血清Hcy和Cys-C聯(lián)合尿β2-MG檢測(cè)對(duì)2型糖尿病患者腎損害早期的診斷價(jià)值

安 勇

(巨鹿縣人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河北 邢臺(tái)055250)

血清Hcy和Cys-C聯(lián)合尿β2-MG檢測(cè)對(duì)2型糖尿病患者腎損害早期的診斷價(jià)值

安 勇

(巨鹿縣人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河北 邢臺(tái)055250)

糖尿病(DM)易引起腎臟損害，早期具有可逆性，嚴(yán)重者可導(dǎo)致腎功能衰竭，是導(dǎo)致DM患者死亡主要誘因。臨床研究表明，早期診治可以有效逆轉(zhuǎn)或降低其腎功能損傷的發(fā)生率，延緩疾病的進(jìn)程，降低病死率、改善患者生活質(zhì)量等[1]。本文旨在探討血清Hcy和Cys-C聯(lián)合檢測(cè)尿β2-MG對(duì)DM腎損害早期的診斷價(jià)值，為糖尿病腎病(DN)的早期診斷提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2015年3月-2016年9月間在本院腎內(nèi)科診治144例2型糖尿病(T2DM)患者，根據(jù)患者的24 h尿微量白蛋白排泄率(UAER)水平，75例為單純糖尿病患者(單純DM組)，其中男51例，女23例，平均年齡(57.9±10.1)歲，病程(1-20年)。UAER≤30 mg/24 h，排除腦卒中、合并有腎炎、尿路感染、原發(fā)性高血壓等其他疾病以及使用腎毒性藥物引起腎損傷的患者。69例為DN早期(早期DN組)，其中男49例，女20例，平均年齡(55.2±11.2)歲，病程(2-18年)。UAER為30-300 mg/24 h，排除1型DM、中晚期DN、惡性腫瘤、心力衰竭等疾病和其他急慢性腎臟疾病以及嚴(yán)重肝臟、原發(fā)性和藥物性引起腎損傷的患者。以上T2DM患者的病情符合美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)《2010年ADA糖尿病診療指南》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。同期選擇在本院進(jìn)行健康體檢者72例(對(duì)照組),其中男50例、女22例,平均年齡(57.1±10.8)歲。經(jīng)體格和實(shí)驗(yàn)室檢查，健康體檢者的重要器官(心、肝、腎等)功能、生化指標(biāo)(血糖、尿蛋白、尿糖)以及UAER水平正常，且無DM、高血壓病、腎臟疾病以及其它內(nèi)分泌疾病。以上研究對(duì)象均自愿參加并簽知情同意書，本研究獲得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。三組的年齡分布、性別構(gòu)成等方面經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(P>0.05),具有可比性。

1.2方法次日清晨空腹(禁食12 h以上)抽取肘靜脈血3 ml。同時(shí)收集24 h尿液并測(cè)量總量，量取5 ml。靜脈血和24 h尿按常規(guī)方法以3 500 r/min，離心10 min。儀器為日立7600-020全自動(dòng)生化分析儀。采用循環(huán)酶法檢測(cè)Hcy水平，采用膠乳免疫比濁法檢測(cè)Cys-C水平及尿液上清液β2-MG、mALB水平，計(jì)算UAER,公式UAER=mALB[mg/ml×24 h尿量(ml)]。Hcy檢測(cè)試劑由四川新健康成生物股份有限公司提供，Cys-C、Uβ2-MG和mALB檢測(cè)試劑由北京百奧泰康生物技術(shù)有限公司提供。

1.3判斷標(biāo)準(zhǔn)所用正常參考區(qū)間為本實(shí)驗(yàn)室近年來對(duì)200例正常健康人群檢測(cè)資料分析結(jié)果。Hcy<25 μmol/L為正常；Cys-C≤1.11 mg/L為正常；Uβ2-MG為0.03-0.14 mg/L為正常。單項(xiàng)檢測(cè)時(shí)，結(jié)果超過參考區(qū)間的上限值即判定陽(yáng)性。聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)項(xiàng)目中只要其中二項(xiàng)或二項(xiàng)以上指標(biāo)超過參考區(qū)間的上限值，即判定樣本為陽(yáng)性，反之則樣本為陰性。

2 結(jié)果

2.13組血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER結(jié)果比較單純DM組Hcy、Cys-C和Uβ2-MG檢測(cè)水平高于對(duì)照組(P<0.05)，UAER略高于正常組(P>0.05)，早期DN組Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER檢測(cè)水平均顯著高于對(duì)照組和單純DM組(P<0.01或P<0.05)。見表1。

2.2血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG與UAER相關(guān)性分析多因素線性相關(guān)分析顯示 Hcy、Cys-C、Uβ2-MG與UAER均呈正相關(guān)(r=0.912，P<0.05，r=0.871，P<0.01，r=0.882，P<0.05)。Hcy與Cys-C、Uβ2-MG變量間呈顯著正相關(guān)(r=0.753，0.631，P<0.05)，Cys-C與Uβ2-MG變量間呈正相關(guān)(r=0.832，P<0.01)。

表1 3組血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER結(jié)果比較

注：與對(duì)照組比較，aP<0.05。與單純DM組比較，cP<0.01或dP<0.05。

2.3血清Hcy、Cys-C、Uβ2-MG單檢或聯(lián)檢對(duì)DM患者腎損害早期診斷效率比較三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的特異性(61.3%)低于三項(xiàng)單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)(69.3%,81.3%,76.0%)，比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別為0.490，2.805,1.574，P均>0.05)；敏感性(94.2%)明顯高于三項(xiàng)單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)(62.3%,68.1%,65.2%)，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別為6.502,4.197,5.276,P均<0.05)，見表2。

表2 3項(xiàng)指標(biāo)單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)患者腎損害早期診斷效率比較 (%)

注：與單項(xiàng)比較，aP<0.05，bP>0.05。

3 討論

DM發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì),與人們飲食結(jié)構(gòu)變化以及DM的治療方法改善密切相關(guān)。DN是DM治療過程中最為普遍的和常見的嚴(yán)重微血管慢性并發(fā)癥之一，腎損害可阻礙體內(nèi)代謝物從腎臟排出[3]。腎損害早期可減少腎小球基底膜上帶負(fù)電荷的成分，降低腎小球?yàn)V過膜電荷選擇性，致腎小球基底膜濾過屏障障礙，使mALb濾過率增加，當(dāng)超過腎小管重吸收閾值時(shí)，患者的腎功能呈進(jìn)行性下降，使mAlb可明顯升高，持續(xù)性mAlb是目前臨床DM引起腎小球損傷的重要標(biāo)志[4]。即標(biāo)志腎功能已開始惡化，預(yù)示患者的腎損害已無法逆轉(zhuǎn)，已引起臨床醫(yī)務(wù)工作者的高度重視。DM患者腎損害的早期診斷，對(duì)于DM腎損害的治療非常關(guān)鍵，可阻止DM進(jìn)一步發(fā)展，亦是改善DM患者預(yù)后及提高生活質(zhì)量的關(guān)鍵。因此，篩選腎損害早期評(píng)估指標(biāo)對(duì)DM患者腎功能損害的早期治療和預(yù)防具有重要意義。

Hcy是蛋氨酸和半胱氨酸代謝過程中的一個(gè)重要中間產(chǎn)物(含硫的非必需氨基酸)，并不參與蛋白質(zhì)的合成，但其水平的高低與心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展有著極其密切的聯(lián)系。亦是DM和DN的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素[5]，其易氧化成過氧化氫和超氧化物，進(jìn)入血液循環(huán)可降低血管內(nèi)皮細(xì)胞自由基清除系統(tǒng)，引起大量的自由基產(chǎn)生致腎臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，使細(xì)胞膜的完整性遭到破壞而導(dǎo)致腎小球功能受損，導(dǎo)致腎功能減退。腎臟是Hcy合成代謝的主要場(chǎng)所，無論是腎小球?yàn)V過功能下降，還是腎小管上皮細(xì)胞代謝功能異常均可直接影響Hcy在血液中水平[6]。Cys-C是一種低分子堿性非糖化的蛋白，由機(jī)體內(nèi)有核細(xì)胞以恒定速率產(chǎn)生釋放人血，參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)肽和蛋白質(zhì)的代謝。血液中的Cys-C通過腎小球?yàn)V膜濾過后絕大部分在近曲小管被重吸收，尿液排出量極少。腎前因素幾乎影響血清Cys-C水平，但與腎小球?yàn)V過率呈明顯的負(fù)相關(guān)[7]。當(dāng)腎小球有輕微損傷時(shí)，血中Cys-C水平迅速升高，并隨病情加重而逐漸增高，是臨床目前公認(rèn)反映腎小球?yàn)V過功能受損的早期敏感內(nèi)源性標(biāo)志物[8]。β2-MG是一種小分子球蛋白，由淋巴細(xì)胞、血小板等細(xì)胞產(chǎn)生。能自由經(jīng)腎小球?yàn)V過，99.9%被腎近曲小管重吸收，最后由腎小管內(nèi)皮細(xì)胞降解為氨基酸。正常情況下，經(jīng)腎臟排出極為微量，當(dāng)腎小球?yàn)V過功能受損或?yàn)V過負(fù)荷增加時(shí)，致β2-MG血清水平升高。尿液中β2-MG排出增加，說明濾過負(fù)荷增加或腎小管功能損害，是目前臨床反映腎小球的濾過功能、腎小球病變?cè)缙谠\斷的敏感重要實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)之一[9]。

本研究結(jié)果顯示，單純DM組Hcy、Cys-C和Uβ2-MG檢測(cè)水平高于對(duì)照組(P<0.05)，UAER高于正常組(P>0.05)，早期DN組Hcy、Cys-C、Uβ2-MG和UAER檢測(cè)水平均顯著高于對(duì)照組和單純DM組(P<0.01或P<0.05)。說明Hcy、Cys-C和Uβ2-MG與DM病變進(jìn)程密切相關(guān)，且隨著腎損傷加重而逐步升高，可作為DM進(jìn)程中重要檢測(cè)指標(biāo)。DM患者進(jìn)行Hcy、Cys-C和Uβ2-MG和UAER檢測(cè)，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)DM患者腎損傷情況，為動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)DM腎損害的發(fā)生發(fā)展、早期診斷提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

由于DM患者機(jī)體長(zhǎng)期受多重代謝紊亂以及持續(xù)高血糖的影響，全身組織器官特別是腎、心血管及神經(jīng)系統(tǒng)的損害及其功能障礙和衰竭，引起組織器官的嚴(yán)重?fù)p傷以及各種急慢性并發(fā)癥已成為DM患者致殘、致死的主要原因[10]。隨著臨床檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，血清與尿液指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)已逐步成為DM腎病早期發(fā)現(xiàn)的重要手段，通過多樣化的多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)檢綜合評(píng)價(jià)DM的發(fā)生和進(jìn)展，可提高DM腎損害早期診斷的準(zhǔn)確性[11]。本研究通過對(duì)血液和尿液中的多項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)，綜合分析DM早期腎損害。研究結(jié)果顯示，Hcy、Cys-C、Uβ2-MG與UAER均呈正相關(guān)(r=0.912，P<0.05，r=0.871，P<0.01，r=0.882，P<0.05)。Hcy與Cys-C、Uβ2-MG變量間呈顯著正相關(guān)(r=0.753，0.631，P<0.05)，Cys-C與Uβ2-MG變量間呈正相關(guān)(r=0.832，P<0.01)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。說明Hcy、Cys-C和尿β2-MG指標(biāo)與UAER的相關(guān)較好，3指標(biāo)檢測(cè)水平變化可反映DM患者的腎小球和腎小管已發(fā)生不同程度損傷。對(duì)DM患者腎損害早期診斷效率， 三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的特異性(61.3%)低于三項(xiàng)單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)(69.3%,81.3%,76.0%)，比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別為0.490，2.805,1.574，P均>0.05)；敏感性(94.2%)明顯高于三項(xiàng)單項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)(62.3%,68.1%,65.2%)，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別為6.502,4.197,5.276,P均<0.05)，提示對(duì)DM患者來講，在臨床未出現(xiàn)大量蛋白尿之前，檢測(cè)Hcy、Cys-C和Uβ2-MG水平可更準(zhǔn)確、更客觀地評(píng)估DM腎損害發(fā)生發(fā)展情況，提高臨床腎損害早期診斷的敏感性，幫助基層醫(yī)生制定合理的治療及干預(yù)措施，促進(jìn)腎臟功能的恢復(fù)有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，在DM腎損害早期Hcy、Cys-C和Uβ2-MG水平均會(huì)升高，是輔助診斷DM患者腎損害早期較為敏感的指標(biāo)，聯(lián)合檢測(cè)可提高DM患者腎損害早期診斷的敏感性，減少誤診，為糖尿病腎病早期診治、病情監(jiān)測(cè)提供可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

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1007-4287(2017)12-2162-03

安勇(1983-), 男, 主管檢驗(yàn)師, 主要從事臨床檢驗(yàn)、生化和免疫工作。

2017-02-15)