牛肝菌多糖對(duì)2型糖尿病大鼠血糖、體重及血脂水平的影響

肖艷紅 張曉敏 郭夢(mèng)南 徐 倩 劉 楠 周曉慧

(承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000)

牛肝菌俗稱(chēng)“大腳菇”，是一種稀有、名貴的野生食用真菌，因其外形似牛肝而得名，美味可口，營(yíng)養(yǎng)豐富,宴席上的極品；現(xiàn)在日本又被稱(chēng)為“植物性食品的頂峰”〔1，2〕?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)該菌所含生物堿可以治療腰腿疼痛、手足麻木、四肢抽搐與婦女白帶異常等癥狀〔3，4〕。近年研究表明牛肝菌具有諸多生理活性，如抗氧化、抗腫瘤、抗疲勞、抗衰老、提高免疫力等〔5～9〕，但關(guān)于牛肝菌多糖對(duì)血糖的影響少有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用高脂高糖飼料喂養(yǎng)聯(lián)合鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射法構(gòu)建2型糖尿病(T2DM)大鼠模型〔10〕，實(shí)施牛肝菌多糖干預(yù)后，對(duì)其降糖降脂作用進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1動(dòng)物、飼料、試劑 健康清潔級(jí)Wistar大鼠40只，雄性，體重180～200 g，12周齡，由北京華阜康科技股份有限公司提供。動(dòng)物合格證號(hào)為SCXK(京)2009-0008。飼養(yǎng)于承德醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，自由攝食水，室溫20℃～22℃，自然采光，通風(fēng)良好。大鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料及高脂高糖飼料由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供，其中高脂高糖飼料的配方為：豬油10%、蛋黃粉8%、膽固醇1.5%、蔗糖20%、膽酸鈉0.1%、標(biāo)準(zhǔn)飼料60.4%。牛肝菌多糖由承德醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室制備；STZ(美國(guó)Sigma公司，100 mg/瓶，批號(hào)031M1287V)用時(shí)溶解于0.1 mol/L(pH=4.3)檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中，現(xiàn)用現(xiàn)配；鹽酸二甲雙胍(中美上海施貴寶制藥有限公司，0.5 g/片，批號(hào)1311123)；血糖儀及配套試紙(三諾生物傳感股份有限公司)。

1.2方法

1.2.1動(dòng)物造模 大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w，然后給予高脂高糖飼料，為期4 w。后禁食12 h，一次性腹腔注射35 mg/kg STZ，72 h后檢測(cè)空腹血糖含量。以空腹血糖(FPG)≥16.7 mmol/L范圍內(nèi)的動(dòng)物為成功T2DM模型。

1.2.2動(dòng)物分組及給藥 取40只大鼠，隨機(jī)分為正常組、模型組、牛肝菌多糖低劑量組、牛肝菌多糖高劑量組和二甲雙胍組，每組8只。標(biāo)準(zhǔn)飼料正常飼養(yǎng)1 w后，模型組及各給藥組造模；正常組繼續(xù)給予標(biāo)準(zhǔn)飼料后注射同等劑量的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。72 h后經(jīng)內(nèi)眥于眶后靜脈叢采血，測(cè)FPG≥16.7 mmol/L為造模成功。各組分籠飼養(yǎng)，正常組與模型組給予生理鹽水灌胃，牛肝菌多糖低、高劑量組給予牛肝菌多糖(0.2 g/kg、0.4 g/kg)，二甲雙胍組給予二甲雙胍(0.2 g/kg)，1次/d，連續(xù)給藥4 w。

1.2.3指標(biāo)檢測(cè) 在給藥期間第7、14、21、28天稱(chēng)量各組大鼠體重；給藥前及末次給藥后各組大鼠內(nèi)眥于眶后靜脈叢采血，檢測(cè)血清葡萄糖(GLU)的含量；末次給藥后各組大鼠內(nèi)眥于眶后靜脈叢采血，檢測(cè)血清三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行方差分析及q檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1牛肝菌多糖對(duì)T2DM大鼠GLU的影響 給藥前各造模組GLU含量均≥16.7 mmol/L，且高于正常組(P<0.01)，說(shuō)明造模成功。與給藥前比較，給藥28 d后牛肝菌多糖低、高劑量組與二甲雙胍組GLU水平均大幅下降P<0.01)。給藥28 d后，給藥組GLU含量顯著低于模型組(P<0.05)；牛肝菌多糖高劑量組與二甲雙胍組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2牛肝菌多糖對(duì)T2DM大鼠體重的影響 模型組的大鼠在7～28 d內(nèi)的體重呈下降趨勢(shì)，且顯著低于正常組(P<0.01)；并觀察到出現(xiàn)明顯的“三多一少”病癥，飲水、飲食次數(shù)增加，伴有多尿現(xiàn)象，表明造模成功。在7～28 d內(nèi)牛肝菌多糖低劑量組、高劑量組及二甲雙胍組大鼠體重呈緩慢增長(zhǎng)趨勢(shì)，且顯著高于模型組(P<0.01)；其中，牛肝菌多糖高劑量組與二甲雙胍組體重增長(zhǎng)趨勢(shì)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表2。

2.3牛肝菌多糖對(duì)T2DM大鼠血脂含量的影響 與正常組比較，模型組TG、TC、LDL-C的含量明顯升高； HDL-C的含量明顯降低(P<0.01)。牛肝菌多糖低劑量組、高劑量組及二甲雙胍組TG、TC、LDL-C的含量顯著低于模型組；HDL-C含量顯著高于模型組(P<0.01)。與二甲雙胍組比較，牛肝菌多糖高劑量組TG、TC的含量更低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表1 牛肝菌多糖對(duì)大鼠GLU的影響

與正常組比較：1)P<0.01；與本組給藥前比較：2)P<0.01；與同時(shí)點(diǎn)模型組比較：3)P<0.05

表2 牛肝菌多糖對(duì)T2DM大鼠體重及血脂的影響

3 討 論

T2DM基本病理特點(diǎn)為胰島素絕對(duì)和相對(duì)不足或外周組織對(duì)胰島素的敏感性下降，引起糖代謝紊亂為主，包括脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂的一種全身性疾病。隨著病程的發(fā)展，可以導(dǎo)致多組織、多器官的慢性進(jìn)行性并發(fā)癥。據(jù)報(bào)道，STZ與其他藥物相比，殺傷胰島β細(xì)胞的能力更強(qiáng)且具有特異性，對(duì)肝、腎等臟器的損害更小〔11，12〕。因此本研究應(yīng)用高脂高糖飼料喂養(yǎng)大鼠4 w，再給予STZ注射，破壞大鼠胰島β細(xì)胞的功能，從而導(dǎo)致T2DM〔13〕。除了血糖升高、體重下降等明顯的病癥以外，糖尿病的臨床表現(xiàn)還有許多其他指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)表明，牛肝菌多糖干預(yù)T2DM大鼠后，能夠極大地降低其血糖水平；并使其體重緩慢增長(zhǎng)；同時(shí)通過(guò)降低TG、TC、LDL-C的含量，提升HDL-C的含量對(duì)血糖血脂代謝的紊亂起抑制作用。尤其高劑量牛肝菌多糖更能降低T2DM大鼠的TG、TC水平。

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