氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定白酒中甲醇含量的確認(rèn)及應(yīng)用

狄紅梅，李艷敏，張立嚴(yán)

（北京順鑫農(nóng)業(yè)股份有限公司牛欄山酒廠，北京 101301）

甲醇是白酒在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的，為原料和輔料中果膠質(zhì)內(nèi)甲基酯分解而成。白酒中的甲醇一方面可以結(jié)合有機(jī)酸生成酯類，形成不同的酒香，另一方面甲醇自身具有較高的毒性，它在人體內(nèi)積蓄，即使少量的甲醇也可以引起慢性中毒、頭痛惡心、視力模糊，5～10 mL即可造成失明，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)尤其是視神經(jīng)損害嚴(yán)重。我國(guó)是酒類消費(fèi)大國(guó)，特別是白酒消費(fèi)量居世界之首，因此嚴(yán)格控制白酒中甲醇的含量，保護(hù)人民群眾的生命安全是一項(xiàng)十分重要的工作。所以，甲醇含量是酒類產(chǎn)品衛(wèi)生監(jiān)督檢測(cè)的主要指標(biāo)之一。因此國(guó)家對(duì)甲醇的含量做出了嚴(yán)格的規(guī)定，為了保證食品安全，必須建立精確有效的甲醇含量測(cè)定方法。GB 5009.266—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中甲醇的測(cè)定》，甲醇的檢測(cè)方法為氣相色譜毛細(xì)管柱內(nèi)標(biāo)法[1-4]，本實(shí)驗(yàn)采用的是氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定甲醇的含量,測(cè)得甲醇的結(jié)果準(zhǔn)確，穩(wěn)定性好，同時(shí)能夠快速分離白酒中的其他不同風(fēng)味成分，最終獲得一種簡(jiǎn)單、快捷，同時(shí)具有較高的靈敏度和較好分離效果的新的檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器和試劑

樣品：酒廠生產(chǎn)的成品酒酒樣1#。

試劑：甲醇（99.5%），叔戊醇（99.5%），無水乙醇（99.9%），超純水。

儀器設(shè)備：Agilent7890B氣相色譜儀（配備7693液體自動(dòng)進(jìn)樣器）；FID檢測(cè)器；色譜柱，CPWax 57 CB 20～200℃（225℃），50 m×250 μm×0.2 μm；萬(wàn)分之一電子天平。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 儀器參數(shù)條件

程序升溫條件：初溫40℃，保持1 min，以4.0℃/min升到130℃，以20℃/min升到200℃，保持5 min。

優(yōu)化后升溫條件：初溫35℃，保持3 min，以1.0℃/min升到50℃，以20℃/min升到200℃，保持5 min。

檢測(cè)器溫度：250℃。進(jìn)樣口溫度：250℃。

載氣流量：1.0 mL/min。進(jìn)樣量：1.0 μL。分流比：20∶1。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑配制

乙醇溶液（40%vol）：量取400 mL乙醇，用超純水定容至1000 mL，混勻。

甲醇儲(chǔ)備液配制：準(zhǔn)確稱取甲醇（99.50%）0.4992 g，用40%vol乙醇溶液定容至100 mL容量瓶中，搖勻備用。

叔戊醇（內(nèi)標(biāo)）溶液的配制：準(zhǔn)確稱取叔戊醇（99.50%）1.9993 g，用40%vol乙醇定容至100 mL容量瓶中，搖勻備用。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

1.2.3.1 國(guó)標(biāo)中甲醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線配制步驟

分別吸取0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、5.0 mL甲醇儲(chǔ)備液于5個(gè)25 mL容量瓶中，用40%vol乙醇定容至刻度，搖勻備用，各級(jí)別濃度見表1。

表1 甲醇的各級(jí)別濃度 (mg/L)

然后從5個(gè)不同濃度的容量瓶中各吸出10 mL樣液，再加入0.1 mL叔戊醇內(nèi)標(biāo)溶液，各樣品加入的內(nèi)標(biāo)濃度為198.93 mg/L，搖勻后進(jìn)樣分析。

1.2.3.2 優(yōu)化程序升溫條件測(cè)定甲醇含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線

配制包括甲醇在內(nèi)的12種風(fēng)味物質(zhì)混標(biāo)，從現(xiàn)有的混標(biāo)儲(chǔ)備液中吸出10 mL，1∶2梯度稀釋，共計(jì)8個(gè)濃度級(jí)別，最后加入濃度為198.93 mg/L的叔戊醇內(nèi)標(biāo)0.1 mL進(jìn)樣分析并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，各級(jí)別濃度見表2。

表2 混標(biāo)中甲醇的各級(jí)別濃度 (mg/L)

本標(biāo)準(zhǔn)曲線是以甲醇的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制的，得到甲醇的相關(guān)系數(shù)r為0.99997，單位是mg/L，見圖1。

2 結(jié)果與分析

甲醇回收率樣品的制備。

酒樣濃度：酒廠成品酒樣1#連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定甲醇的含量為酒樣濃度。

加標(biāo)酒樣濃度：從甲醇儲(chǔ)備液中吸取0.5 mL用本廠成品酒樣1#定容至50 mL，搖勻，吸出5 mL加30 μL內(nèi)標(biāo)連續(xù)進(jìn)樣6次。

表3 國(guó)標(biāo)方法測(cè)得甲醇含量的精密度與回收率

表4 優(yōu)化程序升溫條件甲醇的精密度與回收率

圖1 12種混標(biāo)中甲醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

精密度：根據(jù)GB 5009.266—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中甲醇的測(cè)定》中的要求，在重復(fù)性測(cè)定條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不超過其算數(shù)平均值的10%。

2.1 國(guó)標(biāo)方法測(cè)得的甲醇含量精密度與回收率

根據(jù)國(guó)標(biāo)中的程序升溫條件測(cè)得的甲醇含量以及加標(biāo)回收的情況見表3。

2.2 優(yōu)化程序升溫條件甲醇的精密度與回收率

根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)情況和檢測(cè)要求，優(yōu)化程序升溫條件測(cè)得的甲醇含量見表4。

3 結(jié)果與討論

對(duì)于白酒中甲醇含量檢測(cè)方法的研究對(duì)比，按照GB 5009.266—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中甲醇的測(cè)定》中所要求的儀器設(shè)備條件、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制等進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，測(cè)得的成品酒樣1#的甲醇含量的平均值為50.8 mg/L，含量的精密度為5.57%，回收率為99.28%，回收率的精密度為0.74%。但根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)需求，運(yùn)用國(guó)標(biāo)中的程序升溫條件不能將白酒中其他香味成分很好地分離，所以需要改變柱箱的升溫程序，來確保每個(gè)組分都能完全分離。配制包括甲醇在內(nèi)的風(fēng)味物質(zhì)混標(biāo)，程序升溫條件為初溫35℃，保持3 min，以1.0℃/min升到50℃，以20℃/min升到200℃，保持5 min的條件下進(jìn)樣分析，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。用該方法測(cè)成品酒樣1#的甲醇含量為51.9 mg/L，含量的精密度為2.72%，回收率為100.08%，回收率的精密度為2.42%。從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，兩種方法測(cè)得的成品酒樣1#的甲醇含量分別為50.8 mg/L和51.9 mg/L，精密度為2.12%，符合精密度要求。

根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)情況和檢測(cè)需要，改變程序升溫條件運(yùn)用氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定甲醇的含量與國(guó)標(biāo)中測(cè)定甲醇含量的方法所檢測(cè)出的甲醇含量的精密度為2.12%，能夠滿足國(guó)標(biāo)中的精密度要求，所以運(yùn)用優(yōu)化升溫條件的方法測(cè)定白酒中甲醇含量的方法重現(xiàn)性好，回收率好，精密度高，操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，能夠提高工作效率，對(duì)我廠甲醇的檢測(cè)和白酒產(chǎn)品質(zhì)量的控制提供技術(shù)指導(dǎo)，對(duì)維護(hù)白酒安全具有一定的促進(jìn)作用。

[1]國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì),國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中甲醇的測(cè)定：GB 5009.266—2016[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2017.

[2]李燕,張燕,張書文.氣相色譜法同時(shí)測(cè)定白酒中的特征香氣成分[J].化學(xué)分析計(jì)量,2008,17(6)：59-61.

[3]仲靖雨,陳智生.毛細(xì)管柱色譜法同時(shí)測(cè)定白酒中的醇、酯[J].化學(xué)分析計(jì)量,2008,17(3)：42-44.

[4]李永生,齊嬌娜,高秀峰.酒中甲醇測(cè)定方法的研究進(jìn)展[J].釀酒科技,2006(1)：84-89.