• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    “腎主骨”機(jī)理研究
    ——左歸丸對(duì)Hepcidin、Fpn1及OPG/RANKL mRNA表達(dá)的影響?

    2018-01-02 06:28:35吳佳瑩李岳澤潘靜華趙宏艷王少君汪文來(lái)張治國(guó)鞠大宏劉梅潔
    關(guān)鍵詞:左歸丸醫(yī)學(xué)雜志骨細(xì)胞

    吳佳瑩,李岳澤,劉 紅,李 艷,潘靜華,趙宏艷,王少君,汪文來(lái),張治國(guó),鞠大宏△,劉梅潔△

    (1. 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所,北京 100700; 2. 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心,北京 100700)

    【實(shí)驗(yàn)研究】

    “腎主骨”機(jī)理研究
    ——左歸丸對(duì)Hepcidin、Fpn1及OPG/RANKL mRNA表達(dá)的影響?

    吳佳瑩1,李岳澤1,劉 紅2,李 艷2,潘靜華2,趙宏艷2,王少君2,汪文來(lái)1,張治國(guó)1,鞠大宏2△,劉梅潔2△

    (1. 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所,北京 100700; 2. 中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心,北京 100700)

    目的: 從Hepcidin對(duì)其下游OPG/RANKL通路調(diào)節(jié)的角度,初步探討左歸丸對(duì)骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)理,并為進(jìn)一步揭示“腎主骨”理論的科學(xué)內(nèi)涵提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 60只雌性SD大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對(duì)照組12只,假手術(shù)組12只,造模組36只共3組,造模組大鼠實(shí)行雙側(cè)卵巢切除術(shù)以制作骨質(zhì)疏松癥模型。造模結(jié)束后再將造模組大鼠隨機(jī)分為OVX組、E2組、左歸丸組,每組各12只,開(kāi)始給予相應(yīng)藥物。給藥3個(gè)月后,檢測(cè)大鼠脛骨骨量(TBV%)、骨吸收(TRS%)和骨形成(TFS%、OSW、MAR、mAR)情況;采用原位雜交法檢測(cè)各組大鼠肝組織中Hepcidin mRNA及脛骨骨髓中Fpn1、OPG及RANKL mRNA的表達(dá)。 結(jié)果: OVX組大鼠脛骨TBV%較假手術(shù)組顯著降低,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR較假手術(shù)組均有顯著增高;與OVX組比較,左歸丸組的TBV%顯著增高,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR水平明顯低于OVX組。與假手術(shù)組比較,OVX組大鼠肝臟中Hepcidin的mRNA表達(dá)強(qiáng)度均明顯降低,大鼠脛骨骨髓中Fpn1和RANKL mRNA表達(dá)強(qiáng)度則明顯增強(qiáng),OPG mRNA的表達(dá)強(qiáng)度明顯降低。與OVX組比較,左歸丸組的大鼠肝組織中Hepcidin mRNA表達(dá)強(qiáng)度明顯增高,脛骨骨髓中OPG mRNA表達(dá)強(qiáng)度明顯增高,F(xiàn)pn1和RANKL mRNA表達(dá)強(qiáng)度則明顯下調(diào)。結(jié)論: 左歸丸可通過(guò)提高Hepcidin水平,增加與受體Fpn1的結(jié)合,進(jìn)而對(duì)下游OPG/RANKL信號(hào)通路起到一定的調(diào)節(jié)作用,使OPG表達(dá)上調(diào)而下調(diào)RANKL的表達(dá),從而降低破骨細(xì)胞活性,減少骨量丟失,這是其能夠治療骨質(zhì)疏松癥的機(jī)理之一。

    左歸丸;骨質(zhì)疏松癥;鐵調(diào)素;膜轉(zhuǎn)鐵蛋白;腎主骨

    鐵調(diào)素(Hepcidin)是糾正體內(nèi)“鐵過(guò)載”的關(guān)鍵物質(zhì)。多項(xiàng)研究已證實(shí),鐵過(guò)載是骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的危險(xiǎn)因素。而Hepcidin與受體膜轉(zhuǎn)鐵蛋白(Fpn)結(jié)合,可調(diào)節(jié)鐵離子水平,維持機(jī)體鐵穩(wěn)態(tài),進(jìn)而對(duì)骨代謝產(chǎn)生影響。OPG/RANKL則是非常重要的骨代謝調(diào)控通路,是體內(nèi)細(xì)胞因子發(fā)揮作用、調(diào)節(jié)骨代謝的最終環(huán)節(jié)。我們前期工作證實(shí),左歸丸可以治療去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥。本研究在前期工作基礎(chǔ)上[1],從Hepcidin對(duì)其下游OPG/RANKL通路調(diào)節(jié)的角度,初步探討左歸丸對(duì)骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)理,為進(jìn)一步揭示“腎主骨”理論的科學(xué)內(nèi)涵提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物

    60只雌性SPF級(jí)SD大鼠,體質(zhì)量(240±20) g,購(gòu)自中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(許可證編號(hào)SCXK-(軍)2012-0004),飼養(yǎng)于中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室(實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室許可證號(hào)SYXK(京)2010-0032)。

    1.2 藥物

    戊酸雌二醇片1 mg/片(批號(hào)175A),拜耳醫(yī)藥保健有限公司廣州分公司產(chǎn)品,使用時(shí)用純凈水配制成混懸液,濃度為0.018 mg/ml。左歸丸藥液常規(guī)水煎制,含藥量為0.968 g生藥/ml。藥物組成:熟地24 g,山藥12 g,山茱萸12 g,枸杞12 g,鹿角膠12 g,菟絲子12 g,龜甲膠12 g,川牛膝9 g。中藥材均經(jīng)中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所胡世林研究員鑒定。

    1.3 試劑

    戊巴比妥鈉:德國(guó)MERCK公司(批號(hào)20131206),鹽酸四環(huán)素:北京索萊寶科技有限公司(批號(hào)1104B047),Hepcidin原位雜交檢測(cè)試劑盒:武漢博士德生物工程有限公司(批號(hào)02161TW7032741507TEC),F(xiàn)pn1原位雜交試劑盒:武漢博士德生物工程有限公司(批號(hào)02162TW7032741807TEC),OPG原位雜交試劑盒:武漢博士德生物工程有限公司(批號(hào)011590223-259060FJ),RANKL原位雜交試劑盒:武漢博士德生物工程有限公司(批號(hào)006381129-79060FJ)。

    1.4 儀器

    2040切片機(jī):德國(guó)Reicheit-Jung公司, FINESSE ME+全自動(dòng)石蠟切片機(jī):美國(guó)Thermo公司,CRYOTOME FSE冰凍切片機(jī):美國(guó)Thermo公司,Qwin Pro V3.5.0圖像分析系統(tǒng):德國(guó)Leica公司,DM6000B顯微鏡:德國(guó)Leica公司。

    1.5 方法

    1.5.1 動(dòng)物模型制作及分組給藥 60只SPF級(jí)雌性SD大鼠,按隨機(jī)數(shù)字表法分為造模組36只,空白對(duì)照組12只,假手術(shù)組12只3組。對(duì)造模組大鼠施以雙側(cè)卵巢切除(OVX)手術(shù),制作骨質(zhì)疏松癥模型。假手術(shù)組大鼠僅切除卵巢周圍脂肪組織,不摘除卵巢。造模完成后,將造模組大鼠隨機(jī)分成OVX組、E2組、左歸丸組。左歸丸組大鼠灌胃給予左歸丸水煎液,E2組大鼠灌胃給予戊酸雌二醇混懸液,空白對(duì)照組、假手術(shù)組和OVX組大鼠灌服等體積的純凈水,每日1次,每周給藥6 d,休息1 d,連續(xù)給藥3個(gè)月。

    圖1 各組大鼠脛骨骨小梁分布情況 (甲苯胺藍(lán)染色)

    各組大鼠于對(duì)骨組織進(jìn)行熒光標(biāo)記[2]:處死前16 d和前3 d分別腹腔注射鹽酸四環(huán)素30 mg/kg體質(zhì)量。給藥結(jié)束后,取左側(cè)脛骨制作不脫鈣骨切片,用于骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)的檢測(cè);制作肝組織石蠟切片,檢測(cè)肝臟Hepcidin mRNA;取右側(cè)脛骨脫鈣,制作冰凍切片,檢測(cè)大鼠脛骨骨髓中Fpn1、OPG、RANKL 的mRNA表達(dá)。

    1.5.2 指標(biāo)檢測(cè) (1)骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)檢測(cè)[3-6]:取大鼠左側(cè)脛骨進(jìn)行塑料包埋,使用2040切片機(jī)縱向切取5 μm不脫鈣骨切片制作2張,一張用甲苯胺藍(lán)染色,另一張直接進(jìn)行熒光觀察。采用Leica Qwin V3圖像分析系統(tǒng),對(duì)不脫鈣骨切片進(jìn)行骨組織形態(tài)計(jì)量分析:①骨量檢測(cè):測(cè)量骨小梁面積占被測(cè)骨髓腔總面積的百分比,即骨小梁面積百分比(TBV%),這是衡量骨量水平的主要標(biāo)志;②骨吸收情況檢測(cè):測(cè)量不規(guī)則、凹凸不平的骨小梁表面占骨小梁表面的百分比,即骨小梁吸收表面百分比(TRS%),據(jù)此判斷破骨細(xì)胞的活性;③骨形成情況檢測(cè):骨小梁形成表面百分比(TFS%):有成骨細(xì)胞被覆的類骨質(zhì)表面占骨小梁表面的百分比;④類骨質(zhì)平均寬度(OSW):皮質(zhì)內(nèi)表面有成骨細(xì)胞被覆的類骨質(zhì)平均寬度,反映皮質(zhì)骨的成骨細(xì)胞活性;⑤骨小梁礦化率(MAR):指骨小梁表面熒光雙標(biāo)記帶的平均距離除以2次標(biāo)記相隔的天數(shù),可反映骨小梁礦化速度;⑥骨皮質(zhì)礦化率(mAR):皮質(zhì)內(nèi)表面熒光雙標(biāo)記帶的平均距離除以2次標(biāo)記相隔的天數(shù),可反映皮質(zhì)骨礦化速度。

    (2)Hepcidin、Fpn1、OPG及RANKL mRNA表達(dá)的檢測(cè):采用原位雜交法分別檢測(cè)各組大鼠肝組織中Hepcidin mRNA及脛骨骨髓中Fpn1、OPG及RANKL mRNA的表達(dá)。結(jié)果判斷,陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞呈棕黃色,用Leica-Qwin圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。隨機(jī)檢測(cè)5個(gè)高倍視野(×400),計(jì)算每個(gè)視野內(nèi)的積分光密度(IOD),求其平均值作為mRNA表達(dá)強(qiáng)度。

    2 結(jié)果

    2.1 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)指標(biāo)的影響

    2.1.1 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠脛骨TBV%的影響 圖1表1顯示,OVX組大鼠脛骨TBV%顯著低于假手術(shù)組。E2組、左歸丸組大鼠脛骨TBV%較OVX組顯著增高,但仍顯著低于假手術(shù)組。

    2.1.2 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠脛骨TRS %和TFS %的影響 表2顯示,與假手術(shù)組比較,OVX組大鼠脛骨TRS %和TFS %均顯著增高。E2組和左歸丸組的大鼠脛骨TRS %和TFS %均顯著低于OVX組,且E2組大鼠脛骨TFS %與假手術(shù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但左歸丸組大鼠的脛骨TRS %和TFS %以及E2組大鼠的TRS %仍明顯高于假手術(shù)組。

    表1 各組大鼠脛骨TBV%的變化

    注:與假手術(shù)組比較:*P<0.05,**P<0.01;與OVX組比較:△P<0.05,△△P<0.01(下同)

    表2 各組大鼠脛骨TRS %和TFS %的變化

    2.1.3 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠脛骨OSW、MAR和mAR的影響 表3顯示,OVX組大鼠的脛骨OSW、MAR、mAR均顯著高于假手術(shù)組。與OVX組比較,E2組和左歸丸組的大鼠脛骨OSW、MAR、mAR均顯著降低;E2組的上述指標(biāo)與假手術(shù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但左歸丸組的OSW、MAR、mAR仍顯著高于假手術(shù)組。

    表3 各組大鼠脛骨OSW、MAR、mAR的變化

    2.2 Hepcidin、Fpn1、OPG及RANKL mRNA表達(dá)的檢測(cè)

    2.2.1 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠肝組織中Hepcidin mRNA表達(dá)的影響 表4顯示,與假手術(shù)組比較,OVX組大鼠肝組織中Hepcidin mRNA表達(dá)IOD顯著降低;與OVX組比較,E2組和左歸丸組的肝組織中Hepcidin mRNA表達(dá)IOD則明顯升高,但仍顯著低于假手術(shù)組。

    表4 各組大鼠肝組織中Hepcidin mRNA的變化

    2.2.2 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠脛骨骨髓中Fpn1 mRNA表達(dá)的影響 表5顯示,與假手術(shù)組比較,OVX組大鼠的脛骨骨髓中Fpn1 mRNA表達(dá)IOD顯著增高;與OVX組比較,E2、左歸丸組的Fpn1 mRNA表達(dá)IOD顯著降低,但仍明顯高于假手術(shù)組。

    表5 各組大鼠脛骨骨髓中Fpn1 mRNA表達(dá)的變化

    2.2.3 左歸丸對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠脛骨骨髓中OPG、RANKL mRNA表達(dá)的影響 表6顯示,與假手術(shù)組比較,OVX組大鼠的脛骨骨髓中OPG mRNA表達(dá)IOD顯著降低;與OVX組比較,E2組、左歸丸組的OPG mRNA表達(dá)陽(yáng)性密度明顯增高,且E2組OPG mRNA表達(dá)IOD與假手術(shù)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;左歸丸組OPG mRNA表達(dá)IOD仍明顯低于假手術(shù)組。

    與假手術(shù)組比較,OVX組大鼠脛骨骨髓中RANKL mRNA表達(dá)IOD顯著增高;與OVX組比較,E2組、左歸丸組RANKL mRNA表達(dá)的IOD均顯著下降,但仍高于假手術(shù)組。

    表6 各組大鼠脛骨骨髓中OPG、RANKL mRNA表達(dá)的變化

    3 討論

    腎藏精,精生髓,髓為骨之養(yǎng),髓充則骨堅(jiān)有力,髓虛則骨脆易折?!端貑?wèn)·六節(jié)藏象論》云:“腎者……其充在骨。”由此可知,骨骼中的骨量多少與“腎”的虛實(shí)狀態(tài)緊密相關(guān)。左歸丸是補(bǔ)精益腎的代表方劑。本研究結(jié)果顯示,OVX組大鼠脛骨TBV%顯著低于假手術(shù)組,而反映骨吸收情況的指標(biāo)TRS%、反映骨形成情況的指標(biāo)TFS%、OSW、MAR、mAR較假手術(shù)組均有顯著增高,說(shuō)明卵巢切除可以導(dǎo)致大鼠骨量顯著降低,同時(shí)骨吸收與骨形成均明顯升高,即形成高轉(zhuǎn)換型骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型;與OVX組比較,左歸丸組的TBV%顯著增高,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR水平明顯低于OVX組,表明經(jīng)左歸丸治療后可提高OVX大鼠的骨量,并降低過(guò)高的骨轉(zhuǎn)化率。這與我們以往的研究結(jié)果相一致[7-12]。

    近年研究發(fā)現(xiàn),鐵調(diào)素是維持鐵穩(wěn)態(tài)、糾正 “鐵過(guò)載”的關(guān)鍵物質(zhì),而鐵過(guò)載是骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的危險(xiǎn)因素[13-15]。Hepcidin由肝細(xì)胞合成后,通過(guò)血液調(diào)控鐵的分布與小腸對(duì)鐵的吸收。鐵調(diào)素水平下降,不能誘導(dǎo)其受體-膜轉(zhuǎn)鐵蛋白(Fpn)內(nèi)陷降解,因此鐵離子不斷從細(xì)胞內(nèi)輸出,釋放入血的鐵不斷增加,最終造成鐵過(guò)載;由于體內(nèi)鐵水平的升高,成骨細(xì)胞分化受到抑制,功能降低,骨形成減少;同時(shí)破骨細(xì)胞活性增強(qiáng)、骨吸收增加、骨量減少,可導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥。本研究檢測(cè)各組大鼠肝臟組織中Hepcidin mRNA的表達(dá),以及大鼠脛骨骨髓中Hepcidin受體Fpn1 mRNA的表達(dá),研究結(jié)果顯示,與假手術(shù)組比較OVX組大鼠肝臟中Hepcidin的mRNA表達(dá)強(qiáng)度均明顯降低,大鼠脛骨骨髓中Fpn1 mRNA表達(dá)強(qiáng)度則明顯增強(qiáng)。與OVX組比較,左歸丸組的大鼠肝臟Hepcidin mRNA表達(dá)強(qiáng)度明顯增高,骨髓中Fpn1表達(dá)強(qiáng)度則明顯下調(diào),說(shuō)明大鼠切除卵巢后,Hepcidin水平降低,其與受體Fpn1的結(jié)合受到抑制,而左歸丸可在一定程度上逆轉(zhuǎn)這一過(guò)程。

    OPG/RANKL是非常重要的骨代謝調(diào)控通路,在破骨細(xì)胞生成、發(fā)育、激活等一系列過(guò)程中起至關(guān)重要的作用,是體內(nèi)細(xì)胞因子發(fā)揮作用、調(diào)節(jié)骨代謝的最終環(huán)節(jié)。RANKL主要參與破骨細(xì)胞的分化和激活,OPG是RANKL的天然阻滯受體,可抑制破骨細(xì)胞活化,保護(hù)骨組織。以往的研究表明[16-18],左歸丸對(duì)骨質(zhì)疏松癥大鼠體內(nèi)OPG、RANKL有調(diào)節(jié)作用?,F(xiàn)有研究證實(shí),鐵調(diào)素對(duì)OPG具有調(diào)節(jié)作用[19-20]。本研究結(jié)果顯示,OVX組大鼠脛骨OB和MSC中OPG mRNA的表達(dá)強(qiáng)度較假手術(shù)組明顯降低,RANKL mRNA的表達(dá)強(qiáng)度則明顯升高;與OVX組比較,左歸丸組的OPG mRNA表達(dá)強(qiáng)度明顯增高,RANKL mRNA的表達(dá)強(qiáng)度則明顯降低。這一結(jié)果說(shuō)明,左歸丸對(duì)OPG/RANKL信號(hào)通路具有一定的調(diào)節(jié)作用,即上調(diào)OPG表達(dá),同時(shí)下調(diào)RANKL的表達(dá),最終使破骨細(xì)胞活性降低,骨吸收減少,以達(dá)到治療骨質(zhì)疏松癥的作用。這可能是左歸丸的直接作用,也可能是通過(guò)調(diào)節(jié)Hepcidin水平而實(shí)現(xiàn)的。

    綜上所述,大鼠去卵巢3個(gè)月后可成功復(fù)制經(jīng)典的腎虛型骨質(zhì)疏松癥模型。在腎虛狀態(tài)下,Hepcidin水平降低,骨髓細(xì)胞上的Fpn1內(nèi)陷降解因而被抑制,使鐵離子過(guò)多轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞外,導(dǎo)致鐵過(guò)載,從而刺激破骨細(xì)胞的活性;其下游的OPG/RANKL信號(hào)通路亦被影響,其RANKL表達(dá)增加而OPG表達(dá)減少,促進(jìn)破骨細(xì)胞的生成、分化和激活,最終導(dǎo)致破骨細(xì)胞異?;钴S,骨量丟失加劇。而左歸丸一方面可通過(guò)提高Hepcidin水平,改善卵巢切除所致的鐵過(guò)載,進(jìn)而對(duì)下游的OPG/RANKL信號(hào)通路起到一定的調(diào)節(jié)作用;另一方面,亦可直接作用于OPG/RANKL信號(hào)通路,上調(diào)OPG表達(dá)而下調(diào)RANKL的表達(dá),最終使破骨細(xì)胞活性降低,減少骨量丟失,這是其能夠治療骨質(zhì)疏松癥的機(jī)理之一。

    [1] 李岳澤. 基于鐵調(diào)素探討左歸丸對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用及機(jī)理[D]. 北京:中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院,2016.

    [2] 劉梅潔. 滋補(bǔ)腎陰法對(duì)糖皮質(zhì)激素所致骨質(zhì)疏松大鼠Wnt信號(hào)傳導(dǎo)的影響[D]. 北京:中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院,2009.

    [3] 李鴻泓. 基于破骨細(xì)胞分化調(diào)節(jié)通路OPG/RANKL探討補(bǔ)腎健脾方治療骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)理[D]. 北京:中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院,2013.

    [4] 劉梅潔,李鴻泓,王少君,等. 骨質(zhì)疏松癥脾腎兩虛型病證結(jié)合動(dòng)物模型的建立[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2012,18(8):836-838.

    [5] 鞠大宏,李鴻泓,劉紅,等. 補(bǔ)腎健脾方對(duì)大鼠脾腎兩虛型骨質(zhì)疏松癥的治療作用[J].中華中醫(yī)藥雜志,2012,27(12):3207-3210.

    [6] 胡華剛,陶黎,吳佳瑩,等. “髓減致痿”病機(jī)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2016,22(11):1469-1471.

    [7] 賈朝娟,鞠大宏,劉梅潔,等.山藥對(duì)卵巢切除大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用及其機(jī)理探討[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2009,15(4):268-271.

    [8] 鞠大宏,于福祿,張麗坤,等.滋陰補(bǔ)腎法對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠成骨細(xì)胞COX-2蛋白和mRNA表達(dá)的影響[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2006,14(12):44-46.

    [9] 鞠大宏, 張麗坤, 趙紅艷,等.滋陰補(bǔ)腎法對(duì)卵巢切除所致骨質(zhì)疏松大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞IL-1和成骨細(xì)胞IL-6表達(dá)的影響[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2005,11(7):20-23.

    [10] 王瑩,王少君,潘靜華,等. 巴戟天對(duì)卵巢切除所致大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用及機(jī)理研究[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2012,18(10):1080-1082.

    [11] 王彥峰,李曉強(qiáng),李智勤. 奇正骨碎補(bǔ)鈣片對(duì)卵巢切除所致大鼠骨質(zhì)疏松癥預(yù)防作用的實(shí)驗(yàn)研究—骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)觀察[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2012,18(10):1083-1084.

    [12] 田剛,張治國(guó),付小偉,等. 骨碎補(bǔ)對(duì)卵巢切除所致大鼠骨質(zhì)疏松癥的治療作用及機(jī)理探討[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2013,19(01):47-49.

    [13] 姜宇,徐又佳.鐵調(diào)素與骨質(zhì)疏松鼠[J].中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志,2017,23(2):256-258.

    [14] 陸耀宇,李溥,李瑛,等.絕經(jīng)女性血清雌激素及鐵蛋白含量與骨密度的相關(guān)性研究[J].中國(guó)婦幼保健,2016,31(11):2295-2298.

    [15] 韓艷久,劉國(guó)輝,劉勇.鐵過(guò)載誘導(dǎo)產(chǎn)生活性氧導(dǎo)致人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨成脂分化失平衡[J].中國(guó)組織工程研究,2016,20(14):2007-2014.

    [16] 董佳梓. 沙苑子、狗脊、肉蓯蓉和韭菜子對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥治療作用的機(jī)理探討[D]. 北京:中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院,2011.

    [17] 鄒軍,呂爽,屠嘉衡,等. 有氧運(yùn)動(dòng)配合左歸丸對(duì)去卵巢所致大鼠骨質(zhì)疏松的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2009,15(4):272-273.

    [18] 李鴻泓,鞠大宏,滕靜如,等. 左歸丸對(duì)糖皮質(zhì)激素所致骨質(zhì)疏松大鼠血清中E2、PTH含量的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2011,17(7):744-745.

    [19] 劉虎,徐又佳,張積森,等.鐵調(diào)素對(duì)MC3T3-E1 小鼠成骨細(xì)胞骨保護(hù)素和骨鈣素基因表達(dá)的影響[J].中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志,2010,16(1):1-4.

    [20] 張鵬,劉祿林,賈鵬,等.鐵調(diào)素干預(yù)成骨細(xì)胞(hFOB1.19)后細(xì)胞膜轉(zhuǎn)鐵蛋白1、鐵離子、礦化及成骨基因變化研究[J].中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志,2013,19(10):1011-1017.

    R285.5

    B

    1006-3250(2017)11-1548-04

    國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81473551)

    吳佳瑩(1992-),山西運(yùn)城人,醫(yī)學(xué)碩士,從事中醫(yī)藥防治骨質(zhì)疏松癥的基礎(chǔ)研究。

    △通訊作者:鞠大宏(1963-),遼寧鳳城人,研究員,博士研究生導(dǎo)師,從事中醫(yī)痹癥的臨床與基礎(chǔ)研究,Tel:13641386362,E-mail:judahong@126.com。

    2017-04-11

    猜你喜歡
    左歸丸醫(yī)學(xué)雜志骨細(xì)胞
    機(jī)械應(yīng)力下骨細(xì)胞行為變化的研究進(jìn)展
    Protective effects of Zuogui Jiangtang Jieyu Formula on hippocampal neurons in rats of diabetes complicated with depression via the TRP/KYN metabolic pathway
    調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞功能的相關(guān)信號(hào)分子的研究進(jìn)展
    Zuogui Wan(左歸丸)improves trabecular bone microarchitecture in ovariectomy-induced osteoporosis rats by regulating orexin-A and orexin receptors
    《海軍醫(yī)學(xué)雜志》第二屆編委會(huì)名單
    骨細(xì)胞在正畸牙移動(dòng)骨重塑中作用的研究進(jìn)展
    《中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志》簡(jiǎn)介
    《轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)雜志》稿約
    左歸丸對(duì)化療致卵巢早衰小鼠卵巢功能的影響
    中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:07:30
    左歸丸上調(diào)雷公藤多苷誘導(dǎo)卵巢功能低下大鼠卵巢PLGF及Flt-1水平
    最近最新中文字幕大全免费视频| 国产区一区二久久| 十八禁高潮呻吟视频| 国产1区2区3区精品| 国产极品粉嫩免费观看在线| 宅男免费午夜| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产男女内射视频| 久久精品成人免费网站| 在线精品无人区一区二区三| 一边摸一边做爽爽视频免费| 成人影院久久| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产在线观看jvid| 在线观看www视频免费| 精品少妇久久久久久888优播| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产精品av久久久久免费| 在线观看人妻少妇| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 欧美大码av| 老司机午夜十八禁免费视频| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产伦理片在线播放av一区| 老熟女久久久| 色老头精品视频在线观看| 9色porny在线观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 最近最新中文字幕大全免费视频| 深夜精品福利| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 99热全是精品| 国产免费视频播放在线视频| 老司机福利观看| 成人黄色视频免费在线看| 国产免费福利视频在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产1区2区3区精品| 亚洲成国产人片在线观看| 欧美日韩视频精品一区| 久久中文字幕一级| 91字幕亚洲| 一区二区三区四区激情视频| 久久精品国产亚洲av高清一级| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美精品亚洲一区二区| 成人影院久久| 国产97色在线日韩免费| 日韩大码丰满熟妇| 51午夜福利影视在线观看| 人妻一区二区av| 久久中文字幕一级| 国产精品国产av在线观看| 一个人免费看片子| 国产精品免费视频内射| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产成人免费观看mmmm| 母亲3免费完整高清在线观看| 人妻一区二区av| av在线app专区| 国产亚洲一区二区精品| 美女福利国产在线| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 99国产精品一区二区蜜桃av | 国产免费福利视频在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美日韩精品网址| 亚洲色图综合在线观看| 成人三级做爰电影| 国产一区二区三区av在线| 精品国产乱码久久久久久男人| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美日韩黄片免| 美女国产高潮福利片在线看| 色视频在线一区二区三区| 在线av久久热| 亚洲人成电影免费在线| 亚洲精华国产精华精| 久久久久精品人妻al黑| 美女中出高潮动态图| 久久久国产欧美日韩av| 国产视频一区二区在线看| 国产亚洲精品一区二区www | 亚洲五月色婷婷综合| 欧美乱码精品一区二区三区| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 极品人妻少妇av视频| 成人黄色视频免费在线看| 中文字幕人妻丝袜制服| 十八禁网站免费在线| 桃红色精品国产亚洲av| 久久久水蜜桃国产精品网| 亚洲成人免费av在线播放| 国产高清视频在线播放一区 | 黑丝袜美女国产一区| 日韩三级视频一区二区三区| 大香蕉久久网| 在线精品无人区一区二区三| 男女无遮挡免费网站观看| 91字幕亚洲| 久久久久久久国产电影| 蜜桃国产av成人99| 久久人人爽人人片av| 国产精品久久久久久精品电影小说| 精品高清国产在线一区| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 免费观看a级毛片全部| 狠狠狠狠99中文字幕| 女性生殖器流出的白浆| 十八禁网站免费在线| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| av欧美777| 亚洲 国产 在线| 美女视频免费永久观看网站| 秋霞在线观看毛片| 九色亚洲精品在线播放| 久久久久网色| 国产亚洲精品一区二区www | kizo精华| 亚洲成人国产一区在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产在线一区二区三区精| 国产日韩一区二区三区精品不卡| www.自偷自拍.com| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 丁香六月天网| 国产精品一区二区精品视频观看| 精品久久久精品久久久| 亚洲欧美一区二区三区久久| 在线观看舔阴道视频| 宅男免费午夜| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 97在线人人人人妻| 日本五十路高清| 国产日韩欧美亚洲二区| 欧美在线黄色| 精品视频人人做人人爽| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 精品国产一区二区三区四区第35| 亚洲第一av免费看| 国产xxxxx性猛交| 午夜福利乱码中文字幕| 日韩电影二区| 国产又色又爽无遮挡免| 老汉色av国产亚洲站长工具| 大陆偷拍与自拍| 亚洲av日韩在线播放| 99国产精品一区二区蜜桃av | 午夜91福利影院| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 午夜福利影视在线免费观看| av不卡在线播放| 亚洲精品第二区| 动漫黄色视频在线观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 欧美+亚洲+日韩+国产| 极品少妇高潮喷水抽搐| 在线观看一区二区三区激情| 新久久久久国产一级毛片| 黄色 视频免费看| 久久久久久人人人人人| 自线自在国产av| 无遮挡黄片免费观看| 午夜免费成人在线视频| 精品亚洲成国产av| 波多野结衣av一区二区av| 无遮挡黄片免费观看| 男女午夜视频在线观看| av天堂在线播放| 国产在线一区二区三区精| 久久久久久久国产电影| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 午夜福利在线观看吧| 亚洲人成电影观看| 香蕉国产在线看| 欧美日韩一级在线毛片| 成人黄色视频免费在线看| 99热国产这里只有精品6| 首页视频小说图片口味搜索| 91麻豆av在线| 亚洲精品乱久久久久久| 日韩中文字幕视频在线看片| 成年女人毛片免费观看观看9 | av国产精品久久久久影院| 国产免费视频播放在线视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产在视频线精品| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产精品熟女久久久久浪| 午夜激情av网站| 韩国高清视频一区二区三区| 婷婷成人精品国产| 午夜免费成人在线视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 久久久久久久精品精品| 亚洲成人手机| 人妻人人澡人人爽人人| 真人做人爱边吃奶动态| 我要看黄色一级片免费的| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产精品一二三区在线看| 成年av动漫网址| 亚洲精品国产av蜜桃| 日本欧美视频一区| 亚洲第一青青草原| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 男女下面插进去视频免费观看| 久久久久国内视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 在线av久久热| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲欧美清纯卡通| 男人爽女人下面视频在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 自线自在国产av| 日本欧美视频一区| 亚洲久久久国产精品| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 亚洲精品成人av观看孕妇| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲精品一区蜜桃| h视频一区二区三区| 一二三四社区在线视频社区8| 天天添夜夜摸| 视频在线观看一区二区三区| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| www.精华液| 日日夜夜操网爽| 又黄又粗又硬又大视频| 麻豆乱淫一区二区| 韩国精品一区二区三区| 亚洲国产看品久久| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲精品自拍成人| 久久精品亚洲av国产电影网| 久久热在线av| av不卡在线播放| 一区二区三区激情视频| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 男人舔女人的私密视频| 国产精品影院久久| 午夜免费观看性视频| 在线精品无人区一区二区三| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲av国产av综合av卡| 精品一区二区三区四区五区乱码| 欧美一级毛片孕妇| 91老司机精品| 一区二区三区乱码不卡18| 日韩一区二区三区影片| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 在线永久观看黄色视频| 亚洲久久久国产精品| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 少妇的丰满在线观看| 黑人猛操日本美女一级片| 丝袜美足系列| 一级a爱视频在线免费观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 老司机影院毛片| 日本av免费视频播放| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 久久热在线av| a 毛片基地| av天堂在线播放| 欧美黑人欧美精品刺激| 男女之事视频高清在线观看| 日本av免费视频播放| 少妇的丰满在线观看| 窝窝影院91人妻| 在线 av 中文字幕| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产又爽黄色视频| 视频区欧美日本亚洲| 亚洲人成电影观看| 成年女人毛片免费观看观看9 | 亚洲欧美清纯卡通| 啦啦啦啦在线视频资源| av在线老鸭窝| 欧美黑人精品巨大| 91成年电影在线观看| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产男女内射视频| 午夜福利影视在线免费观看| 国产精品一二三区在线看| 国产xxxxx性猛交| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 日本av免费视频播放| svipshipincom国产片| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 99久久人妻综合| 一二三四社区在线视频社区8| 国产精品 国内视频| 久久久国产一区二区| 手机成人av网站| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产精品九九99| 91国产中文字幕| www.精华液| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 搡老岳熟女国产| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲美女黄色视频免费看| 人妻久久中文字幕网| 午夜日韩欧美国产| 少妇粗大呻吟视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 99久久综合免费| 亚洲精品在线美女| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲黑人精品在线| 两人在一起打扑克的视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 另类精品久久| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 久久精品成人免费网站| 欧美另类亚洲清纯唯美| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 亚洲一区中文字幕在线| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲精品在线美女| 夫妻午夜视频| 大片免费播放器 马上看| 亚洲精品国产av蜜桃| 午夜免费观看性视频| 午夜福利在线免费观看网站| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 一区在线观看完整版| 91麻豆av在线| 我要看黄色一级片免费的| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲国产看品久久| 大陆偷拍与自拍| av福利片在线| 免费在线观看日本一区| 丰满饥渴人妻一区二区三| 久久久精品免费免费高清| 成年美女黄网站色视频大全免费| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 丁香六月欧美| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美日韩一级在线毛片| 青青草视频在线视频观看| 美女国产高潮福利片在线看| 国产在线观看jvid| 亚洲欧美精品自产自拍| 桃花免费在线播放| 一本大道久久a久久精品| 国产野战对白在线观看| 五月开心婷婷网| 一区在线观看完整版| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 午夜免费观看性视频| 欧美在线一区亚洲| 欧美另类亚洲清纯唯美| 一本久久精品| 国产在线一区二区三区精| 国产亚洲欧美在线一区二区| 久久性视频一级片| 欧美日韩成人在线一区二区| 黄频高清免费视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 老司机影院成人| 亚洲成国产人片在线观看| 十八禁人妻一区二区| 亚洲精品乱久久久久久| 无限看片的www在线观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 日韩三级视频一区二区三区| 制服诱惑二区| 国产99久久九九免费精品| 不卡一级毛片| 大香蕉久久网| 极品人妻少妇av视频| 欧美人与性动交α欧美软件| 久久久久久久国产电影| 性高湖久久久久久久久免费观看| 精品久久久久久电影网| 精品久久久精品久久久| 亚洲国产看品久久| 一区二区三区精品91| 淫妇啪啪啪对白视频 | h视频一区二区三区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久午夜综合久久蜜桃| 老司机靠b影院| av有码第一页| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| av在线老鸭窝| 大型av网站在线播放| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 又紧又爽又黄一区二区| 日本黄色日本黄色录像| 国产一区二区在线观看av| 久久精品国产综合久久久| 美女午夜性视频免费| 国产黄色免费在线视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 悠悠久久av| 最近中文字幕2019免费版| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 麻豆国产av国片精品| 男男h啪啪无遮挡| 国产成人系列免费观看| 欧美在线一区亚洲| 久久ye,这里只有精品| 性色av一级| 岛国毛片在线播放| 国产区一区二久久| 9热在线视频观看99| 高清视频免费观看一区二区| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 国产精品久久久人人做人人爽| 久久免费观看电影| 国产一区二区 视频在线| 999久久久国产精品视频| 国产在线视频一区二区| 女人精品久久久久毛片| av免费在线观看网站| 一二三四社区在线视频社区8| 国产麻豆69| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 老鸭窝网址在线观看| 久久热在线av| 国产在线一区二区三区精| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲国产精品一区三区| 999久久久国产精品视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲 国产 在线| 在线看a的网站| 黄色a级毛片大全视频| 精品亚洲成国产av| 久久精品成人免费网站| 国产1区2区3区精品| 欧美97在线视频| 麻豆国产av国片精品| 欧美人与性动交α欧美软件| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 精品国产一区二区久久| av不卡在线播放| 国产欧美日韩精品亚洲av| 精品欧美一区二区三区在线| 老汉色∧v一级毛片| 在线看a的网站| 三级毛片av免费| 老司机影院成人| 美女高潮到喷水免费观看| 国产亚洲欧美精品永久| 少妇精品久久久久久久| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久精品国产综合久久久| 91大片在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 制服人妻中文乱码| 亚洲全国av大片| 久久精品成人免费网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 老司机亚洲免费影院| 午夜影院在线不卡| tocl精华| 欧美日韩精品网址| 90打野战视频偷拍视频| 欧美一级毛片孕妇| 母亲3免费完整高清在线观看| 午夜福利视频精品| 丝瓜视频免费看黄片| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 久久久久久久久免费视频了| 日韩视频在线欧美| 99精品久久久久人妻精品| 欧美日韩精品网址| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产精品九九99| www.熟女人妻精品国产| 国产日韩欧美亚洲二区| 两性夫妻黄色片| 国产老妇伦熟女老妇高清| 成人免费观看视频高清| 精品第一国产精品| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲人成电影免费在线| 国产亚洲av高清不卡| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产av国产精品国产| 国产又色又爽无遮挡免| 99久久精品国产亚洲精品| 久久国产精品影院| 中文字幕人妻丝袜制服| 久久 成人 亚洲| 国产欧美日韩一区二区三 | 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久久国产欧美日韩av| 久久香蕉激情| 一级a爱视频在线免费观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | avwww免费| 日本vs欧美在线观看视频| 中文字幕制服av| 青草久久国产| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 天天添夜夜摸| 一级毛片女人18水好多| 午夜影院在线不卡| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 中国国产av一级| 欧美黑人精品巨大| 亚洲av男天堂| 男人舔女人的私密视频| 国产黄频视频在线观看| 欧美激情久久久久久爽电影 | 久久99热这里只频精品6学生| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 精品国产一区二区久久| 热re99久久精品国产66热6| 男女下面插进去视频免费观看| 美女福利国产在线| 1024香蕉在线观看| 久久久久视频综合| 乱人伦中国视频| 中国美女看黄片| 9热在线视频观看99| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 久久久久久久久免费视频了| 国产av一区二区精品久久| 久久久久国产一级毛片高清牌| 新久久久久国产一级毛片| 精品国产一区二区久久| 午夜精品国产一区二区电影| 一区二区三区精品91| 九色亚洲精品在线播放| 69av精品久久久久久 | 精品少妇久久久久久888优播| 黄片小视频在线播放| 搡老乐熟女国产| 国产免费av片在线观看野外av| 高清av免费在线| 日韩视频在线欧美| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 欧美+亚洲+日韩+国产| 成年人黄色毛片网站| 欧美日韩精品网址| 日本a在线网址| 国产亚洲精品一区二区www | 黄色毛片三级朝国网站| 亚洲男人天堂网一区| 久久午夜综合久久蜜桃| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久久久视频综合| 无遮挡黄片免费观看| av片东京热男人的天堂| 国产精品影院久久| 日韩有码中文字幕| 亚洲精品中文字幕在线视频| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产精品一二三区在线看| 18在线观看网站| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 免费看十八禁软件| 欧美成人午夜精品| 亚洲av国产av综合av卡| 水蜜桃什么品种好| 亚洲黑人精品在线| 欧美日韩精品网址| 男女下面插进去视频免费观看| 久久99热这里只频精品6学生| 国产成人系列免费观看| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 超碰97精品在线观看| 国产亚洲精品久久久久5区| av一本久久久久| 乱人伦中国视频| 最近最新免费中文字幕在线| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国产亚洲av高清不卡| 久久久水蜜桃国产精品网| 精品久久蜜臀av无| 国产一级毛片在线| 最近最新中文字幕大全免费视频| 精品国内亚洲2022精品成人 | 色播在线永久视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 国产三级黄色录像| 亚洲精品国产一区二区精华液| 热re99久久精品国产66热6| 精品国产乱码久久久久久男人| 国产一区二区 视频在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 美女大奶头黄色视频| 国产免费视频播放在线视频| 国产精品久久久人人做人人爽| av一本久久久久| 亚洲成人国产一区在线观看| 黄片播放在线免费| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 黄色毛片三级朝国网站| 午夜福利在线免费观看网站| 久久精品国产综合久久久| 免费观看人在逋|