松樹皮中原花青素的提取及抗氧化作用研究

孔德冰

【摘 要】松樹皮中的提取物質(zhì)作為天然抗氧化劑已成為當(dāng)前研究的主要課題之一。本試驗以松樹皮為原料，采用超聲波輔助鹽酸-乙醇浸取法對原花青素進(jìn)行提取，以原花青素的提取量為評價指標(biāo)，研究超聲波作用時間、料液比、提取溫度和提取時間對原花青素提取量的影響。以花生油的過氧化值（POV）為評價指標(biāo)，探索原花青素花生油的抗氧化作用。試驗結(jié)果表明，原花青素花生油均有一定的抗氧化作用。

【關(guān)鍵詞】松樹皮；原花青素；提取；抗氧化

松樹皮，分布極廣種類多，多數(shù)生長于我國的東北及華北地區(qū)，含有40種有效成分，其中以水溶性極高的原花青素居多。近年來隨著人們對黃酮類活性物質(zhì)的研究加深，松樹皮的研究也愈來愈多，其高含量的抗氧化活性物質(zhì)使松樹皮提取物具有得天獨厚的優(yōu)勢，其中抗氧化活性物質(zhì)可應(yīng)用于諸如化妝品、食品等多個領(lǐng)域。松樹皮藥用價值高，具有散熱解暑，溫中止血，回陽通脈，燥濕消痰的功效。

一、材料與方法

（一）原材料

松樹皮，購于淘寶，產(chǎn)地吉林長白山，無蟲害、無糜爛；

豬油，購于澤航家農(nóng)產(chǎn)品，正常肥豬肉煎制，不含任何添加劑；

胡姬花牌花生油，購于康樂購超市，產(chǎn)地山東青島。

（二）試驗方法

1.工藝流程

新鮮樹皮→預(yù)處理→超聲波乙醇浸提→過濾→2次浸提→合并濾液→減壓濃縮→色素濃縮液→測定吸光度→計算提取量

2.原花青素的提取

取一定量的松樹皮，切成小塊，在55℃下烘干過夜后將干松樹皮片磨成粉末，粉末用60目篩過篩備用。

稱取2g粉末，置于250mL錐形瓶中，按一定量的料液比加入提取劑（鹽酸：乙醇（V：V）=1：9，鹽酸為2M），超聲波作用一定時間后，在一定水浴溫度下提取一定的時間，之后按提取流程進(jìn)行吸光度測定。

原花青素提取量（mg/g）=1000AV/abm。其中：A為吸光度；V為濃縮液的體積；a為原花青素的吸光系數(shù)（0.0775L/（g.cm））；b為液層厚度（1cm）；m為樣品質(zhì)量。

3.豬油和花生油過氧化值的檢測

在50g豬油和花生油中分別加入1%的松樹皮原花青素濃縮液，充分搖勻，對照組不加濃縮液，置于室溫下，分別于第0d，第3d，第6d，第9d，第12d測量豬油和花生油的過氧化值，并進(jìn)行空白檢測。過氧化值檢測方法如下：精密稱取油脂2-3g并注入250mL錐形瓶中，水浴中加熱溶解，加入氯仿-冰乙酸混合物30mL，立即震蕩并溶解。加入飽和碘化鉀1mL，在暗處放置3min，取出后加水5mL，搖勻后立即用0.005M硫代硫酸鈉進(jìn)行滴定至淡黃色，加淀粉指示劑1mL，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失為止，記錄使用的硫代硫酸鈉的體積為V1，同時做不加油脂的空白試驗記錄使用的硫代硫酸鈉體積為V2，平行三次試驗。

過氧化值的計算： POV=（V1-V2）×0.005×0.1269/m×100

式中：V1-三次試驗中消耗硫代硫酸鈉的平均值；V2-三次試驗中空白對照消耗硫代硫酸鈉的平均值；0.005-硫代硫酸鈉的濃度；0.1269-消耗1mL硫代硫酸鈉相當(dāng)、于碘的量；m-試樣質(zhì)量。

（三）單因素試驗

通過對乙醇提取原花青素工藝的研究，以原花青素提取量為評價標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行單因素試驗，對超聲波作用時間、料液比、提取溫度和提取時間四個因素對原花青素提取量的影響進(jìn)行研究。

1.超聲波作用時間對提取量的影響

采用超聲波作用時間為5min、10 min、15 min、20 min、25 min共5個時間。按1：15加入提取劑，55℃水浴中提取2h，抽濾后濾渣進(jìn)行2次浸提濾渣，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標(biāo)進(jìn)行評定。

2.料液比對提取量的影響

分別按照料液比為1：10、1：15、1：20、1：25、1：30的比例加入提取劑，選用最佳超聲波作用時間，55℃水浴中提取2h，抽濾后濾渣進(jìn)行2次浸提，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標(biāo)進(jìn)行評定。

3.提取溫度對提取量的影響

采用提取溫度（水浴溫度）45℃、50℃、55℃、60℃和65℃，最佳超聲波作用時間和最佳料液比進(jìn)行試驗，水浴中提取2h，抽濾后濾渣進(jìn)行2次浸提濾渣，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標(biāo)進(jìn)行評定。

4.提取時間對提取量的影響

采用提取時間為1.0h、1.5h、2.0h、2.5h和3.0h 共5個配比，按照上述三個單因素的最佳條件進(jìn)行提取，抽濾后濾渣進(jìn)行2次浸提濾渣，合并濾液，減壓濃縮得到較為純凈的原花青素。以提取量為評價指標(biāo)進(jìn)行評定。

二、花生油過氧化值的檢測結(jié)果

圖1反映的是未添加原花青素的空白組和添加1%原花青素的對照組在時間作用下POV值的變化。由該圖可知，隨著時間的增長，添加原花青素的花生油明顯比未添加原花青素的花生油的POV值更低，說明其被氧化的程度更低；并且隨著時間的延長，原花青素的抗氧化作用越來越明顯。因此，原花青素對花生油有著一定的抗氧化作用。

三、結(jié)論

本試驗是以松樹皮為原料，采用鹽酸-乙醇作為提取劑，以原花青素的提取量為評價指標(biāo)，探索原花青素的最佳提取工藝。通過試驗，得到最佳的提取工藝條件為：超聲波作用時間為20min，料液比為1：25，提取溫度為55℃，提取時間為3h，在該工藝條件下原花青素的提取量可以達(dá)到3.0mg/g。將原花青素用于花生油的抗氧化試驗中發(fā)現(xiàn)，添加原花青素的油脂比起未添加的油脂明顯被氧化的程度更低，說明原花青素對油脂有一定的抗氧化作用。

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