男性相關(guān)參數(shù)與精子頂體酶活性關(guān)系分析

陸文昊 陳雪君 楊歡利 諸溢揚(yáng)★

近些年研究發(fā)現(xiàn)精子總量和活力并不能完全反映精子受精能力，精子頂體酶活性與精卵結(jié)合的受精率呈現(xiàn)了正相關(guān)性，所以精子的頂體酶活性也應(yīng)作為評判男性生育能力的一個重要指標(biāo)。本資料將從不同年齡、不同活力、不同形態(tài)回顧性分析相應(yīng)的頂體酶活性，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2015年2月至2017年2月期間在臺州醫(yī)院不孕與優(yōu)生科就診的217例男性患者，年齡18～50歲?；楹笳Ｐ陨睿?年未育，無外傷及遺傳性疾病家族史，無性功能障礙病史，體檢未發(fā)現(xiàn)有明顯睪丸、附睪及輸精管異常。另外排除女方不孕因素以及由男女雙方因素造成的不育。

1.2 精液標(biāo)本收集及檢查 禁欲2～7 d 后手淫取精液置于干燥無菌的取精杯中，置37℃水浴箱內(nèi)液化，采用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)（CASA），檢查結(jié)果參照世界衛(wèi)生組織精液分析標(biāo)準(zhǔn)第五版。

1.3 精子形態(tài)分析 采用改良巴氏染色法進(jìn)行染色，采用人工在光鏡下計(jì)數(shù)200個精子重復(fù)計(jì)數(shù)兩次分析精子形態(tài)。根據(jù)世界衛(wèi)生組織精液分析標(biāo)準(zhǔn)第五版評估，以正常形態(tài)精子率≥4%為正常組，正常形態(tài)精子率＜4%為異常組。

1.4 頂體酶測定 按照深圳華康生物醫(yī)學(xué)工程有限公司頂體酶試劑盒的檢查方法進(jìn)行。判斷標(biāo)準(zhǔn)：正常值為48.2～218.7μIU／106精子。

1.5 研究方法 按年齡分為＜31、31～35、＞35 歲三組，分別測定每組的頂體酶活性；按照世界衛(wèi)生組織精液分析標(biāo)準(zhǔn)第五版PR精子＜32%為弱精癥，分別測定PR＜10、10＜PR＜32、精液檢查正常組的頂體酶活性；結(jié)合世界衛(wèi)生組織精液分析標(biāo)準(zhǔn)第四和第五版的標(biāo)準(zhǔn)，設(shè)立形態(tài)＜4%、4%～15%、＞15%三組，比較三者的頂體酶活性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（±s）表示，組間差異采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各年齡組頂體酶活性比較 按年齡分為＜31歲、31～35歲、＞35歲三組的頂體酶活性的平均值分別為（65.48±15.38）μIU/106精 子、（58.76±16.65）μIU/106精子、（59.83±16.25）μIU/106精子，各組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 不同活力組頂體酶活性比較 按精子PR＜10、10＜PR＜32、精液檢查正常組的頂體酶活性三組的頂體酶活性的平均值分別為（39.06±14.01）μIU/106精子、（58.26±17.22）μIU/106精 子、（61.60±16.69）μIU/106精子，其中PR＜10與10＜PR＜32組和正常組差異顯著（P＜0.05），PR＜10與 10＜PR＜32 組和正常組組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 不同染色形態(tài)組頂體酶活性比較 形態(tài)＜4%、4%～15%、＞15%三組頂體酶活性的平均值分別為（41.77±14.48）μIU/106精 子、（56.71±17.65）μIU/106精 子、（57.91.±18.03）μIU/106精 子， 其中形態(tài)＜4%組與4%～15%組和＞15%組差異顯著（P＜0.05），4%～15%組和 ＞15% 組組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

研究數(shù)據(jù)表明，育齡夫婦的不孕不育癥發(fā)病率為10%～15%，且有逐年遞增的趨勢。其中30%～40%為男性原因?qū)е拢?］。導(dǎo)致男性不育的原因有藥物、煙草、毒品等外部因素以及遺傳、分子突變、禁欲時間等內(nèi)部因素［2-3］。精子頂體酶為特化溶解酶，相連于頂體膜，屬于胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶，其活性高低與精子對卵母細(xì)胞的穿透能力相關(guān)［4］。頂體酶活性較低時不但會導(dǎo)致卵母細(xì)胞卵丘復(fù)合物分解受到影響，也會對精子穿透卵母細(xì)胞透明帶產(chǎn)生一定影響，最終誘發(fā)男性不育［4］。臨床上常采用CASA來評估男性的精液質(zhì)量，但該技術(shù)并不能全面地評估男性的生育能力，尤其是無法解釋不明原因的男性不育［5-6］。因此，將精子頂體酶活性測定作為評估精子質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)是值得推廣的。

Langlois等［7］報(bào)道頂體酶活性越低，IVF受精率也越低。隨后，Sharma等［8］認(rèn)為，精子頂體酶活性的測定，在判定精子受精能力方面比傳統(tǒng)的精子數(shù)量和運(yùn)動能力更具客觀性，而且發(fā)現(xiàn)了頂體酶活性與受精率之間具有正相關(guān)性。作者按年齡分為＜31、31～35、＞35歲三組檢測其頂體酶活性發(fā)現(xiàn)各組間差異不顯著（P＞0.05），這與邴晏如等［9］精子頂體酶活性在 36～50歲年齡段顯著降低（P＜0.05）研究不一致。這可能與其高齡組的樣本量的較少有關(guān)，隨著二孩政策的放開樣本量的擴(kuò)充，或者更具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。作者發(fā)現(xiàn)精PR＜10與10＜PR＜32組的和正常組頂體酶活性差異顯著（P＜0.05），PR＜10 與 10＜PR＜32組和正常組頂體酶活性組間差異不顯著（P＞0.05），這與丁錦麗等［10］、黃世若等［11］研究的結(jié)果是一致的，證明了精子質(zhì)量與精子頂體酶是有正相關(guān)性的。作者同時發(fā)現(xiàn)形態(tài)＜4%組與4%～15%組和 ＞15% 組差異顯著（P＜0.05），這與黃永漢等［12］、劉錦宏等［13］的研究是一致的，頂體酶活性與精子畸形率呈負(fù)相關(guān)，畸形率數(shù)值降低頂體酶活性亦會隨之降低。

關(guān)如意等［13］發(fā)現(xiàn)頂體酶的低下極有可能存在精卵結(jié)合障礙，這與孫琴等［14］的研究是一致的，孫琴等發(fā)現(xiàn)不明原因的男方精子頂體酶活性＜36IU/106精子時，受精率僅為47.7%，鑒于較低的受精率，可避免IUI治療，建議首選IVF。而王欽［15］等在研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)精子頂體酶活性低于＜30μIU/106時可能會出現(xiàn)受精率較低甚至完全不受精的情況，此時應(yīng)該選擇行單精子顯微注射（ICSI）來避免此類現(xiàn)象發(fā)生。

綜上所述，精子頂體酶是評估男性生育能力的一個重要指標(biāo)，對男性不育癥的診斷和治療都有較高的應(yīng)用價值，因此有必要將精子頂體酶活性的測定作為男性不育癥的常規(guī)項(xiàng)目來檢測，從而給臨床更多的診療思路和參考價值。

［1］ Check JH．Treatment of male infertility．Clin Exp Obst Gynecol,2007,34(4):201．

［2］ 劉睿智,董乃屹,高元奇,等．禁欲時間對人精子頂體酶活性精子密度和精子數(shù)的影響． 中國婦幼保健,2005,20(24):3306-3307．

［3］ Chaudhury K, Das T, Chakravarty B, et al． Acrosin activity as a potential marker for sperm membrane characteristics inunexplainedmale infertility．Fertil Steril,2005,83(1):104-109．

［4］ Howes L, Jones R． Interactions between zona pellucida glycoproteins and sperm proacrosin /acrosin during fertilization． J Reprod Immunol, 2002,53(1-2):181．

［5］ 蒲江波,高建,唐雪蓮．少、弱、畸形精子癥患者體外精子的PR、PR+NP以及頂體酶活性在不同時間段的下降速率比較．中華男科學(xué)雜志,2015,21(8):733-736．

［6］ Chaudhury K, Das T, Chakravarty B, et al． Acrosin activity as a potential marker for sperm membrane characteristics in unexplainedmale infertility． Fertil Steril,2005,83(1):104-109．

［7］ Langlois MR, Oorlynck L, Vandekerckhove F, et al． Discrepancy between sperm crosin activity and sperm morphology: Significance for fertilization in vitro．Clin Chim Acta, 2005, 351(1-2): 121-129．［8］ Sharma R,Hogg J,Bromham DR,et al．Is spermatozoan acrosin a predictor of fertilization and embryo quality in the human．FertilSteril,2012, 60(5):881-884．

［9］ 邴晏如,莫和國,黃健云．男性不育患者精子形態(tài)與精漿鋅和精子頂體酶活性關(guān)系的研究．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2014,35(13):1708-1709．

［10］ 丁錦麗,楊菁,張怡,等．男性精子頂體酶活性與精液常規(guī)參數(shù)的相關(guān)性分析．中國性科學(xué),2015,24(8):95-97．

［11］ 黃世若．精液多項(xiàng)檢測參數(shù)對男性不育癥的探討．醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐,2017,30(9):1368．

［12］ 黃永漢,鄧天勤,李穎嫦,等．精子形態(tài)與頂體酶活性關(guān)系分析．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2009,6(9):677-680．

［13］ 劉錦宏,李小珍．男性不育癥患者精液質(zhì)量與精子頂體酶活性關(guān)系分析．長治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,27(2):125-127．

［13］ 關(guān)如意,史中娜,任新玲,等．輔助生殖技術(shù)中原因不明性不孕患者的病因分析．中國婦幼保健,2013,28(32):5324-5327．

［14］ 孫琴,李鴻儒,梁元姣,等．精子頂體酶檢測對不明原因不孕夫婦助孕治療方案選擇的臨床意義．中華男科學(xué)雜志,2017,23(2):152-156．

［15］ 王欽,牛煥付,劉莊．體外短時受精周期中第二極體排出率與精子頂體酶活性關(guān)系的探討．中國優(yōu)生與遺傳雜志,2015,23(5):104-106．