藥物—油相性質(zhì)對(duì)藥物納米晶自穩(wěn)定Pickering乳液構(gòu)建的影響研究

王帆+王帥+易濤+張繼芬

[摘要] 探究藥物及油相性質(zhì)對(duì)藥物納米晶自穩(wěn)定Pickering乳液（nanocrystalline self-stabilized Pickering emulsions，NSSPE）成型與穩(wěn)定的影響。分別以葛根素、丹參酮ⅡA和阿魏酸3種難溶性中藥成分自身納米晶為固體微粒，以Capmul C8、Fabrafil M 1944 CS、肉豆蔻酸異丙酯、川芎油、橄欖油為油相，高壓勻質(zhì)法制備N(xiāo)SSPE。以室溫靜置14 d 后NSSPE的外觀、離心穩(wěn)定性、乳滴粒徑變化以及乳液層藥物含量變化為指標(biāo)對(duì)NSSPE進(jìn)行評(píng)價(jià)。分析油相的性質(zhì)（表面張力、黏度）、藥物的性質(zhì)（表面能、油水分配系數(shù)、納米晶粒徑、Zeta電位及藥物-水-油的三相接觸角）等對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定的影響。以阿魏酸納米晶為固體微粒制備的5種油相的樣品，成乳性和穩(wěn)定性均明顯差于葛根素和丹參酮ⅡA；阿魏酸納米晶的粒徑高達(dá)3.90 μm，極顯著高于葛根素的305 nm和丹參酮ⅡA的406 nm（P<0.05）；阿魏酸納米晶的Zeta電位為-0.018 0 mV，極顯著低于葛根素的-29.1 mV和丹參酮ⅡA的-42.6 mV（P<0.05）。以肉豆蔻酸異丙酯為油相制備的3種藥物的樣品均不成乳狀；肉豆蔻酸異丙酯的黏度為4.67 mPa·s，極顯著低于其余各油（P<0.01）。以川芎油為油相制備的葛根素-NSSPE成乳性和穩(wěn)定性最好；葛根素在川芎油-水中的接觸角為69.7°，接近90°，且顯著高于其余各接觸角。藥物為丹參酮ⅡA時(shí)，Capmul C8和Labrafil M 1944 CS制備的NSSPE穩(wěn)定性最好，其接觸角分別為99.2°和112°，較其余油相更近接90°。油相的黏度、藥物納米晶粒徑、Zeta電位及三相接觸角對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定有較大影響；而油相的表面張力、藥物的表面能和油水分配系數(shù)可能與NSSPE的構(gòu)建不相關(guān)。

[關(guān)鍵詞] Pickering乳液； 葛根素； 丹參酮ⅡA； 阿魏酸； 納米晶； 自穩(wěn)定

[Abstract] To investigate the effects of drug and oil properties on the formation and stability of drug nanocrystalline self-stabilizied Pickering emulsions （NSSPE）. Three insoluble Chinese medicine components （puerarin， tanshinone ⅡA and ferulic acid） were selected as model drugs， and Capmul C8， Fabrafil M 1944 CS， isopropyl myristate， Pzechwan Lovage Rhizome oil， and olive oil were used as oil phase. NSSPEs were developed by high pressure homogenization method and were evaluated for their appearance， centrifugal stability， droplet size and drug content changes in emulsion layer after storing at room temperature for 14 d. Then the properties of the oil （surface tension and viscosity） and properties of the drugs （surface energy， oil-water partition coefficient， size and Zeta potential of nanocrystalline and drug-water-oil contact angle） on the formation and stability of NSSPE were analyzed. The emulsification property and stability of five samples prepared with ferulic acid nanocrystals and different oils were significantly lower than those of puerarin and tanshinone ⅡA； the particle size of ferulic acid nanocrystals was 3.90 μm， extremely higher than 305 nm of puerarin and 406 nm of tanshinone ⅡA （P<0.05）； the zeta potential of ferulic acid nanocrystals was -0.018 0 mV， significantly lower than -29.1 mV of puerarin and -42.6 mV of tanshinone ⅡA （P<0.05）. Three samples prepared with isopropyl myristate and different drugs were not emulsions and the viscosity of isopropyl myristate was 4.67 mPa·s， significantly lower than that of the other oils （P<0.01）. Puerarin-NSSPEs prepared with Pzechwan Lovage Rhizome oil showed best emulsification property and stability； the contact angle of puerarin in Pzechwan Lovage Rhizome oil-water was 69.7°， close to 90°， significantly higher than other contact angles. NSSPEs made by tanshinone ⅡA-Capmul C8-water， tanshinone ⅡA-Labrafil M 1944 CS-water showed highest stability， with a contact angle of 99.2° and 112° respectively， more close to 90° than other oils. The results indicated that viscosity， size and Zeta potential of nanocrystalline and three-phase contact angle had great influence on the formation and stability of NSSPE； surface tension of oil， surface energy of drug and oil-water partition coefficient may not be related to the construction of NSSPE.

[Key words] Pickering emulsions； puerarin； tanshinone ⅡA； ferulic acid； nanocrystalline； self-stabilized

傳統(tǒng)的Pickering乳液是一種通過(guò)固體微粒，如二氧化硅^[1]、纖維素^[2-3]、蛋白^[4-5]等吸附在乳滴的油水界面而起到穩(wěn)定作用的乳液。藥物納米晶自穩(wěn)定Pickering乳液（nanocrystalline self-stabilized Pickering emulsions，NSSPE）是以難溶性藥物自身納米晶為固體微粒制備的Pickering乳液，由課題組率先提出^[6]。該乳液系統(tǒng)僅由水、油和難溶性藥物3種物質(zhì)組成，藥物部分分布于油/水相，部分吸附于乳滴的油水界面，具有較高的安全性和載藥量。

課題組分別以水飛薊賓^[7]和葛根素^[8]為模型藥物，以Capmul C8和川芎油-Fabrafil M 1944 CS （9∶1）為油相，成功構(gòu)建了NSSPE。激光共聚焦顯微鏡、掃描電鏡、熒光顯微鏡等表征證實(shí)，難溶性藥物納米晶可以吸附于乳滴的油水界面，阻止乳滴的合并，穩(wěn)定乳液。大鼠灌胃給予水飛薊賓和葛根素的NSSPE，AUC較原料藥分別提高3.8倍^[9]和2.6倍^[10]。可見(jiàn)，NSSPE有望成為一種難溶性藥物的口服新載體。然而，該載體能否適用于所有的難溶性成分？對(duì)不同難溶性藥物而言，如何構(gòu)建穩(wěn)定的NSSPE？藥物和油相的哪些性質(zhì)對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定有重要影響？這些問(wèn)題都有待探討。

本研究以通脈方中的3種難溶性成分葛根素（puerarin，Pu）、丹參酮ⅡA（tanshinone ⅡA，Tan ⅡA）和阿魏酸（ferulic acid，F(xiàn)A）為固體微粒，分別以Capmul C8、Fabrafil M 1944 CS、肉豆蔻酸異丙酯、川芎油、橄欖油5種油為油相，制備N(xiāo)SSPE，探討藥物和油相性質(zhì)對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定的影響，為成功構(gòu)建NSSPE，拓寬其在中藥制劑中的應(yīng)用提供參考。

1 材料

FA2004A電子天平（1/1萬(wàn)，上海精天電子儀器有限公司）；FA25高速剪切機(jī)（上海弗魯克流體機(jī)械制造公司）；AH100D高壓均質(zhì)機(jī)（加拿大ATS工業(yè)系統(tǒng)有限公司）；光學(xué)生物顯微鏡（集成Cool SNAP Photomerics光學(xué)采集系統(tǒng)，OPTEC奧特光學(xué)公司）；佳能IXUS1100HS數(shù)碼相機(jī)（佳能中國(guó)有限公司）；Zetasizer Nano ZS納米粒度及Zeta電位分析儀（英國(guó)馬爾文儀器公司）；Agilent 1200高效液相色譜系統(tǒng)（美國(guó)Agilent公司）；G16-WS高速離心機(jī)（長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；SHA-C恒溫振蕩器（常州澳華儀器有限公司）；JC2000C接觸角測(cè)量?jī)x（上海中晨數(shù)字技術(shù)設(shè)備有限公司）；SV-10正弦波振動(dòng)式粘度計(jì)（AD公司，日本）。

Pu原料藥（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98%，四川玉鑫藥業(yè)有限公司，批號(hào)140602）；Tan ⅡA原料藥（質(zhì)量分?jǐn)?shù)95%，西安鴻生生物技術(shù)有限公司，批號(hào)140804）；阿魏酸（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98%，上海邁瑞爾化學(xué)技術(shù)有限公司，批號(hào)ZL091015G）；單辛酸甘油酯（Capmul C8，美國(guó)阿比泰克公司）；油酸聚乙二醇甘油酯（Labrafil M 1944 CS，法國(guó)佳法賽試劑有限公司）；川芎油、橄欖油（江西雪松天然藥用油有限公司）；肉豆蔻酸異丙酯、正十六烷（上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；甲醇（色譜純，Spectaum 公司）；乙腈（色譜純，Adamas 公司）；其余試劑均為分析純。

2 方法

2.1 藥物-油相性質(zhì)的測(cè)定

2.1.1 油相的表面張力 采用接觸角測(cè)量?jī)x中的懸滴法測(cè)量各油相的表面張力。

2.1.2 油相的黏度 取各油相適量置于測(cè)量杯中，25 ℃下用黏度計(jì)直接測(cè)量黏度。

2.1.3 藥物的表面能 用紅外壓片機(jī)以20 MPa的壓力分別將0.1 g Pu，Tan ⅡA，F(xiàn)A原料藥壓制成直徑約為10 mm，厚度約為0.5 mm的圓形片狀，置于玻片上，接觸角測(cè)量?jī)x分別測(cè)量滴加甘油和正十六烷時(shí)的接觸角，用Owens法計(jì)算表面能。

2.1.4 藥物的溶解度及l(fā)ogP 取Capmul C8、 Fabrafil M1944 CS、肉豆蔻酸異丙酯、川芎油、橄欖油和純化水于EP管中，分別加入過(guò)量的藥物，渦旋混合2 min，25 ℃恒溫振蕩72 h，1萬(wàn) r·min-1離心10 min，取上清液，0.45 μm的微孔濾膜過(guò)濾，采用HPLC測(cè)定藥物含量，計(jì)算藥物溶解度和logP。色譜條件如下：色譜柱均為SilGreen GH0525046 C18A色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流速均為1 mL·min-1，柱溫均為30 ℃。Pu的流動(dòng)相為水-乙腈（15∶85），檢測(cè)波長(zhǎng)為250 nm；Tan ⅡA的流動(dòng)相為水-乙腈（25∶75），檢測(cè)波長(zhǎng)為270 nm；FA的流動(dòng)相為0.5%的冰醋酸水溶液-甲醇（65∶35），檢測(cè)波長(zhǎng)為321 nm。

2.1.5 藥物納米晶的性質(zhì) 分別稱取Pu 0.2 g，Tan ⅡA 0.04 g及FA 0.2 g，置于燒杯中，加入純化水36 mL，攪拌，19 000 r·min-1高剪切2 min，80 MPa高壓勻質(zhì)5 min，得藥物納米晶混懸液。用納米粒度及Zeta電位分析儀測(cè)量納米晶的粒徑和Zeta電位。

2.1.6 藥物-油-水的三相接觸角 用紅外壓片機(jī)以20 MPa的壓力分別將0.1 g Pu，Tan ⅡA以及FA原料藥壓制成直徑約為10 mm，厚度約為0.5 mm的圓形片狀，置于透明的正方體容器中，分別加入3 mL油相，用接觸角測(cè)量?jī)x向藥片上滴加3 μL純化水，測(cè)量三相接觸角。

2.2 NSSPE的制備

分別以Campul C8、Fabrafil M 1944 CS、肉豆蔻酸異丙酯、川芎油和橄欖油為油相，以Pu，Tan ⅡA以和FA為納米晶，高壓勻質(zhì)法制備N(xiāo)SSPE。操作如下：稱取一定量的藥物置于燒杯中，加入36 mL純化水，攪拌，19 000 r·min-1高剪切2 min，80 MPa高壓勻質(zhì)5 min，制得納米晶混懸液。再量取4 mL油相，加入高壓勻質(zhì)機(jī)中，80 MPa高壓繼續(xù)勻質(zhì)2 min，即得。Pu，Tan ⅡA及FA的用量分別為乳液總體積的0.50%，0.10%，0.50%。

2.3 NSSPE的評(píng)價(jià)

2.3.1 穩(wěn)定指數(shù)的測(cè)定 取新制備的樣品22 mL，裝于25 mL玻璃瓶中，室溫避光靜置，分別于0時(shí)刻和14 d，觀察乳液外觀狀態(tài)。記錄乳液層高度，按下式計(jì)算穩(wěn)定指數(shù)（stability index，SI）^[11]：SI=Ht/H0。H0指0時(shí)刻的乳液層高度，Ht指放置14 d后的乳液層高度。出現(xiàn)明顯絮凝或凝固現(xiàn)象時(shí)，穩(wěn)定指數(shù)為0。

2.3.2 離心穩(wěn)定性 取1 mL新制備出的樣品于1.5 mL的離心管中，4 000×g離心15 min，觀察是否有分層、沉淀等現(xiàn)象。

2.3.3 乳滴粒徑 乳液室溫避光靜置，分別于0時(shí)刻和14 d，取樣品1滴，均勻涂于玻片上，光學(xué)顯微鏡觀察乳滴形態(tài)，集成Cool SNAP Photomerics光學(xué)采集系統(tǒng)拍攝照片，并用USB2.0 Gamer軟件計(jì)數(shù)200個(gè)乳滴的粒徑，按下式計(jì)算平均體積徑（d43 d）^[12-13]。每份樣品重復(fù)3次，取平均值。

d43 d=di4di3

2.3.4 乳液層的藥物含量 分別取0時(shí)刻、離心后及放置14 d時(shí)乳液層部分（為保證均勻性，分別在乳液層的上部、中部和下部各取一個(gè)點(diǎn)），氯仿-甲醇（2∶1）溶解，甲醇定容，0.22 μm的微孔濾膜過(guò)濾后，HPLC按2.1.4項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定藥物含量。含量下降率=（1-Ct/C0）×100%。C0指0時(shí)刻乳液層藥物含量，Ct放置14 d或離心后的乳液層藥物含量。

3 結(jié)果

3.1 藥物-油相的性質(zhì)

3.1.1 油相的表面張力及黏度 各油相的表面張力及黏度見(jiàn)表1。

用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析事后檢驗(yàn)，各油的表面張力分成了2組：第一組為L(zhǎng)abrafil M 1944 CS、肉豆蔻酸異丙酯、川芎油和橄欖油，表面張力在41～44 mN·m-1；第二組為Capmul C8，表面張力為34.2 mN·m-1，極顯著低于第一組（P<0.01）；油相的黏度分為4組：Capmul C8>Labrafil M 1944 CS、橄欖油>川芎油>肉豆蔻酸異丙酯，各組間均有極顯著性差異（P<0.01）。

3.1.2 藥物的表面能 懸滴法測(cè)得Pu，Tan ⅡA和FA的表面能分別為（59.13±1.90），（23.1±4.50），（46.87±2.21） mN·m-1，用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析檢驗(yàn)，3個(gè)藥物的表面能之間均有極顯著性差異（P<0.01）。

3.1.3 藥物的溶解度及l(fā)ogP Pu，Tan ⅡA和FA在各溶劑中的溶解度及l(fā)ogP見(jiàn)表2。

3.1.4 藥物納米晶的性質(zhì) Pu，Tan ⅡA及FA納米晶混懸液的粒徑及Zeta電位見(jiàn)表3。用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析事后檢驗(yàn)，Pu和Tan ⅡA納米晶的粒徑無(wú)顯著差異，但均顯著小于FA（P<0.05）；Pu，Tan ⅡA及FA納米晶，兩兩之間的Zeta電位均有顯著性差異（P<0.05）。

3.1.5 三相接觸角 藥物-水-油的三相接觸角結(jié)果見(jiàn)表4。用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析事后檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，①油相一致而藥物不同時(shí)，僅Tan ⅡA，F(xiàn)A在Labrafil M 1944 CS-水、肉豆蔻酸異丙酯-水和川芎油-水中的三相接觸角無(wú)顯著性差異，其余各組接觸角之間均有極顯著差異（P<0.01）。②藥物一致而油相不同時(shí)，接觸角與油相的關(guān)系隨藥物而異：對(duì)于Pu，Labrafil M 1944 CS<肉豆蔻酸異丙酯<橄欖油

3.2 不同藥物-油相制備的NSSPE的性質(zhì)

3.2.1 樣品外觀變化及穩(wěn)定指數(shù) 不同藥物-油相制備的各樣品室溫放置14 d的外觀見(jiàn)圖1，穩(wěn)定指數(shù)見(jiàn)表5。結(jié)果顯示：①對(duì)于Pu，Labrafil M 1944 CS和川芎油制備的樣品室溫放置14 d后仍然具有較好的乳液性質(zhì)，穩(wěn)定指數(shù)均高于0.900；Capmul C8、肉豆蔻酸異丙酯和橄欖油制備的樣品出現(xiàn)了絮凝現(xiàn)象。②對(duì)于Tan ⅡA，Capmul C8，Labrafil M 1944 CS和川芎油制得的樣品室溫放置14 d后乳液層性質(zhì)還較好，穩(wěn)定指數(shù)均高于0.900，肉豆蔻酸異丙酯和橄欖油制備的樣品室溫放置14 d后底部出現(xiàn)清亮的水層，穩(wěn)定指數(shù)分別為0.571和0.804。③對(duì)于FA，僅Labrafil M 1944 CS制備的樣品室溫放置14 d還具有一定的乳液性質(zhì)，此時(shí)乳液的穩(wěn)定指數(shù)為0.860，其余各樣品均不成乳狀。

3.2.2 離心穩(wěn)定性 不同油相制備的各樣品4 000×g離心15 min后的外觀見(jiàn)圖2。可見(jiàn)，①對(duì)于Pu，Capmul C8，Labrafil M 1944 CS和川芎油制備的樣品離心后雖均有油相和藥物析出，但仍具有較好的乳層；肉豆蔻酸異丙酯和橄欖油制備的樣品離心后不成乳狀，樣品變清亮；②對(duì)于Tan ⅡA，Capmul C8，Labrafil M 1944 CS和川芎油制備的樣品離心后均有油相和藥物析出，但乳液層性質(zhì)較好，肉豆蔻酸異丙酯制備的樣品變清亮，橄欖油制備的樣品居于兩者之間；③對(duì)于FA，僅Labrafil M 1944 CS制備的樣品具有一定的乳液性質(zhì)，其余樣品均變得清亮。

3.2.3 乳滴粒徑 各樣品 0時(shí)刻及室溫放置14 d的乳滴粒徑見(jiàn)表5。由表可知，①Labrafil M 1944 CS為油相制備的Pu，TanⅡA和FA的樣品放置14 d后，乳滴粒徑均顯著變大（P<0.05），分別為0時(shí)刻的11.5，1.59，3.00倍。② 川芎油制備的Pu，Tan ⅡA的樣品放置14 d后的乳滴粒徑均顯著減?。≒<0.05），分別為0時(shí)刻的57.5%和39.2%。③ 對(duì)于TanⅡA，Capmul C8、肉豆蔻酸異丙酯和橄欖油制備的樣品放置14 d后仍呈乳狀，乳滴粒徑分別為0時(shí)刻的12.8%，47.9%，159%。

3.2.4 乳液層的藥物含量 各樣品 0時(shí)刻、室溫放置14 d及以4 000×g離心15 min后乳液層藥物含量變化見(jiàn)表6?？芍?，①在各油相中，川芎油制備的Pu和Tan ⅡA的樣品乳層藥物含量下降相對(duì)最少；其余各樣品放置14 d或以4 000×g離心15 min后乳液層藥物損失嚴(yán)重，含量下降率都高于川芎油；②整體而言，Pu為納米晶制備的樣品乳層藥物含量下降率低于Tan ⅡA和FA。

4 討論

4.1 模型藥物和油相的選擇

研究的模型藥物源于通脈復(fù)方。該方由葛根、川芎、丹參配伍組成，具有活血通脈的功效?，F(xiàn)有研究證實(shí)，通脈方中的難溶性藥效成分主要有Pu，Tan ⅡA和FA等。這3種成分分別屬于黃酮類(lèi)、二萜醌類(lèi)及有機(jī)酸類(lèi)，水中溶解度分別為3.01 g·L-1、低于0.02，0.82 g·L-1，油（正辛醇）水分配系數(shù)分別0.38，2.38，1.26，pKa分別為7.4，6.84，4.99。這3種成分在分子結(jié)構(gòu)、脂溶性、荷電性各方面都不同，具有一定的代表性?？紤]到課題研究的最終目標(biāo)是構(gòu)建通脈復(fù)方的NSSPE新制劑，故選用這3種成分為模型藥物，進(jìn)行NSSPE構(gòu)建機(jī)制的研究。

考察的油相選擇了Campul C8，F(xiàn)abrafil M 1944 CS，肉豆蔻酸異丙酯，川芎油和橄欖油。其中，Campul C8、肉豆蔻酸異丙酯和橄欖油均為乳液常用的油相^[9，14-15]，分別含有8，14，18個(gè)碳；Fabrafil M 1944 CS為油酸聚乙二醇甘油酯，在自乳化體系中可用作油相，同時(shí)是一種性能優(yōu)良的液體增溶劑和吸收促進(jìn)劑，可能會(huì)促進(jìn)模型藥物的口服吸收。川芎油為通脈方中川芎的揮發(fā)油，具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、改善血管功能、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞等藥理作用的藥理作用，對(duì)通脈方的療效有一定貢獻(xiàn)。因此，研究選擇了這5種油作為油相。

4.2 NSSPE制備工藝條件的選擇

在制備N(xiāo)SSPE時(shí)，參照文獻(xiàn)[16]，選擇了目前Pickering乳液最常用的制備方法：先將固體微粒分散于水相，超聲或高壓勻質(zhì)形成納米分散液，再加入油相，高剪切后高壓乳勻，即得。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，油水體積比定為1∶9。由于Pu，Tan ⅡA和FA在水中的溶解度差異較大，Pu在水中微溶，F(xiàn)A在水中為極微溶解，而Tan ⅡA在水中幾乎不溶或不溶。通過(guò)溶解度計(jì)算可知，Pu，Tan ⅡA和FA在油-水混合體系中的最大溶解量分別為2.98，0.56，1.82 g·L-1，為保證有非溶解狀態(tài)的藥物納米晶存在并便于比較，將Pu和FA的投藥量定為5.00 g·L-1，Tan ⅡA的投藥量定為1.00 g·L-1。

4.3 藥物性質(zhì)對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定的影響

研究結(jié)果顯示，以FA納米晶為固體微粒制備的5種油相的樣品，成乳性和穩(wěn)定性均明顯差于Pu和TanⅡA：除Fabrafil M 1944 CS外，其余油相制備的樣品放置14 d均不成乳狀。比較Pu，Tan ⅡA和FA的性質(zhì)，發(fā)現(xiàn)：① FA的logP和表面能介于Pu和Tan ⅡA之間，在各油-水中的三相接觸角接近Tan ⅡA，由此推測(cè)表面能、logP和三相接觸角的差異不是FA納米晶難以穩(wěn)定Pickering乳液的關(guān)鍵原因。②FA納米晶的粒徑達(dá)到3.90 μm，遠(yuǎn)高于Pu和Tan ⅡA（300～400 nm）；Zeta電位接近于0，說(shuō)明幾乎不帶電荷，而Pu和Tan ⅡA均帶有大量負(fù)電荷，Zeta電位分別為-29.1，-42.6 mV。由此推測(cè)，F(xiàn)A納米晶的大粒徑和弱電荷可能是其不能穩(wěn)定Pickering的關(guān)鍵因素。由此推測(cè)，Pickering乳液的成型和穩(wěn)定與納米晶的粒徑和電荷密切相關(guān)。這一結(jié)果也與文獻(xiàn)報(bào)道一致。Duffus L J等^[17]以多糖和黃酮類(lèi)顆粒為固體微粒制備Pickering乳液，發(fā)現(xiàn)微粒粒徑在200 nm～1 μm是形成穩(wěn)定的Pickering乳的重要條件。一般而言，隨著固體微粒的粒徑減小，其表面積顯著增大，有利于增強(qiáng)其在油水界面的吸附能力；固體顆微粒的粒徑越小，在油水界面形成的膜越緊密，剛性阻隔作用越強(qiáng)，有利于乳滴的穩(wěn)定^[18]。Nawaz等^[19]以水楊酸修飾的二氧化鈦納米粒為固體微粒制備Pickering乳液，證實(shí)，微粒的Zeta電位較高時(shí)，乳滴的Zeta電位也就較高，乳滴之間的靜電斥力作用強(qiáng)，可阻礙乳滴的合并，有利于乳液的穩(wěn)定。

4.4 油相性質(zhì)對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定的影響

肉豆蔻酸異丙酯為油相制備的3個(gè)藥物的樣品穩(wěn)定性均不好，放置14 d或離心后均變清亮，不呈乳狀。分析油相各性質(zhì)，肉豆蔻酸異丙酯的表面張力與川芎油、Labrafil M 1944 CS和橄欖油均無(wú)顯著性差異，故表面張力應(yīng)該不是其無(wú)法成乳的關(guān)鍵因素；而肉豆蔻酸異丙酯的黏度極小，僅為4.67 mPa·s，接近于水的黏度（約為1 mPa·s，25 ℃），極顯著低于另外4種油相（70.0～102 mPa·s），由此推斷，肉豆蔻酸異丙酯極低的黏度可能是導(dǎo)致其無(wú)法成乳的重要因素之一。

4.5 油水分配系數(shù)對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定的影響

Luo等^[20]以十四烷作油相，以一系列不同油水分配系數(shù)的黃酮類(lèi)化合物為固體微粒制備Pickering乳液。研究發(fā)現(xiàn)，山柰酚-7-新橘皮糖苷和山柰酚-3-蕓香糖苷的logP接近，分別為-0.53，-0.57，前者形成的乳液在1 h內(nèi)油相和水相完全分離，但后者形成的乳液較好，儲(chǔ)存1周后無(wú)油相析出；山柰酚香豆酰基葡萄吡喃糖苷和4，5，7-三羥黃烷酮的logP也相近，但4，5，7-三羥黃烷酮未能形成乳液，而山柰酚香豆酰基葡萄吡喃糖苷形成的乳液儲(chǔ)存1周后，僅頂部有少量的油相析出。證實(shí)，油水分配系數(shù)與Pickering乳液的形成無(wú)關(guān)。

本研究也得到相同的結(jié)果。Pu在川芎油-水和橄欖油-水的logP接近，分別為-3.30，-3.10，但橄欖油制備的乳液以4 000×g離心后變清亮，而川芎油制備的樣品仍具有較好的乳層。Tan ⅡA在Capmul C8-水和橄欖油-水的logP也相近，但橄欖油制備的樣品離心后幾乎變得清亮，Capmul C8制備的樣品乳層仍較好。具有相近油水分配系數(shù)的藥物-油相組合，制得的樣品穩(wěn)定性差異很大，說(shuō)明logP不是影響Pu-NSSPE和TanⅡA-NSSPE成乳性的關(guān)鍵因素。

4.6 三相接觸角對(duì)NSSPE成型與穩(wěn)定的影響

據(jù)文獻(xiàn)[21]報(bào)道，固體微粒的油水接觸角需在30°～150°才能形成Pickering乳液。接觸角越接近90°，越易形成穩(wěn)定的乳液；當(dāng)用強(qiáng)疏水性或親水性微粒作乳化劑時(shí)，不能形成穩(wěn)定的乳液^[22]。Pu在川芎油-水、Capmul C8-水和橄欖油-水中的接觸角均在30～150°，制備的樣品在0時(shí)刻均有較好的乳液性質(zhì)。川芎油制備的樣品14 d后的穩(wěn)定指數(shù)為0.970，乳滴粒徑略有下降，乳液層藥物含量為0時(shí)刻的93.9%，說(shuō)明穩(wěn)定性較好，這可能與其69.7°的接觸角有關(guān)。但橄欖油和Capmul C8制備的樣品14 d后出現(xiàn)Pu絮狀物，這可能是因?yàn)槠浣佑|角較小，僅為49.3°，40.3°，Pu納米晶不能緊密吸附于橄欖油-水和Capmul C8-水的界面，易解吸附并自身聚集成絮狀物。Pu在Labrafil M 1944 CS-水中的接觸角只有14.4°，但成乳性也較好，這可能與Labrafil M 1944 CS自身有一定的弱乳化性有關(guān)。盡管如此，其較小的接觸角仍然導(dǎo)致部分Pu解吸附，乳液層藥物含量?jī)H為0時(shí)刻的53.4%，同時(shí)乳滴合并嚴(yán)重，放置14 d的后乳滴粒徑增大為0時(shí)刻的11.5倍。

藥物為T(mén)an ⅡA時(shí)，Capmul C8和Labrafil M 1944 CS制備的乳液穩(wěn)定性最好，14 d時(shí)穩(wěn)定指數(shù)均為0.964；川芎油次之，穩(wěn)定指數(shù)均為0.929，橄欖油最差，穩(wěn)定指數(shù)均僅0.804。這可能與其三相接觸角有關(guān)，Tan ⅡA在Capmul C8-水和Labrafil M 1944 CS-水中的接觸角接近90°，分別為99.2°，111°，因此乳液穩(wěn)定性最好；在川芎油-水中的接觸角為140°，在橄欖油-水中的接觸角最大，為159°，所以乳液穩(wěn)定性較差。

4.7 小結(jié)

影響NSSPE成型與穩(wěn)定的因素較多，有油相的黏度，油相自身的乳化性，藥物納米晶的粒徑和電荷，以及藥物-油-水的三相接觸角等，且其成乳性并不是由某一種因素決定的。FA納米晶的大粒徑和弱電荷導(dǎo)致NSSPE成乳困難，但當(dāng)油相為L(zhǎng)abrafil M 1944 CS時(shí)，Labrafil M 1944 CS自身的弱乳化性仍使制備的樣品具有一定的成乳性。Tan ⅡA在肉豆蔻酸異丙酯-水中的接觸角為140°，在30°～150°范圍內(nèi)，理論上可以成乳，但肉豆蔻酸異丙酯4.67 mPa·s的低黏度又使得無(wú)法形成穩(wěn)定的NSSPE?？梢?jiàn)，NSSPE的成型和穩(wěn)定是多種影響因素綜合作用的結(jié)果。

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