食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉檢測方法

劉娜，扎木則仁,吳騰,常建軍

（內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團）股份有限公司質(zhì)量安全管理系統(tǒng)中心實驗室，呼和浩特011517）

食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉檢測方法

劉娜，扎木則仁,吳騰,常建軍

（內(nèi)蒙古蒙牛乳業(yè)（集團）股份有限公司質(zhì)量安全管理系統(tǒng)中心實驗室，呼和浩特011517）

使用毛細管色譜柱-氣相色譜儀檢測食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的質(zhì)量濃度。將樣品稱取后放置在冰水浴中先加氯化鈉搖勻，再加入三氯乙酸溶液輕輕搖勻,然后加入亞硝酸鈉溶液冰浴衍生，用正己烷提取后，用氣相色譜儀氫火焰離子化檢測器檢測。該方法檢測環(huán)己基氨基磺酸鈉回收率范圍在86.07%～109.33%之間，相對標準偏差在3.16%～7.38%之間。該方法檢測結(jié)果準確可靠、重復(fù)性好，可進行食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉質(zhì)量濃度的檢測。

環(huán)己基氨基磺酸鈉；三氯乙酸；氣相色譜儀；毛細管色譜柱

0 引 言

環(huán)己基氨基磺酸鈉的商品名稱為甜蜜素（Sodi?um Cyclamate），是一種人工合成的食品添加劑[1]。是一種高甜度、無熱值、安全衛(wèi)生，并能代替蔗糖的新型食品添加劑，是不被人體吸收的低熱能甜味劑[2]，但長期食用過量的甜蜜素會加重肝臟負擔,并對腎臟有一定的毒副作用[3];近年來研究發(fā)現(xiàn),甜蜜素因在胃腸道內(nèi)轉(zhuǎn)化為環(huán)己胺,可能具有潛在的致癌性,能誘發(fā)膀胱癌[4]。因此我國國家標準GB2760《食品添加劑使用衛(wèi)生標準》嚴格規(guī)定了甜蜜素的使用范圍及用量。

目前環(huán)己基氨基磺酸鈉氣相檢測方法的前處理主要用亞硝酸鈉溶液和硫酸溶液在冰水中進行衍生化反應(yīng)產(chǎn)物環(huán)己醇亞硝酸酯進行檢測，方法的穩(wěn)定性差、準確度低等不足的地方較多。本方法在國標方法的基礎(chǔ)上，使用三氯乙酸溶液代替硫酸溶液提供酸性條件比較安全，提高方法的準確度、精密度以及穩(wěn)定性。另一目的是通過前處理方法衍生化過程中先加入氯化鈉，然后先加三氯乙酸溶液后加亞硝酸鈉溶液的方式提高方法的穩(wěn)定性以及準確度。

1 實驗

1.1 材料與試劑

本研究所使用的樣品均為市場上購買；環(huán)己基氨基磺酸鈉標準品：DR.Ehrenstorfer純度99.0%、正己烷色譜純，其他藥品均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。

三氯乙酸溶液質(zhì)量濃度10%（10 g三氯乙酸溶于100 mL水中），亞硝酸鈉水溶液質(zhì)量濃度50 g/L

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜儀:VARIAN GC-450,氫火焰離子化檢測器。

氣相毛細管色譜柱:VF-1ms（30m×0.32mm×0.25 μm）。

IKATM MS 3 basic旋渦混和器，Heal Toledo離心機，MettlerToldeo XP205萬分之一電子天平。

1.3 測定方法

樣品稱取后放置在冰水浴中先加氯化鈉搖勻，再加入三氯乙酸溶液輕輕搖勻,然后加入亞硝酸鈉溶液冰浴衍生，用正己烷提取樣品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉；氣相毛細管色譜柱分析，外標法定量[5]。

1.4 方法

1.4.1 標準溶液配制

標準儲備液：稱取環(huán)己基氨基磺酸鈉標準品0.25 g（精確至0.0001 g），25.00 mL容量瓶中用水溶解定容至刻度。2～8℃冰箱內(nèi)保存2個月。

標準工作液：使用前從標準儲備液中取0.1，0.2，0.4，0.8，1.6 mL至50 mL離心管中再加10 mL水，準確配置環(huán)己基氨基磺酸鈉的質(zhì)量濃度分別為0.1，0.2，0.4，0.8 g/L和1.0 g/L的待測液，其他按照樣品預(yù)處理步驟進行操作，分別測定待測液中環(huán)己基氨基磺酸鈉，并繪制濃度-峰面積標準曲線。

1.4.2 樣品預(yù)處理、衍生及提取

主要稱取的樣品放置在冰水浴中先加1.0 g氯化鈉搖勻放置5.0 min，然后加入5 mL 10%三氯乙酸溶液輕輕搖勻，再加入5 mL質(zhì)量濃度為50 g/L亞硝酸鈉溶液,搖勻。在冰浴中放置40 min,并經(jīng)常搖動,再準確加入10 mL正己烷及5 g氯化鈉,搖勻后置旋渦混合器上振動1 min或搖80次充分提取衍生物,有乳化現(xiàn)象的樣品進行5 000 r/min離心5 min,待靜止分層后吸出正己烷層待上機。取上清液及時上機；環(huán)己基氨基磺酸鈉衍生物易揮發(fā)不太穩(wěn)定[6]。

1.4.3 結(jié)果計算

外標法定量，按下式進行計算：

式中：X為待測樣品環(huán)已基氨基磺酸鈉的質(zhì)量分數(shù)（g/kg）；A為樣品測定液中環(huán)已基氨基磺酸鈉的質(zhì)量濃度（g/L）；V為樣品定容體積（mL）；f為樣液的稀釋因子；m為樣品稱量質(zhì)量（g）。

1.5 儀器參考條件

色譜柱：VF-1（30m ×0.32mm ×0.25μm）毛細管色譜柱或相等性能的毛細管色譜柱；檢測器溫度300℃，氣化溫度260℃,柱溫50℃,保持0 min,10℃/min升溫到120℃,保持2 min；載氣(N2)2.0 mL/min,氫氣流量30 mL/min,空氣流量300 mL/min,分流比20:1,尾吹流量(N2)25 mL/min。

2 結(jié)果與討論

2.1氯化鈉對比實驗

（1）稱取5.0 g含有環(huán)己基氨基磺酸鈉的蜜餞肉加10.0 mL純水，在加入不同稱量的氯化鈉對檢測結(jié)果的影響實驗，結(jié)果如圖1所示。

圖1 加入不同稱量的氯化鈉對檢測結(jié)果的影響實驗

由圖1可以看出：其他條件相同的情況下對蜜餞質(zhì)控樣品中加入不同量NaCl固體，加入量1.20 g時檢測結(jié)果最大，因考慮實際操作故選擇1.00 g左右時最佳。

（2）含有環(huán)己基氨基磺酸鈉的蜜餞肉質(zhì)控樣品中添加NaCl和不添加NaCl對比實驗，結(jié)果如表1所示。

表1 NaCl添加和不添加對比實驗 g/kg

2.2 本方法對不同基質(zhì)精密度和準確度實驗

表2 對不同基質(zhì)精密度和準確度實驗（n=6）

在不同樣品中加入不同濃度水平的環(huán)己基氨基磺酸鈉進行加標回收率試驗，回收率范圍在86.07%～109.33%之間，RSD在3.16%～7.38%之間。

3 結(jié)論

本文在國標的基礎(chǔ)上建立了測定食品中環(huán)已基氨基磺酸鈉的檢測，先加入1.0 g氯化鈉能夠保持試樣的溫度較低，衍生化反應(yīng)過程中容易產(chǎn)熱，并且充分釋放試樣中溶進物，（如：蜜餞中的添加劑環(huán)己基氨基磺酸鈉，腌制脫水原理）提高準確度。三氯乙酸的添加不僅能夠為衍生化反應(yīng)提供酸性條件，而且基于三氯乙酸能夠在不同pH值條件下都能夠沉淀蛋白質(zhì)的特性[7]，利用三氯乙酸能夠較充分地沉淀蛋白質(zhì)，容易釋放目標物。本方法的回收率范圍在82.37%～109.15%之間、RSD范圍在2.43%～5.02%之間方法的精密度和準確度比較好，此方法可以快速、高效、準確檢測食品中的環(huán)已基氨基磺酸鈉。

[1]汪鐵軍,陳國烽．毛細管柱氣相色譜法測定果凍中甜蜜素[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報.2010（3）208-210.

[2]張霞，王錫寧，張萍.毛細管氣相色譜法測定含奶油類冰淇淋等樣品中甜蜜素[J].預(yù)防學論壇2010（16）:248-250.

[3]鄧永利,周光明,羅振亞,等.離子色譜法直接測定牛奶中的甜蜜素[J].西南大學學報(自然科學版),2007,29(7):79.

[4]王敏,郭德華,韓麗,等.HPLC法快速分離和檢測食品中微量甜蜜素含量[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2007,17(8):1421·

[5]曹祥英.氣相色譜法測蛋白飲料中甜蜜素的試樣前處理方法探討[J].科技資訊，2007（4）:35-36.

[6]GB/T5009.97-2003食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉檢測方法[S].

[7]CHEUNG C K,MAK Y T,SWAMINATHAN R.Automated tri?chloroacetic acid precipitation method for urine total protein[J].Ann Clin Biochem.,1987,24:140-144.

Research of cyclamate detection method in food product

LIU Na，Zhamuzeren,WU Teng,CHANG Jianjun

(Inner Mongolia Mengniu Dairy Industrial Co.Ltd.,Hohhot 011517,China)

The paper established a method to detect cyclamate in food using capillary column-gas chromatograph.Sample of the said after taking place in the ice water bath,firstly adding sodium chloride and shaking,and the supernatant solution was added aqueous solution of tri?chloroacetic acid and aqueous sodium nitrite solution in ice bath,finally the target substance was extracted with n-hexane and detected by gas chromatography.The recoveries of the method was between 86.07%～109.33%,relative standard deviations between 3.16%～7.38%.The test results of this method are accurate and reliable.

cyclamate;trichloroacetic acid;gas chromatograph;capillary column

TS252.7

A

1001-2230（2017）08-0051-02

2016-12-13

劉娜（1986-），女，碩士研究生，從事乳品檢測方面的研究。