高效液相色譜法測定氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚含量

張蕾

摘 要：本文采用高校液相測定了氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量，固定相為：安捷倫Cl8（4.6mm×250mm，5um），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（5：10：85）為流動(dòng)相，檢測波長為249nm，流速1.0mL·min-1，柱溫：30℃。對乙酰氨基酚在10～60μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。對乙酰氨基酚的平均回收率為99.3%，RSD為0.66%（n=6）；此方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量測定。

關(guān)鍵詞：氨咖黃敏膠囊；對乙酰氨基酚；含量

氨咖黃敏膠囊為常用感冒藥。氨咖黃敏膠囊為復(fù)方制劑，由對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏、人工牛黃、淀粉、糊精、糖粉組成。氨咖黃敏膠囊用于感冒引起的鼻塞、頭痛、咽喉痛、發(fā)熱等。對乙酰氨基酚是非那西丁在體內(nèi)的代謝產(chǎn)生，其抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)前列腺素合成的作用與阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱，故解熱鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)，抗風(fēng)濕作用弱。本文采用高校液相測定了氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量。

1 儀器與試藥

HH-601超級恒溫水浴（江蘇金壇市億通電子有限公司）；PH-620高精度實(shí)驗(yàn)室酸度計(jì)（上海禾工科學(xué)儀器有限公司）；優(yōu)普杜伯特UP-DBT-IV實(shí)驗(yàn)室洗瓶機(jī)（西安優(yōu)普儀器設(shè)備有限公司）；QTSXR10260數(shù)控型超聲波清洗器（天津市瑞普電子儀器公司）；PTX-FA110萬分之一天平（上海鑫倉電子科技有限公司）；屹譜儀器U-1810準(zhǔn)雙光束紫外可見分光光度計(jì)（屹譜儀器制造（上海）有限公司）；Kertone實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)（科爾頓（中國）有限公司）；LC3000高效液相色譜儀（山東滕州市滕海分析儀器有限公司）。對乙酰氨基酚對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。乙腈（啟東市名成化工有限公司）、乙醇（南京維之誠化學(xué)試劑有限公司）、磷酸（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、甲醇（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、冰醋酸（濟(jì)南英出化工科技有限公司）、磷酸二氫鉀（啟東市名成化工有限公司）、三乙胺（南京維之誠化學(xué)試劑有限公司）。

2 含量測定

2.1 色譜條件：依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-5]。色譜柱為安捷倫Cl8規(guī)格為（4.6mm×250mm，5um）；乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（5：10：85）為流動(dòng)相；檢測波長為249nm。理論板數(shù)按對乙酰氨基酚峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2 供試品溶液的制備

取氨咖黃敏膠囊內(nèi)容物，精密稱取，加流動(dòng)相超聲處理10分鐘，放冷，濾過，濾液置50ml量瓶中，用流動(dòng)相分次洗滌容器和殘?jiān)?，洗液濾人同一量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取對乙酰氨基酚對照品約5mg，用流動(dòng)相溶解并稀釋成每1ml中含30μg的溶液，作為對照溶液。

2.4 陰性溶液的制備

依照處方取咖啡因、馬來酸氯苯那敏、人工牛黃、淀粉、糊精、糖粉，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，照供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測定，結(jié)果在對乙酰氨基酚出峰處陰性液無色譜峰，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為10、15、20、25、30、35、40、45、50、60μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。試驗(yàn)表明，對乙酰氨基酚對照品在10～60μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6 精密度試驗(yàn)

依照2.3項(xiàng)下制備對照品溶液，精密吸取對乙酰氨基酚對照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.89%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的氨咖黃敏膠囊樣品6份，按測定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.83%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)

依照2.2項(xiàng)下供試品制備方法制備供試品溶液，分別在0，2，4小時(shí)精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進(jìn)樣測定，供試品對乙酰氨基酚峰面積積分值的RSD為0.85%。結(jié)果表明對乙酰氨基酚至少在4小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。

2.9 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的對乙酰氨基酚對照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測定含量（同時(shí)測定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測定的平均回收率為99.3%，RSD為0.66%。

2.10 樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定氨咖黃敏膠囊三批樣品中對乙酰氨基酚的含量，含量為標(biāo)示量的100.1%、100.3%、99.1%。

3討論

分別考察乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（5：10：85），乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）（30∶70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（10：10：80），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH4.0）（10：10：80），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀緩沖液（含三乙胺0.5%，磷酸調(diào)pH至3.0）（20：80）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（5：10：85）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調(diào)節(jié)至pH3.0）（5：10：85）為流動(dòng)相。此方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量測定。氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量應(yīng)為標(biāo)示量的95-105%。

參考文獻(xiàn)

[1]蓋軻，鄭阿利.高效液相色譜法同時(shí)測定氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚和咖啡因的含量[J].中國藥房，2006（06）.

[2]肖海文，曾常青，張志福，許建峰，譚琦珊.氨咖黃敏膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的改進(jìn)研究[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2014（03）.

[3]劉洪海，劉維彬，李智慧，李海霞，竇靖怡.HPLC波長切換法測定氨咖黃敏膠囊4個(gè)成分的含量[J].中國藥師，2016（01）.

[4]王慧文，張士洋.氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚含量3種測定方法的比較[J].安徽醫(yī)藥，2005（05）.

[5]仇其原，鄧曉文，姚立娟.HPLC-PAD法同時(shí)測定精制銀翹解毒膠囊中對乙酰氨基酚、綠原酸、連翹苷和牛蒡苷的含量[J].藥學(xué)與臨床研究，2012（05）.