• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    灰褐牛肝菌(Boletus griseus)子實體的營養(yǎng)評價及蛋白質(zhì)組分分析

    2017-10-11 11:36:12鮑長俊常惟丹莊永亮孫麗平
    食品科學 2017年20期
    關鍵詞:牛肝菌食用菌水解

    鮑長俊,常惟丹,莊永亮,孫麗平*

    灰褐牛肝菌(Boletus griseus)子實體的營養(yǎng)評價及蛋白質(zhì)組分分析

    鮑長俊,常惟丹,莊永亮,孫麗平*

    (昆明理工大學云南省食品安全研究院,云南 昆明 650500)

    測定灰褐牛肝菌子實體的基本成分、單糖、脂肪酸和氨基酸組成,礦物質(zhì)含量及其蛋白質(zhì)連續(xù)累進組分的含量,并對其蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值進行系統(tǒng)評價。結(jié)果表明:灰褐牛肝菌子實體中粗蛋白質(zhì)量分數(shù)為28.22%;葡萄糖含量最高,為258.04 mg/g;17 種脂肪酸被檢出,亞油酸、油酸和棕櫚酸分別占脂肪酸總量的35.91%、28.46%和24.50%;游離氨基酸共檢出29 種,其中Tyr和Ala含量較高,甜味氨基酸和鮮味氨基酸分別占游離氨基酸總量的23.37%和12.69%;水解氨基酸中必需氨基酸含量較高,占氨基酸總量的38%,其氨基酸評分、必需氨基酸指數(shù)、生物價、營養(yǎng)指數(shù)和氨基酸比值系數(shù)分別為71.88、69.93、64.52、19.73和50.05?;液峙8尉缓琈g、Fe、Zn、Cu,同時有毒元素Cd含量相對較高。蛋白質(zhì)連續(xù)累進組分中清蛋白含量最高,占總蛋白的65.62%,但其Cd含量較高,占總Cd量的38.79%。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析表明清蛋白和球蛋白的分子質(zhì)量分布主要在40 kD,差異熱量掃描分析表明其熱變性溫度分別為125.04 ℃和75.04 ℃。結(jié)果表明,灰褐牛肝菌子實體的營養(yǎng)價值較高,但是由于Cd元素含量較高,可能存在一定的健康風險。

    灰褐牛肝菌;氨基酸組成;營養(yǎng)價值評價;鎘元素;熱變性溫度

    牛肝菌是真菌系擔子菌亞門層菌綱牛肝菌目的重要類群,因其肉質(zhì)肥厚,極似牛肝而得名??墒撑8尉且活愔匾囊吧秤镁Y源,味道鮮美、食藥用價值高,同時其產(chǎn)量高、種類多、子實體質(zhì)地堅實、耐儲運、易加工,具有很高的經(jīng)濟價值?;液峙8尉˙oletus griseus)屬于擔子菌亞門(Basidiomycotina)、層菌綱(Hymenomycetes)、傘菌目(Agaricases)、牛肝菌科(Boletaceae)、牛肝菌屬(Boletus),因其味微酸,有地方稱其為“酸牛肝”,在我國主要分布在廣西、四川、云南等地[1]。灰褐牛肝菌的生長期長、產(chǎn)量大、價格相對較便宜,是當?shù)厝讼矏鄣囊吧秤门8尉弧?/p>

    對野生食用菌的安全、營養(yǎng)和功能性進行分析和評價是食品科學的一個研究熱點。這主要是食用菌特別是野生食用菌對典型有害元素如Cd、Pb、Hg、As等[2-3]具有富集甚至超富集作用;野生食用菌品種繁多,菌體富含真菌多酚、真菌多糖(含膳食纖維)、非蛋白氨基酸、生物堿、色素等生物活性物質(zhì),可進行生物活性物質(zhì)的廣泛篩查;一旦篩選到高活性目標物質(zhì),可進行菌種純化,可控化菌絲發(fā)酵,低成本、低環(huán)境污染獲得大批量的原料物質(zhì)。為支持云南野生食用牛肝菌產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展,本課題組在野生食用牛肝菌重金屬安全性、營養(yǎng)和功能價值分析等方面展開研究。主要對灰褐牛肝菌的營養(yǎng)和安全性進行了探討,通過對基本組成成分的分析,測定其單糖、脂肪酸、氨基酸的組成,礦物質(zhì)成分及其蛋白質(zhì)的組成,并對其蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值進行評價,以期為灰褐牛肝菌的綜合利用提供理論基礎。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    新鮮灰褐牛肝菌采集自云南省昆明市木水花野生菌交易市場,根據(jù)食用菌圖鑒進行鑒定,剔除幼小的菌蕾和損傷腐爛的子實體。削除樣品表面不可食部分,先后用流動水和超純水清洗,切片冷凍干燥,研磨粉碎,過40 目篩,儲存于棕色干燥器中備用。

    1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone,PMP,色譜純),D-(+)-葡萄糖、D-(+)-半乳糖、L-鼠李糖、L-(+)-阿拉伯糖、D-(+)-半乳糖醛酸、D-木糖、L-巖藻糖、D-甘露糖單糖標準品 美國Sigma公司;三氟乙酸、乙腈(均為色譜純) 美國Merck公司。

    1.2 儀器與設備

    LGJ-12真空冷凍干燥機 北京松源華興科技發(fā)展有限公司;TDL-40B型離心機 上海安亭科學儀器有限公司;TU-1901紫外-可見光光度計、PF51原子熒光光度計北京普析通用儀器有限責任公司;1260高效液相色譜儀 美國Agilent公司;QP2010 Ultra氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 日本島津公司;NOVA400P原子吸收光譜儀 德國耶拿公司;L-8900氨基酸分析儀 日本日立公司;DYCZ-25E型電泳儀 北京六一生物科技有限公司;DSC 214 Polyma型差示掃描量熱儀 德國耐馳公司。

    1.3 方法

    1.3.1 基本成分測定

    水分含量測定:參考GB 5009.3—2010《食品中水分的測定》第一法,結(jié)果以鮮質(zhì)量計;粗灰分含量測定:參考GB 5009.4—2010《食品中灰分的測定》;粗蛋白含量測定:參考GB 5009.5—2010《食品中蛋白質(zhì)的測定》;粗脂肪含量測定:參考GB/T 5009.6—2003《食品中脂肪的測定》;粗灰分、粗蛋白和粗脂肪含量均以干質(zhì)量計;多酚含量測定采用福林-酚法[4],結(jié)果以mg/g干質(zhì)量計;碳水化合物含量按下式計算:

    碳水化合物含量=1-(粗蛋白+粗脂肪+粗灰分)

    1.3.2 單糖組成測定

    采用PMP柱前衍生-高效液相色譜法測定單糖組成[5]。準確稱取0.1 g樣品于10 mL硬質(zhì)玻璃水解管中,加入2 mL 3 mol/L三氟乙酸溶液,置于110 ℃烘箱水解4 h。水解結(jié)束后調(diào)節(jié)pH 7.0,定容后5 000 r/min離心10 min;取上清液1 mL加入1 mL 0.5 mol/L的PMP溶液和1 mL 0.3 mol/L的NaOH溶液,混勻后70 ℃衍生30 min;加入1 mL的0.3 mol/L的鹽酸溶液進行中和;將混合物用10 mL的氯仿萃取3 次以去除剩余的PMP,取上層水相進行高效液相色譜分析。

    檢測條件:檢測波長250 nm;柱溫為室溫;流速1.0 mL/min;流動相A為15%乙腈+85% 0.05 mol/L磷酸緩沖液(KH2PO4-NaOH,pH 6.9);流動相B為40%乙腈+60% 0.05 mol/L磷酸緩沖液(KH2PO4-NaOH,pH 6.9);梯度洗脫,0~30 min為0%~40% B,并保持40%溶劑B 10 min;進樣體積20 μL。每種單糖的含量以mg/g干質(zhì)量計。

    1.3.3 脂肪酸組成測定

    索氏抽提法提取脂肪,并采用酸催化酯化:在提取得到的脂肪中加入10 mL甲醇-濃硫酸溶液(20∶1,V/V),2 mL正己烷,于90 ℃水浴鍋內(nèi)酯化30 min。冷卻后用正己烷萃取,取上層溶液用無水硫酸鈉干燥,取上清液過膜,采用氣相色譜-質(zhì)譜分析[6]。

    1.3.4 氨基酸組成分析

    1.3.4.1 游離氨基酸組成測定

    準確稱取0.1 g樣品于15 mL離心管中,加入10 mL 5%三氯乙酸溶液,搖勻后室溫靜置1 h,10 000 r/min離心10 min,取上清液過膜后,采用日立L-8900氨基酸分析儀的生理體液分析系統(tǒng)測定其游離氨基酸組成,結(jié)果以mg/g干質(zhì)量計。

    1.3.4.2 水解氨基酸組成測定

    準確稱取0.1 g樣品于15 mL硬質(zhì)玻璃水解管中,加入6 mL 6 mol/L鹽酸溶液,置于110 ℃烘箱水解22 h。水解結(jié)束待完全冷卻后轉(zhuǎn)移到50 mL離心管中,調(diào)節(jié)pH值在2~2.5之間,定容至25 mL,取4 mL水解液10 000 r/min離心10 min,取上清液過膜后,采用日立L-8900氨基酸分析儀的水解蛋白分析系統(tǒng)測定其水解氨基酸組成,結(jié)果以mg/g干質(zhì)量計。

    1.3.4.3 色氨酸含量的測定

    參考GB/T 15400—1994《飼料中色氨酸測定方法 分光光度法》,準確稱取0.1 g樣品于15 mL硬質(zhì)玻璃水解管中,加入10 mL 5 mol/L氫氧化鈉溶液(含5%氯化亞錫),置于110 ℃烘箱水解20 h。水解結(jié)束待完全冷卻后轉(zhuǎn)移到50 mL離心管中,調(diào)節(jié)pH值至7.0,定容至50 mL,5 000 r/min離心10 min,上清液用對二甲氨基苯甲醛法于波長590 nm處比色測定其色氨酸含量,結(jié)果以mg/g干質(zhì)量計。

    1.3.5 蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值評價

    氨基酸評分(amino acid score,AAS)、必需氨基酸指數(shù)(essential amino acid index,EAAI)、生物價(biological value,BV)、營養(yǎng)指數(shù)(nutritional index,NI)、氨基酸比值系數(shù)分(score of ratio coefficient of amino acid,SRCAA)分別按照文獻[7-9]的方法進行測定和評分。

    1.3.6 礦質(zhì)元素含量測定

    準確稱取0.2 g樣品于50 mL三角瓶中,加入10 mL混酸(V(高氯酸)∶V(硝酸)=1∶4),封口浸泡過夜,之后加蓋小漏斗于電熱板上消解至冒白煙,待消化液至透明或略帶淺黃色,余液約2~3 mL后加入10 mL去離子水于電熱板上繼續(xù)加熱趕酸至1~2 mL液體,定容至250 mL塑料容量瓶中待測。用原子熒光光譜儀分析Hg、As含量,原子吸收光譜儀測定Pb、Cd、Mg、Fe、Zn和Cu含量,結(jié)果均以mg/kg干質(zhì)量計。

    1.3.7 蛋白質(zhì)組分分析

    蛋白質(zhì)組分的連續(xù)累進提取分離[10]:準確稱取2 g樣品,加入20 mL提取溶劑,混合后磁力攪拌,每種組分的提取溶劑、提取次數(shù)、提取時間見表1。清蛋白和球蛋白在4 ℃條件下進行,其余在室溫條件下提取。提取后的混合物5 000 r/min離心15 min,收集上清液,采用凱氏定氮法測定其蛋白質(zhì)的含量。

    表1 蛋白質(zhì)組分的連續(xù)累進提取分離方法Table 1 Extraction of protein fractions with the successive extraction methods

    1.3.8 清蛋白和球蛋白分子質(zhì)量測定

    收集1.3.7節(jié)中提取的清蛋白和球蛋白,純化后冷凍干燥,采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacryl amide gel electrophoresis,SDS-PAGE)[11],10%分離膠、5%濃縮膠,考馬斯亮藍R-250染色,10%醋酸-20%甲醇洗脫液脫色,直至蛋白條帶清晰。

    1.3.9 清蛋白和球蛋白熱變性溫度測定

    收集1.3.7節(jié)中提取的清蛋白和球蛋白,純化后冷凍干燥,稱取一定量的樣品于差示掃描量熱儀坩堝中,坩堝加蓋密封后,以空坩堝作為參比,從0 ℃加熱至250 ℃。升溫速率為10 K/min,樣品室的氮氣流量為20 mL/min。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

    每個實驗均重復3 次,測定結(jié)果以 ±s表示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 灰褐牛肝菌的基本組成成分

    表2 灰褐牛肝菌的基本組成成分Table 2 Proximate composition of B. griseuuss

    由表2可知,新鮮灰褐牛肝菌子實體的水分質(zhì)量分數(shù)為88.12%,與其他食用牛肝菌的水分含量相當[12-13]。蛋白質(zhì)是食用菌的主要營養(yǎng)成分之一,灰褐牛肝菌的粗蛋白質(zhì)量分數(shù)為28.22%,高于常見栽培食用菌中的平菇、金針菇以及野生菌中美味牛肝菌、銅色牛肝菌和網(wǎng)柄牛肝菌等[14];粗脂肪質(zhì)量分數(shù)為2.44%,略低于李興奎等[15]的研究結(jié)果;粗灰分質(zhì)量分數(shù)為7.60%,與常見食用菌一致。此外,灰褐牛肝菌子實體中碳水化合物質(zhì)量分數(shù)和多酚含量分別為61.74%和7.74 mg/g??傮w上,灰褐牛肝菌具有高蛋白、低脂肪的特點。

    2.2 灰褐牛肝菌的單糖組成分析

    表3 灰褐牛肝菌中的單糖組成Table 3 Monosaccharide composition of B. g riseuuss

    如表3所示,檢出7 種單糖組分,其中葡萄糖含量最高,為258.04 mg/g,其次是甘露糖,為48.33 mg/g,木糖含量較低,阿拉伯糖未檢出。此外,灰褐牛肝菌中半乳糖醛酸含量較高,為28.98 mg/g。

    2.3 灰褐牛肝菌的脂肪酸組成分析

    表4 灰褐牛肝菌中的脂肪酸組成(占脂肪酸總量)Table 4 Fatty acid composition of B. g riseuuss (relative to total fatty acids)

    研究顯示,亞油酸、油酸和棕櫚酸是野生菌中最主要的脂肪酸組成[6,16-17]。由表4可知,灰褐牛肝菌中共檢出17 種脂肪酸,亞油酸、油酸和棕櫚酸相對含量較高,分別為脂肪酸總量的35.91%、28.46%和24.50%。亞油酸是灰褐牛肝菌中含量最高的脂肪酸,且亞油酸是有助于野生菌產(chǎn)生風味的前體物質(zhì)[17]。此外,灰褐牛肝菌中含有較高的多不飽和脂肪酸,這與Kala?[16]的研究結(jié)果一致。

    2.4 灰褐牛肝菌的氨基酸組成分析

    游離氨基酸是野生食用菌中重要的非揮發(fā)性滋味物質(zhì)。由表5可知,灰褐牛肝菌的游離氨基酸種類比較豐富,共檢出29 種,總量為36.16 mg/g,其中酪氨酸(Tyr)含量最高,為7.90 mg/g,其次是丙氨酸(Ala),為4.60 mg/g。甜味氨基酸(Thr、Ser、Gly和Ala)和鮮味氨基酸(Asp和Glu)分別占游離氨基酸總量的23.37%和12.69%。灰褐牛肝菌的游離氨基酸總量高于已報道的野生菌美味牛肝菌、褐環(huán)乳牛肝菌和點柄粘蓋牛肝菌[18],但低于食藥用菌姬松茸[19]。此外,灰褐牛肝菌還含有對嬰幼兒智力發(fā)育有利的?;撬岷徒舛咀o肝的鳥氨酸。

    表5 灰褐牛肝菌的游離氨基酸組成Table 5 Free amino acid composition of B. g riseuuss

    表6 灰褐牛肝菌的水解氨基酸組成Table 6 Hydrolytic amino acid composition of B. griseus

    本實驗進一步對灰褐牛肝菌中18 種水解氨基酸含量進行測定。由表6可知,灰褐牛肝菌水解氨基酸總量為219.15 mg/g,其中谷氨酸(Glu)含量最高,為30.79 mg/g,占總氨基酸含量的14.05%,與文獻[15]報道相似。氨基酸的營養(yǎng)價值主要由必需氨基酸的種類、數(shù)量和組成比例決定,灰褐牛肝菌中必需氨基酸與氨基酸總量的比值為0.38,高于孫燦等[20]報道的0.30,比較接近理想蛋白質(zhì)的要求。

    2.5 灰褐牛肝菌的蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值評價分析

    根據(jù)灰褐牛肝菌的氨基酸組成,進一步對蛋白質(zhì)的質(zhì)量進行分析。如表7所示,灰褐牛肝菌子實體蛋白質(zhì)的AAS為71.88,高于常見食用菌姬松茸、香菇和黑木耳[21]。由AAS可知灰褐牛肝菌的第1限制性氨基酸為亮氨酸。此外,灰褐牛肝菌中含硫氨基酸評分較高,不同于以前的報道含硫氨基酸為菌類第1限制性氨基酸[21]。

    表7 灰褐牛肝菌子實體蛋白質(zhì)質(zhì)量分析Table 7 Quality scores of protein inB. griseus us

    EAAI用于評價食物蛋白質(zhì)的質(zhì)量,數(shù)值越接近100,說明食物蛋白與標準蛋白組成越接近,營養(yǎng)價值越高?;液峙8尉訉嶓w蛋白質(zhì)的EAAI為69.93,高于已報道的雞腿菇、姬松茸和美味牛肝菌等[21-22]。BV表示蛋白消化吸收后的利用程度,數(shù)值越高表明吸收消化后利用程度越高,灰褐牛肝菌的BV為64.52,均高于美味牛肝菌[22]和其他一些常見的野生菌[23]。NI綜合考慮了食品中蛋白質(zhì)的百分含量和必需氨基酸組成2 個因素,NI超過10說明蛋白營養(yǎng)價值較好,灰褐牛肝菌的NI為19.73,高于滑菇[24]、美味牛肝菌[22]以及一些常見食用菌[21]。SRCAA表示蛋白質(zhì)的氨基酸組成的均衡性,SRCAA越接近100,其蛋白質(zhì)氨基酸組成與推薦模式氨基酸組成越一致,對氨基酸平衡所做的貢獻就越大?;液峙8尉腟RCAA為50.05,高于常見的野生菌[23]。

    2.6 灰褐牛肝菌的礦質(zhì)元素含量分析

    表8 灰褐牛肝菌的礦質(zhì)元素含量分析Table 8 Mineral elements and their contents in B. griseus

    野生菌子實體能夠累積大量的常量和微量元素,同時也能富集一些有毒的元素,如As、Hg、Cd和Pb[25]。由表8可知,Mg是灰褐牛肝菌中含量最高的元素,含量為983.82 mg/kg,高于以前的報道[15],其次是Fe、Zn和Cu,與Liu Yuntao等[26]對中國西南5 種牛肝菌礦質(zhì)元素的研究結(jié)果相一致。Mg、Fe、Zn和Cu是人體必需的常量和微量元素,因此,灰褐牛肝菌可以作為補充這些必需元素的良好食物來源。不過,灰褐牛肝菌含有典型有毒元素As、Hg、Cd和Pb,其中As、Hg和Pb的含量低于國家限量標準,但是Cd含量相對較高,遠超過國家限量標準,表明灰褐牛肝菌對Cd具有明顯的富集作用,具有潛在的健康風險,需要引起重視。

    2.7 灰褐牛肝菌蛋白質(zhì)組分分析

    表9 灰褐牛肝菌子實體蛋白質(zhì)組分Table 9 Protein fractions and their contents in B. griseuuss%

    采用連續(xù)累進提取法測定了灰褐牛肝菌蛋白的組成,如表9所示,其中清蛋白質(zhì)量分數(shù)最高,為65.62%,其次是球蛋白(16.00%)和谷蛋白(9.10%),其他的蛋白組分均低于5%。清蛋白是必需氨基酸的重要來源,容易被人體消化吸收,其含量高低對蛋白質(zhì)的品質(zhì)具有重要的影響?;液峙8尉訉嶓w中清蛋白含量顯著高于Petrovska等[27]測定的幾種牛肝菌,且與人血清蛋白中清蛋白含量相當,表明灰褐牛肝菌子實體蛋白質(zhì)品質(zhì)較高??紤]到灰褐牛肝菌中Cd含量較高,對不同組分的Cd含量進行了測定,清蛋白和球蛋白中Cd質(zhì)量分數(shù)較高,分別為38.79%和30.87%,說明灰褐牛肝菌中的Cd主要存在可溶性物質(zhì)中,需要進一步提高其健康風險評估。

    2.8 清蛋白和球蛋白分子質(zhì)量分析

    圖1 蛋白組分的SDS-PAGE圖譜Fig. 1 SDS-PAGE pattern of protein fractions

    采用SDS-PAGE測定清蛋白和球蛋白的分子質(zhì)量分布,如圖1所示。清蛋白組分復雜,在80、60、40 kD和30 kD附近有明顯條帶,其中40 kD條帶最清晰;球蛋白在40 kD附近有3 個條帶。由表9可知,清蛋白和球蛋白的Cd含量較高。研究表明,蛋白質(zhì)對于Cd的吸附有重要的貢獻。Meisch等[28]從大孢蘑菇中提取出一種Cd結(jié)合蛋白,分子質(zhì)量約12 kD,陳露等[29]從大米中提取了分子質(zhì)量為14 kD的Cd結(jié)合蛋白。因此,灰褐牛肝菌的清蛋白和球蛋白的部分組分可能會有較高的Cd吸附能力,需要進一步研究。

    2.9 熱變性溫度分析

    圖2 蛋白組分的差示掃描量熱圖Fig. 2 DSC curves of protein fractions

    熱變性溫度是評價蛋白質(zhì)加工性的一個主要因素,隨著溫度的升高,蛋白質(zhì)變性,其三、四級結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,導致產(chǎn)品的功能特性顯著降低甚至喪失,差示掃描量熱儀掃描可以評價蛋白質(zhì)的熱變性溫度。如圖2所示,灰褐牛肝菌蛋白組分中清蛋白的變性溫度為125.04 ℃,球蛋白為75.04 ℃。清蛋白的變性溫度顯著高于球蛋白,結(jié)果與蔡聯(lián)輝等[30]研究的蓮子蛋白一致。清蛋白的變性溫度高可能與其蛋白質(zhì)組成的復雜性及含有的色素和多酚有關。呂曉亞等[31]研究發(fā)現(xiàn)辣木葉水溶性蛋白的變性溫度為113.7 ℃,略低于本實驗研究結(jié)果,表明灰褐牛肝菌子實體的蛋白具有較好的熱穩(wěn)定性。

    3 結(jié) 論

    灰褐牛肝菌子實體中蛋白質(zhì)質(zhì)量分數(shù)較高,為干質(zhì)量的28.22%,高于常見的食用菌。在17 種脂肪酸中,亞油酸、油酸和棕櫚酸相對含量分別為35.91%、28.46%和24.50%。子實體中游離氨基酸和水解氨基酸種類較為豐富,必需氨基酸/氨基酸總量為0.38,接近理想蛋白質(zhì)的要求。蛋白質(zhì)的AAS為71.88,第1限制性氨基酸為亮氨酸,其EAAI、BV、NI和SRCAA分別為69.93、64.52、19.73和50.05。子實體富含礦質(zhì)元素Mg、Fe、Zn、Cu,但有毒元素Cd含量相對較高,表明灰褐牛肝菌可能具有潛在的食用健康風險。灰褐牛肝菌子實體中清蛋白質(zhì)量分數(shù)最高,占粗蛋白的65.62%,明顯高于常見的食用菌,但Cd質(zhì)量分數(shù)較高,占總Cd量的38.79%。清蛋白組分復雜,在80、60、40 kD和30 kD附近有明顯條帶,其中40 kD條帶最清晰,球蛋白在40 kD附近有3 個條帶。熱變性溫度顯示灰褐牛肝菌子實體的蛋白具有較好的熱穩(wěn)定性。綜上,灰褐牛肝菌具有較高的營養(yǎng)價值,但是由于有毒元素Cd含量較高存在一定的食用健康風險,需要引起重視。

    [1] 卯曉嵐. 中國蕈菌[M]. 北京: 科學出版社, 2009.

    [2] FALANDYSZ J, BORVI?KA J. Macro and trace mineral constituents and radionuclides in mushrooms-health benefi ts and risks[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2012, 97(2): 477-501. DOI:10.1007/s00253-012-4552-8.

    [3] OKORO I O. Proximate and mineral analysis of some wild edible mushrooms[J]. African Journal of Biotechnology, 2012, 11(30)∶ 7720-7724. DOI∶10.5897/AJB11.590.

    [4] 唐遠龍, 楊成濤, 莊永亮, 等. 云南主產(chǎn)區(qū)夏黑果皮營養(yǎng)成分及抗氧化活性研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2016, 37(6): 147-150. DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2016.06.021.

    [5] 楊興斌, 趙燕, 周四元, 等. 柱前衍生化高效液相色譜法分析當歸多糖的單糖組成[J]. 分析化學, 2005, 33(9): 1287-1290. DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2005.09.022.

    [6] PEDNEAULT K, ANGERS P, GOSSELIN A, et al. Fatty acid composition of lipids from mushrooms belonging to the family Boletaceae[J]. Mycological Research, 2006, 110(10): 1179-1183.DOI:10.1016/j.mycres.2006.05.006.

    [7] BANO Z, RAJARATHRAM S. Pleurotus mushroom as a nutrition food[M]//Tropical mushroom: biological nature and cultivation methods. Hong Kong: The Chinese University Press, 1982: 363-380.

    [8] FAO. No. 24 Amino acid content of foods and biological data on proteins[S].

    [9] 王芳, 喬璐, 張慶慶, 等. 桑葉蛋白氨基酸組成分析及營養(yǎng)價值評價[J].食品科學, 2015, 36(1): 225-228. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201501043.

    [10] PETROVSKA B B. Protein fraction in edible Macedonian mushrooms[J]. European Food Research and Technology, 2001, 212:469-472. DOI:10.1007/s002170000285.

    [11] 郭堯君. 蛋白質(zhì)電泳實驗技術[M]. 北京: 科學出版社, 2005: 72-85.

    [12] 周玲仙, 殷建忠. 云南野生食用牛肝菌營養(yǎng)成分分析及評價[J]. 食用菌, 2008, 30(4): 61-62. DOI:10.3969/j.issn.1000-8357.2008.04.044.

    [13] 朱萍, 郭永紅, 丁曉雯. 四種鮮牛肝菌成分分析[J]. 中國食用菌,2006, 25(4): 44-46. DOI:10.3969/j.issn.1003-8310.2006.04.014.

    [14] SANDRINA A H, LILLIAN B, MARIA J S, et al. Targeted metabolites analysis in wild Boletus species[J]. LWT-Food Science and Technology, 2011, 44(6): 1343-1348. DOI:10.1016/j.lwt.2011.01.017.

    [15] 李興奎, 王元忠. 灰褐牛肝菌子實體營養(yǎng)成分分析[J]. 中國食用菌,2007, 26(1): 55-56. DOI:10.3969/j.issn.1003-8310.2007.01.01.

    [16] KALA? P. Chemical composition and nutritional value of European species of wild growing mushrooms: a review[J]. Food Chemistry,113(1): 9-16. DOI:10.1016/j.foodchem.2008.07.077.

    [17] RIBERO B, PINHO P G D, ANDRADE P B, et al. Fatty acid composition of wild edible mushrooms species: a comparative study[J]. Microchemical Journal, 2009, 93(1): 29-35. DOI:10.1016/j.microc.2009.04.005.

    [18] RIBERIRO B, ANDRADE P B, SILVA B M, et al. Comparative study on free amino acid composition of wild edible mushroom species[J].Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2008, 56(22): 10973-10979. DOI:10.1021/jf802076p.

    [19] KIM M Y, CHUNG L M, LEE S J, et al. Comparison of free amino acid, carbohydrates concentrations in Korean edible and medicinal mushrooms[J]. Food Chemistry, 2009, 113(3): 386-393. DOI:10.1016/j.foodchem.2008.07.045.

    [20] 孫燦, 林佶, 萬玉萍, 等. 云南省常見野生食用菌的氨基酸含量[J]. 植物分類與資源學報, 2012, 34(1): 89-92. DOI:10.3724/SP.J.1143.2012.11102.

    [21] 姜萍萍, 韓燁, 顧賽紅, 等. 五種食用菌氨基酸含量的測定及營養(yǎng)評價[J]. 氨基酸和生物資源, 2009, 31(2): 67-71. DOI:10.3969/j.issn.1006-8376.2009.02.018.

    [22] 冮潔, 李學偉, 金懷剛. 美味牛肝菌菌絲體與子實體蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的評價[J]. 食品科學, 2013, 34(3): 253-256.

    [23] 羅正明, 劉秀麗, 賈艷青, 等. 四種五臺山野生食用菌蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值評價[J]. 食品工業(yè)科技, 2015, 36(2): 249-254. DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2015.02.067.

    [24] 冮潔, 李文靜. 滑菇菌絲體和子實體蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的評價[J].食品科學, 2013, 34(21): 321-324. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201321064.

    [25] WANG X M, ZHANG J, WU L H, et al. A mini-review of chemical composition and nutritional value of edible wild-grown mushroom from China[J]. Food Chemistry, 2014, 151(20): 279-285. DOI:10.1016/j.foodchem.2013.11.062.

    [26] LIU Y T, CHEN D, YOU Y X, et al. Nutritional composition of boletus mushrooms from Southwest China and their antihyperglycemic and antioxidant activities[J]. Food Chemistry, 2016, 211: 83-91.DOI:10.1016/j.foodchem.2016.05.032.

    [27] PETROVSKA B B, KULEVANOVA S, UGRINOVA L, et al. Protein fractions in some Macedonian edible Boletaceae mushrooms[J]. Planta Medica, 2007, 73(9): 937-938. DOI:10.1055/s-2007-987147.

    [28] MEISCH H, BECHMANN I, SCHMITT J. A new cadmium-binding phosphoglycoprotein, cadmium-mycophosphatin, from the mushroom,Agaricus macroscporus[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Protein Structure and Molecular Enzymolog, 1983, 745(3): 259-266.DOI:10.1016/0167-4838(83)90057-2.

    [29] 陳露, 陳季旺, 蔡俊, 等. 大米鎘結(jié)合蛋白的分離純化及純度鑒定[J].食品科學, 2016, 37(13): 60-64. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201613011.

    [30] 蔡聯(lián)輝, 曾虹燕, 王亞舉, 等. 蓮子蛋白質(zhì)的氨基酸組成及其營養(yǎng)評價[J]. 營養(yǎng)學報, 2010, 32(5): 503-506. DOI:10.13325/j.cnki.acta.nutr.sin.2010.05.013.

    [31] 呂曉亞, 白新鵬, 伍曾利, 等. 辣木葉水溶性蛋白的超聲-微波萃取及其性質(zhì)研究[J]. 食品工業(yè)科技, 2016, 37(5): 212-216. DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2016.05.033.

    Nutritional Characteristics and Protein Composition of Fruiting Bodies of Boletus griseus

    BAO Changjun, CHANG Weidan, ZHUANG Yongliang, SUN Liping*
    (Yunnan Institute of Food Safety, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China)

    The proximate composition, monosaccharide composition, fatty acid and amino acid compositions, and mineral contents of the fruiting bodies of Boletus griseus were detected and the protein composition of the mushroom was evaluated by successive extraction. Besides, the nutritional value of proteins of the mushroom was also assessed systematically.Results showed that the crude protein content in the mushroom was 28.22% and the glucose content was 258.04 mg/g. A total of 17 fatty acids were detected, with linoleic acid, oleic acid and palmitic acid accounting for 35.91%, 28.46% and 24.50% of the total fatty acids, respectively. A total of 29 free amino acids were detected, among which, Tyr and Ala showed the highest contents. Sweet amino acids and umami amino acids accounted for 23.37% and 12.69% of the total free amino acids, respectively. The amino acid score (AAS), essential amino acid index (EAAI), biological value (BV), nutritional index (NI) and score of ratio coefficient of amino acid (SRCAA) of essential amino acids in the protein hydrolysate of Boletus griseus, which accounted for 38% of the total amino acids, were 71.88, 69.93, 64.52, 19.73 and 50.05, respectively.B. griseus contained high levels of Mg, Fe, Zn, and Cu. Meanwhile, the toxic element Cd was also at a relatively high level. Furthermore, albumin was the most prominent protein in the mushroom, accounting for 65.62% of the crude protein,but the content of Cd in albumin accounted for 38.79% of total Cd. The molecular masses (mw) of albumin and globulin in Boletus griseus were identifi ed by SDS-PAGE to be around 40 kD. Differential scanning calorimetry (DSC) results showed the thermal denaturation temperatures of the two proteins were 125.04 and 75.04 ℃, respectively. In conclusion, the results indicated that B. griseus showed high nutritional quality, but its consumption could pose considerable health risk due to the high content of Cd.

    Boletus griseus; amino acid composition; nutritional value assessment; Cd; thermal denaturation temperature

    10.7506/spkx1002-6630-201720012

    S646.3

    A

    1002-6630(2017)20-0083-07

    2016-12-08

    國家自然科學基金地區(qū)科學基金項目(21267013)

    鮑長俊(1990—),男,碩士,研究方向為食品營養(yǎng)與安全。E-mail:809353681@qq.com

    *通信作者:孫麗平(1981—),女,教授,博士,研究方向為食品質(zhì)量與安全控制。E-mail:kmlpsun@163.com

    鮑長俊, 常惟丹, 莊永亮, 等. 灰褐牛肝菌(Boletus griseus)子實體的營養(yǎng)評價及蛋白質(zhì)組分分析[J]. 食品科學, 2017,38(20)∶ 83-89. DOI∶10.7506/spkx1002-6630-201720012. http∶//www.spkx.net.cn

    BAO Changjun, CHANG Weidan, ZHUANG Yongliang, et al. Nutritional characteristics and protein composition of fruiting bodies of Boletus griseus[J]. Food Science, 2017, 38(20)∶ 83-89. (in Chinese with English abstract) DOI∶10.7506/spkx1002-6630-201720012. http∶//www.spkx.net.cn

    猜你喜歡
    牛肝菌食用菌水解
    云南發(fā)現(xiàn)4.2公斤野生牛肝菌
    食用菌的栽培技術(中)
    食用菌的栽培技術(上)
    食用菌的栽培技術(下)
    番石榴中結(jié)合多酚堿水解與酸水解法提取工藝優(yōu)化的比較
    牛肝菌的功效
    中國食用菌(2017年2期)2017-01-14 03:18:24
    鹽類的水解考點探究
    中學化學(2016年2期)2016-05-31 05:27:22
    最好的老年人食譜——牛肝菌扒菜心
    鹽類水解的原理及應用
    麗水山區(qū)牛肝菌資源的調(diào)查
    窝窝影院91人妻| 精品乱码久久久久久99久播| 欧美zozozo另类| av片东京热男人的天堂| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 神马国产精品三级电影在线观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 男人的好看免费观看在线视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 一区二区三区国产精品乱码| 国内精品美女久久久久久| 国产免费av片在线观看野外av| 国产黄色小视频在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 在线观看免费视频日本深夜| 1024香蕉在线观看| 黄片大片在线免费观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产真人三级小视频在线观看| 偷拍熟女少妇极品色| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产综合懂色| 久久精品91蜜桃| 免费av毛片视频| cao死你这个sao货| 高清在线国产一区| 成年女人看的毛片在线观看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 熟女人妻精品中文字幕| 在线国产一区二区在线| 最好的美女福利视频网| 观看美女的网站| aaaaa片日本免费| 国产1区2区3区精品| 我的老师免费观看完整版| 黄片小视频在线播放| 成人无遮挡网站| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产免费男女视频| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 免费在线观看成人毛片| 国产伦在线观看视频一区| 午夜日本视频在线| 超碰av人人做人人爽久久| 简卡轻食公司| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲精品亚洲一区二区| 欧美一区二区亚洲| 久久久久久久国产电影| 最近中文字幕2019免费版| 99久久精品热视频| 一区二区三区免费毛片| 久久久久久久亚洲中文字幕| 在线观看av片永久免费下载| 免费看美女性在线毛片视频| 国产91av在线免费观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 真实男女啪啪啪动态图| 免费观看在线日韩| 亚洲国产欧美人成| 成年免费大片在线观看| 色综合色国产| 99久久中文字幕三级久久日本| 能在线免费看毛片的网站| av线在线观看网站| 欧美日韩综合久久久久久| 免费av毛片视频| 亚洲精品国产av成人精品| 国产大屁股一区二区在线视频| 在线观看66精品国产| 色综合亚洲欧美另类图片| 一区二区三区乱码不卡18| videos熟女内射| 在线天堂最新版资源| 99久久中文字幕三级久久日本| 男插女下体视频免费在线播放| 丝袜喷水一区| 国产乱人视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 免费看av在线观看网站| .国产精品久久| 国产精品久久久久久精品电影| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产大屁股一区二区在线视频| 天堂中文最新版在线下载 | 午夜福利网站1000一区二区三区| av在线天堂中文字幕| 成人二区视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 一区二区三区乱码不卡18| 国产色爽女视频免费观看| 日本免费在线观看一区| a级毛片免费高清观看在线播放| 午夜激情福利司机影院| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 看非洲黑人一级黄片| 国产成人a∨麻豆精品| 又爽又黄a免费视频| 人体艺术视频欧美日本| 久久这里有精品视频免费| 欧美精品一区二区大全| 日韩成人av中文字幕在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 永久网站在线| 成年女人永久免费观看视频| 久久草成人影院| 三级经典国产精品| 变态另类丝袜制服| 国产精品久久久久久久久免| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 亚洲成av人片在线播放无| 免费看a级黄色片| 嫩草影院新地址| 成人亚洲精品av一区二区| 免费无遮挡裸体视频| 久久这里只有精品中国| 少妇人妻精品综合一区二区| 亚洲色图av天堂| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 白带黄色成豆腐渣| 精品午夜福利在线看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 精品酒店卫生间| 亚洲综合色惰| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久久久国产网址| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 久久久国产成人精品二区| 伦理电影大哥的女人| 99热网站在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 高清视频免费观看一区二区 | 毛片一级片免费看久久久久| 日韩一区二区视频免费看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 日本爱情动作片www.在线观看| 在线播放国产精品三级| 亚洲av中文av极速乱| 国产黄片视频在线免费观看| 国产成人精品一,二区| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 超碰av人人做人人爽久久| 内地一区二区视频在线| 在线观看av片永久免费下载| 69人妻影院| 又爽又黄a免费视频| 一区二区三区高清视频在线| 狠狠狠狠99中文字幕| av线在线观看网站| 只有这里有精品99| 亚洲精品国产av成人精品| 麻豆一二三区av精品| 中文欧美无线码| 嫩草影院入口| 国产精品人妻久久久久久| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 男女视频在线观看网站免费| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久久成人免费电影| av女优亚洲男人天堂| 欧美日本视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲无线观看免费| 亚洲精品乱久久久久久| 婷婷色av中文字幕| 亚洲av日韩在线播放| 国产精品爽爽va在线观看网站| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 身体一侧抽搐| 一区二区三区四区激情视频| 一级爰片在线观看| 精品久久久久久久久亚洲| 国产精华一区二区三区| 内射极品少妇av片p| 美女国产视频在线观看| 人妻系列 视频| 久久久久久久久久久免费av| a级毛片免费高清观看在线播放| 中文字幕亚洲精品专区| 午夜福利高清视频| 好男人视频免费观看在线| 免费观看精品视频网站| 草草在线视频免费看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日韩一区二区视频免费看| av国产免费在线观看| 午夜免费激情av| 国产成人午夜福利电影在线观看| www.色视频.com| 国产美女午夜福利| 小说图片视频综合网站| 18禁在线播放成人免费| 最近最新中文字幕大全电影3| 中文字幕av成人在线电影| 日韩成人av中文字幕在线观看| 级片在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲色图av天堂| 精品久久久久久久久av| 特大巨黑吊av在线直播| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久99热这里只频精品6学生 | av国产免费在线观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 赤兔流量卡办理| 精华霜和精华液先用哪个| 精品久久久久久久末码| 91狼人影院| 免费电影在线观看免费观看| 99久国产av精品| 日本黄大片高清| 欧美一区二区亚洲| av专区在线播放| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 国产一区二区三区av在线| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久人人爽人人爽人人片va| 中文在线观看免费www的网站| 午夜福利在线在线| 亚洲欧美日韩高清专用| 欧美区成人在线视频| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产av一区在线观看免费| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久午夜福利片| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产精品福利在线免费观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 熟女电影av网| 美女内射精品一级片tv| 国产免费男女视频| 嫩草影院精品99| av在线老鸭窝| 精品国产三级普通话版| 超碰97精品在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产探花在线观看一区二区| 国产精品久久久久久精品电影| 美女高潮的动态| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲人成网站在线观看播放| 黑人高潮一二区| 欧美成人精品欧美一级黄| 人妻少妇偷人精品九色| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产高清有码在线观看视频| 伦精品一区二区三区| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 女人被狂操c到高潮| 永久免费av网站大全| 一个人观看的视频www高清免费观看| a级一级毛片免费在线观看| 日日撸夜夜添| 国产91av在线免费观看| 深夜a级毛片| 在线免费十八禁| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产视频首页在线观看| 精品久久久久久成人av| 91aial.com中文字幕在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 看免费成人av毛片| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美潮喷喷水| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产单亲对白刺激| 成人毛片a级毛片在线播放| 国产成人a∨麻豆精品| 赤兔流量卡办理| 亚洲18禁久久av| 高清毛片免费看| 亚洲自拍偷在线| av女优亚洲男人天堂| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 人妻系列 视频| 我的老师免费观看完整版| 一区二区三区免费毛片| 波野结衣二区三区在线| 视频中文字幕在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品久久电影中文字幕| 欧美又色又爽又黄视频| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品综合久久久久久久免费| 大香蕉97超碰在线| 欧美最新免费一区二区三区| 日韩av在线大香蕉| 天天一区二区日本电影三级| 国产精品女同一区二区软件| 国产午夜精品论理片| 九色成人免费人妻av| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 少妇丰满av| 又爽又黄无遮挡网站| 久久久亚洲精品成人影院| 国产精华一区二区三区| 免费观看在线日韩| 2021少妇久久久久久久久久久| 女人久久www免费人成看片 | 日本黄大片高清| 丰满少妇做爰视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 麻豆成人av视频| 亚洲最大成人av| 99久久精品一区二区三区| 亚洲18禁久久av| videos熟女内射| 亚洲美女视频黄频| av线在线观看网站| 免费av毛片视频| 内地一区二区视频在线| 草草在线视频免费看| 中文字幕制服av| 国产一区二区三区av在线| 少妇熟女欧美另类| 久久欧美精品欧美久久欧美| 一级黄片播放器| 亚洲精品aⅴ在线观看| 一级毛片我不卡| 国产黄片美女视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 色5月婷婷丁香| 久久久精品欧美日韩精品| 久久这里有精品视频免费| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 青春草视频在线免费观看| 日韩大片免费观看网站 | 国产一区二区三区av在线| 久久久久性生活片| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产麻豆成人av免费视频| 在线天堂最新版资源| 成人无遮挡网站| 欧美不卡视频在线免费观看| 六月丁香七月| 欧美最新免费一区二区三区| 欧美成人一区二区免费高清观看| 夫妻性生交免费视频一级片| 一区二区三区免费毛片| 网址你懂的国产日韩在线| 日韩av在线大香蕉| av天堂中文字幕网| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产高清不卡午夜福利| 最近手机中文字幕大全| 在线a可以看的网站| 免费搜索国产男女视频| 久久久久久久久久久免费av| 国模一区二区三区四区视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 国产免费视频播放在线视频 | 亚洲美女视频黄频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 精品久久久久久电影网 | 久久精品综合一区二区三区| 18+在线观看网站| 欧美性猛交黑人性爽| 赤兔流量卡办理| 亚洲精品国产成人久久av| 日韩一区二区视频免费看| 色哟哟·www| 免费人成在线观看视频色| 变态另类丝袜制服| 日韩欧美在线乱码| 综合色av麻豆| 搞女人的毛片| 最近中文字幕高清免费大全6| 伊人久久精品亚洲午夜| 狠狠狠狠99中文字幕| 黄色一级大片看看| 99久久无色码亚洲精品果冻| av天堂中文字幕网| 亚洲最大成人手机在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久国内精品自在自线图片| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品一区www在线观看| ponron亚洲| 老司机影院成人| 边亲边吃奶的免费视频| 最近的中文字幕免费完整| 日韩精品青青久久久久久| 少妇熟女欧美另类| 午夜日本视频在线| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产 一区精品| 国产乱来视频区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产69精品久久久久777片| 中文欧美无线码| 极品教师在线视频| 日韩制服骚丝袜av| 欧美一级a爱片免费观看看| 日韩欧美三级三区| 成人午夜精彩视频在线观看| 18禁在线播放成人免费| 精品酒店卫生间| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 日韩在线高清观看一区二区三区| 欧美一区二区亚洲| 免费无遮挡裸体视频| av国产久精品久网站免费入址| 国产熟女欧美一区二区| 男人和女人高潮做爰伦理| 午夜福利高清视频| 青春草国产在线视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 午夜精品国产一区二区电影 | 欧美激情国产日韩精品一区| 国产成人a∨麻豆精品| 99视频精品全部免费 在线| 国内精品宾馆在线| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 欧美3d第一页| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产av一区在线观看免费| 亚洲精品色激情综合| 免费观看精品视频网站| 99九九线精品视频在线观看视频| 99久久九九国产精品国产免费| 欧美成人一区二区免费高清观看| 久久人妻av系列| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 日韩在线高清观看一区二区三区| 一个人免费在线观看电影| 久久久久国产网址| 一本久久精品| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 国产精品久久电影中文字幕| 深夜a级毛片| 亚洲精品456在线播放app| 26uuu在线亚洲综合色| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲18禁久久av| 看黄色毛片网站| 日韩成人av中文字幕在线观看| 网址你懂的国产日韩在线| 国产精华一区二区三区| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲一区高清亚洲精品| 26uuu在线亚洲综合色| 观看免费一级毛片| 亚洲国产欧美人成| 国产成人freesex在线| av卡一久久| 日本-黄色视频高清免费观看| 成人av在线播放网站| 欧美又色又爽又黄视频| 国产精品久久电影中文字幕| 国产亚洲91精品色在线| 在线播放无遮挡| 一二三四中文在线观看免费高清| 插逼视频在线观看| 午夜激情福利司机影院| 日韩精品有码人妻一区| 国产成人a区在线观看| 亚洲18禁久久av| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产高清国产精品国产三级 | 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 超碰97精品在线观看| 精品一区二区免费观看| 欧美97在线视频| 日韩强制内射视频| 国语自产精品视频在线第100页| 国产精华一区二区三区| 免费看a级黄色片| 久久草成人影院| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | h日本视频在线播放| 春色校园在线视频观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产精品蜜桃在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 成人综合一区亚洲| 日韩成人av中文字幕在线观看| 欧美区成人在线视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| eeuss影院久久| 天堂网av新在线| 中国国产av一级| 亚洲性久久影院| 免费大片18禁| 国产高清不卡午夜福利| 热99re8久久精品国产| 美女大奶头视频| 九九爱精品视频在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲最大成人中文| 亚洲va在线va天堂va国产| 日韩av在线免费看完整版不卡| 91精品国产九色| 久久久久久久久大av| 国产精品野战在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 大话2 男鬼变身卡| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久久久久伊人网av| 久久久久久久久中文| 毛片一级片免费看久久久久| 中文字幕av成人在线电影| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产av不卡久久| 亚洲在久久综合| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 国产一区二区三区av在线| 国产 一区 欧美 日韩| 国产高清国产精品国产三级 | 欧美xxxx性猛交bbbb| 欧美日韩精品成人综合77777| 男女那种视频在线观看| 免费看美女性在线毛片视频| 亚洲电影在线观看av| 美女高潮的动态| 日韩欧美三级三区| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲av免费高清在线观看| 只有这里有精品99| av在线老鸭窝| 天美传媒精品一区二区| 天堂中文最新版在线下载 | 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品一区二区性色av| 晚上一个人看的免费电影| 久久精品影院6| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产片特级美女逼逼视频| 成人三级黄色视频| 中文字幕久久专区| 丝袜美腿在线中文| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲精品国产成人久久av| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 婷婷六月久久综合丁香| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 亚洲国产精品成人综合色| 日韩欧美 国产精品| 免费黄网站久久成人精品| 有码 亚洲区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 午夜精品国产一区二区电影 | 日日啪夜夜撸| 午夜久久久久精精品| 我要搜黄色片| 永久免费av网站大全| 免费黄网站久久成人精品| 淫秽高清视频在线观看| 国产av码专区亚洲av| 免费看日本二区| 国产黄a三级三级三级人| 大香蕉久久网| 国产美女午夜福利| 美女国产视频在线观看| 欧美激情国产日韩精品一区| 麻豆成人午夜福利视频| 日本wwww免费看| 免费av观看视频| 久久国内精品自在自线图片| 黄片wwwwww| 国产精品野战在线观看| 能在线免费看毛片的网站| 91aial.com中文字幕在线观看| 日韩视频在线欧美| 久久6这里有精品| 日本免费一区二区三区高清不卡| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品女同一区二区软件| 三级国产精品欧美在线观看| 免费黄网站久久成人精品| 嫩草影院精品99| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产91av在线免费观看| 嫩草影院精品99| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 成人亚洲精品av一区二区| 日韩强制内射视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产精品久久电影中文字幕| 舔av片在线| 日本黄大片高清| 欧美成人午夜免费资源| 欧美性感艳星| 欧美精品一区二区大全| 国产在视频线在精品| 免费观看人在逋| 国产精品综合久久久久久久免费| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 一个人免费在线观看电影| 久久热精品热| av在线老鸭窝| 色播亚洲综合网| 久久久午夜欧美精品| 久久久久久久亚洲中文字幕| 99久久无色码亚洲精品果冻| 日本与韩国留学比较| 国产精品电影一区二区三区| 最后的刺客免费高清国语| 婷婷色综合大香蕉|