不同基質(zhì)對(duì)低溫保鮮人參的影響

賈璐璐+李瓊+王慧斌+許永華

[摘要] 該文以鮮人參為試驗(yàn)材料，利用采收地土壤、蛭石、珍珠巖和蛭石與珍珠巖1∶1處理， 以室外生長(zhǎng)人參為對(duì)照，在4 ℃保鮮處理6個(gè)月，測(cè)定人參體內(nèi)SOD，POD酶活、人參皂苷及蛋白含量，考察不同貯藏介質(zhì)對(duì)人參保鮮貯藏的影響。研究結(jié)果表明：采用珍珠巖保鮮處理，貯藏6個(gè)月后人參的外觀品相完好，且具有成活能力，SOD，POD活性較低，皂苷及蛋白得以有效貯存。利用珍珠巖在4 ℃保存，人參所受逆境侵害較小，是適宜鮮參貯藏運(yùn)輸?shù)臈l件。

[關(guān)鍵詞] 人參；保鮮；貯藏；珍珠巖

[Abstract] The SOD and POD enzyme activities were detected， ginseng saponin content and protein concentration at 4 ℃ preservation on fresh ginseng by different substrates were determined. The results showed that the appearance of the ginseng and the survival ability were good after six months by perlite preservation. It has lower SOD， POD enzyme activity and higher saponins and protein contention. It is the best fresh storing conditions for ginseng by using perlite at 4 ℃ preservation.

[Key words] ginseng；freshness；storage；pearlite

人參Panax ginseng C.A.Mey.是五加科人參屬重要藥用植物。具有大補(bǔ)元?dú)?、補(bǔ)脾益肺、安神益智、生津等功效[1]。人民生活水平的不斷提高以及對(duì)綠色食品的向往，對(duì)產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量要求也就愈來(lái)愈高，隨著我國(guó)與國(guó)際接軌的形勢(shì)要求，越來(lái)越要求色、形、味和成分含量俱佳的保鮮人參[2]，該文研究了不同基質(zhì)處理對(duì)貯藏鮮人參SOD，POD，人參皂苷，蛋白含量的變化規(guī)律，為延長(zhǎng)鮮參的貨架期提供基礎(chǔ)研究，為日益增大的鮮人參市場(chǎng)提供技術(shù)支撐。

1 材料

蛭石、珍珠巖、色譜乙腈、色譜甲醇、無(wú)水乙醇、磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）、雙蒸水、試劑盒。

人參來(lái)自于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)藥用植物園種植的六年生人參，經(jīng)吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)張連學(xué)教授鑒定為五加科人參屬人參P. ginseng，為“大馬牙”農(nóng)家類型。于2015年10月25日采挖后置于潮濕土壤中保存?zhèn)溆谩?/p>

儀器有島津色譜工作站LC solution、紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀、組織研磨儀、分析天平、低溫離心機(jī)、人工培養(yǎng)箱、恒溫鼓風(fēng)干燥箱、漩渦混勻器、水浴鍋。

2 方法

2015年11月2日，將人參從種植地取出，在土壤，珍珠巖-蛭石1∶1，珍珠巖，蛭石4種不同基質(zhì)中，4 ℃下進(jìn)行保鮮貯藏。至2016年5月3日截止，以2016年5月3日在吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)藥用植物園采收的人參為對(duì)照組，于2016年5月4日，測(cè)定人參的地下部分及萌發(fā)莖葉中SOD，POD酶和人參皂苷、蛋白含量。

粗酶液的制備：取人參試驗(yàn)部分1.00 g經(jīng)低溫冷凍研磨后加0.1 mol·L^-1磷酸鹽緩沖液稀釋（pH 7.4）到10%。充分混勻提取20 min，4 ℃條件下3 800 r·min^-1，離心15 min，取上清液為粗酶液。

2.1 SOD（超氧化物歧化酶）活性的測(cè)定 SOD（超氧化物歧化酶）試劑盒應(yīng)用WST-1法：取粗酶液10 μL加入990 μL的磷酸鹽緩沖液，稀釋完成后充分混勻，測(cè)定孔和測(cè)定空白孔分別加入20 μL的待測(cè)樣本，對(duì)照孔和對(duì)照空白孔分別加入20 μL雙蒸水，對(duì)照孔和測(cè)定孔分別加入20 μL的酶工作液，對(duì)照孔和對(duì)照空白孔分別加入20 μL酶稀釋液，測(cè)定孔、測(cè)定空白孔、對(duì)照孔、對(duì)照空白孔分別加入200 μL底物應(yīng)用液?；靹?，37 ℃孵育20 min，波長(zhǎng)450 nm，酶標(biāo)儀測(cè)定其吸光度。

2.2 POD（過(guò)氧化物酶）活性的測(cè)定 POD（過(guò)氧化物酶）試劑盒采用愈創(chuàng)木酚法：對(duì)照管分別加入緩沖液2.4 mL、促進(jìn)劑0.3 mL、測(cè)定管加底物0.2 mL、對(duì)照管加雙蒸水0.2 mL，對(duì)照管和測(cè)定管分別加入粗酶液0.1 mL。測(cè)定管和對(duì)照管均在37 ℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)30 min。然后測(cè)定管和對(duì)照管分別加入顯色劑1.0 mL。充分混勻后，3 500 r·min^-1離心10 min，取上清液在420 nm下，1 cm光徑，雙蒸水調(diào)零，測(cè)定各管吸光度，并進(jìn)行比較分析。

2.3 皂苷檢測(cè) 人參根樣品乙醚抽脂，利用索氏提取法80 ℃甲醇提取12 h，每秒1～2滴，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓回收甲醇，色譜甲醇定容至8 mL，以Rg₁，Re，Rf，Rb₁，Rg₂，Rc，Rb₂，Rb₃，Rd為對(duì)照品，HPLC分析，進(jìn)樣量10 μL。Diamonsil C₁₈色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；柱溫 50 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng) 203 nm，流速1 mL·min^-1，流動(dòng)相：乙睛-水梯度洗脫，0～3 min，28%乙腈；3～5 min，28%～30%乙腈；5～9 min，30%～35%乙腈；9～22 min，35%～37%乙腈；22～23 min，37%～28%乙腈；23～30 min，28%乙腈。

2.4 蛋白質(zhì)含量檢測(cè) 蛋白質(zhì)濃度試劑盒應(yīng)用考馬斯亮藍(lán)法：空白管加雙蒸水0.05 mL，標(biāo)準(zhǔn)管加入0.05 mL蛋白對(duì)照品，測(cè)定管加入0.05 mL粗酶液，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管分別加入考馬斯亮藍(lán)顯色液3.0 mL，充分混勻，靜置10 min，波長(zhǎng)595 nm，光徑1 cm，雙蒸水調(diào)零，測(cè)定各管吸光度。

3 結(jié)果與分析

從2015年11月開(kāi)始，通過(guò)在土壤，珍珠巖和蛭石混合物，珍珠巖，蛭石4種不同基質(zhì)4 ℃條件下貯藏，2016年5月進(jìn)行觀察測(cè)定。所有試驗(yàn)人參的外觀完好無(wú)損，芽孢和幼苗生長(zhǎng)良好。

3.1 SOD，POD活性變化 通過(guò)測(cè)定SOD，POD 酶的變化，考察不同保鮮處理對(duì)于SOD，POD酶活性的影響，結(jié)果見(jiàn)表1。

結(jié)果表明：采用土壤保鮮處理的人參根部SOD活性顯著大于其他處理，且處理組SOD酶活性均大于室外生長(zhǎng)人參，其SOD酶活性大小為：土壤>蛭石珍珠巖>蛭石>珍珠巖>對(duì)照組；土壤中貯藏的人參根的POD活性最高，正常室外生長(zhǎng)的人參根的POD活性最低。珍珠巖>對(duì)照組>蛭石>土壤>蛭石珍珠巖。萌發(fā)的莖葉測(cè)定結(jié)果顯示，正常室外條件下幼苗的SOD活性最高，蛭石條件下幼苗的SOD活性最低。其SOD酶活性大小為：對(duì)照組>土壤>珍珠巖>蛭石珍珠巖>蛭石。

SOD，POD為植物保護(hù)酶類，當(dāng)植物受到逆境侵害時(shí)，保護(hù)酶活性會(huì)顯著升高。對(duì)于人參主根來(lái)說(shuō)，任何保鮮過(guò)程都是對(duì)主根造成一種逆境傷害。珍珠巖保鮮能夠降低人參在保鮮過(guò)程中所受逆境程度，降低保鮮過(guò)程中活性氧的產(chǎn)生，而對(duì)于人參莖葉，任何保鮮處理均能降低人參莖葉生長(zhǎng)發(fā)育；同時(shí)能夠降低人參生長(zhǎng)活性，故在人參保鮮過(guò)程中應(yīng)適當(dāng)采用珍珠巖作為保鮮材料。

3.2 皂苷含量 通過(guò)測(cè)定人參皂苷的變化，考察不同保鮮處理對(duì)于皂苷成分含量的影響，色譜條件顯示分離效果滿足測(cè)定要求，按照保留時(shí)間（min）依次為Rg₁（5.697），Re（5.946），Rf（13.497），Rb₁（14.671），Rg₂（16.325），Rc（16.715），Rb₂（18.085），Rb₃（18.554），Rd（23.955），色譜圖見(jiàn)圖1，標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)表2。

均符合藥典規(guī)定，珍珠巖保鮮處理皂苷含量最高，土壤保鮮皂苷含量最低，其皂苷含量大小為，珍珠巖>對(duì)照組>蛭石珍珠巖>蛭石>土壤，分析認(rèn)為，珍珠巖保鮮可以有效抑制人參有效物質(zhì)分解，室外人參可以有效生長(zhǎng)，吸收成分，轉(zhuǎn)化營(yíng)養(yǎng)，含量次之，土壤保鮮人參消耗自身成分，故含量最低，所以利用珍珠巖保鮮極具價(jià)值，這與酶活測(cè)定結(jié)果一致。

3.3 蛋白質(zhì)濃度 通過(guò)測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的變化，考察儲(chǔ)藏條件對(duì)于蛋白代謝的影響，分測(cè)3次取平均值，結(jié)果見(jiàn)表4。

結(jié)果顯示，室外生長(zhǎng)的人參根的蛋白濃度最高，土壤中人參根的蛋白濃度最低，對(duì)照組>蛭石>珍珠巖>蛭石珍珠巖>土壤?？赡苡捎谑彝馕震B(yǎng)分轉(zhuǎn)化自身成分致使含量增加，蛭石能夠抑制在儲(chǔ)存過(guò)程中蛋白質(zhì)的分解，與上述珍珠巖最佳的結(jié)論有所差異，但這可能與逆境情況下人參體內(nèi)能源物質(zhì)氧化功能有關(guān)，其機(jī)制還需進(jìn)一步研究。對(duì)于幾種保鮮方式來(lái)說(shuō)，雖然蛭石略高于珍珠巖，但二者含量差異不大，故從蛋白含量考慮，采用珍珠巖仍然有效。

4 結(jié)論與討論

人參因其良好的藥食兩用價(jià)值而聞名于世，是我國(guó)名貴中藥材。人參在工業(yè)應(yīng)用較為廣泛，以人參為主要原料的有藥制品、日用品、化妝品、食用保健品等。但是由于新鮮人參容易腐爛，所以大大地增加了人參制品的應(yīng)用成本以及增加了人參應(yīng)用的困難。因此，本研究采用不同的基質(zhì)低溫保鮮技術(shù)對(duì)人參進(jìn)行處理，抑制人參腐敗微生物和生理活性，增加人參的應(yīng)用范圍，開(kāi)發(fā)出低溫有效的保鮮方法，保證人參的品質(zhì)，為新鮮人參應(yīng)用提供一定的理論基礎(chǔ)。

在4種基質(zhì)貯藏條件下，人參的外觀品相完好，生長(zhǎng)良好，11月初采收到第2年5月，SOD，POD活性中根部變化都以帶土保鮮人參中最高，2016年5月在吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)藥用植物園采收測(cè)人參的活性最低，說(shuō)明土壤保鮮逆境影響最大，珍珠巖最低，逆境影響最小。以珍珠巖為基質(zhì)保鮮的人參中皂苷、蛋白含量較高，參體外觀品相完好，生長(zhǎng)良好，且珍珠巖經(jīng)濟(jì)易得，所以本研究對(duì)延長(zhǎng)人參的貨架期提供了良好的參數(shù)。為鮮人參進(jìn)一步應(yīng)用提供了研究基礎(chǔ)。故以珍珠巖在4 ℃保藏，可以作為鮮參貯藏的首選條件。

人參保鮮貯藏方法的一直是人參研究的熱點(diǎn)之一。劉強(qiáng)等對(duì)人參貯藏工藝的研究表明，保溫層保溫厚度0.75 cm，密閉層為3層，降溫變化速度為每小時(shí)0.2 ℃、貯藏冷凍時(shí)間為40 d。升溫變化速度為每小時(shí)0.2 ℃升至4 ℃進(jìn)行低溫儲(chǔ)藏的鮮人參，漿氣飽滿、色黃白、栽培成活率95%[3]。趙英等應(yīng)用蜂膠生物保鮮劑對(duì)鮮人參進(jìn)行保鮮貯藏，鮮人參的貯存可達(dá)1年以上，人參的氣味、色澤、包裝情況均無(wú)明顯變化；人參皂苷和氨基酸總量與鮮人參的含量差異不明顯。細(xì)菌分析符合國(guó)家衛(wèi)生法規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)[4]。本研究只是在同一時(shí)間進(jìn)行了SOD，POD酶活，皂苷與蛋白含量的檢測(cè)，后期還要進(jìn)行不同時(shí)間、溫度、濕度、人參與介質(zhì)配比以及抑菌的相關(guān)研究，以進(jìn)一步優(yōu)化貯藏條件。但目前真正意義上讓人參保持生理活性，并且持續(xù)生長(zhǎng)發(fā)育長(zhǎng)達(dá)7個(gè)月之久的方法并未見(jiàn)報(bào)道。

[參考文獻(xiàn)]

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[2] 周錫龍，陸麗.鮮藥的歷史沿革、現(xiàn)狀與對(duì)策[J].基層中藥雜志，2001（6）：58.

[3] 劉強(qiáng)， 丁麗潔， 張達(dá)正，等. 鮮人參儲(chǔ)藏工藝研究[J].人參研究，2013， 25（1）：25.

[4] 趙英，蔡榮春，范廣志，等.鮮人參生物保鮮技術(shù)研究[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù)，1995（2）：36.

[責(zé)任編輯 呂冬梅]