甜瓜霜霉病的病源生物學(xué)特性

李樹鋒

（長(zhǎng)春市農(nóng)安縣前崗鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)站 130209）

瓜類霜霉病的致病菌是古巴假霜霉菌，屬于鞭毛菌亞門、霜霉菌目、假霜霉屬，是一種轉(zhuǎn)性寄生菌。該菌侵染對(duì)葫蘆科的甜瓜、西瓜、南瓜、絲瓜、葫蘆及蛇瓜等12種瓜類造成病害，其中受害最嚴(yán)重的是黃瓜、甜瓜。最早發(fā)現(xiàn)瓜類作物霜霉病是1868年，首先在古巴報(bào)道的。目前瓜類霜霉病已成為世界各國(guó)瓜類作物的主要病害。近年來隨著我國(guó)甜瓜生產(chǎn)規(guī)模的逐漸擴(kuò)大，霜霉病也隨之產(chǎn)生擴(kuò)大和蔓延的趨勢(shì)，導(dǎo)致較重的經(jīng)濟(jì)損失。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)甜瓜霜霉病的研究，主要集中在甜瓜霜霉病的發(fā)生危害、發(fā)生規(guī)律和綜合防治等方面，對(duì)甜瓜霜霉病的病源生物學(xué)特性、系統(tǒng)流行學(xué)方面的研究較少。鑒于此，我們開展了對(duì)這方面的分析研究工作，通過對(duì)甜瓜霜霉病菌游動(dòng)孢子囊產(chǎn)生、萌發(fā)、病斑擴(kuò)展、病菌的近程傳播等方面進(jìn)行研究。以掌握甜瓜霜霉病的發(fā)病規(guī)律，為甜瓜霜霉病的系統(tǒng)分析研究、病害預(yù)測(cè)和管理提供基礎(chǔ)資料。

1 病斑產(chǎn)孢

實(shí)驗(yàn)中的甜瓜品種為純甜時(shí)代，萬里飄香，金甜佳美，嘎嘎甜。接下來將通過病害流行學(xué)的常規(guī)方法對(duì)品種抗病性等方面進(jìn)行初步的研究。

1.1 病孢子日齡與病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊潛能的關(guān)系。對(duì)尚未發(fā)病的甜瓜葉片的最下位葉進(jìn)行標(biāo)記，發(fā)現(xiàn)已標(biāo)葉片上產(chǎn)生霜霉病斑后做病斑標(biāo)記，以后分別采集 1-2、3-4、5-6、7-8、9-10、13-14、17-18、21-22日齡病斑，洗去表面游動(dòng)孢子囊，每個(gè)培養(yǎng)皿中放入10個(gè)同質(zhì)病斑，放入20℃溫箱中保濕培養(yǎng)24小時(shí)。培養(yǎng)后檢查每個(gè)培養(yǎng)皿中產(chǎn)生的游動(dòng)孢子囊數(shù)，在相同大小培養(yǎng)皿中用同樣放大倍數(shù)的鏡頭觀察50個(gè)視野，查出游動(dòng)孢子囊總數(shù)并計(jì)算單斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊量。經(jīng)計(jì)算1～4日齡病斑僅少量產(chǎn)孢，5～10日齡病斑可大量產(chǎn)孢，7～8日齡病斑產(chǎn)孢量最大，13～14日齡病斑還有一定產(chǎn)孢能力，個(gè)別17～18日齡病斑還可以產(chǎn)少量孢。20日齡后病斑完全不能產(chǎn)孢。

1.2 保濕時(shí)間與病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊關(guān)系。采集同質(zhì)病斑，洗去病斑上游動(dòng)孢子囊，在培養(yǎng)皿中保濕并置于25℃溫箱中讓其產(chǎn)游動(dòng)孢子囊，分別設(shè) 6、8、10、12、14、16、18、20、22、24 小時(shí)，10 個(gè)保溫時(shí)間，觀察50個(gè)顯微鏡視野，記錄游動(dòng)孢子囊總數(shù)，并計(jì)算出各處理組游動(dòng)孢子囊總數(shù)占24小時(shí)生成游動(dòng)孢子囊總數(shù)的百分率（%）。經(jīng)觀察，保濕時(shí)間少于10小時(shí)條件下游動(dòng)孢子囊基本不產(chǎn)生，保濕時(shí)間10～24小時(shí)條件下游動(dòng)孢子囊產(chǎn)生量隨保濕時(shí)間增加而增加。

1.3 光照對(duì)病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊的影響。將新采集的病葉在兩個(gè)培養(yǎng)皿中保濕，分別置于光暗交替（光暗各12小時(shí)）和黑暗條件（用報(bào)紙將培養(yǎng)皿包好）下。24小時(shí)后鏡檢產(chǎn)游動(dòng)孢子囊情況：用等量水洗下病斑上的游動(dòng)孢子囊，每皿洗液在鏡下觀察50個(gè)視野算出每個(gè)視野內(nèi)的平均游動(dòng)孢子囊數(shù)。對(duì)比光暗交替（光暗各12小時(shí)）和黑暗條件下游動(dòng)孢子囊產(chǎn)生數(shù)量的多少。在顯微鏡下可見，在光暗交替（光暗各12小時(shí)）和黑暗條件下游動(dòng)孢子囊產(chǎn)生有較大的差異。全黑暗條件下病斑上產(chǎn)孢面積明顯大于光暗交替（光暗各12小時(shí)）條件下的產(chǎn)孢面積。

1.4 溫度與病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊的關(guān)系

1.4.1 病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊的最低、最高溫度測(cè)定。采集同質(zhì)病斑，洗去病斑表面游動(dòng)孢子囊，每個(gè)培養(yǎng)皿中放入5個(gè)同質(zhì)病斑，放5、6、7、7.5、8、28、28.5、30、35℃溫箱中保溫培養(yǎng) 24 小時(shí)。之后在顯微鏡下觀察每個(gè)病斑產(chǎn)生游動(dòng)孢子囊情況。

觀察得當(dāng)溫度在5～7℃時(shí)不產(chǎn)孢；在7.5℃時(shí)可見產(chǎn)孢但孢囊梗很稀疏；8℃時(shí)可見一定數(shù)量產(chǎn)孢；28℃時(shí)可見一定數(shù)量產(chǎn)孢；28.5～35℃時(shí)未見產(chǎn)孢。其中，病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊的最低、最適合溫度、最高溫度分別為：7.5、20、28℃。

1.4.2 溫度與病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊的定量關(guān)系測(cè)定。洗下病斑上的游動(dòng)孢子囊，觀察30個(gè)顯微鏡視野，記錄游動(dòng)孢子囊總數(shù)，并計(jì)算出各處理組游動(dòng)孢子囊總數(shù)占24小時(shí)生成游動(dòng)孢子囊總數(shù)的百分率（%）。對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，得溫度與病斑產(chǎn)游動(dòng)孢子囊關(guān)系的回歸方程為：Y=Sin（Z700000.1X-11667X2+43.21275X3）

2 浸水時(shí)間與游動(dòng)孢子囊萌發(fā)率的關(guān)系

采甜瓜霜霉病斑，洗下表面游動(dòng)孢子囊放入不同培養(yǎng)皿中，分別置顯微鏡（10×10）下，固定視野，在記錄本上畫出視野內(nèi)各個(gè)游動(dòng)孢子囊的位置，隨時(shí)觀察并記錄各個(gè)游動(dòng)孢子囊的萌發(fā)情況，最后計(jì)算出不同浸水時(shí)間的游動(dòng)孢子囊萌發(fā)率。

經(jīng)觀察，不同批次的游動(dòng)孢子囊萌發(fā)情況不同，最快在30分鐘即可萌發(fā)，1小時(shí)內(nèi)萌發(fā)率可達(dá)60%左右，較慢的1小時(shí)10分鐘才開始萌發(fā)。

3 病斑日齡與病斑長(zhǎng)度的關(guān)系

在甜瓜霜霉病試驗(yàn)田發(fā)病后，在發(fā)病瓜秧上標(biāo)記新產(chǎn)生的20個(gè)病斑，標(biāo)記后每2日測(cè)量記錄病斑長(zhǎng)度，直至這些病斑不再擴(kuò)展為止。分析這些病斑的發(fā)展規(guī)律，在前4天里病斑增長(zhǎng)較慢，每天增長(zhǎng)量?jī)H0.5毫米；在5-8天里病斑增長(zhǎng)較快，每天增長(zhǎng)量接近1毫米；在9～10天時(shí)病斑增長(zhǎng)又變慢，增長(zhǎng)量不足0.5毫米；在10天后病斑基本不再擴(kuò)展。

4 病害的近程傳播

在甜瓜霜霉病試驗(yàn)田發(fā)病1個(gè)月后，在試驗(yàn)田南側(cè)種植2壟（壟向南北）甜瓜，則甜瓜霜霉病試驗(yàn)田成為菌源中心，可向后出苗的甜瓜傳播霜霉病菌。待后出苗的甜瓜發(fā)病后，對(duì)甜瓜霜霉病的傳播做調(diào)查。記錄每個(gè)調(diào)查樣點(diǎn)距菌源中心的距離及每個(gè)植株上的甜瓜霜霉病斑數(shù)，最后用回歸分析法對(duì)調(diào)查數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

回歸分析法處理結(jié)果顯示由于田間存在大量外來菌源，普遍傳播于所有植株上，且數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于我們所設(shè)的菌源中心產(chǎn)生的游動(dòng)孢子囊的數(shù)量，因此甜瓜霜霉病菌不再表現(xiàn)出明顯的梯度。

5 甜瓜不同品種的抗性組分對(duì)比

同時(shí)對(duì)純甜時(shí)代，萬里飄香，金甜佳美，嘎嘎甜四個(gè)品種的病斑數(shù)、病斑面積以及每個(gè)顯微鏡視野內(nèi)孢子囊數(shù)進(jìn)行測(cè)試，以每個(gè)品種感染病性指數(shù)=單葉病斑數(shù)X病斑面積X孢子囊數(shù)來進(jìn)行各品種抗病性總體評(píng)價(jià)。其中，純甜時(shí)代的單葉病斑數(shù)（個(gè)）、病斑面積（mm2）、每個(gè)視野孢子囊數(shù)（個(gè)）、各種感染病性指數(shù)分別是5.9、17.1、9.7、978；萬里飄香的單葉病斑數(shù)（個(gè)）、病斑面積（mm2）、每個(gè)視野孢子囊數(shù)（個(gè)）、各種感染病性指數(shù)分別是23.2、19.1、6.0、2658.7；金甜佳美的單葉病斑數(shù)（個(gè)）、病斑面積（mm2）、每個(gè)視野孢子囊數(shù)（個(gè)）、各種感染病性指數(shù)分別是17.7、20.1、10.2、3628.7；嘎嘎甜的單葉病斑數(shù)（個(gè)）、病斑面積（mm2）、每個(gè)視野孢子囊數(shù)（個(gè)）、各種感染病性指數(shù)分別是 13.1、18.5、11.8、2862.6。因此從上述數(shù)值分析中可見，甜瓜品種純甜時(shí)代與其他三個(gè)品種相比較抗病性最好，其次分別為萬里飄香、嘎嘎甜、金甜佳美。

6 討論

本文通過對(duì)病害流行學(xué)的常規(guī)研究方法，對(duì)對(duì)甜瓜霜霉病菌游動(dòng)孢子囊產(chǎn)生、萌發(fā)、病斑擴(kuò)展、病菌的近程傳播及不同甜瓜品種的抗性組分等方面進(jìn)行研究，多數(shù)研究結(jié)果在國(guó)內(nèi)尚未報(bào)道。這些研究結(jié)果可為甜瓜霜霉病的預(yù)測(cè)和防止方案的制訂提供基礎(chǔ)性資料。