子宮上皮細胞穩(wěn)定性細胞游離亞鐵原卟啉對宮頸癌的診斷意義

陳艷輝+周訓華+趙瑩

[摘要] 目的 探討子宮上皮細胞穩(wěn)定性細胞游離亞鐵原卟啉（FH）對宮頸癌的診斷價值。 方法 選取2014年2月～2016年12月湖南省腦科醫(yī)院接受宮頸癌篩查的女性患者303例，經(jīng)病理學診斷宮頸癌患者56例，宮頸上皮內瘤變Ⅱ～Ⅲ（CINⅡ～Ⅲ）患者112例，宮頸刮片檢查健康正常健康者135例，均行子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測和液基薄層細胞檢測（TCT）。將病理學診斷結果作為金標準，分析上皮細胞穩(wěn)定性FH和TCT對宮頸癌與CINⅡ～Ⅲ檢測的靈敏度、特異度、準確度、約登指數(shù)、陽性和陰性預測值。 結果 經(jīng)上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測，宮頸癌患者與CINⅡ～Ⅲ患者的總陽性率均明顯高于正常健康者（P < 0.05），且宮頸癌患者明顯高于CINⅡ～Ⅲ患者（P < 0.05）；上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測宮頸癌患者54例，CINⅡ～Ⅲ患者97例，TCT檢測宮頸癌患者49例，CINⅡ～Ⅲ患者93例；上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測的靈敏度、特異度、準確度、約登指數(shù)、陽性預測值及陰性預測值均高于TCT檢測。 結論 上皮細胞穩(wěn)定性FH在宮頸癌高表達，檢測結果有較高的準確度、靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值。

[關鍵詞] 細胞游離亞鐵原卟啉；宮頸癌；宮頸上皮內瘤變Ⅱ～Ⅲ；液基薄層細胞檢測

[中圖分類號] R711.74 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2018）01（b）-0079-04

[Abstract] Objective To investigate the diagnostic value of the uterine epithelial cells stability of the cells free ferrous protoporphyrin （FH） for cervical cancer. Methods Three hundred and three female patients with cervical cancer screening in Brain Hospital of Hunan Province were selected from February 2014 to December 2016， and there were 56 cases of cervical cancer and 112 cases of cervical intraepithelial neoplasia Ⅱ-Ⅲ （CIN Ⅱ-Ⅲ） by pathological diagnosis and 135 cases of normal healthy women by cervical scraping smear test， who were detected by uterine epithelial cells stability FH test and thinprep cytologic test （TCT）. The pathological diagnosis was used as the gold standard， and the sensitivities， specificity， accuraciy， Youden indexes， positive and negative predictive values of the uterine epithelial cells stability FH and TCT for cervical cancer and CINⅡ-Ⅲ were analyzed. Results The total FH positive rate of cervical cancer patients and CIN Ⅱ-Ⅲ patients were significantly higher than that of normal healthy subjects （P < 0.05）， of which the patients with cervical cancer were significantly higher than of the CINⅡ-Ⅲ patients （P < 0.05）. There were 54 cases patients of cervical cancer and 97 patients of CIN Ⅱ-Ⅲ who were detected by uterine epithelial cells stability FH， and there were 49 patients of cervical cancer and 93 patients of CINⅡ-Ⅲ who were detected by TCT. The sensitivities， specificity， accuracies， Youden indexes， positive predictive value and negative predictive value of the uterine epithelial cells stability FH test were higher than those of the TCT. Conclusion The expressions of the uterine epithelial cells stability FH test are increased in cervical cancer， which has higher accuracies， sensitivity， specificity， positive and negative predictive values for the detection of cervical cancer.

[Key words] Cells free ferrous protoporphyrin； Cervical carcinoma； Cervical intraepithelial neoplasiaⅡ-Ⅲ； Thinprep cytologic testendprint

宮頸癌是婦科最常見的一種惡性腫瘤，宮頸上皮內瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是宮頸癌前病變，近年來，宮頸癌與CIN的發(fā)病均有逐漸年輕化的趨勢，且宮頸癌在女性癌癥患者中死亡率較高，嚴重威脅婦女的生命安全[1-2]。宮頸液基薄層細胞檢測（Thinprep cytologic test，TCT）是目前主要的宮頸細胞學篩查方法，有較高的靈敏度與特異度，對宮頸癌及CIN有較高的檢出率，但TCT的檢測效果并沒有預期理想[3-4]。細胞游離亞鐵原卟啉（free ferrous protoporphyrin，F(xiàn)H）含量同細胞癌變程度有密切關系，其析出量越高，癌變越嚴重，對宮頸癌的早期篩查與診斷有重要作用[5]。為提高宮頸癌的篩查診斷，以助于疾病的及時治療，本研究對宮頸癌及CINⅡ～Ⅲ患者均行子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測和TCT檢測，根據(jù)其相應指標對比，分析子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測臨床診斷價值，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年2月～2016年12月接受宮頸癌篩查的女性，納入標準：經(jīng)病理學診斷為宮頸癌、CINⅡ～Ⅲ患者及宮頸刮片檢查正常者，有性生活史；排除標準：宮頸息肉、陰道不規(guī)則出血、子宮切除、黏膜下子宮肌瘤患者，近期接受放化療患者，有急性生殖道感染者。其中，經(jīng)病理學診斷：宮頸癌患者56例，年齡36～71歲，平均（51.21±4.62）歲；CINⅡ～Ⅲ患者112例，年齡28～57歲，平均（40.61±3.54）歲；宮頸刮片檢查正常者135例，年齡26～61歲，平均（42.74±4.19）歲。本研究患者均簽署知情同意書，且通過醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審查批準。

1.2 檢測方法

1.2.1 病理學檢測方法 陰道鏡下選擇宮頸鱗-柱交接部的3、6、9、12點處取活檢標本，4%甲醛固定，常規(guī)脫水、浸蠟及石蠟包埋，切5 μm薄片，進行HE染色，在光鏡下觀察組織病理學形態(tài)，并做出病理診斷。

1.2.2 子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測 ①檢測試劑與材料：FH染色試劑盒購于青島東孚美倫生物科技有限公司，細胞保存液與細胞刷均購于Hologic公司；②檢測方法：將宮頸滲液采樣器從陰道緩緩插入至子宮頸部位，并按右上、右下、左下、左上、宮頸管口部位循序擦拭，獲取細胞滲液，并將其與細胞保存液混勻送檢，嚴格按照FH染色試劑盒的步驟進行操作（順時針折斷乳白色滴管管口，將試劑滴入測試池，并用該管吸入樣本液1 mL將其滴入測試池內，之后將橘紅色滴管旋轉折斷，將試劑滴入測試池，2 min內對比顯色情況）。

1.2.3 TCT檢測 將TCT宮頸細胞刷置入宮頸管1 cm左右，采集宮頸脫落細胞，將細胞轉移到裝有細胞保存液瓶中送檢，通過全自動細胞制備對樣本細胞進行混勻、過濾及轉移，貼附于玻片上，染色固定，最后于顯微鏡下進行觀察診斷。

1.3 判定標準

1.3.1 子宮上皮細胞穩(wěn)定性 FH檢測結果判定標準， 陰性：細胞不著色或微藍色；陽性：藍色（子宮上皮細胞不穩(wěn)定）；強陽性：深藍色或顯深藍色后即刻轉為深黃色或棕紅色（子宮上皮細胞極不穩(wěn)定），總陽性率=（陽性+強陽性）/總人數(shù)×100%。

1.3.2 TCT檢測結果診斷標準 細胞核大、胞漿較少、核質較粗糙、胞漿呈多形性或細胞邊界模糊等屬于CINⅡ～Ⅲ；細胞排列松散或紊亂、核質深染、胞漿角化明顯、細胞形狀奇怪、核膜不規(guī)則增厚等屬于宮頸癌。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，多樣本比較采用秩和檢驗，等級分布比較采用秩和檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測不同研究對象的結果比較

三組研究對象等級分布、總陽性率比較差異均有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）；宮頸癌患者與CINⅡ～Ⅲ患者的總陽性率均明顯高于正常健康者，且宮頸癌患者明顯高于CINⅡ～Ⅲ患者，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩種檢測方法檢測結果與病理學診斷結果比較

子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測宮頸癌、CINⅡ～Ⅲ的靈敏度、特異度、準確度、約登指數(shù)、陽性預測值、陰性預測值、隱形預測值均高于TCT檢測。見表2、3。

3 討論

宮頸癌是目前我國最常見的婦科惡性腫瘤，高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染是其主要危險因素。高危型HPV亞型產(chǎn)生E6和E7兩種癌蛋白，其可與細胞周期調節(jié)蛋白相結合，導致細胞周期調節(jié)失控，發(fā)生癌變[6-8]。宮頸癌變的發(fā)生發(fā)展是一個漸進性過程，CIN是宮頸癌前病變，通過臨床檢測可及時發(fā)現(xiàn)，確診后進行積極治療，可避免其進一步發(fā)展成宮頸癌，降低宮頸癌癌變率[9-11]。

本研究檢測結果發(fā)現(xiàn)，上皮細胞穩(wěn)定性FH在宮頸癌與CINⅡ～Ⅲ患者中陽性率均顯著升高，且宮頸癌患者明顯高于CINⅡ～Ⅲ患者；此外上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測的靈敏度、特異度、準確度、約登指數(shù)、陽性預測值、陰性預測值均高于TCT檢測，說明上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測具有較高的臨床診斷價值，其診斷準確率具有相對可靠性。TCT檢測是臨床檢測CIN和宮頸癌的主要方法之一，其操作過程中清除了黏液、血液、各種炎癥細胞等干擾，在一定程度上提高了細胞制片質量，使其臨床檢測結果有較高的靈敏度和特異度，有利于CIN和宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)和治療，但其受細胞學醫(yī)生操作技術水平和對細胞異常形態(tài)主觀判斷等的影響，容易漏診和誤診，對CIN和宮頸癌早期診斷有一定的限制，效果不甚理想[12-15]。上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測是近年來臨床上使用的一種新型的宮頸癌診斷方法，主要是通過FH與特定物質的氧化還原反應使子宮上皮細胞染色，根據(jù)著色的深淺分析患者病變程度[16]。正常情況下，亞鐵血紅素通常以結合蛋白的形式參與機體各種調節(jié)活動，但當出現(xiàn)致癌因子時，抑癌基因p53會發(fā)生突變或缺失，導致對糖代謝葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的抑制作用喪失，從而使細胞內穩(wěn)定性失調、能量代謝發(fā)生異常、蛋白質構象發(fā)生變化，最終使親脂性物質進入含有亞鐵原卟啉蛋白的疏水核內，導致亞鐵原卟啉脫落成為FH。游離的FH極不穩(wěn)定，可從鄰近的蛋白質、脂肪和DNA上奪取電子，使自己處于穩(wěn)定狀態(tài)，如此連鎖反應，引起細胞膜脂質、細胞骨架、脂蛋白、DNA等氧化損傷，細胞自身調控發(fā)生紊亂，最終導致組織細胞發(fā)生癌變。因此，穩(wěn)定性FH可作為宮頸癌生物標志物，通過檢測其含量多少可對患者進行癌變診斷[17-19]。有研究發(fā)現(xiàn)[20]，上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測在宮頸癌及CIN患者的臨床診斷中有較高的準確率，其臨床診斷相對可靠，此與本研究結果相符。endprint

綜上，上皮細胞穩(wěn)定性FH對宮頸癌檢測有較高的準確度、靈敏度、特異度，陽性預測值、陰性預測值，對宮頸癌的臨床診斷敏感性較高。但由于本研究樣本量較小，且樣本細胞收集及上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測操作過程受人為因素的影響，如細胞取樣偏差、操作水平參差不齊等均可影響檢測結果的準確性，因此還需進一步擴大樣本量進行研究，并改善上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測方法，減少主觀因素的影響，以進一步提高檢測結果的準確度。

[參考文獻]

[1] Tay SK，Lin LE，Goh RC. Detection Rate of High-Grade Cervical Neoplasia and Cost-Effectiveness of High-Risk Human Papillomavirus Genotyping with Reflex Liquid-based Cytology in Cervical Cancer Screening [J]. Ann Acad Med Singapore，2017，46（7）：267-273.

[2] 劉國強，張朝紅，謝映君，等.高危型人乳頭瘤病毒聯(lián)合液基細胞學檢測在宮頸癌前病變篩查中的應用[J].中國計劃生育和婦產(chǎn)科，2015，7（6）：43-45.

[3] 胡玉芹，劉付強，劉巖麗，等.宮頸上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測與TCT技術在宮頸病變篩查中的應用價值[J].河北醫(yī)科大學學報，2016，37（1）：35-39.

[4] 臧元怡.高危HPV檢測聯(lián)合TCT在宮頸癌篩查中的應用[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2015，24（11）：1184-1186.

[5] Munsell MF，Park JC，Meyer L，et al. Retrospective review of symptoms and palliative care interventions in women with advanced cervical cancer [J]. J Clin Oncol，2015，33（29_suppl）：104.

[6] 左學騫，舒麗莎，呂亞淑，等.TCT聯(lián)合Cervista HPV HR在宮頸癌篩查中的應用價值[J].中國婦幼保健，2015，30（3）：457-459.

[7] Chun S，Shin K，Kim KH，et al. The Neutrophil-Lymphocyte Ratio Predicts Recurrence of Cervical Intraepithelial Neoplasia [J]. J Cancer，2017，8（12）：2205-2211.

[8] 姜愛鳳，王以新，楊敏京，等.新柏式薄層液基細胞學（TCT）聯(lián)合HPV -DNA 分型檢測在宮頸癌篩查中的臨床價值[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2015，28（20）：3015-3017.

[9] 陳建英，韓萍.高危型HPV檢測及TCT對中晚期宮頸癌放療后病情監(jiān)測的臨床意義[J].實用癌癥雜志，2015，30（8）：1243-1245.

[10] 姚有娣，程易凡，王丹鳳，等.宮頸液基薄層細胞學檢測與人乳頭瘤病毒檢測對宮頸癌診斷的效用評價[J].中國性科學，2016，25（2）：44-47.

[11] 李瑛.腫瘤標志物聯(lián)合TCT與HPV DNA檢測在宮頸癌及癌前病變中的臨床意義[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2016， 25（1）：92-93.

[12] 劉志紅，鄒艷芬.宮頸液基細胞學檢查與高危型HPV檢測早期篩查宮頸癌前病變的對比分析[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學，2016，24（8）：1269-1271.

[13] 魏萌.探討人乳頭瘤病毒DNA分型檢測聯(lián)合宮頸液基薄層細胞學檢查在宮頸癌篩查診斷中的研究[J].中國婦幼保健，2016，31（16）：3264-3266.

[14] 高田方. 高危型HPV檢測及TCT檢查在宮頸癌篩查中的應用效果[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2016，20（21）：213-214.

[15] 馬琛，彭力，袁蔓麗，等.TCT聯(lián)合HPV-DNA及端粒酶檢測在宮頸癌前病變篩查中的應用[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2016，13（2）：196-197.

[16] Lehtinen M，Lagheden C，Luostarinen T，et al. Ten-year follow-up of human papillomavirus vaccine efficacy against the most stringent cervical neoplasia end-point-registry-based follow-up of three cohorts from randomized trials [J]. BMJ Open，2017，7（8）：e015867.

[17] 王少云，謝東.宮頸液基薄層細胞學檢測聯(lián)合陰道鏡在篩查宮頸癌前病變中的價值[J].中國性科學，2015，24（11）：36-39.

[18] 員周慧，余曉，徐舜，等.子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測在宮頸癌前病變中的臨床診斷意義分析[J].中國性科學，2016，25（11）：39-41.

[19] Li Y，Carlson E，Villarreal R，et al. Cost-effectiveness of a patient navigation program to improve cervical cancer screening [J]. Am J Manag Care，2017，23（7）：429-434.

[20] 李姍，宗麗菊，孟麗華，等.子宮上皮細胞穩(wěn)定性FH檢測在診斷宮頸癌及癌前病變中的臨床意義[J].中國腫瘤，2015，24（10）：881-883.

（收稿日期：2017-09-28 本文編輯：任 念）endprint