岷山紅三葉資源及其保健食品的開發(fā)

吳國泰，王水明，馬清林，王瑞瓊

（甘肅中醫(yī)藥大學(xué)，甘肅省中藥藥理與毒理學(xué)重點(diǎn)實驗室，甘肅蘭州730000）

紅三葉（Trifolium pratenseL.）為豆科車軸草屬短期多年生草本植物，也叫紅車軸草、紅荷蘭翹搖，原產(chǎn)于歐洲中部，廣泛分布于溫帶及亞熱帶地區(qū)。岷山紅三葉是生長于岷縣東南部高寒陰濕山區(qū)的紅三葉，草質(zhì)柔軟、營養(yǎng)豐富、適口性好，各種家畜均可飼用。岷山紅三葉是三葉草短期多年生豆科牧草，是國內(nèi)著名的珍稀高原優(yōu)質(zhì)牧草。1944年岷縣軍馬場從美國引進(jìn)該植物進(jìn)行栽培，在岷縣寺溝奔直寺、閭井鎮(zhèn)及其周邊區(qū)域試種成功，1987年經(jīng)全國牧草品種審定委員會審定命名為“岷山紅三葉”[1]。截止目前，岷山紅三葉在岷縣東南片區(qū)已有70余年的種植歷史，經(jīng)野生馴化和人工選育，已成為岷縣及其周末區(qū)域的優(yōu)勢草種[2]。紅三葉中含有豐富的異黃酮類物質(zhì)，而岷山紅三葉則富含4種特有的異黃酮類植物雌激素，具有極高的醫(yī)用價值，也是一種極有前途的天然保健食材。

1 岷山紅三葉的特點(diǎn)

1.1 生長特性

岷山紅三葉屬于長日照叢生型植物，喜溫暖濕潤氣候，適宜在夏不過熱、冬不過寒的二陰地區(qū)生長，最適溫度為15～25℃，35℃以上或-15℃以下都難以生存，-8℃左右可以越冬，35℃以上則難越夏。岷山紅三葉不耐旱，也不耐澇，土壤pH6～7時最適宜生長，以排水良好、土質(zhì)肥沃富含鈣質(zhì)的黏壤土為宜，年降雨量在1000～2000mm的地區(qū)適宜生長[3,4]。野生岷山紅三葉生長的最高海拔是2750m，生境為亞高山草甸草地的河灘、路旁、田間地埂等陰坡或二陰坡，岷縣人工栽培的岷山紅三葉在春、夏、秋三季均可播種[5]。

1.2 營養(yǎng)成分

岷山紅三葉營養(yǎng)豐富，在開花期刈割的干草中含粗蛋白質(zhì)19.9%、粗纖維21.7%、粗脂肪3.3%、無氮浸出物47.5%、總灰分7.6%、鈣1.8%、全磷0.4%；粗蛋白質(zhì)含量為玉米籽的2.3倍[6]。

岷山紅三葉主要含有異黃酮類、黃酮類、黃酮醇類、香豆素和酚酸類化學(xué)成分，還含有水楊酸、葉酸及四氫葉酸，以及少量的多元醇、甘油酯、烴類、氨基酸、維生素、磷脂和糖脂等成分。另外，其揮發(fā)油含有水楊酸甲酯、水楊酸乙酯、苯乙醇、鄰氨基苯甲酯、丁香酚以及糠醛等多種成分[7-9]。異黃酮是一類廣泛存在于植物界中的化合物，是岷山紅三葉中最主要的化學(xué)成分；也具有與雌二醇類似的功效，是一種極具有開發(fā)前景的天然保健食品添加劑、功能性食品添加劑和醫(yī)用藥品和飼料添加劑，被譽(yù)為“純天然植物雌激素”。岷山紅三葉青干草中異黃酮含量為8%～10%，花蕾中的含量高于葉片和莖稈，其異黃酮含量高于其他豆科植物，是大豆籽粒中異黃酮含量的 10 倍[10]。

有學(xué)者在岷山紅三葉中發(fā)現(xiàn)了4種特有的植物雌激素類異黃酮：芒柄花素、鷹嘴豆芽素、染料木素和大豆素，另外紅三葉草中還含有毛蕊異黃酮、柳穿魚素、車軸草素、野靛苷等異黃酮成分[8,11]。

1.3 生物活性

岷山紅三葉及其主要營養(yǎng)成分具有廣泛的藥理活性，具有一定的消炎鎮(zhèn)痛、消腫、抗過敏、抗感染、抗癌、抗氧化，調(diào)節(jié)人體激素平衡，改善骨質(zhì)疏松、改善婦女更年期綜合征等作用。

1.3.1 抗癌作用

岷山紅三葉所含的異黃酮類化合物具有潛在的抗癌作用，研究報道異黃酮可抑制前列腺癌、乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌、胃癌、胰腺癌、結(jié)腸癌等。尤其對前列腺癌和乳腺癌效果明顯，臨床發(fā)現(xiàn)乳腺癌病人血漿雌激素水平偏高，植物雌激素對人雌激素具有拮抗作用，從而抑制乳腺癌。研究表明，食用大量植物雌激素類物質(zhì)的婦女患乳腺癌的機(jī)率明顯減小[12]。

1.3.2 調(diào)節(jié)雌激素作用

岷山紅三葉異黃酮具有與己烯雌酚和雌二醇相似的化學(xué)結(jié)構(gòu)、確定的雌激素增強(qiáng)效應(yīng)，通過替代甾體雌激素與雌激素受體結(jié)合，減少腸黏膜游離雌激素受體的生成，減輕雌激素受體對鈣質(zhì)吸收的抑制作用，減緩增齡性骨骼退變和骨質(zhì)疏松癥引發(fā)的骨質(zhì)流失。岷山紅三葉所含的芒柄花素、鷹嘴豆芽素、染料木素和大豆素均具有植物雌激素作用，能廣泛分布到機(jī)體各個組織細(xì)胞中發(fā)揮雙向調(diào)節(jié)作用，當(dāng)機(jī)體內(nèi)源性雌激素水平異常升高時，植物雌激素可抑制內(nèi)源性雌激素分泌。反之，當(dāng)機(jī)體內(nèi)源性雌激素水平異常降低時，植物雌激素能提供外源性雌激素，臨床治療婦女經(jīng)前期綜合征和更年期綜合征以及改善絕經(jīng)期癥狀[13,14]。

1.3.3 抗氧化活性

岷山紅三葉所含的多酚化合物具有確定的抗氧化作用和清除自由基活性，能明確抑制H2O2所致的卵磷脂過氧化反應(yīng)，其中染料木素和芒柄花素抑制作用相對較強(qiáng)，作用強(qiáng)度與維生素C相當(dāng)。實驗研究表明，岷山紅三葉所含的黃酮類化合物槲皮素及其衍生物具有一定的清除自由基活性，明顯抑制細(xì)胞膜脂質(zhì)的氧化酶活性，減弱過氧化反應(yīng)過程，保護(hù)細(xì)胞不受破壞[15,16]。

1.3.4 抗感染、抗過敏活性

岷山紅三葉草屬植物提取物具有廣譜的抗菌、抗病毒、抗炎和抗過敏作用，常用于治療濕疹、表皮燒傷、黏膜潰瘍和牛皮癬等皮膚病，作用機(jī)理與其所含的槲皮素及其衍生物均能抑制溶酶體酶和磷酸酯酶活性，干擾核酸的磷酸化過程，抑制病毒蛋白的生物合成，通過抑制細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜的脂氧酶系統(tǒng)和環(huán)氧酶系統(tǒng)，減少炎癥因子白三烯類物質(zhì)（LTs）和前列腺素（PGs）合成，發(fā)揮較強(qiáng)的抗炎抗過敏作用[17]。

1.3.5 抗輻射活性

岷山紅三葉所含的染料木素及其代謝物對曝曬誘發(fā)的裸鼠輻射損傷具有一定的保護(hù)作用，降低由紫外線輻射引起的皮膚水腫和超敏反應(yīng)。此外，岷山紅三葉異黃酮也能保護(hù)由輻射引起的機(jī)體免疫力下降[18]。

2 岷山紅三葉的應(yīng)用

岷山紅三葉兼有較高的飼用和藥用價值，具有強(qiáng)大的開發(fā)潛力和市場競爭優(yōu)勢，是促進(jìn)岷縣草產(chǎn)業(yè)發(fā)展的龍頭產(chǎn)品。

2.1 制作干花茶品

岷山紅三葉的鮮花呈紅色或淡紫紅色，十分美觀，干燥花以其自然、淳樸和耐久性成為品相美觀、風(fēng)格獨(dú)特的天然茶品。岷山紅三葉花茶，密封避光儲存12月，花色和形態(tài)未見明顯改變，可以直接沖泡茶飲，口感清香。

2.2 用作動物飼草

在豆科牧草中紅三葉的營養(yǎng)價值僅次于苜蓿，可供作牛、羊和豬的青飼。岷山紅三葉草質(zhì)柔嫩多汁，適口性好，多種家畜都喜食，可以青飼、青貯、放牧，也可以用作調(diào)制青干草、加工草粉和各種草產(chǎn)品[6，19]。為兼顧岷山紅三葉的營養(yǎng)成分和產(chǎn)量，單播收草刈割用作青飼通常在孕蕾至初花期，曬制青干草刈割通常在初花至盛花期；單播收草用作青貯，通常在開花后期刈割。放牧利用岷山紅三葉時通常在株叢高度達(dá)到15～20cm開始播種，當(dāng)年不宜放牧，再生草在土壤封凍后再作放牧利用[20,21]。

岷山紅三葉的種子在播種當(dāng)年極少成熟，但翌年可通過刈割提高青草的產(chǎn)量。岷山紅三葉調(diào)制青干草時，葉片不易脫落，可制成優(yōu)質(zhì)干草。有學(xué)者提出，岷山紅三葉與多年生禾本科牧草混播，可使岷山紅三葉草地生產(chǎn)力提高，并提升其營養(yǎng)價值和適口性都可明顯提升，岷山紅三葉與岷山貓尾草以（3～4）:1的比例混播，第1年不刈割，第2年每667m2產(chǎn)量混合鮮草為4000～4650kg，比單播岷山紅三葉產(chǎn)量提高20%～30%，比單播貓尾草產(chǎn)量提高55%～65%[22，23]。岷山紅三葉不論收草還是收種，每種一茬通常利用3～4年，間歇輪作4～6年。

2.3 在醫(yī)藥方面的應(yīng)用

很早以前，北美洲當(dāng)?shù)氐耐林擞眉t三葉治療百日咳、痛風(fēng)和毒瘤，在民間廣泛使用，后來美洲和歐洲人也用紅三葉治療哮喘、支氣管炎、咳嗽、濕疹、牛皮癬等病癥，具有一定的效果[2]。

研究發(fā)現(xiàn)，岷山紅三葉草屬植物均富含多種異黃酮類化合物，異黃酮可防治冠心病，降血脂，降血壓，抑制動脈粥樣硬化，改善血管順應(yīng)性；還能改善更年期綜合征，防治骨質(zhì)疏松癥、減緩中樞神經(jīng)退化，延緩衰老，防治老年癡呆癥等；尤其對乳腺癌、前列腺癌和腸癌有輔助治療作用；除此之外，異黃酮還具有消腫止痛，抗菌抗炎，養(yǎng)顏護(hù)膚的作用，國外已有相關(guān)的制劑和保健品上市，是一種極有開發(fā)前景的天然藥物[24.25]。

岷山紅三葉異黃酮還具有降低血脂和血膽固醇的作用，其含有的鷹嘴豆芽素能明顯抑制實驗性大鼠血漿膽固醇升高，芒柄花素、染料木素能明顯降低實驗性大鼠高血脂，紅三葉含的槲皮素和金絲桃苷能擴(kuò)張冠脈、降血壓、抗腦缺血、抑制血小板聚集及血栓形成，在心腦血管疾病防治方面具有重要意義[26,27]。

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