萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)的臨床觀察及對(duì)血清IL-6的調(diào)控

李美紅 ，孫丹 ，閆小寧 ，李文彬 ，武彩霞

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193；2.陜西省中醫(yī)醫(yī)院，西安 710003）

萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)的臨床觀察及對(duì)血清IL-6的調(diào)控

李美紅1，2，孫丹2，閆小寧2，李文彬2，武彩霞2

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193；2.陜西省中醫(yī)醫(yī)院，西安 710003）

目的觀察萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀型白癜風(fēng)的臨床療效及對(duì)患者血清白細(xì)胞介素6（IL-6）水平的調(diào)控。方法采用隨機(jī)對(duì)照分組試驗(yàn)，將120例中醫(yī)辨證為血瘀證白癜風(fēng)的患者分為3組：對(duì)照組1，脂芷艾條灸外用；對(duì)照組2，萍香丸口服；治療組40例，萍香丸口服聯(lián)合脂芷艾條灸外用。治療后對(duì)患者病情進(jìn)行療效評(píng)估，采用ELISA于治療前后檢測(cè)血清IL-6水平。結(jié)果治療組治療后療效明確，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；治療后各組患者IL-6水平較治療前明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=84.78，P<0.01）；治療組IL-6水平與對(duì)照組1及對(duì)照組2比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），而對(duì)照組1與對(duì)照組2之間IL-6水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.28）。結(jié)論萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)療效明確，其對(duì)血清IL-6水平的下調(diào)作用與其治療血瘀證白癜風(fēng)的機(jī)制可能相關(guān)。

萍香丸；脂芷艾條；白癜風(fēng)；血瘀證；白細(xì)胞介素-6

白癜風(fēng)是一種色素障礙性皮膚病，深膚色人群患病率較高，其發(fā)病機(jī)制尚不明確，主要受免疫、精神、遺傳等因素影響，導(dǎo)致黑素細(xì)胞缺失而發(fā)病。目前白癜風(fēng)尚缺乏理想的治療手段，中醫(yī)中藥則表現(xiàn)出一定的治療優(yōu)勢(shì)，我科采用萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療白癜風(fēng)取得較好的臨床療效，在本研究中將進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) 門診收集符合尋常型白癜風(fēng)診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者120例，西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《臨床皮膚病學(xué)》[1]，中醫(yī)癥候證型參考《中醫(yī)外科學(xué)》氣滯血瘀證[2]。近3個(gè)月內(nèi)未服用、外用或系統(tǒng)應(yīng)用治療白癜風(fēng)藥物者。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①表現(xiàn)為色素脫失的其它疾病者；②有嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病或自身免疫相關(guān)性疾病者；③已知患有其他疾病，需要長(zhǎng)期服用類固醇激素及其他免疫調(diào)節(jié)劑治療者；④妊娠、哺乳期婦女及12歲以下兒童。

1.1.3 剔除標(biāo)準(zhǔn) ①未按規(guī)定用藥及復(fù)診者；②自行使用對(duì)研究有影響治療的受試者；③有嚴(yán)重不良反應(yīng)的受試者；④因其他原因中斷或更換治療方式而終止研究的受試者。

1.1.4 入選病例 120例患者按照就診順序隨機(jī)分為3組，對(duì)照組1共40例，男22例，女18例，年齡（32．53±16．12）歲，病程（17．88±15．98）個(gè)月；對(duì)照組 2共 40 例，男 19 例，女 21 例，年齡（35．15±14．47）歲，病程（19．85±18．52）個(gè)月；治療組共 40 例，男 20 例，女 20 例，年齡（34．28±15．74）歲，病程（18．73±18．15）個(gè)月；3組患者的性別、年齡、病程、病情嚴(yán)重程度等均具可比性。本研究組內(nèi)患者治療前簽署知情同意書。

1.2 治療方法 對(duì)照組1：脂芷艾條（艾絨、補(bǔ)骨脂、白蒺藜、紅花、白芷等藥曬干后置于石臼內(nèi)反復(fù)搗絨，棉紙卷?xiàng)l黏合后而成），皮損局部懸起灸，懸起高度約 1．5～2 cm，以溫?zé)岵蛔苽麨槎龋?次/d，30 min/次；對(duì)照組 2：萍香丸（浮萍、沉香、制首烏、丹參、紅花、生地、菟絲子、丹皮、白蒺藜等，批號(hào)：陜藥管制字[2001]第 0018號(hào)），20 粒/次，口服 3次/d；治療組：萍香丸口服聯(lián)合脂芷艾條懸起灸。所有患者連續(xù)治療3個(gè)月后進(jìn)行療效判定。

1.3 療效判定

1.3.1 皮損改變情況 皮損情況根據(jù)判定，于治療前后均由同1名醫(yī)師評(píng)估，該醫(yī)師不參與分組及治療方案的擬定。痊愈：靶皮損全部消退，恢復(fù)正常膚色；顯效：靶皮損部分消退或縮小，恢復(fù)正常膚色的面積占原皮損面積＞50%；好轉(zhuǎn)：靶皮損部分消退或縮小，恢復(fù)正常膚色面積占原皮損面積10%～49%；無(wú)效：靶皮損無(wú)變化或恢復(fù)正常膚色的面積占原皮損面積的100%以下。總有效率=（顯效例數(shù)+痊愈例數(shù)）/總病例數(shù)×100%。

1.4 外周血IL－6水平檢測(cè)

1.4.1 標(biāo)本采集 2組患者在治療前后分別抽取靜脈血，置于肝素的離心試管內(nèi)，3 000轉(zhuǎn)離心后收集血清后置于－80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.2 主要試劑及儀器 人白細(xì)胞介素6（IL－6）ELISA試劑盒（美國(guó) TSZ），37℃恒溫箱（Thermo Forma），酶標(biāo)儀（BIO－RAD）。

1.4.3 IL－6水平檢測(cè) 將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為48、24、12、6、3、1．5 pg/mL 濃度，20×洗滌緩沖液按 1∶20 用蒸餾水稀釋；從室溫平衡20 min后的鋁箔袋中取出板條，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品各加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50 μL；待測(cè)樣本孔加入待測(cè)樣本10 μL，再加樣本稀釋液40 μL；標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔中加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100 μL，封板膜封好反應(yīng)孔，37℃恒溫箱內(nèi)孵育60 min；棄去液體，吸水紙上拍干，加入洗滌液靜置1 min，如此反復(fù)洗滌5次后棄去洗滌液，每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min；每孔加入終止液50μL，15 min在450 nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔OD值；根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，算出各樣本濃度，單位為pg/mL。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17．0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，樣本均數(shù)采用t檢驗(yàn)，觀察指標(biāo)采用重復(fù)測(cè)量資料的方差分析，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

入選120例患者中有112例患者完成試驗(yàn)。對(duì)照組1中3例退出試驗(yàn)，1例由于失訪，2例因不良反應(yīng)終止試驗(yàn)；對(duì)照組2中2例失訪終止試驗(yàn)；治療組1例因不良反應(yīng)退出試驗(yàn)，1例因失訪終止試驗(yàn)。

2.1 萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸可改善血瘀證白癜風(fēng)患者臨床癥狀 治療組治療后療效明確，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=34．22，P＜0．01），見(jiàn)表 1，提示萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)的臨床療效明確。

表1 萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)臨床療效結(jié)果 例（%）

2.2 萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸可降低血瘀證白癜風(fēng)患者IL－6水平 治療前IL－6水平具有可比性（F=0.01，P=0.99），治療后各組患者IL-6水平較治療前明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=84.78，P=0.00），見(jiàn)表2，結(jié)果提示各組治療對(duì)于IL-6水平均有顯著影響。治療后IL-6水平組間比較情況：治療組與對(duì)照組1及對(duì)照組2比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），而對(duì)照組1與對(duì)照組2之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.28），見(jiàn)表3，結(jié)果提示萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療降低血瘀證白癜風(fēng)患者IL-6水平優(yōu)于各對(duì)照組。

表2 萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療前后血瘀證白癜風(fēng)IL-6水平（ng/L）

表3 萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)IL-6水平組間比較結(jié)果

2.3 不良反應(yīng) 研究中共有3例出現(xiàn)不良反應(yīng)：對(duì)照組1中1例患者因?yàn)榘牟簧鳡C傷，出現(xiàn)水皰停止治療，1例由于艾灸后結(jié)膜充血伴瘙癢停止治療；治療組中1例患者因艾灸后，出現(xiàn)全身皮膚紅斑、丘疹伴瘙癢過(guò)敏反應(yīng)而停止治療。

3 討論

白癜風(fēng)是一種常見(jiàn)的后天性色素脫失性皮膚病，目前研究認(rèn)為，白癜風(fēng)主要是在遺傳、免疫、神經(jīng)等多種因素作用下，出現(xiàn)免疫功能、神經(jīng)精神及內(nèi)分泌、代謝等多方面功能紊亂，導(dǎo)致酪氨酸酶系統(tǒng)的活性受到抑制或是黑素細(xì)胞的功能遭遇破壞，最終使病變部位色素脫失。大部分研究認(rèn)為白癜風(fēng)為炎癥介導(dǎo)的自身免疫性疾病。目前臨床治療白癜風(fēng)的手段主要分為：糖皮質(zhì)激素、光療、光化學(xué)療法及外科技術(shù)，因其適用范圍及不良反應(yīng)等原因?qū)е禄颊咭缽男暂^差。傳統(tǒng)中醫(yī)藥以其獨(dú)到的治療思路、穩(wěn)定的治療效果及其較低的不良反應(yīng)等優(yōu)勢(shì)受到患者的青睞，前往我院就診的患者多以尋求中醫(yī)特色治療為目的，經(jīng)過(guò)多年臨床經(jīng)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)萍香丸及脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)療效明確，2組聯(lián)合應(yīng)用效用更佳。

白癜風(fēng)屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“白駁風(fēng)”范疇。據(jù)《醫(yī)林改錯(cuò)》觀點(diǎn)“白癜風(fēng)，血瘀皮里”，可見(jiàn)肌膚血瘀是皮色異常的關(guān)鍵因素。血瘀形成的主要病因病機(jī)有：或因跌打損傷或化學(xué)灼傷，致使絡(luò)脈受阻，導(dǎo)致血瘀不行，外加毛竅閉塞，肌膚腠理失養(yǎng)，皮膚失色而成白斑；或因情志不遂，氣機(jī)受阻，氣血運(yùn)化失常，經(jīng)脈不通，血運(yùn)受阻發(fā)為白斑；或因久病失治，瘀血內(nèi)停于經(jīng)絡(luò)，新血不能新生，氣血難以濡養(yǎng)肌膚，日久釀化白斑。課題組選用萍香丸聯(lián)合脂芷艾條局部艾灸治療白癜風(fēng)切合瘀血阻滯肌表的病因病機(jī)。萍香丸為我院的院內(nèi)制劑，是我科幾輩醫(yī)家經(jīng)過(guò)40余年臨床研究研制而出，用于治療辨證為血瘀證的白駁風(fēng)患者，該方年使用率高達(dá)2萬(wàn)余瓶。萍香丸君藥浮萍、沉香，可辛散祛風(fēng)、行氣溫中。輔以制首烏、菟絲子補(bǔ)益精血，丹參、紅花活血化瘀。全方共用調(diào)和氣血、滋補(bǔ)肝腎、活血消斑。脂芷艾灸為經(jīng)驗(yàn)特色治療，艾灸選用主要藥物有艾絨、補(bǔ)骨脂、白蒺藜、紅花、白芷。補(bǔ)骨脂味辛性溫，為壯火益土之要藥，藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂素可促進(jìn)色素新生[3]；白蒺藜、白芷可祛風(fēng)發(fā)表，即可散風(fēng)熱，又可利于活血，藥理學(xué)研究認(rèn)為白芷具有光敏作用，可促進(jìn)色素合成[4]；紅花、艾絨活血通絡(luò)，溫中祛寒。萍香丸聯(lián)合脂芷艾條可達(dá)到溫陽(yáng)散寒、活血行氣、化瘀通絡(luò)的作用。

IL-6為重要的免疫趨化因子，目前明確IL-6主要通過(guò)IL-6R和gp130兩條信號(hào)通路發(fā)揮生物功能，IL-6可表達(dá)于角質(zhì)形成細(xì)胞及黑素細(xì)胞，誘導(dǎo)T細(xì)胞分化參與細(xì)胞生成、增殖與凋亡。Kotobuki等[5]認(rèn)為，IL-6水平上調(diào)后，誘導(dǎo)Th17分泌Th17A及IFN-γ，作用于角質(zhì)形成細(xì)胞及黑素細(xì)胞間接參與調(diào)節(jié)皮膚色素合成。有學(xué)者證實(shí)血瘀證患者源于炎癥細(xì)胞被激活，促進(jìn)多種白細(xì)胞介素等表達(dá)，導(dǎo)致炎癥性疾病發(fā)生發(fā)展[6]。IL-6作為常見(jiàn)的炎癥指標(biāo)，抑制IL-6誘導(dǎo)機(jī)制可能是治療血瘀證白癜風(fēng)的關(guān)鍵因素。目前已經(jīng)證實(shí)黑素細(xì)胞自身分泌IL-6參與白癜風(fēng)的發(fā)病[7]，本研究結(jié)果顯示血瘀證白癜

風(fēng)的好轉(zhuǎn)同時(shí)血清IL-6水平明顯降低，提示IL-6水平是參與血瘀證白癜風(fēng)黑素細(xì)胞功能的重要因子。萍香丸治療可能通調(diào)節(jié)血管及皮膚微環(huán)境等途徑，通過(guò)下調(diào)患者IL-6水平，抑制炎癥狀態(tài)，從而糾正血瘀證白癜風(fēng)患者免疫功能，通過(guò)參與黑素細(xì)胞的合成，激發(fā)黑素細(xì)胞活性，參與血瘀證白癜風(fēng)的治療。萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸組，無(wú)論是在臨床療效以及下調(diào)IL-6水平均優(yōu)于單用萍香丸組及脂芷艾條灸組，提示萍香丸聯(lián)合脂芷艾條灸治療血瘀證白癜風(fēng)可能通過(guò)下調(diào)IL-6水平發(fā)揮其臨床療效。

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Clinical Effect and Serum IL-6 Regulation of Pingxiang Pill Plus Zhizhi Moxa-stick Moxibustion on Vitiligo Patients of Blood-stasis Syndrome

Li Meihong1,2,Sun Dan2,Yan Xiaoning2,Li Wenbin2,Wu Caixia2
1.Tianjin University of Traditional Chinese Medicine,Tianjin 300193,China;2.Shaanxi Hospital of Traditional Chinese Medicine,Xi'an 710003,China

ObjectiveIn order to observe the clinical effect and the modulation of serum IL-6 regulation of Pingxiang pill plus Zhizhi moxa-stick moxibustion on vitiligo patients of blood-stasis syndrome.MethodsTotally 120 vitiligo patients of blood-stasis syndrome were randomly assigned into three groups.Control group one（n=40）were treated with Zhizhi moxastick moxibustion externally.Control group two （n=40）were treated with Pingxiang pill orally.Treatment group （n=40）were treated with Pingxiang pill orally and the mentioned moxibustion externally.Before and after four weeks of clinical observation,the severity of disease was evaluated,and the serum IL-6 level was determined by ELISA.ResultsThe treatment group showed obvious efficacy,the difference showed significance than control group（P<0.01）.The IL-6 levels after the treatment were down-regulated than before treatment in each group,the difference was significant（F=84.78,P<0.01）.The IL-6 level of the treatment group showed significance than control group one and control group two（P<0.01）,but the IL-6 level between control group one and control group two showed no significance（P=0.28）.ConclusionThe down-regulation of serum IL-6 level may be one of the mechanisms of Pingxiang pill plus Zhizhi moxa-stick moxibustion in treating vitiligo patients of blood-stasis syndrome.

Pingxiang pill;Zhizhi moxa-stick;Vitiligo;Blood-stasis syndrome;Interleukin-6

R758.4+1

A

1672－0709（2017）05-0409－04

陜西省中醫(yī)藥管理局：脂芷艾條灸治白癜風(fēng)的研究（項(xiàng)目編號(hào)：13-LC119）

武彩霞，E-mail：wucx12187@sina.com

2017-04-09）