廣泛推廣，因此腫瘤標(biāo)志物在胃癌早期診斷中具有重要意義[2-3]。目前腫瘤標(biāo)志物可用于胃癌的診斷和病情監(jiān)測，但特異性和準確性仍不能令人滿意。尋找靈敏度和特異性比較高的胃癌腫瘤標(biāo)志物成為目前研究的熱點。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物，在胃腸癌、乳腺癌、肺癌及其他惡性腫瘤患者的血清中均有升高，因此不能作為診斷某種惡性腫瘤的特異性指標(biāo)，但在腫瘤的良惡性鑒別診斷、病情監(jiān)測、療效評價等方面仍有重要臨床價值。骨橋蛋白(osteopontin,OPN)是具有多種功能的分泌型蛋白，在惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移、新生血管生成和凋亡抑制方面發(fā)揮一定作用，有可能成為胃癌的診斷、治療和預(yù)后監(jiān)測的新指標(biāo)[4-6]。細胞角蛋白18(cytokeratin18,CK18)是細胞角蛋白家族中的一種，是胃上皮性細胞惡變的標(biāo)志之一[7-8]。本研究通過測定胃癌患者血清中OPN、CEA和CK18的表達情況，探討3者單獨及聯(lián)合檢測對胃癌的診斷和病情監(jiān)測的應(yīng)用價值。

1　對象與方法

1.1研究對象選擇2015年1月至2016年12月鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科收治的胃癌患者(80例)作為胃癌組，體檢中心健康體檢的健康者(80例)作為對照組，胃癌組患者年齡46～77(62.4±11.2)歲，男59例，女21例；對照組年齡45～75(61.8±10.4)歲，男52例，女28例，2組年齡、性別比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，有可比性。排除標(biāo)準：患有其他系統(tǒng)惡性腫瘤者，患有嚴重心肝腎等重要臟器疾病者，曾接受過手術(shù)或者放化療治療者，患有胃部其他疾病者，資料不完整者，拒絕參與試驗者。納入標(biāo)準：胃癌組經(jīng)病理證實為胃癌患者，對照組各項體檢指標(biāo)均正常。研究對象均資料完整，簽署知情同意書。

1.2主要觀察指標(biāo)和檢測方法檢測兩組血清OPN、CEA和CK18含量，血清OPN、CEA和CK18診斷胃癌的靈敏度、特異度及ROC曲線下面積，血清OPN、CEA和CK18含量及其與胃癌患者病理特征的關(guān)系。健康體檢者體檢當(dāng)天清晨空腹抽血，胃癌患者入院后第2天清晨空腹抽血。均抽取外周靜脈血4 mL，離心后分離血清保存?zhèn)溆?。血清OPN含量采用ELISA法測定，血清CEA含量采用電化學(xué)發(fā)光法測定，血清CK18含量采用化學(xué)發(fā)光法測定。OPN、CEA及CK18鑒別胃惡性腫瘤的臨床檢驗診斷界點分別為：40 μg/L、4.3 μg/L和5.0 U/L。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 20.0進行分析，繪制ROC曲線，計算各指標(biāo)診斷胃癌的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積，應(yīng)用t檢驗比較兩組血清OPN、CEA和CK18含量的差異，應(yīng)用t檢驗和單因素方差分析比較不同病理特征胃癌患者血清OPN、CEA和CK18水平的差異，檢驗水準α=0.05。

2　結(jié)果

2.1兩組血清OPN、CEA和CK18含量比較見表1。

表1　兩組血清OPN、CEA和CK18含量比較

2.2血清OPN、CEA和CK18診斷胃癌的靈敏度、特異度及ROC曲線下面積比較見表2。由表2可知,兩兩聯(lián)合指標(biāo)診斷胃癌的ROC曲線下面積大于單獨指標(biāo)，三者聯(lián)合診斷胃癌的ROC曲線下面積最大。隨著聯(lián)合指標(biāo)的增多，診斷胃癌的靈敏度升高。

表2　血清OPN、CEA和CK18診斷胃癌的靈敏度、特異度及ROC曲線下面積比較

2.3血清OPN、CEA和CK18含量與胃癌病理特征的關(guān)系見表3。

表3　血清OPN、CEA和CK18含量和胃癌病理特征的關(guān)系

由表3可知，血清OPN、CEA和CK18含量與胃癌的臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，其中Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量明顯高于Ⅰ+Ⅱ期胃癌患者(P<0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者(P<0.05)。表明血清OPN、CEA和CK18含量與胃癌的嚴重程度和轉(zhuǎn)移有關(guān)。

3　討論

胃癌的發(fā)展一般經(jīng)歷5個階段：正常胃黏膜階段、淺表性胃炎階段、萎縮性胃炎階段、不典型增生階段和胃癌階段，在發(fā)展到胃癌階段后相當(dāng)長的一段時間內(nèi)胃癌的轉(zhuǎn)移速度比較慢，呈局限性發(fā)展。因此，胃癌的早期診斷和治療對延長胃癌患者的生存時間和提高治愈率具有非常重要的意義[9]。血清腫瘤標(biāo)志物的檢查方法簡單快捷，容易被患者接受，成為胃癌早期診斷的常用方法[10]。診斷胃癌比較常用的腫瘤標(biāo)志物有CEA、CA19-9、CA72-4等[11-13]。但是，這些廣譜腫瘤標(biāo)志物不能作為診斷胃癌的特異性指標(biāo)，探索和尋找診斷胃癌靈敏度高、特異性強的腫瘤標(biāo)記物是胃癌研究的熱點問題。

CEA是1965年由Gold和Freedman首先從結(jié)腸癌和胚胎組織中提取的一種腫瘤相關(guān)抗原，由存在于內(nèi)胚層的細胞分化而來的癌癥細胞表面抗原，是細胞膜的結(jié)構(gòu)蛋白，其在多種惡性腫瘤的血清中均有升高。OPN是一種蛋白質(zhì)，從骨基質(zhì)中分離，廣泛分布于多種組織和細胞中，OPN含有的RGD能夠抑制細胞凋亡，促進細胞黏附和遷移，OPN還參與免疫調(diào)節(jié)、新生血管生成和鈣代謝等。OPN和惡性腫瘤的關(guān)系也比較密切，與惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移和預(yù)后有關(guān)[14-15]：OPN水平下調(diào)，腫瘤細胞的凋亡增加、侵襲力下降；OPN水平越高，患者的預(yù)后越差。OPN在胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中表達量明顯增加，在有轉(zhuǎn)移的患者中表達升高，抑制OPN的表達能夠抑制惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移[16-17]。CK18 在胃 癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌等惡性腫瘤中作用的研究越來越多[18]。CK18主要反映上皮細胞的裂解和凋亡情況?；熕帉?dǎo)致的腫瘤細胞死亡主要由凋亡介導(dǎo)，因此檢測與凋亡相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物CK18可能反映化療藥物的有效率，其有望成為更有臨床價值的胃癌相關(guān)血清學(xué)標(biāo)志物[19]。

本研究通過對胃癌患者血清中OPN、CEA及CK18的表達情況進行測定，探討三者聯(lián)合檢測在胃癌診斷中的意義。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：胃癌組患者血清OPN、CEA和CK18含量均高于對照組。Ⅲ+Ⅳ期胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量高于Ⅰ+Ⅱ期胃癌患者，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者血清OPN、CEA和CK18含量高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌患者。ROC曲線下面積可以定量反應(yīng)診斷方法的準確性，ROC曲線下面積越大診斷準確性越高。本研究發(fā)現(xiàn)OPN對胃癌的診斷準確性較CEA和CK18高，可以作為胃癌檢測的指標(biāo)，OPN和其他指標(biāo)兩兩聯(lián)合的診斷準確度高于單獨OPN的診斷準確度，OPN和其他指標(biāo)三聯(lián)合的診斷準確度高于兩兩聯(lián)合，表明OPN和其他指標(biāo)聯(lián)合能夠提高胃癌的診斷準確度。

OPN與CEA、CK18均可作為胃癌診斷、治療及預(yù)后判定的相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，但機制不同。OPN在惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移、新生血管生成和凋亡抑制方面發(fā)揮一定作用，CK18與上皮細胞惡變增殖、細胞降解死亡緊密相關(guān)，而 CEA的升高則與其編碼基因在細胞癌變時失去抑制作用有關(guān)，三者的聯(lián)合檢測可能起到一定的互補作用，具體的相關(guān)機制有待進一步研究。多腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測有利于提高對胃癌診斷和病情監(jiān)測的敏感性，有重要的臨床價值。

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