MQ-2000PT糖化血紅蛋白分析儀性能驗(yàn)證

朱延清 吳文新 吳文君 朱舜琦

215345江蘇省昆山市淀山湖人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

MQ-2000PT糖化血紅蛋白分析儀性能驗(yàn)證

朱延清 吳文新 吳文君 朱舜琦

215345江蘇省昆山市淀山湖人民醫(yī)院檢驗(yàn)科

目的：對(duì)MQ-2000PT全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀進(jìn)行性能驗(yàn)證。方法：按照CLIS EP15-A2文件進(jìn)行準(zhǔn)確度、精密度評(píng)價(jià)；按照WS/T 408-2012和402-2012文件進(jìn)行線性范圍和參考區(qū)間驗(yàn)證。結(jié)果：批內(nèi)、批間精密度均＜3%；20例健康成人HbA1c檢測值，結(jié)果在參考范圍內(nèi)19例，引用廠家的參考區(qū)間，在4.0%～6.0%為有效；溯源樣本1靶值5.3%，樣本2靶值8.7%，測得的偏離度均＜3%，準(zhǔn)確度驗(yàn)證通過。結(jié)論：MQ-2000PT糖化血紅蛋白分析儀具有重復(fù)性好、檢測結(jié)果準(zhǔn)確、分析速度快等特點(diǎn)，可定量檢測患者血液中糖化血紅蛋白的含量。

糖化血紅蛋白；高效液相色譜法；性能驗(yàn)證

根據(jù)《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》和《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》ISO 15189的規(guī)定，為保證臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確與可靠性，任何新的檢測系統(tǒng)在正式用于檢測時(shí)，發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告前，實(shí)驗(yàn)室需要對(duì)儀器的性能進(jìn)行驗(yàn)證[1，2]，檢查其是否符合廠家聲稱的性能。驗(yàn)證的主要內(nèi)容包括精密度、準(zhǔn)確性、線性、參考范圍等。國產(chǎn)惠中MQ-2000PT全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀采用經(jīng)典的陽離子高效液相色譜法檢測原理，在國內(nèi)用戶越來越多，但對(duì)該儀器的性能驗(yàn)證報(bào)道較少，現(xiàn)對(duì)我院使用該儀器進(jìn)行性能驗(yàn)證的結(jié)果分析如下。

資料與方法

儀器與試劑：MQ-2000PT全自動(dòng)糖化血紅蛋白分析儀，試劑為儀器配套試劑，批號(hào)PTHbA1c151106H。MAS糖化血紅蛋白質(zhì)控品，批號(hào)DBCL1606。其儀器廠家、性能參數(shù)，見表1。

標(biāo)本來源：收集本院門診和住院的患者標(biāo)本、健康體檢標(biāo)本，所有標(biāo)本均用EDTA-K2抗凝管采集。

方法：①精密度驗(yàn)證：a.批內(nèi)精密度：隨機(jī)選取高值、中值及低值新鮮病人全血各1份，用同一批次試劑盒測試。每個(gè)標(biāo)本連續(xù)重復(fù)測試20次，計(jì)算各標(biāo)本20次測試的(±s)和變異系數(shù)(CV)。b.批間精密度驗(yàn)證：檢測高、中2個(gè)濃度水平的MAS糖化血紅蛋白質(zhì)控品，分別連續(xù)測定20 d，每天檢測2批，每批檢測1次，計(jì)算20次測試的平均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。②線性驗(yàn)證：根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》對(duì)線性進(jìn)行驗(yàn)證[3]。收集高低值樣本(分別記為H和L)，按 5L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、5H的比例配成6個(gè)濃度樣本，每個(gè)重復(fù)檢測3次。每個(gè)稀釋樣本的預(yù)期值(由已知的高低濃度樣品值計(jì)算得到)為X軸作圖，計(jì)算相關(guān)系數(shù)r2≥0.95，且各濃度點(diǎn)的測定均值與預(yù)期值的相對(duì)偏倚應(yīng)≤10%。觀察結(jié)果有無明顯數(shù)據(jù)錯(cuò)誤，若有明顯異常時(shí)，應(yīng)判斷離群點(diǎn)。全部數(shù)據(jù)中的離群點(diǎn)如果≥2點(diǎn)，應(yīng)重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。③參考區(qū)間驗(yàn)證：根據(jù)中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》小樣本驗(yàn)證方案[4]，收集正常健康人20例(無已知疾病、無用藥史、體重在健康范圍的人)樣本及時(shí)檢測，對(duì)參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證，只允許10%的數(shù)據(jù)超過所驗(yàn)證的參考范圍。如≥3個(gè)測定值超出，則需重新篩選20例，重復(fù)上述操作。R=(測定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)/總測定例數(shù))×100%，R≥90%為通過。④準(zhǔn)確度：測量2個(gè)有美國國家糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃(NGSP)溯源樣本，該樣本由上海惠中醫(yī)療科技有限公司提供，樣本1靶值5.3%，樣本2靶值8.7%，每個(gè)樣本測定5次，計(jì)算2個(gè)樣本的平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)、偏離度(B)。偏離度B≤±8%可以接收。測量樣本平均值；x：樣本靶值。

結(jié) 果

精密度驗(yàn)證結(jié)果：批內(nèi)、批間精密度CV值均小于判斷標(biāo)準(zhǔn)，精密度較好，見表2、表3。

線性驗(yàn)證值：線性測試回歸曲線，見圖1。

檢測糖化血紅蛋白的上下限均呈線性，相對(duì)偏倚≤10%，r2≥0.95，符合驗(yàn)證要求，見表4。

參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果：20例健康成人HbA1c檢測值：19例結(jié)果在參考范圍內(nèi)，R95%，引用廠家的參考區(qū)間在4.0%～6.0%為有效，見表5。

準(zhǔn)確度驗(yàn)證通過，見表6。

表1 廠家說明書參數(shù)

表2 批內(nèi)精密度

表3 批間精密度(±s)

表3 批間精密度(±s)

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圖1 HbA1c線性測試回歸曲線圖(單位：%)

表4 線性驗(yàn)證數(shù)據(jù)(%)

討 論

糖化血紅蛋白是血紅蛋白與糖類經(jīng)非酶促反應(yīng)結(jié)合而成的，生成的量與血糖的濃度和高血糖存在的時(shí)間相關(guān)。糖化血紅蛋白反映的是檢測前120d平均血糖水平，較空腹血糖和口服葡萄糖耐量試驗(yàn)有獨(dú)特的優(yōu)越性，并且與患者是否空腹、抽血時(shí)間、是否使用胰島素等因素?zé)o關(guān)[5]。HbA1c在糖尿病患者篩查、血糖控制效果評(píng)價(jià)、并發(fā)癥預(yù)防以及鑒別糖尿病性高血糖和應(yīng)激性高血糖等方面發(fā)揮著巨大的作用[6]，2010年美國糖尿病協(xié)會(huì)(ADA)將其列為糖尿病的首選診斷指標(biāo)[7]。離子交換高效液相色譜法(HPLC)具有快速、準(zhǔn)確、精密度高和特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，被美國、瑞典等國家確定為HbA1c標(biāo)準(zhǔn)化系統(tǒng)的參考方法，并成為HbA1c檢測公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)[8]，

在實(shí)驗(yàn)室實(shí)際條件下，用實(shí)驗(yàn)去證實(shí)該儀器檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性、可靠性，與廠商提供的資料一致才能將此系統(tǒng)用于臨床檢驗(yàn)[9]。精密度是指測量程序在相同條件下，對(duì)同一樣本進(jìn)行連續(xù)多次檢測所得結(jié)果之間的一致性，通過批內(nèi)、批間精密度測定表明該檢測系統(tǒng)達(dá)到要求。精密度是反映儀器整體性能的首要指標(biāo)，是進(jìn)行其他項(xiàng)目驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的前提[10]。本次實(shí)驗(yàn)在確認(rèn)檢測系統(tǒng)精密度符合要求的基礎(chǔ)上進(jìn)行了線性、參考范圍、準(zhǔn)確度驗(yàn)證，均符合廠家聲明的參數(shù)。批內(nèi)、批間精密度CV值均＜2%，精密度好，可以保證檢驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定。參考范圍按照中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)：臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間里的內(nèi)容，制定了小樣本驗(yàn)證方案，驗(yàn)證通過。準(zhǔn)確度采用EP-15A2的驗(yàn)證方案，樣本由上海惠中醫(yī)療科技有限公司提供的具有NGSP溯源樣本進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證通過。根據(jù)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》對(duì)線性進(jìn)行驗(yàn)證，線性回歸方程y=1.005 70.370 1，r2=0.994 8，呈線性。我國新版《2型糖尿病防治指南(2013年版)》建議[11]，暫不推薦在我國將HbA1c作為糖尿病的診斷切點(diǎn)，但對(duì)于采用標(biāo)準(zhǔn)化檢測方法，有嚴(yán)格的質(zhì)量控制才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，對(duì)儀器進(jìn)行全面的性能驗(yàn)證、評(píng)價(jià)顯得非常重要。

性能驗(yàn)證是一個(gè)復(fù)雜過程，驗(yàn)證前要詳細(xì)制定計(jì)劃，要考慮所用的樣本、檢測批次時(shí)間的選定、分析結(jié)果的方法、接受結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)等。通過各項(xiàng)性能驗(yàn)證的結(jié)果，惠中MQ2000PT糖化血紅蛋白儀檢測糖化血紅蛋白的精密度、線性、參考范圍、準(zhǔn)確度驗(yàn)證均符合廠家聲明要求，實(shí)驗(yàn)證明其檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、吸樣量少、分析速度快、重復(fù)性好，可以滿足臨床需求。分析驗(yàn)證的數(shù)據(jù)，使檢驗(yàn)結(jié)果在對(duì)病人的診斷和治療中具有可比性。

[1]ISO15189.醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則[S].中國合格評(píng)定國家認(rèn)可委員會(huì),2008：1-36.

[2]畢波,呂元.定量檢測方法學(xué)性能驗(yàn)證的系統(tǒng)設(shè)計(jì)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(2)：143-145.

[3]中國人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T 408-2012).臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南[S].

[4]中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(WS/T402-2012).臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定[S].

表5 20例健康成人HbA1c檢測值

表6 準(zhǔn)確度樣本驗(yàn)證(±s)

表6 準(zhǔn)確度樣本驗(yàn)證(±s)

HbA1c ±s CV(%) x B(%) 判斷標(biāo)準(zhǔn) 評(píng)價(jià)結(jié)果樣本1 5.18±0.045 0.87 5.3 2.26 B≤8% 通過樣本2 8.56±0.055 0.64 8.7 1.61 B≤8% 通過

[5]王麗娟,紀(jì)立農(nóng).國際專家委員會(huì)關(guān)于糖化血紅蛋白檢測在糖尿病診斷中的作用的報(bào)告[J].中國糖尿病雜志,2009,17(8)：563-568.

[6]Home P,Haddad J,Latif Z A,et al.Comparison of National/Regional Diabetes Guidelines for the Management of Blood Glucose Control in non-Western Countries[J].Diabetes Ther,2013,4(1)：91-102.

[7]王冬環(huán),陳文祥,張傳寶,等.糖化血紅蛋白實(shí)驗(yàn)室檢測指南[J].中國糖尿病雜志,2013,21(8)：673-678.

[8]Little RR,Rohlfing CL,Sacks DB.Status of hemoglobin A1c measurement and goals for improvement：from chaos to order for improving diabetes care[J].Clin Chem,2011：57(2)205-214.

[9]張葵.定量檢測系統(tǒng)方法學(xué)性能驗(yàn)證的基本方法[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2009,27(5)：321-323.

[10]賀巖,崔學(xué)強(qiáng),杜宗孝.BIO-RAD VARIANTⅡ測定糖化血紅蛋白的性能評(píng)價(jià)及其在糖尿病篩查中的應(yīng)用[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2015,37(4)：474-477.

[11]中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì).中國2型糖尿病防治指南(2013年版)[J].中華糖尿病雜志,2014,6(7)：447-498.

Performance verification of MQ-2000PT glycosylated hemoglobin analyzer

Zhu Yanqing,Wu Wenxin,Wu Wenjun,Zhu Shunqi
Department of Clinical Laboratory,the People's Hospital of Dianshan Lake,Kunshan City,Jiangsu Province 215345

Objective：The performance of MQ-2000PT automatic hemoglobin analyzer was verified.Methods：We evaluted the accuracy and precision according to the CLIS EP15-A2 document.We validated the linear range and the reference interval according to the WS/T 408-2012 and 402-2012 files.Results：The intra-and inter-batch precision was less than 3%.HbA1cvalues of 20 healthy adults were measured and 19 cases within the reference range,the reference to the manufacturer's reference range from 4.0%to 6.0%effective.The target value of traceability sample 1 was 5.3%,and sample 2 was 8.7%,and the deviation was less than 3%,the accuracy was verified by.Conclusion：MQ-2000PT glycosylated hemoglobin analyzer has the characteristics of good repeatability,accurate detection and rapid analysis.It can quantitatively detect the content of glycosylated hemoglobin in the blood of patients.

Glycosylated hemoglobin;High performance liquid chromatography;Performance verification

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.24.67