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    正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化黑豆胡蘿卜汁豆腐工藝研究

    2018-01-26 06:59:12楊豫斐譚孟娜何述棟
    糧油食品科技 2017年5期
    關(guān)鍵詞:胡蘿卜汁凝固劑保水

    張 馨,楊豫斐,譚孟娜,何述棟

    (合肥工業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院,安徽 合肥 230009)

    隨著人民生活水平的不斷提高,選擇食品的著眼點(diǎn)已從溫飽型轉(zhuǎn)向保健型[1-2]。機(jī)體內(nèi)抗氧化酶活性會(huì)因年齡增長(zhǎng)而下降,導(dǎo)致過多自由基不能被及時(shí)清除而堆積在細(xì)胞內(nèi),對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性,使細(xì)胞膜、組織、酶以及基因受損,從而引起機(jī)體多種疾病的發(fā)生和機(jī)體的衰老[3]。因此,抗氧化性食品的開發(fā)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

    王萌等研究表明,黑豆蛋白質(zhì)中的必需氨基酸組成結(jié)構(gòu)水平總體優(yōu)于黃豆,且其黃酮及類黃酮類物質(zhì)含量較高,是很好的抗氧化劑來源[4-5]。豆腐是重要的傳統(tǒng)食品之一,營(yíng)養(yǎng)豐富,蛋白質(zhì)含量高于大多數(shù)食物且容易被人體吸收[6]。若將黑豆制成深受消費(fèi)者喜愛的豆制品,將能更好地發(fā)揮其功能。但是以黑豆為原料生產(chǎn)的豆腐類產(chǎn)品色澤較深,感官接受度較低,因此,本實(shí)驗(yàn)擬加入同樣具有抗氧化能力的胡蘿卜汁,以提高豆腐的色澤接受度。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    黑豆、胡蘿卜:市售;豆腐:安徽八公山豆制品有限公司;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH):梯希愛(上海)化成工業(yè)有限公司;豆制品消泡劑(食品級(jí)):天津潔潤(rùn)食品有限公司;無水乙醇、石膏粉:天津潔潤(rùn)食品有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    JM50型立式膠體磨:溫州市甌海梧田華慧乳化機(jī)械廠; KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器:昆山市超聲儀器有限公司;JYL-C50T料理機(jī):九陽(yáng)股份有限公司;ThermoFisher FC型全自動(dòng)酶標(biāo)儀:美國(guó)Thermo公司; TA-XTplus物性測(cè)試儀:英國(guó)Stable公司; LGJ-12冷凍干燥機(jī):北京松源華興科技發(fā)展有限公司; SC-3614型低速離心機(jī):安徽省中科中佳科學(xué)儀器有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1黑豆胡蘿卜汁豆腐制備1.3.1.1 胡蘿卜汁制備

    篩選出充分成熟且無病蟲害的胡蘿卜,用水清洗,按原料與復(fù)合磷酸鹽(磷酸鈉4%、磷酸氫二鈉0.5%、焦磷酸鈉0.5%)溶液比1∶3(W/V)混合,于95 ℃下處理3 min后去皮,用水漂洗后將其切成厚度為0.5 cm的薄片,按胡蘿卜與水比(W/V)1∶1放入膠體磨榨汁,將制得的胡蘿卜汁用100目紗布過濾,過濾后的胡蘿卜汁放入冰箱冷藏備用[6]。

    1.3.1.2 黑豆胡蘿卜汁豆腐制備工藝流程

    挑選優(yōu)質(zhì)黑豆,水洗后,按水∶豆(W/V)3∶1加水于常溫下浸泡8 h,浸泡完的大豆瀝盡水,放入膠體磨中磨漿,用100目紗布過濾,用電磁爐煮漿,在第1次沸騰后加入胡蘿卜汁,攪拌均勻,煮至第2次沸騰后停止。調(diào)溫至80 ℃點(diǎn)漿,點(diǎn)漿時(shí)邊攪拌邊加入凝固劑,置于80 ℃的恒溫水浴鍋中蹲腦30 min,放入豆腐模具中用5 kg的重物壓制成型。

    1.3.2 黑豆胡蘿卜汁豆腐最佳工藝條件確定

    單因素實(shí)驗(yàn)中以豆腐感官評(píng)價(jià)、保水性、得率以及質(zhì)構(gòu)特性確定最佳工藝條件。設(shè)置正交實(shí)驗(yàn)因素水平為豆水比(W/V):1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8,胡蘿卜汁的添加量(V/V):0%、5%、10%、15%、20%,凝固劑添加量(W/V):0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%。

    正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇豆水比、胡蘿卜汁添加量、凝固劑添加量為實(shí)驗(yàn)因素,以抗氧化能力的大小為評(píng)定指標(biāo),進(jìn)行L9(34)正交實(shí)驗(yàn)[7]。因素水平見表1。

    表1 正交實(shí)驗(yàn)因素水平

    1.3.3 豆腐品質(zhì)評(píng)價(jià)指標(biāo)1.3.3.1 感官評(píng)價(jià)

    隨機(jī)邀請(qǐng)具有豆腐生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的男女評(píng)價(jià)員各6位,分別從口感、凝固狀態(tài)、色澤、風(fēng)味、組織狀態(tài)對(duì)黑豆胡蘿卜汁豆腐進(jìn)行感官評(píng)價(jià)。感官評(píng)價(jià)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表2。

    表2 感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

    1.3.3.2 保水率

    取一定質(zhì)量的豆腐樣品,稱重記為W1,在4 000 r/min 的條件下離心15 min,去除上清液后,記重W2,然后將樣品置于105 ℃下干燥6 h,記重W3[8]。保水率的計(jì)算公式如下:

    保水率/% =(W2-W3)/(W1-W3)×100

    1.3.3.3 質(zhì)構(gòu)測(cè)定

    取新鮮豆腐樣品,切成1 cm正方體,水平放在物性分析儀載物臺(tái)上,進(jìn)行TPA物性測(cè)試。實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)定:P/100型號(hào)探頭,測(cè)前速度1 mm/s,測(cè)試速度2 mm/s,測(cè)后速度1 mm/s,2次壓縮時(shí)間間隔5 s,下壓距離20%,感應(yīng)力5 g,觸發(fā)點(diǎn)為20 g。平行測(cè)定3次[9]。

    1.3.3.4 豆腐得率測(cè)定

    取黑豆胡蘿卜汁豆腐成品在室溫下稱重,計(jì)算每100 g干豆所得到的豆腐質(zhì)量。

    1.3.3.5 抗氧化能力測(cè)定

    采用DPPH自由基清除率表征樣品抗氧化性,在干燥后的豆腐樣品中加入無水乙醇浸提,離心后取出上層清液,用0.45 μm膜進(jìn)行過濾。每個(gè)樣品做3次重復(fù),用酶標(biāo)儀測(cè)自由基的清除率[10-11]。將樣品加入DPPH試劑的吸光度記為Ap,樣品加入無水乙醇的吸光度記為Ac, DPPH試劑加入無水乙醇的吸光度記為Amax,自由基清除率計(jì)算公式如下:

    1.3.4 黑豆胡蘿卜汁豆腐營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

    脂肪含量測(cè)定:按GB/T 5009.6—2003《食品中脂肪的測(cè)定》中規(guī)定的索式提取法進(jìn)行測(cè)定;蛋白質(zhì)含量測(cè)定:按GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》中規(guī)定的凱氏定氮法進(jìn)行測(cè)定;水分含量測(cè)定:按GB 5009.3—2016《食品中水分的測(cè)定》中規(guī)定的直接干燥法進(jìn)行測(cè)定;胡蘿卜素含量測(cè)定:按GB 5009.83—2003《食品中胡蘿卜素的測(cè)定》中規(guī)定的紙層析法進(jìn)行測(cè)定;黑色素含量測(cè)定:取5 g烘干后的豆腐粉末樣品,置于100 mL錐形瓶中,按料液比1∶40(W/V)加入40%的乙醇提取劑,調(diào)節(jié)pH值<3.5,密封后在60 ℃恒溫水浴中提取2 h。抽濾收集濾液,在恒溫干燥箱中于60 ℃下烘至恒重[12-13],計(jì)算每5 g豆腐中黑色素粗產(chǎn)品的質(zhì)量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素實(shí)驗(yàn)分析

    2.1.1 豆水比對(duì)黑豆胡蘿卜汁豆腐品質(zhì)的影響

    豆水比對(duì)豆腐品質(zhì)的影響見表3和4。由表3和表4可知,隨豆?jié){濃度的降低,豆腐硬度和保水率逐漸減弱,咀嚼性和膠粘性呈先增加后降低的趨勢(shì),豆水比為1∶5、1∶6(W/V)時(shí)各項(xiàng)指標(biāo)相差較小。當(dāng)?shù)鞍缀窟_(dá)到一定濃度時(shí),加熱會(huì)使其變性后形成凝膠結(jié)構(gòu)[14],故豆?jié){的濃度對(duì)豆腐的凝膠效果、保水率及其品質(zhì)影響較大[15-16]。豆水比在1∶8(W/V)時(shí),豆?jié){濃度過低,豆腐的質(zhì)地軟、得率和保水率均偏低[17]。當(dāng)豆水比為1∶6(W/V)時(shí),刀切有一定韌性,硬度適中,咀嚼性和膠粘性較好,保水率和得率也均處于較高水平,感官評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)此時(shí)口感、風(fēng)味最佳,硬度適中,因此,綜合考慮選取最佳豆水比為1∶6。

    表3 豆水比對(duì)豆腐質(zhì)構(gòu)特性的影響

    表4 豆水比對(duì)豆腐品質(zhì)影響

    2.1.2 胡蘿卜汁添加量對(duì)豆腐品質(zhì)的影響

    胡蘿卜汁添加量對(duì)豆腐品質(zhì)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5和6。由表5和表6可知,隨胡蘿卜汁添加量的增多,豆腐的硬度、保水率、得率均有逐漸下降的趨勢(shì),對(duì)膠粘性和咀嚼性差異不顯著。胡蘿卜汁添加量過多導(dǎo)致豆腐的硬度、保水率、得率下降;添加量過少,則豆腐的顏色過深且沒有胡蘿卜的香味。在豆?jié){中添加胡蘿卜汁,會(huì)降低大豆蛋白各成分之間的穩(wěn)定性,影響豆腐的成型效果[18]。由感官評(píng)價(jià)可知,胡蘿卜汁添加量為15%時(shí),豆腐的色澤均勻,指壓不破碎,口感風(fēng)味為最佳,且質(zhì)構(gòu)特性與對(duì)照組差距不大。綜合考慮,最佳胡蘿卜汁添加量為15%。

    表6 胡蘿卜汁添加量對(duì)豆腐品質(zhì)的影響

    2.1.3 凝固劑添加量對(duì)豆腐品質(zhì)的影響

    凝固劑添加量對(duì)豆腐品質(zhì)的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表7和表8。由表7和表8可知,隨著凝固劑添加量增加,豆腐的硬度、粘度、咀嚼性和得率也隨之增加,而保水率逐漸下降,彈性變化不大。凝固劑添加量對(duì)豆腐凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的影響較大[18-19],凝固劑添加量在1.0%~1.2%范圍內(nèi),豆腐的結(jié)構(gòu)緊湊,密實(shí)性增加,水分和蛋白流失過多[16],導(dǎo)致豆腐的硬度過高,表面結(jié)構(gòu)疏松,保水率和感官接受度均較低;凝固劑用量在0.4%~0.6%范圍時(shí),豆腐的質(zhì)地偏軟,刀切韌性不好,咀嚼性較差,得率偏低。當(dāng)添加量為0.8%時(shí),得率、保水率均處于較高水平,硬度適中,且感官接受度達(dá)到最高。綜合考慮,確定凝固劑的添加量為0.8%。

    表7 凝固劑添加量對(duì)豆腐質(zhì)構(gòu)特性的影響

    表8 凝固劑添加量對(duì)豆腐品質(zhì)的影響

    2.2 正交實(shí)驗(yàn)分析

    2.2.1 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

    選取豆水比(A)、胡蘿卜汁添加量(B)、凝固劑添加量(C)3個(gè)因素,以自由基清除率為指標(biāo),進(jìn)行L9(34)正交實(shí)驗(yàn),獲取最佳工藝條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表9、圖1。

    表9 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與極差分析

    圖1 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果極差分析

    由表10方差分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,相關(guān)系數(shù)R2=0.992,校正相關(guān)系數(shù)RAdj2=0.968,實(shí)驗(yàn)與實(shí)際情況相關(guān)性較高。豆水比對(duì)豆腐自由基清除率的影響高度顯著(P<0.05),胡蘿卜汁添加量和凝固劑添加量對(duì)自由基清除率有一定的影響(P>0.05)。由圖1和表7可知,各因素對(duì)自由基清除率影響的主次順序?yàn)锳(豆水比)>B(胡蘿卜汁添加量)>C(凝固劑添加量),表明黑豆的抗氧化物質(zhì)是清除自由基的主要原因;適當(dāng)?shù)暮}卜汁添加可以有效提高豆腐的抗氧化性[20],但是當(dāng)胡蘿卜汁添加量過大時(shí),降低了黑豆?jié){的濃度,從而影響了產(chǎn)品的

    表10 正交實(shí)驗(yàn)方差分析

    注:R2=0.992(Adj R2=0.968);* 表示差異顯著(P<0.05)。

    抗氧化性;凝固劑添加量增大,豆腐表面結(jié)構(gòu)疏松,抗氧化物質(zhì)有一定流失。自由基清除率最高時(shí)工藝條件為A1B2C2,即最佳工藝條件為豆水比1∶5(W/V)、胡蘿卜汁添加量為15%(V/V)、凝固劑添加量為0.8%(W/V)。在此工藝條件下,豆腐自由基清除率可達(dá)57.7%。

    2.2.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

    為驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)的最優(yōu)組合A1B2C2進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn)取平均值,與正交實(shí)驗(yàn)最優(yōu)組合值57.7%接近,且得率為151.27%,方案可行。與市售豆腐的抗氧化能力做對(duì)照實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明黑豆胡蘿卜汁豆腐的抗氧化能力明顯高于市售豆腐。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表11、表12。

    表11 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    表12 對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    2.2.3 產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)價(jià)

    對(duì)經(jīng)驗(yàn)證過的最優(yōu)組合的黑豆胡蘿卜汁豆腐產(chǎn)品的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果其胡蘿卜素含量為0.48%、黑色素含量為0.61 mg/g、含水量為74.28%、粗脂肪含量為3.46%、蛋白質(zhì)含量為13.26%,灰分含量為5.14%符合GB/T 22106—2008非發(fā)酵豆制品中對(duì)豆腐類產(chǎn)品的理化指標(biāo)的要求。大腸菌群≤100 CFU/g,符合GB 2714—2014中衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的要求。

    3 結(jié)論

    通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了黑豆胡蘿卜汁豆腐的加工工藝。單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,豆腐的得率、硬度均隨豆?jié){濃度的增加而增大,隨著凝固劑添加量的增多豆腐的硬度和得率均有逐漸增大的趨勢(shì),確定豆腐的生產(chǎn)工藝參數(shù)為豆水比1∶6(W/V)、胡蘿卜汁添加量為15%(V/V)、凝固劑添加量為0.8%(W/V)。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各因素對(duì)豆腐抗氧化能力的影響主次順序?yàn)椋憾顾?胡蘿卜汁添加量>凝固劑添加量,優(yōu)化出的最佳工藝組合為A1B2C2,即豆水比1∶5(W/V)、胡蘿卜汁添加量為15%(V/V)、凝固劑添加量為0.8%(W/V)。在此最佳條件下,自由基清除率可達(dá)57.2%,得率為151.27%。

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