牛樟芝對(duì)四氯化碳致大鼠慢性肝損傷的保護(hù)作用

楊淑賢，趙青舟，單宇，高麗，李立勇，曹麗

（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，北京 100193）

肝臟是人體最大的消化腺和實(shí)質(zhì)性器官，擔(dān)負(fù)著人體重要的生理功能，特別是在新陳代謝方面尤為重要，但其易受病毒、藥物、食品添加劑和酒精等多種因素影響而導(dǎo)致疾病。據(jù)報(bào)道，超過(guò)600種化學(xué)物質(zhì)會(huì)導(dǎo)致肝臟受損，如四氯化碳、乙醇和對(duì)乙酰氨基酚等[1]。反復(fù)的肝臟受損導(dǎo)致慢性肝損傷，繼而發(fā)展為肝纖維化、肝硬化甚至是肝癌，因此，慢性肝損傷是多種嚴(yán)重肝疾病的發(fā)生發(fā)展及最終走向肝功能衰竭的始動(dòng)環(huán)節(jié)和共同途徑[2,3]。到目前為止，臨床治療肝損傷藥物以秋水仙堿、馬洛替酯、奧曲肽和水飛薊素等為主[4]，但是由于副作用大且缺乏特異性，致使慢性肝病廣泛流行且成為世界高死亡率的疾病。所以，急需開(kāi)發(fā)高效、安全的藥物來(lái)治療慢性肝損。

近年來(lái)，中草藥對(duì)于肝損傷的治療受到持續(xù)關(guān)注。牛樟芝（Antrodia cinnamomea，AC）是特產(chǎn)于臺(tái)灣國(guó)寶級(jí)的保健食品，又稱樟芝、牛樟菇、紅樟和血靈芝等，屬擔(dān)子菌門菌蔁綱無(wú)褶菌目多孔菌科薄孔菌屬，由于其僅長(zhǎng)在臺(tái)灣特有的牛樟樹(shù)上，產(chǎn)量小、價(jià)格昂貴，故被譽(yù)為“森林中的紅寶石”。幾個(gè)世紀(jì)以來(lái)，牛樟芝一直被用來(lái)治療食物中毒和增強(qiáng)肝功能[5]，由于其療效顯著，逐漸成為臺(tái)灣研究最熱門的保健品及抗癌藥物之一[6]。近年來(lái)對(duì)其藥理活性進(jìn)行的研究顯示，其具有抗炎、保肝、細(xì)胞毒、免疫調(diào)節(jié)、降血壓、降膽固醇和抑制血小板凝集等多種生理活性。保肝作用是牛樟芝應(yīng)用歷史最悠久也最為顯著的活性，研究者分別在急性酒精性肝損傷[7,10]、CCl4致大鼠亞急性肝損傷[8]、CCl4致小鼠急性肝損傷[9]幾個(gè)模型上，探究了牛樟芝的保護(hù)作用，但這些均是針對(duì)牛樟芝保護(hù)急性或亞急性肝損傷的研究，對(duì)于慢性肝損傷是否也同樣具有保護(hù)作用還未見(jiàn)報(bào)道，因此本文首先成功建立了CCl4誘導(dǎo)的大鼠慢性肝損傷模型，從血清學(xué)、肝臟病理、肝細(xì)胞損傷、脂質(zhì)過(guò)氧化等方面探究了牛樟芝的保肝作用及可能作用機(jī)制，為其開(kāi)發(fā)為保健食品和保肝藥品提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

1.2 藥品與試劑

牛樟芝，淺黃色粉末，由臺(tái)灣易宏生物科技股份有限公司提供，經(jīng)成分分析共17種成分，分別為1,4-二甲氧基-2,3-亞甲二氧基-5-甲苯、2,2',5,5'-四甲氧基-3,4,3',4'-二亞甲二氧基-6,6-二甲基聯(lián)苯、3β,15α-二羥基-羊毛甾-7,9(11),24-三烯-21-烏蘇酸、4-乙?；沧靠Z爾 B、硫色多孔菌酸、去氫硫色多孔菌酸、15α-乙酰去氫硫色多孔菌酸、齒孔酸、去氫齒孔酸、methyl antcinate類（A、B、H）、Antcin類（A、B、C、H、K），其中主要成分為：Antcin K、Antcin B、去氫齒孔酸，純度分別為98.40%、53.94%和99.89%，于常溫密閉條件下保存，使用前用蒸餾水配成不同濃度的溶液。

50% CCl4橄欖油溶液：將CCl4（分析純，北京化學(xué)試劑有限公司）與橄欖油（山東魯花集團(tuán)有限公司）按體積比1:1制成50%橄欖油劑。

秋水仙堿片（昆藥集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)：160908-01）；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（glutamic-pyruvic transaminase，ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（glutamic oxalacetic transaminase，AST）自動(dòng)生化儀試劑盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX）、還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）試劑盒、丙二醛（malondiadehyde，MDA）、總蛋白定量測(cè)試試劑盒，均購(gòu)自于南京建成生物工程有限公司；實(shí)驗(yàn)用其他試劑均為分析純。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

全自動(dòng)生化分析儀（BCKMANCOULTER，型號(hào)：AU480）；-80 ℃冰箱，美國(guó)NBS公司；電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司，型號(hào)：AL104；離心機(jī)，德國(guó)Heraeus公司，型號(hào)：Labofuge 400R；酶標(biāo)儀，美國(guó)Bio-Tek公司，型號(hào)：MQX 200；溫控水浴箱，北京長(zhǎng)風(fēng)公司。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組、給藥

健康雄性SD大鼠60只，隨機(jī)分為6組，即正常組、模型組、牛樟芝低（30 mg/kg）、中（60 mg/kg）、高（120 mg/kg）劑量組和秋水仙堿陽(yáng)性對(duì)照組（0.1 mg/kg）。除正常組外，其余各組分別于腹腔注射50%CCl4橄欖油溶液，1 mL/kg，2次/周，連續(xù)9周，造模，并于造模的同時(shí)，牛樟芝組及陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給相應(yīng)藥物，正常組和模型組灌胃給蒸餾水，每日1次，連續(xù)9周。試驗(yàn)期間，每天觀察記錄動(dòng)物狀態(tài)，每周稱一次體重。最后一次給藥后，禁食不禁水。

主要行業(yè)：石排鎮(zhèn)產(chǎn)業(yè)布局以傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)為主，塑料、五金、紡織服裝、電子制品為石排鎮(zhèn)的四大主要產(chǎn)業(yè)，總體占石排鎮(zhèn)經(jīng)濟(jì)總量的62.15%。

1.4.2 對(duì)臟器指數(shù)的影響

末次給藥禁食后，戊巴比妥麻醉大鼠，進(jìn)行眼眶取血，取血后，頸椎脫臼處死大鼠，解剖取肝臟和脾臟，用預(yù)冷的生理鹽水清洗、拍照，并用濾紙吸干，用電子天平精密稱重，計(jì)算肝指數(shù)和脾指數(shù)。

臟器指數(shù)(%)=臟器的重量(mg)/體重(g)

1.4.3 血清ALT、AST水平檢測(cè)

眼眶取血所得的樣品在4 ℃，3500 r/min條件下，離心10 min，取上清，分裝于EP管中，-80 ℃凍存。全自動(dòng)生化儀檢測(cè)血清中ALT、AST的活性。

1.4.4 肝組織SOD、GSH-PX活性及MDA、GSH含量的測(cè)定

取100 mg凍存的肝組織，加入9倍量的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)，在冰水浴中制成10%大鼠肝組織勻漿液，4 ℃，3500 r/min，離心 15 min，取上清液置-20 ℃保存。根據(jù)試劑盒的說(shuō)明檢測(cè)肝組織蛋白含量、SOD、GSH-PX活性、GSH、MDA含量。

1.4.5 肝臟病理學(xué)檢測(cè)

將樣品左中葉剪下置入 10%甲醛溶液固定后，0.01 mol/L磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffered solution，PBS）浸泡過(guò)夜，常規(guī)梯度酒精脫水，石蠟浸泡，包埋，制成4 mm石蠟切片。經(jīng)二甲苯脫蠟及梯度酒精復(fù)水后，進(jìn)行蘇木素-伊紅（HE）染色，再進(jìn)行梯度酒精脫水，脫水后將組織切片中的酒精用二甲苯置換出來(lái)。最后滴加中性樹(shù)膠封片，顯微鏡下觀察肝組織切片的病理變化并拍照。

1.4.6 統(tǒng)計(jì)結(jié)果處理

2 結(jié)果與討論

2.1 各組對(duì) CCl4所致慢性肝損傷大鼠體重的影響

飼養(yǎng)期間，各組大鼠體重、進(jìn)食狀況等方面表現(xiàn)正常，且無(wú)死亡情況，其體重變化如圖 1，牛樟芝各劑量組與正常組相比，體重?zé)o顯著性差異（p>0.05）；模型組在第2周時(shí)，體重顯著下降，可能是由于CCl4毒物引起大鼠不適導(dǎo)致的，在第7～9周時(shí)，體重與正常組相比，差異顯著（p<0.01），同時(shí)觀察其有皮毛光澤度欠佳、精神萎靡的現(xiàn)象，說(shuō)明CCl4毒物會(huì)影響大鼠食欲及對(duì)食物的吸收，并對(duì)大鼠的生活狀態(tài)有一定影響；陽(yáng)性組在第6～9周時(shí)，大鼠體重出現(xiàn)了與正常組相比差異顯著的現(xiàn)象（p<0.01），說(shuō)明在減輕 CCl4毒物對(duì)大鼠體重影響這一方面，秋水仙堿的作用有限。

圖1 體重變化Fig.1 The changes of body weight

2.2 牛樟芝對(duì) CCl4所致慢性肝損傷大鼠肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)的影響

表1結(jié)果顯示，模型組大鼠肝臟、脾臟指數(shù)顯著升高(p<0.01或p<0.05），較正常組分別升高了10.62%、7.22%，提示模型組大鼠的肝臟、脾臟存在明顯受損腫脹的情況。與模型組比，秋水仙堿陽(yáng)性組有抑制肝臟增大的作用；牛樟芝給藥組的肝臟、脾臟指數(shù)雖有所降低，但差異不顯著（p>0.05），經(jīng)分析可能是因?yàn)榕Ｕ林ジ淖兏闻K指數(shù)、脾臟指數(shù)是一個(gè)漫長(zhǎng)的過(guò)程，本實(shí)驗(yàn)的給藥周期短，還不足以造成顯著影響。

表1 牛樟芝對(duì)大鼠肝指數(shù)及脾臟指數(shù)的影響(±s，n=10)Table 1 Effects of AC on the relative liver weight and relative spleen weight in rats (ˉx ± s, n = 10)

表1 牛樟芝對(duì)大鼠肝指數(shù)及脾臟指數(shù)的影響(±s，n=10)Table 1 Effects of AC on the relative liver weight and relative spleen weight in rats (ˉx ± s, n = 10)

注：##表示與正常組比，差異極顯著（p<0.01）；#表示與正常組比，差異顯著（p<0.05）；**表示與模型組比，差異極顯著（p<0.01）；*表示與模型組相比，差異顯著（p<0.05）。下同。

Group Dose/(mg/kg) Relative liver weight/% Relative spleen weight/%normal group - 24.86±1.33 1.67±0.12 model group - 27.50±1.31## 1.80±0.10#LD group 30 26.52±1.51 1.74±0.12 MD group 60 26.65±1.95 1.71±0.17 HD group 120 26.48±1.93 1.77±0.11 positive group 0.1 25.91±0.54* 1.75±0.11

2.3 牛樟芝對(duì) CCl4所致慢性肝損傷大鼠血清中ALT、AST的影響

CCl4毒物進(jìn)入肝臟后，激活細(xì)胞色素P450，繼而生成三氯甲基自由基（·CCl3），使細(xì)胞膜及細(xì)胞器膜脂質(zhì)過(guò)氧化，膜的結(jié)構(gòu)和功能被破壞，通透性增強(qiáng)，胞漿內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶滲出，血清中ALT、AST含量上升[11,12]。因此，CCl4誘導(dǎo)的慢性肝損中，ALT、AST是檢測(cè)肝功能的最重要、最敏感的指標(biāo)，其活性的高低反映了肝臟受損的程度[13]。

表2結(jié)果顯示，模型組大鼠血清ALT、AST活力較空白組分別升高了35.80%、12.83%，且與正常組的差異達(dá)到了極顯著水平（p<0.01），提示肝損傷模型成功；與模型組相比，秋水仙堿陽(yáng)性組ALT、AST活力分別下降了 30.24%、34.55%，差異顯著（p<0.01）；牛樟芝各劑量組大鼠血清中ALT、AST活力隨著牛樟芝劑量的增加而逐漸降低。

其中，牛樟芝高劑量組降低尤為明顯，較模型組分別降低了33.48%、45.55%，已明顯優(yōu)于秋水仙堿陽(yáng)性組，表明了牛樟芝對(duì)慢性肝損傷大鼠的肝功能有不同程度的改善作用，之前的文獻(xiàn)有報(bào)道過(guò)，牛樟芝中活性成分以三萜類成分最特別，高達(dá)200以上，是其他菇菌無(wú)法相比的，占牛樟芝功能活性成分50%以上，具有極高的藥用價(jià)值[18,20]，推斷該部分的改善作用可能是與保肝活性成分三萜類化合物（AntcinB、C、H、去氫齒孔酸）和4-乙酰基安卓奎諾爾B相關(guān)[5,6]，但究竟是哪種成分起主要作用還是多種成分協(xié)同或疊加等有待于深入研究。

表2 牛樟芝對(duì)血清ALT和AST活性的影響(±s，n=10)Table 2 Effects of AC on the activity of AST and ALT in serum

表2 牛樟芝對(duì)血清ALT和AST活性的影響(±s，n=10)Table 2 Effects of AC on the activity of AST and ALT in serum

Group Dose/(mg/kg) ALT/(IU/L） AST/(IU/L)normal group - 39.25±4.37 177.12±5.78 model group - 53.01±7.78 ## 199.85±4.85##LD group 30 37.38±6.44** 145.05±15.12**MD group 60 36.57±2.86** 135.05±17.85**HD group 120 35.26±6.28** 108.82±8.44**positive group 0.1 36.98±3.72** 130.8±18.55**

2.4 牛樟芝對(duì) CCl4所致慢性肝損傷大鼠肝臟SOD、GSH-Px活性及MDA、GSH含量影響

脂質(zhì)過(guò)氧化是慢性肝損傷的最主要且最被廣泛研究的作用機(jī)制之一[14]。CCl4進(jìn)入機(jī)體后，引起肝細(xì)胞膜受損的同時(shí)，亦可產(chǎn)生大量新的活性氧（ROS），促發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，繼而損傷肝臟中的各種細(xì)胞[14,15]。

SOD是機(jī)體內(nèi)可清除自由基的重要的抗氧化酶之一。而MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的最終產(chǎn)物，可影響線粒體呼吸鏈復(fù)合物及多種關(guān)鍵酶活性，破壞肝細(xì)胞，與肝細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子一起介導(dǎo)肝細(xì)胞壞死。因此，SOD和MDA的測(cè)定常常相互配合，分別間接反映機(jī)體清除自由基的能力和組織細(xì)胞氧化性損傷的程度[12]。

GSH是重要的抗氧化劑和自由基清除劑，可從根本上防止脂肪肝和肝的纖維化，并且也是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST)兩種酶類的底物，為二種酶分解過(guò)氧化物所必需。GSH-PX是機(jī)體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化過(guò)氧化氫分解的酶，其特異性催化 GSH對(duì)過(guò)氧化氫的還原反應(yīng)，從而保護(hù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能不受過(guò)氧化物的干擾和損害[13,16]。因此本實(shí)驗(yàn)通過(guò)測(cè)定 MDA以評(píng)價(jià)牛樟芝對(duì)CCl4大鼠的氧化損傷程度的影響，檢測(cè)GSH、GSH-px和SOD反映牛樟芝對(duì)CCl4大鼠的抗氧化水平。結(jié)果見(jiàn)表3，與正常組比較，模型組大鼠肝勻漿中GSH-Px、SOD活性和GSH含量顯著下降（p<0.01），MDA含量顯著升高（p<0.01），說(shuō)明 CCl4毒物對(duì)大鼠肝臟已造成嚴(yán)重的氧化損傷；秋水仙堿組顯著升高了 GSH含量（p<0.01），降低了 MDA 含量（p<0.05），但對(duì)GSH-Px和SOD的作用不顯著；與模型組相比，牛樟芝高劑量組的 GSH-Px、GSH、SOD分別升高了15.28%、66.40%、11.68%，MDA含量降低了36.17%，尤其是對(duì) GSH-Px、GSH、MDA 的影響已極其顯著（p<0.01），說(shuō)明高劑量組明顯減輕了肝臟的氧化損傷，該顯著作用是否與之前報(bào)道的牛樟芝抗氧化的主要活性成分 AntcinC密切相關(guān)[6]，還需要進(jìn)一步研究證實(shí)，但是再綜合四個(gè)指標(biāo)可看出，低、中劑量組也有不同程度的抗氧化損傷作用，但是不及高劑量明顯，可能是由于其劑量改變，活性成分含量也隨之變化引起的。

表3 牛樟芝對(duì)CCl4所致肝損傷大鼠肝組織勻漿SOD、GSH-Px活性及MDA、GSH含量的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of AC on the levels of SOD, GSH-Px, MDAand GSH in liver induced by CCl4 (±s, n=10)

表3 牛樟芝對(duì)CCl4所致肝損傷大鼠肝組織勻漿SOD、GSH-Px活性及MDA、GSH含量的影響(±s，n=10)Table 3 Effect of AC on the levels of SOD, GSH-Px, MDAand GSH in liver induced by CCl4 (±s, n=10)

Group Dose/(mg/kg) SOD/(U/mL) GSH-Px/(U/mgprot) MDA/(nmol/mgprot) GSH/(μmoL/gprot)normal group - 246.95±6.90 512.77±24.43 14.02±1.79 65.32±14.01

?

2.5 牛樟芝對(duì) CCl4所致慢性肝損傷大鼠肝臟組織病理學(xué)的影響

圖2 牛樟芝對(duì)CCl4致慢性肝損大鼠肝臟組織的病理學(xué)觀察（400×）Fig.2 Effects of AC on the liver histopathological features in rats with chronic liver injury induced by CCl4 (400×)

肝臟病理學(xué)檢查被認(rèn)為是判斷肝臟損傷的金標(biāo)準(zhǔn)，圖2病理切片顯示，正常組大鼠的肝組織結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞大小一致，成索狀排列，無(wú)水腫、脂肪變性和炎癥浸潤(rùn)等現(xiàn)象（圖 2a）；模型組大鼠的肝細(xì)胞廣泛且重度脂肪變性，胞漿內(nèi)可見(jiàn)彌漫性、大小不等的脂肪空泡，部分區(qū)域肝細(xì)胞點(diǎn)狀、灶狀壞死，匯管區(qū)伴炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，增生（圖 2b）；牛樟芝低中高劑量組肝細(xì)胞形態(tài)基本正常，上述的病理現(xiàn)象較模型組均有明顯改善，尤以中、高劑量組改善最明顯，視野內(nèi)幾乎未見(jiàn)脂肪空泡，肝細(xì)胞無(wú)變性、壞死等損傷性改變（圖2c、d、e），由此表明牛樟芝可減輕CCl4對(duì)肝細(xì)胞的損害，保護(hù)肝細(xì)胞的完整性，對(duì)CCl4慢性肝損傷出現(xiàn)的脂肪變性和炎癥病理學(xué)改變具有一定的逆轉(zhuǎn)和抑制其發(fā)展的作用；秋水仙堿陽(yáng)性組輕度脂肪變性，且有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，與牛樟芝各組相比較，其病理改善作用并不明顯（圖 2f），這與文獻(xiàn)報(bào)道的秋水仙堿對(duì)慢性肝損傷大鼠總的病理?yè)p傷改善作用有限相一致[19]，因此，認(rèn)為秋水仙堿在慢性肝損傷的治療中，它的主要作用在于降低ALT、AST酶活性，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，病理改善作用并不顯著。

3 結(jié)論

3.1 本文在成功制備 CCl4致慢性肝損傷模型的基礎(chǔ)上，探究了牛樟芝對(duì)大鼠慢性肝損傷的保護(hù)作用，結(jié)果顯示：牛樟芝各劑量組大鼠體重較正常組無(wú)顯著差異，肝臟、脾臟指數(shù)較模型組有所降低，可顯著降低血清ALT、AST活性，肝組織H&E染色結(jié)果也顯示牛樟芝有明顯的病理改善作用。

3.2 在上述研究結(jié)果基礎(chǔ)之上，我們又首次從脂質(zhì)過(guò)氧化方面探究了牛樟芝對(duì)大鼠慢性肝損傷的保護(hù)作用。本研究中，模型組的抗氧化物質(zhì)GSH-PX、SOD活性顯著降低，GSH含量顯著減少，脂質(zhì)過(guò)氧化終產(chǎn)物MDA含量顯著增加，證實(shí)了CCl4致大鼠體內(nèi)活性氧的過(guò)度激活和脂質(zhì)過(guò)氧化的發(fā)生是肝臟損傷的主要原因之一[17]。而牛樟芝高劑量組顯著升高了GSH-PX、SOD活性及GSH含量，并顯著降低了MDA含量，表明了牛樟芝可增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，從而保護(hù)肝臟的結(jié)構(gòu)和功能。

3.3 總之，上述的研究結(jié)果證實(shí)了牛樟芝具有保肝和對(duì)抗慢性肝損傷的作用，有望開(kāi)發(fā)為保健食品和保肝藥品，其作用機(jī)制可能與抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)、清除體內(nèi)過(guò)多的自由基、提高組織的抗氧化能力和調(diào)節(jié)血脂代謝相關(guān)，但是其確切機(jī)制及起主要作用的護(hù)肝活性成分還需要更深入的研究。

[1]Xia D Z, Zhang P H, Fu Y, et al. Hepatoprotective activity of puerarin against carbon tetrachloride-induced injuries in rats:a randomized controlled trial [J]. Food & Chemical Toxicology, 2013, 59(8): 90-95

[2]Ramachandran P, Henderson N C. Antifibrotics in chronic liver disease: tractable targets and translational challenges [J].Lancet Gastroenterol & Hepatol, 2016, 1(4): 328-340

[3]蔡兆斌,莊讓笑,潘旭旺,等.N-乙酰半胱氨酸對(duì)慢性肝損傷大鼠Nrf2及HO-1和γ-GCS表達(dá)的影響[J].中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)志,2016,30(11):1136-1141 CAI Zhao-bin, ZHUANG Rang-xiao, PAN Xu-wang, et al.Effect of N-acetylcysteine on Nrf2, heme oxygenase-1 and γ-glutamate cysteine synthetase in rats with chronic hepatic injury [J]. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology,2016, 30(11): 1136-1141

[4]莫志華,王振常.抗肝纖維化治療的臨床研究進(jìn)展[J].廣西醫(yī)學(xué),2014,8:1126-1129 MO Zhi-hua, WANG Zhen-chang. Clinical research progress of anti-fibrosis treatment [J]. Guangxi Medical Journal, 2014,8: 1126-1129

[5]Lu MC, El-Shazly M, Wu T Y, et al. Recent research and development of Antrodiacinnamomea [J]. Pharmacology &Therapeutics, 2013, 139(2): 124-156

[6]張遠(yuǎn)騰,李曉波.牛樟芝化學(xué)成分及其藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥,2016,47(6):1034-1042 ZHANG Yuan-teng, LI Xiao-bo. Research progress on active components of Antrodia Cinnamomea and their pharmacological effects [J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016, 47(6): 1034-1042

[7]王瑾,徐財(cái)泉,王宮.牛樟芝濃縮膠囊對(duì)小鼠急性酒精肝損傷的保護(hù)作用[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐,2014,5:44-46 WANG Jin, XU Cai-quan, WANG Gong. Protective effects of enriched capsules of antrodiacamphorata on acute alcohol liver injury in mice [J]. Research and Practice of Chinese Medicines, 2014, 28(5): 44-46

[8]李俊鵬,金毅,王平,等.牛樟芝膠囊對(duì)大鼠四氯化碳肝損傷的保護(hù)作用研究[J].中國(guó)藥師,2013,16(7):964-966 LI Jun-peng, JIN Yi, WANG Ping, et al. Protective effect of Taiwanofungus camphorates capsulesm on rat liver injury induced by tetrachloromethane [J]. China Pharmacist, 2013,16(7): 964-966

[9]Huang G J, Deng J S, Huang S S, et al. Hepatoprotective effects of eburicoic acid and dehydroeburicoic acid from Antrodia camphorata in a mouse modal of acute hepatic injury [J]. Food Chemistry, 2013, 141(3): 3020-3027

[10]Lu Z M, Tao W Y, Zou X L, et al. Protective effects of mycelia of Antrodia camphorata and Armillariellata bescens in submerged culture against ethanol-induced hepatic toxicity in rats [J]. Journal of Ethnopharmcology, 2007, 110(1): 160-164

[11]Ma J Q, Ding J, Zhang L, et al. Hepatoprotective properties of sesamin against CCl4induced oxidative stress-mediated apoptosis in mice via JNK pathway [J]. Food & Chemical Toxicology, 2014, 64(2): 41

[12]王薇,張旋,許苗苗,等.珠子參總皂苷對(duì)四氯化碳致大鼠慢性肝損傷的保護(hù)作用[J].中藥藥理與臨床,2014,5:70-73 WANG Wei, ZHANG Xuan, XU Miao-miao, et al. Protective effects of total saponins from Panacismajoris rhizome against CCl4-induced chronic hepatic injury in rats [J]. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica, 2014, 5: 70-73

[13]羅亦靈,石磊,王穎鈺,等.復(fù)方龍葵顆粒對(duì)四氯化碳致大鼠慢性肝損傷的保護(hù)作用[J].中藥藥理與臨床,2014,1:105-109 LUO Yi-ling, SHI Lei, WANG Ying-yu, et al. Effect of complex granula of Solanumnigrum on chronic liver injury by CCl4in rats [J]. Pharmacology and Clinics of Chinese Materia Medica, 2014, 1: 105-109

[14]董婧婧,劉艷菊,陳祥勝,等.三七粉對(duì)四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的大鼠慢性肝損傷的保護(hù)作用[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2017,27(8):32-37 DONG Jing-jing, LIU Yan-ju, CHEN Xiang-sheng, et al.Protective effect of panaxnotoginseng powder on CCl4nduced chronic liver injury in rats [J]. China Journal of Modern Medicine, 2017, 27(8): 32-37

[15]Hamdy N, El-Demerdash E. New therapeutic aspect for carvedilol: antifibrotic effects of carvedilol in chronic carbon tetrachloride-induced liver damage [J]. Toxicol Appl Pharmacol, 2012, 261(3): 292-299

[16]劉晨琪,高麗,霍小位,等.諸葛菜種子水提物對(duì)急性酒精肝損傷小鼠的保護(hù)作用[J].現(xiàn)代食品科技,2017,33(8):7-11 LIU Chen-qi, GAO Li, HUO Xiao-wei, et al. Protective Effect of water extracts from Orychophragmus violaceus seed on alcohol induced acute liver injury in mice [J].Modern Food Science and Technology, 2017, 33(8): 7-11

[17]趙文璽,金梅花,李天,等.草蓯蓉水萃取物對(duì)四氯化碳致肝損傷小鼠肝臟氧化應(yīng)激的干預(yù)作用[J].中國(guó)中藥雜志,2013,38(6):875-878 ZHAO Wen-xi, JIN Mei-hua, LI Tian, et al. Intervention effect of aqueous fractions from Boschniakiarossica on hepatic oxidative stress in mice with liver injury induced by carbon tetrachloride [J]. China Journal of Chinese Materia Medica, 2013, 38(6): 875-878

[18]趙春艷,吳素蕊,高觀世,等.牛樟芝藥用功能成分作用及應(yīng)用進(jìn)展[J].食品工業(yè)科技,2016,37(23)ZHAO Chun-yan, WU Su-rui, GAO Guan-shi, et al.Research progress of the medicinal function components and utilization of Antrodiacinnamomea [J]. Science and Technology of Food Industry, 2016, 37(23)

[19]李瀚旻,盛國(guó)光,張建軍,等.秋水仙堿抗大鼠慢性肝損傷及肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,1995,4:21-22 LI Han-min, SHENG Guo-guang, ZHANG Jian-jun, et al.Experimental study of colchicine on chronic liver injury and hepatic fibrosis in rats [J]. Chinese Journal of Integrated Traditional and Western hepatopathy, 1995, 4: 21-22

[20]楊璐,黃正明.牛樟芝研究進(jìn)展[C]//中國(guó)醫(yī)藥教育論壇-中國(guó)醫(yī)藥教育協(xié)會(huì)三次理事大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文專輯.2013 YANG Lu, HUANG Zheng-ming. Antrodia Camphorata Researeh [C]// China Medcine Edueation Assoesation. 2013