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    有毒中藥配伍甘草增毒與減毒作用研究進(jìn)展

    2018-01-29 05:18:17李超英
    關(guān)鍵詞:芫花甘遂烏頭

    董 婉,李超英,楊 萌,孫 惠

    長(zhǎng)白山資源開發(fā)與利用

    有毒中藥配伍甘草增毒與減毒作用研究進(jìn)展

    董 婉,李超英,楊 萌,孫 惠

    甘草是一種藥食同源的中藥,其性味甘,平.歸心、肺、脾、胃經(jīng),具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗?jié)?、解痙攣、抗過(guò)敏、抗糖尿病、抗抑郁以及保護(hù)肝臟等藥理作用.甘草作為臨床常見(jiàn)的降低毒性和調(diào)和藥性之藥,在與有毒中藥配伍的過(guò)程中主要起“減毒”的作用,但其具有兩面性,即增強(qiáng)毒性又解毒或增強(qiáng)療效,因此,甘草被稱為“雙向”草藥.文章通過(guò)甘草與有毒中藥配伍后,對(duì)物質(zhì)基礎(chǔ)變化、毒副作用、藥效、藥代動(dòng)力學(xué)及其代謝組學(xué)方面的影響,研究增毒與減毒作用機(jī)理.

    有毒中藥;甘草;配伍;增毒與減毒;作用機(jī)理

    1 甘草增強(qiáng)配伍中藥的毒性機(jī)制

    與“十八反”中有毒藥物配伍 十八反歌訣中記載“藻戟遂芫俱戰(zhàn)草”,古代醫(yī)學(xué)認(rèn)為甘草與大戟、芫花、甘遂、海藻屬于配伍禁忌,配伍同用會(huì)增強(qiáng)毒性、損害機(jī)體,通過(guò)對(duì)其配伍作用分析主要有如下幾方面.

    1.1 甘草對(duì)配伍中藥成分的影響

    王鋼等[1]和景欣悅等[2]對(duì)甘遂、海藻、大戟和芫花與甘草配伍后的甘草主要成分甘草酸溶出進(jìn)行檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,除甘遂以外,其余三味藥均增加甘草酸的溶出率,而甘草酸水解后形成的甘草次酸有導(dǎo)致機(jī)體水鈉潴留的作用.對(duì)甘遂與甘草配伍后甘遂化學(xué)組成進(jìn)行分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,有十二個(gè)毒性成分均為二萜類化合物;并且甘草與甘遂合用甘遂中有毒成分二萜物質(zhì)含量明顯高于單用甘遂,因此,甘遂的毒性增強(qiáng).

    上述研究表明,甘草對(duì)有毒中藥甘遂、海藻、大戟和芫花配伍后的成分影響有兩方面:一方面,配伍后產(chǎn)生甘草次酸顯著降低配伍中藥的利水消腫作用;另一方面,甘草使甘遂產(chǎn)生有毒成分,導(dǎo)致毒性增強(qiáng).

    1.2 甘草對(duì)配伍中藥毒性的影響

    沈娟等[3]研究表明,甘遂與甘草配伍使用時(shí)會(huì)引起谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase,ALT)、甘油三酯(triglyceride,TG)、肌酸磷酸激酶(creatine phosphokinase,CK)升高,總膽紅素(total bilirubin,T-BIL)、總蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)或者尿素氮(usea nitrogen,BUN)降低,并且甘遂-甘草合用毒性隨甘草比例增加而增強(qiáng);甘草與甘遂配伍后使心臟、肝臟、腎臟及腸黏膜病理發(fā)生惡性變化.

    李愛(ài)芳等[4]對(duì)補(bǔ)骨脂與甘草配伍研究表明,甘草次酸抑制CYP酶的異形體,增加內(nèi)照射,抑制補(bǔ)骨脂酚原型的消除,增加腎臟毒性,而且甘草使補(bǔ)骨脂中的主要化學(xué)成分補(bǔ)骨脂酚含量增加,這可能是甘草與補(bǔ)骨脂不能配伍的主要機(jī)制.

    上述研究表明,甘草與有毒中藥甘遂、補(bǔ)骨脂配伍后,對(duì)血清生化指標(biāo)均有不同程度的影響,導(dǎo)致對(duì)機(jī)體肝、腎、心臟及小腸等的毒性增強(qiáng).

    1.3 甘草對(duì)配伍中藥藥效的影響

    麻智祥等[5]利用尤斯灌流室技術(shù)(ussingchamber)對(duì)“十八反”中“藻戟遂芫俱戰(zhàn)草”的配伍禁忌進(jìn)行機(jī)理研究.P-糖蛋白(P-gp)外排是排斥細(xì)胞在生存環(huán)境中遇到細(xì)胞毒物(或藥物)的自我保護(hù).研究結(jié)果表明,甘草自身可以提高P-gp的活性,從而促進(jìn)細(xì)胞的內(nèi)物質(zhì)外排.當(dāng)甘草與有毒中藥大戟或芫花合用時(shí),P-gp的活性降低,促進(jìn)藥物外排的解毒效應(yīng)被影響,因此,大戟與芫花的有毒成分外排減少.丁愛(ài)華等[6]對(duì)甘草與芫花合用后對(duì)大鼠離體回腸收縮作用進(jìn)行研究,結(jié)果顯示,甘草使芫花促進(jìn)腸管運(yùn)動(dòng)的作用減弱.

    上述研究表明,甘草與十八反中“藻戟遂芫”配伍后降低外排現(xiàn)象,導(dǎo)致有毒物質(zhì)穩(wěn)定存在細(xì)胞內(nèi);甘草與芫花合用后減弱其“峻下”作用.

    1.4 對(duì)配伍中藥藥代動(dòng)力學(xué)的影響

    陳艷琰等[7]通過(guò)對(duì)芫花與甘草配伍的藥動(dòng)學(xué)研究指出,配伍與單用芫花相比,大鼠死亡時(shí)間縮短,Tmax縮短,藥時(shí)曲線下面積(AUC)增加,且隨著給藥劑量的降低,Cmax也隨之降低.

    上述研究結(jié)果表明,甘草與芫花配伍后可促進(jìn)有毒中藥芫花二萜類毒性物質(zhì)的體內(nèi)吸收,同時(shí)抑制其代謝消除過(guò)程和排泄過(guò)程.

    1.5 對(duì)配伍中藥代謝組學(xué)的影響

    沈娟等[8]利用液-質(zhì)聯(lián)用(LC-MS/MS)技術(shù),基于代謝組學(xué)對(duì)甘草與甘遂配伍后治療惡性胸膜積液的劑量-療效-毒性之間的關(guān)系進(jìn)行研究,結(jié)果顯示,機(jī)體內(nèi)源性代謝物和生理指標(biāo)變化,硒氨基酸、煙酸和煙酰胺的代謝偏差是導(dǎo)致毒性增強(qiáng)的主要機(jī)制,與組織損傷之間的內(nèi)在關(guān)聯(lián),并且當(dāng)甘遂單用治療惡性胸膜積液大鼠時(shí)可以將不正常的代謝調(diào)節(jié)至正常水平,當(dāng)甘遂與甘草配伍比例為2∶1時(shí),代謝有所改善,毒性也降低,生化結(jié)果顯示,當(dāng)甘遂與甘草比例為1∶4,代謝變化更不正常.

    上述研究結(jié)果表明,甘草與甘遂配伍后導(dǎo)致機(jī)體代謝紊亂,并且隨著甘草所占比例增加甘遂的毒性增強(qiáng).

    2 甘草降低配伍中藥毒性的機(jī)制

    甘草降低食物或藥物中毒研究,甘草中主要解毒成分為甘草甜素,甘草甜素水解后成為葡萄糖醛酸,其與有毒物質(zhì)結(jié)合即起到吸附作用.另外,甘草甜素還有腎上腺皮質(zhì)激素樣作用,降低機(jī)體對(duì)各種有毒物質(zhì)的反應(yīng),使機(jī)體在不良的環(huán)境中維持必要的生理功能,從而增強(qiáng)肝臟的解毒功能[9].

    歷代醫(yī)書《金匱要略》和《傷寒論》等記載甘草與烏頭或附子類有大毒中藥配伍達(dá)到緩和藥性作用,如《本草綱目》中將甘草列為草部中藥的首位,認(rèn)為其有解眾毒藥的特性,現(xiàn)代臨床上中醫(yī)通常用甘草降低川烏、草烏和附子類中藥的毒性.

    2.1 甘草對(duì)配伍中藥成分的影響

    張愛(ài)華等[10]對(duì)甘草單用與附子配伍后的甘草黃酮成分溶出進(jìn)行研究,實(shí)驗(yàn)表明,當(dāng)甘草單獨(dú)煎煮時(shí),解毒成分甘草黃酮的煎出率和其含量均低于與附子配伍后.虞巧英[4]通過(guò)對(duì)附子與甘草配伍前后烏頭堿、甘草苷、甘草酸含量檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,附子與甘草配伍后烏頭堿、甘草苷、甘草酸含量均比單煎時(shí)降低,因此,通過(guò)甘草苷、甘草酸、烏頭堿等化學(xué)成分的變化能揭示附子甘草配伍后起到減毒作用.

    陳建萍等[11]對(duì)附子與甘草配伍前后的主要成分含量變化進(jìn)行檢測(cè),實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,配伍后甘草酸與烏頭堿的含量均降低.章津銘等[12]研究附子配伍甘草合煎過(guò)程,結(jié)果表明,附子中大量有毒成分酯型生物堿被甘草成分復(fù)合而發(fā)生沉積,沉積物產(chǎn)生的機(jī)制初步確定為附子生物堿中叔胺N與甘草中羧酸C=O發(fā)生締合,因此,配伍后起到降低烏頭中藥的毒性作用.

    另有研究表明,甘草與附子配伍后附子中雙酯型生物堿容易與大鼠腸內(nèi)菌群分泌的脂肪酸發(fā)生脂交換反應(yīng),生成毒性較小的酯型生物堿,此反應(yīng)結(jié)果降低甘草與附子中雙酯型生物堿的含量,從而達(dá)到減毒目的[13].

    陳秋薇等[14]對(duì)附子-甘草配伍前后湯液的電導(dǎo)率、鹽度、濁度、黏度及粒徑等指標(biāo)進(jìn)行對(duì)比,實(shí)驗(yàn)表明,配伍后的湯液中甘草中黃酮與附子中生物堿形成了復(fù)合態(tài)結(jié)構(gòu)表明,配伍后湯液的物質(zhì)基礎(chǔ)發(fā)生改變,從而引起湯液相態(tài)理化性質(zhì)變化.

    楊海潤(rùn)[15]以四逆湯組方中三個(gè)配伍組(附子配伍干姜、附子配伍甘草、四逆湯全方)的雙酯型烏頭堿總含量作為指標(biāo),結(jié)果顯示,各配伍組中生物堿均低于單用附子的含量,其中以全方減毒最佳,與附子配伍干姜相比,附子與甘草配伍中生物堿的含量顯著降低,在四逆湯組方配伍中甘草在減毒方面起主要作用.

    甘草與雷公藤配伍研究,結(jié)果顯示,甘草酸銨通過(guò)與雷公藤甲素絡(luò)合或使雷公藤甲素部分水解的方式降低了雷公藤甲素在血中的濃度,同時(shí)通過(guò)緩慢釋放雷公藤甲素,或者水解后的產(chǎn)物再酯化還原為雷公藤甲素,說(shuō)明甘草在一定程度上延長(zhǎng)了雷公藤甲素的釋放,從而達(dá)到既能降低毒性又能起到緩釋藥效作用[16].

    綜上研究結(jié)果表明,甘草與烏頭類或與雷公藤有毒中藥配伍后改變甘草黃酮、甘草苷、甘草酸的溶出,并且甘草可與有毒成分復(fù)合或水解,從而達(dá)到降低有毒中藥毒性作用.

    2.2 甘草對(duì)配伍中藥毒性的影響

    李冰潔等[17]在甘草與附子配伍急性毒性實(shí)驗(yàn)中,腹腔注射甘草煎液時(shí),小鼠活動(dòng)健康正常,腹腔注射附子煎液時(shí),小鼠出現(xiàn)明顯的中毒現(xiàn)象并且在1.5小時(shí)內(nèi)全部死亡.腹腔注射甘草附子煎液時(shí),中毒現(xiàn)象明顯減輕.腹腔注射烏頭堿,小鼠出現(xiàn)嚴(yán)重中毒現(xiàn)象并在半小時(shí)內(nèi)相繼死亡,單獨(dú)腹腔注射甘草蛋白-烏頭時(shí),小鼠中毒現(xiàn)象不明顯,且沒(méi)有死亡.張廣平等[16,18]研究發(fā)現(xiàn),與單用附子灌胃給藥相比,附子與甘草配伍后半數(shù)致死量(LD50)由17.7g/kg增加到 25.4g/kg,實(shí)驗(yàn)表明,甘草與附子配伍后達(dá)到顯著降低附子在動(dòng)物體內(nèi)的毒性作用.

    馬錢子與甘草配伍研究表明,單用制馬錢子粉混懸液灌胃給藥LD50為66.83mg/kg,制馬錢子與甘草浸膏粉混懸液給藥后為97.36mg/kg,配伍后LD50增加[19],結(jié)果表明,制馬錢子與甘草配伍后降低毒性.

    對(duì)雷公藤與甘草配伍研究結(jié)果表明,配伍后半數(shù)致死量和半數(shù)中毒量(TD50)均增加.雷公藤提取物口服給藥時(shí),LD50和TD50分別為315.37mg/kg和8.6mg/kg,與甘草提取物配伍時(shí)LD50和TD50分別為348.69mg/kg和15mg/kg,表明雷公藤與甘草配伍能夠緩解有毒中藥的毒性[20].

    分析上述研究表明,甘草與烏頭類中藥、馬錢子、雷公藤有毒中藥配伍后對(duì)小鼠的半數(shù)致死量及半數(shù)中毒量的增加,證明甘草顯著降低有毒中藥的毒性作用.

    2.3 甘草對(duì)配伍中藥藥效學(xué)的影響

    張碩峰[21]以靜脈推注的方式給予小鼠烏頭堿后,小鼠于1小時(shí)內(nèi)迅速死亡,且死亡率為100%,隨著配伍甘草苷給藥劑量的增加,小鼠的死亡率逐漸下降.采用灌流系統(tǒng)Langendorff灌注法,對(duì)離體大鼠心臟灌注烏頭堿及不同劑量的甘草苷,實(shí)驗(yàn)證明,甘草苷可以顯著提高大鼠離體心臟停搏時(shí)的累積量,因此,可以提高小鼠心臟對(duì)烏頭堿的耐受能力.

    甘草附子共用與附子或甘草單用藥效比較研究結(jié)果表明,甘草附子共用不但可以增加心收縮力、增加心輸出量,還可以升高血壓,而且抑制缺血心肌脂質(zhì)過(guò)氧化、清除氧自由基[22-23].

    周天梅等[24]運(yùn)用MTT法檢測(cè)附子與甘草主要成分配伍對(duì)心肌細(xì)胞存活率的研究發(fā)現(xiàn),附子與甘草主要成分配伍可能是通過(guò)對(duì)琥珀酸脫氫酶(succinodehydrogenase,SDH)、Na+-K+ATP酶、Ca2+-Mg2+ATP酶等進(jìn)行能量代謝調(diào)節(jié),實(shí)現(xiàn)其抑制線粒體結(jié)構(gòu)改變,維持細(xì)胞內(nèi)生物氧化過(guò)程,從而降低烏頭所致的心肌細(xì)胞損傷.

    對(duì)黃藥子配伍甘草后的研究結(jié)果表明,配伍甘草后可明顯改善黃藥子,可導(dǎo)致小鼠的體重增長(zhǎng)緩慢,肝臟腫大等毒副作用.黃藥子致大鼠腎臟功能及腎臟組織病理學(xué)的改變也有所改善,使肝細(xì)胞索排列整齊,減輕肝細(xì)胞腫脹及炎性細(xì)胞浸潤(rùn).另外,黃藥子配伍后血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性均明顯降低;AST/ALT的平均比值也下降至1.291,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甘草具有明確降低黃藥子肝毒性,達(dá)到保護(hù)肝臟的作用[25-27].

    對(duì)雷公藤配伍甘草后的研究顯示,雷公藤毒副作用導(dǎo)致肝損傷與脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)有關(guān),甘草具有維持體內(nèi)自由基平衡,誘導(dǎo)抗氧化和抗氧化的保護(hù)作用[28-29].研究表明,雷公藤配伍甘草后可以降低納米二氧化鈦(NTiO2)導(dǎo)致的肝免疫性損傷并且可以抑制細(xì)胞凋亡,增加超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽過(guò)氧化酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活性,緩解在肝組織產(chǎn)生的氧化應(yīng)激反應(yīng)[30].

    綜上研究表明,甘草配伍烏頭類、黃藥子或雷公藤有毒中藥后,起到增加心收縮力、增加心輸出量、升高血壓,清除氧自由基、抑制缺血心肌脂質(zhì)過(guò)氧化等作用;對(duì)黃藥子或雷公藤產(chǎn)生的肝損害起到保護(hù)作用,并降低腎臟毒性.

    2.4 甘草對(duì)配伍中藥藥代動(dòng)力學(xué)的影響

    王志琪等[31]通過(guò)大鼠灌胃給予附子、甘草單煎液與合煎液,實(shí)驗(yàn)表明,附子與甘草配伍后的致毒成分烏頭堿在體內(nèi)的Tmax延長(zhǎng),峰濃度(Cmax)和AUC降低,t1/2縮短.李瑩等[32]四逆湯全方與去除甘草方中,次烏頭堿Tmax分別為5h和1.9h,吸收程度分別為4.5和1.82,四逆湯中次烏頭堿體內(nèi)的吸收達(dá)峰時(shí)間明顯較缺甘草四逆湯延長(zhǎng),因此,符合附子與甘草合煎起到“緩急而減毒”的作用這一說(shuō)法.

    分析上述研究表明,甘草與附子配伍后,其中有毒成分烏頭堿和次烏頭堿的吸收受到抑制,吸收速度變慢,吸收量減少,從而達(dá)到降低有毒中藥的釋藥速度和吸收率,加速其代謝,從而達(dá)到降低附子毒性作用.

    2.5 甘草對(duì)配伍中藥代謝組學(xué)的影響

    劉建群等[33]對(duì)雷公藤與甘草配伍代謝組學(xué)研究,采用LC-MS/MS研究雷公藤甲素和雷公藤內(nèi)酯酮單獨(dú)給藥與甘草聯(lián)合給藥比較,結(jié)果表明,在大鼠血漿中大部分代謝產(chǎn)物相同,其中氧化代謝產(chǎn)物為主要代謝產(chǎn)物.聯(lián)合給藥組比單獨(dú)給藥組的各代謝產(chǎn)物生成量增大.

    李俊健[34]對(duì)甘遂與甘草配伍代謝組學(xué)研究,采用NMR的代謝組學(xué)方法,實(shí)驗(yàn)表明,內(nèi)源性代謝物如檸檬酸、乳酸、異亮氨酸等的含量均降低,且能降低對(duì)肝臟和腎臟的中毒反應(yīng),甘遂導(dǎo)致的體內(nèi)代謝紊亂和腸道菌群失調(diào)等現(xiàn)象均有所改善.

    上述研究表明,一方面甘草與有毒中藥雷公藤配伍后可加速雷公藤甲素和雷公藤內(nèi)酯酮的體內(nèi)代謝,達(dá)到降低雷公藤的毒副作用,另一方面,甘草與有毒中藥甘遂配伍后,可調(diào)節(jié)甘遂所引起的代謝、腸道菌群紊亂.

    3 結(jié)論

    甘草與有毒中藥配伍后的增毒與減毒作用機(jī)制有多方面,本文通過(guò)采用甘草與有毒中藥配伍后對(duì)其有效成分與毒性成分、毒副作用、藥效、藥代動(dòng)力學(xué)及其代謝組學(xué)方面影響,對(duì)增毒與解毒的作用機(jī)理進(jìn)行系統(tǒng)的分析與解讀,一方面,對(duì)甘草與補(bǔ)骨脂及“十八反”中甘遂、海藻、大戟和芫花中藥物配伍增毒機(jī)制的研究;另一方面,對(duì)甘草與烏頭或附子類、雷公藤、黃藥子、馬錢子、甘遂配伍減毒機(jī)制的研究.因此,本文對(duì)有毒中藥與甘草配伍及其制劑研究、臨床應(yīng)用具有重要的指導(dǎo)意義.

    Research Progress on the Compatibility of Toxicity and Attenuation of Toxic Herbs with Licorice

    DONG Wan,LI Chao-ying,YANG Meng,SUN Hui
    (Changchun university of Chinese Medicine,Changchun,Jilin 130117,China)

    Licorice is a kind of medicinal and edible Traditional Chinese Medicine,sweet and flat in taste,attributive to heart,lung,spleen and kidney channels.It has the pharmacological action of anti-inflammatory,antioxidant,antiviral,anti-ulcer,lifting spasm anti-anaphylaxis,anti-diabetic,anti-depression and protecting live etc.Licorice reduces toxicity mainly in the process of compatibility with toxic Traditional Chinese Medicine as the common medicine of reducing toxicity and balancing drug properties.It has dual characters,that is,it not only enhances the toxicity but also reduces the toxicity or improve drug efficacy.Thus,Licorice is called bidirectional herb.The article studys the enhancing and reducing toxicity mechanism of action on compatibility of toxic Traditional Chinese Medicine with licorice by material basis variation,toxic and side effect,pharmacodynamics,pharmacokinetics and metabonmics.

    toxic Traditional Chinese Medicine;licorice;compatibility;enhancing and reducing toxicity;mechanism of action

    R285

    A

    1008-7974(2018)01-0012-06

    10.13877/j.cnki.cn22-1284.2018.02.004

    2017-12-01

    國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2016091114).

    董婉,女,吉林長(zhǎng)春人,長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生;楊萌,孫惠,長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)(吉林 長(zhǎng)春 130117).

    李超英,長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)教授,研究生導(dǎo)師,Email:chaoying_li@126.com.

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    王海波)

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