高危型人乳頭瘤病毒在女性感染者中的分布特征及其用于篩查宮頸癌的價值分析

蔣元寶

宮頸癌是我國女性常見惡性腫瘤之一，發(fā)病率位居女性惡性腫瘤第二位，應(yīng)當給予較高的重視。隨著生活習(xí)慣的改變，宮頸癌的發(fā)病年齡趨向年輕化。目前，普遍研究認為宮頸癌的發(fā)生是1個漫長的發(fā)展過程，從宮頸癌前病變發(fā)展為宮頸癌需要近十年時間，并且有效的篩查手段和干預(yù)措施。流行病學(xué)研究顯示，幾乎所有的宮頸癌患者中都可以檢測到HPV-DNA，高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌變的根本原因。因此，HPV-DNA的早期發(fā)現(xiàn)和早期干預(yù)是預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵措施。本研究對近5年來我院婦科門診采用HPV-DNA基因分型檢測宮頸病變的患者資料進行分析，評估HPV-DNA分型檢測用于篩查宮頸癌的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年6月至2016年6月在我院婦科門診進行宮頸癌篩查的患者2560例，年齡18～70歲，平均年齡(34.7±9.6)歲。排除宮頸手術(shù)史，曾經(jīng)宮頸細胞學(xué)檢測異?；颊撸瑡D科腫瘤患者，妊娠，24 h內(nèi)有性生活史者。

1.2 標本采集

選擇月經(jīng)干凈后3～7天，取材前72 h禁止沖洗陰道及使用陰道藥物。患者取膀胱截石位，使用陰道窺器暴露宮頸，將一次性宮頸刷尖端插入宮頸口，順時針旋轉(zhuǎn)動3～5周，采集足夠細胞標本后取出宮頸刷，裝入專用的細胞保存液收集管中，標記好患者詳細信息。

1.3 檢測方法

將保存液中的標本離心，取沉淀物，采用PCR熒光法檢測HPV-DNA，試劑盒來自深圳亞能生物公司，共檢測23個HPV基因型，分別為高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4，低危型：HPV6、11、42、43、45。HPV-DNA高危型陽性患者行液基細胞學(xué)(TCT)檢測，TCT陽性者行陰道鏡取活檢病理檢測。TCT標本采用新柏2000全自動制片機進行制片，巴氏染色后鏡檢，按照TBS分類報告法分為非典型鱗狀上皮細胞(ASC)、低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)、高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)和鱗狀細胞癌(SCC)。病理診斷根據(jù)2003年WHO《乳腺與女性生殖系統(tǒng)腫瘤病理與遺傳學(xué)》診斷標準將結(jié)果分為：慢性炎癥、宮頸輕度不典型增生(CIN-Ⅰ)、宮頸中度不典型增生(CIN-Ⅱ)、宮頸重度不典型增生(CIN-Ⅲ)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV-DNA高危型分布情況

2560例婦女中共檢測出HPV-DNA陽性者711例(27.8%)，其中高危型265例(10.4%)，低危型446例(17.4%)。其中HPV16型49例，18型13例，31型12例，35型2例，39型19例，45型3例，51型11例，52型92例，53型34例，56型7例，58型59例，59型10例，66型13例，68型19例，73型1例。

2.2 不同高危型在各級宮頸病變中的分布

CINⅠ患者中，HPV16占15.7%，HPV18占2.0%； CINⅡ患者中，HPV16占58.3%，HPV18占11.1%；CINⅢ患者中，HPV16占53.8%，HPV18占23.1%；宮頸癌患者中，HPV16占60.0%，HPV18占20.0%；不同分級宮頸病變中HPV類型感染分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同高危型在各級宮頸病變中的分布(例，%)

2.3 HPV-DNA高危型感染在各年齡段分布

HPV-DNA高危型感染在各年齡段的分布如表2所示，以30歲以下和50歲以上的人群感染率較高。各年齡段患者HPV-DNA高危型感染率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.673，P=0.339)。

表2 HPV-DNA高危型感染在各年齡段分布

2.4 HPV-DNA陽性與病理診斷結(jié)果對照

HPV-DNA高危型感染者中病理診斷為宮頸癌患者10例(3.8%)，低危型感染者中病理診斷為宮頸癌者2例(0.4%)，二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

2.5 高危型HPV用于篩查宮頸癌的價值分析

TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測的敏感度高于二者單獨檢測，特異度和假陽性率低于HPV-DNA分型檢測，假陰性率低于二者單獨檢測，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表3 HPV-DNA陽性與病理診斷結(jié)果對照(例，%)

表4 高危型HPV用于篩查宮頸癌的價值分析/%

注：與TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測比較，*為P<0.05。

3 討論

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤，隨著生活水平的提高，宮頸癌的發(fā)病呈現(xiàn)年輕化趨勢。研究顯示宮頸癌的發(fā)生和HPV的持續(xù)感染密切相關(guān)[1]，HPV與宿主基因的整合是宮頸病變發(fā)展到宮頸癌的標志[2-3]，也是宮頸癌術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素[4]。但是宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是1個量變到質(zhì)變，漫長的過程，且未發(fā)展成宮頸癌的變病存在可逆性[5-6]，所以有效的篩查及恰當?shù)母深A(yù)，能阻斷宮頸癌的進展，對降低宮頸癌的發(fā)病率和死亡率至關(guān)重要。

宮頸細胞學(xué)檢測用于臨床宮頸癌的篩查已有近40年歷史，使宮頸癌的發(fā)生率和死亡率得到明顯下降。但是宮頸細胞學(xué)檢測有其局限性，一方面標本的取材對宮頸細胞學(xué)檢測的結(jié)果有一定的影響，而且其結(jié)果受閱片者主觀因素及經(jīng)驗影響較大；另一方面，宮頸細胞學(xué)只能在宮頸病變以后對宮頸病變類型定性，不能預(yù)估病變。相比于宮頸細胞學(xué)檢測，HPV的檢測更為客觀，且可重復(fù)性檢測，避免不同檢測者之間的主管差異，減少假陰性結(jié)果的發(fā)生。本組患者中，HPV檢測的敏感性和特異性均高于宮頸細胞學(xué)檢測。

大多數(shù)女性感染HPV為一過性的，可在2年內(nèi)被機體免疫系統(tǒng)清除，只有約10%的持續(xù)感染者最終會發(fā)生宮頸上皮內(nèi)瘤變。HPV感染主要通過性接觸傳播，因此在20～30歲性活躍年齡段HPV的感染率較高，感染類型主要以單一感染為主。而50歲以上人群處于絕經(jīng)期，性激素水平低下，免疫功能減弱，因此成為HPV感染的第二個年齡高峰，且此時感染類型中雙重以上感染類型比例增加。本研究中30歲以前是HPV感染的第一個高峰年齡段，雙重以上感染類型的人數(shù)占18.4%，50～70歲是第二個高峰年齡段，此階段婦女高危型HPV雙重以上感染類型的人數(shù)占53.0%。鑒于HPV感染的年齡相關(guān)性特點，美國癌癥協(xié)會根據(jù)年齡制定了宮頸病變的篩查方案[7]：性生活開始后3年內(nèi)的女性即需要進行宮頸病變的篩查，30歲以下婦女每1～2年進行宮頸細胞學(xué)檢測，30歲以上婦女每1～2年進行宮頸細胞學(xué)聯(lián)合HPV檢測，二者皆為陰性可3年后復(fù)查；70歲以上婦女連續(xù)3次宮頸細胞學(xué)檢測陰性即可停止篩查。

目前，許多研究認為CINⅠ主要與低危型HPV有關(guān)，而CINⅡ和CINⅢ主要和高危型HPV有關(guān)，尤其是HPV16型和18型[8]。姜霞[9]的研究顯示CINⅠ患者中HPV16占16.9%，HPV18占6.8%，CINⅡ患者中HPV16陽性占33.3%，HPV18占10.5%，CINⅢ患者中HPV16陽性占50.0%，HPV18占12.5%，且三組中HPV感染分布差異顯著。本研究中，CINⅠ患者中，HPV16占15.7%，HPV18占2.0%； CINⅡ患者中，HPV16占58.3%，HPV18占11.1%；CINⅢ患者中，HPV16占53.8%，HPV18占23.1%，與姜霞的研究結(jié)果基本一致。由此可見，對于高危型HPV感染的患者，尤其是HPV16和18型患者，做好后續(xù)的監(jiān)測很重要。美國陰道鏡及宮頸病理學(xué)會2013年宮頸病變指南也指出存在HPV16或HPV18感染的女性，就算細胞學(xué)顯示正常，也需要接受陰道鏡檢查[10]。Koutsky等[11]研究顯示細胞學(xué)檢測結(jié)果正常的女性，HPV陽性者2年內(nèi)發(fā)生宮頸病變的發(fā)生率為30%，而陰性者僅為3%。HPV作為宮頸細胞學(xué)檢測的補充手段，可以顯著提高檢測的敏感性和特異性，眾多研究結(jié)果證實了這一觀點。本研究結(jié)果顯示宮頸細胞學(xué)聯(lián)合高危型HPV檢測的敏感性和特異性顯著高于二者的單獨檢測，同時降低了假陽性率和假陰性率。

綜上所述，高危型HPV檢測用于篩查宮頸癌敏感性和特異性高，可作為輔助宮頸細胞學(xué)檢測的手段，二者聯(lián)合檢測能顯著提高檢測的敏感性和特異性，同時降低假陽性率的發(fā)生，臨床應(yīng)用價值較高。

[1] Arbyn M,Ronco G,Anttila A,et al.Evidence regarding human papillomavirus testing in secondary prevention of cervical cancer〔J〕.Vaccine,2012,30(Suppl 5):F88-F99.

[2] Arias PH,Peyton CL,Joste NE,et al.Human Papillomavirus type16 integra-tion in cervical carcinoma in situ an in invasive cervical cancer〔J〕.J Clin Microbiol,2006,44(5):1755-1762.

[3] Ferher MJ,Montoya DP,Yu C,et al.Intergrations of the hepatitis B virus(HBV) and human papillimavirus(HPV) into the human telomaerrase reverse transeriptase(hTERT) gene in liver and cervical cancer〔J〕.Oncogene,2003,22(24):3813-3820.

[4] Li Z,Barron S,Hong W,et al.Surveillance for recurentcancers and vaginal epithelial lesions in patients with invasive cervical cancer after hysterectomy〔J〕.Am J Clin Pathol,2013,140(5):708-714.

[5] Dahlstrom LA,Ylitalo N,Sundstrom K,et al.Prospective study of human papillomavirus and risk of cervical adenocarcinoma〔J〕.Int J Cancer,2010,127(8):1923-1930.

[6] Pimple S,Muwonge R,Amin G,et al.Cytology versus HPV testing for the detection of high-grade cervical lesions in women found positive on visual inspection in Mumbal India〔J〕.Int J Gynaecol Obstet,2010,108(3):236-239.

[7] Saslow D,Runowicz CD,Solomon D,et al.American Cancer Society guidelin for the early detection of cervical neoplasia and cancer〔J〕.CA Cancer J Clin,2002,52(6):342-362.

[8] Koutsky L.The epidemiology behind the HPV vaccine discovery〔J〕.Ann Epidemiol,2009,19(4):239-244.

[9] 姜 霞.高危型人乳頭瘤病毒檢測對宮頸愛錢病變篩查的臨床價值〔M〕.河北醫(yī)科大學(xué),2014.

[10] Berkowitz RP.2012 updated consensus guidelines for the management of abnormal cervical cancer screening tests and cancer precursors〔J〕.Obstes Gynecol,2013,122(2 Pt 1):393.

[11] Koutsky LA,Holmes KK,Critchlow CW,et al.A cohort study of the risk of cervical intraepithelial neoplasia grade 2 or 3 in relation to papillomavirus infection〔J〕.N Engl J Med,1992,327(18):1272-1278.