脈血康軟膠囊對缺血性腦卒中病人MMP-9、Hcy表達的影響

胡 萍，牛建平，宋葉華，彭瑞強，徐 娜，張奕文，陳新僑

脈血康軟膠囊對缺血性腦卒中病人MMP-9、Hcy表達的影響

胡 萍，牛建平，宋葉華，彭瑞強，徐 娜，張奕文，陳新僑

目的 觀察脈血康軟膠囊對缺血性腦卒中病人血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、同型半胱氨酸(Hcy)的影響。方法 入組病人67例，隨機分為試驗組(35例)和對照組(32例)，另選30名健康人作為健康組，觀察所有研究對象第1天、第7天和第14天的MMP-9、Hcy及美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分變化。結(jié)果 試驗組和對照組組內(nèi)第7天、第14天和第1天MMP-9水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；試驗組和對照組組間第7天MMP-9水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.018)。試驗組與對照組第1天Hcy水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但均高于健康組；兩組與健康組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其水平均在正常范圍內(nèi)，兩周內(nèi)呈逐漸下降的趨勢；試驗組和對照組組間第7天Hcy水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.012)；與健康組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。血清Hcy水平與NIHSS評分進行相關(guān)性檢驗，r=0.507，P=0.002；r=0.206，P=0.025。結(jié)論 MMP-9、Hcy在缺血性腦卒中病人明顯升高，呈動態(tài)變化，其中Hcy水平增高和單核細胞表面TLR4高表達與缺血性腦卒中嚴重程度密切相關(guān)，MMP-9水平的變化與腦卒中的評分表現(xiàn)出一致性，但差異無統(tǒng)計學意義。脈血康軟膠囊可降低MMP-9、Hcy水平，改善缺血性腦卒中病人的臨床癥狀。

缺血性腦卒中；脈血康軟膠囊；美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表；基質(zhì)金屬蛋白酶-9；同型半胱氨酸

腦卒中是臨床上常見的腦血管病，在統(tǒng)計學上列為死亡的第三大原因[1]。腦卒中病人約80%是缺血性腦卒中。至今沒有發(fā)現(xiàn)一類生物標志物具有足夠的靈敏度和特異性應用缺血性腦卒中的臨床診斷或在臨床運用。大量研究證明基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)是缺血性腦卒中發(fā)病和死亡的危險因素，且這些指標日益引起關(guān)注。國內(nèi)外研究對其研究多以基礎(chǔ)研究為主，臨床應用及報道較少。

脈血康軟膠囊主要活性成分為水蛭素。水蛭素是高度特異性凝血酶抑制劑，能阻止纖維蛋白原活化和纖維蛋白凝固，抑制血小板結(jié)合血管內(nèi)皮膠原蛋白，抑制血小板黏附和聚集[2]。本研究觀察急性缺血性腦卒中病人第1天、第7天和第14天MMP-9、Hcy及美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)評分變化，在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用脈血康軟膠囊治療，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年6月—2015年12月廈門市第二醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院病人67例，所有病例均符合全國第四屆腦血管病學術(shù)會議標準(1995)和中國缺血性卒中亞型大動脈粥樣硬化性腦梗死診斷標準。隨機分為兩組，試驗組35例，男22例，女13例，年齡66.79歲±6.64歲；對照組32例，男19例，女13例，年齡64.97歲±4.82歲。選取同期在我科門診健康體檢者30名作為健康組，男17名，女13名，年齡30.84歲±4.57歲。

1.2 納入和排除標準 納入標準：年齡41歲～75歲；首發(fā)卒中；發(fā)病到入院≤3 d；NIHSS評分1分～15分。排除標準：溶栓病人；合并有明顯肝、腎或心功能衰竭病人發(fā)病前后有炎性感染性疾病病人；風濕免疫系統(tǒng)疾病及腫瘤；近3個月內(nèi)患有血管閉塞性疾??；病人同意入組但不簽署知情同意書。

1.3 治療方法 所有病人均按照《中國腦血管病防治指南》進行基礎(chǔ)治療，具體療程14 d。對照組：丹參酮(批號：國藥準字H31022558，上海第一生化藥業(yè)有限公司)30 mg，靜脈輸注，每日1次；依拉達奉注射液(批號：國藥準字H20080056，國藥集團國瑞藥業(yè)有限公司)30 mg，靜脈輸注，每日2次。試驗組：在對照組治療基礎(chǔ)上加用脈血康軟膠囊(批號：國藥準字Z20033197，貴州信邦制藥股份有限公司)，每次3粒，每日3次，餐后口服。

1.4 觀察指標 觀察兩組病人第1天、第7天和第14天MMP-9、Hcy及NIHSS評分變化及健康組上述指標的基礎(chǔ)值。ELISA檢測MMP-9(Catalog Number：SMP900，RD)，嚴格按照實際說明操作；Hcy由檢驗科

專業(yè)技師完成。

1.5 不良反應 兩組病人在治療過程中有無出血、過敏、休克等不良反應。

2 結(jié) 果

2.1 各組一般資料比較 各組年齡、性別、NIHSS評分、血壓、血脂等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。詳見表1。

表1 各組一般資料比較

2.2 3組MMP-9水平比較 試驗組和對照組MMP-9水平兩周內(nèi)呈逐漸下降的趨勢，兩組組內(nèi)第7天、第14天和第1天MMP-9水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兩組組間比較，試驗組第1天與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=0.603，P=0.551)；兩組第1天分別與健康組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。試驗組第7天MMP-9水平低于對照組，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(t=2.500，P=0.018)；試驗組第14天MMP-9水平低于對照組，與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(t=1.223，P=0.230)；但兩組第14天MMP-9水平與健康組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。詳見表2。

組別n第1天第7天第14天試驗組3510.04±3.652)7.45±1.481)3)5.06±1.371)對照組3210.58±3.952)8.95±3.301)5.40±1.461)健康組304.71±1.54 與同組第1天比較,1)P<0.05;與健康組比較,2)P<0.05;與對照組第7天比較,3)P<0.05。

2.3 3組血清Hcy水平比較 試驗組和對照組血清Hcy水平基本在正常范圍內(nèi)，且在兩周內(nèi)呈逐漸下降的趨勢，第1天、第7天Hcy水平均高于健康組，分別與健康組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。試驗組和對照組組內(nèi)第7天、第14天和第1天Hcy水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。試驗組第14天Hcy水平基本接近健康組，與健康組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；對照組第14天Hcy水平高于健康組，與健康組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。試驗組與對照組第1天組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=0.290，P=0.774)，第7天組間比較，差異有統(tǒng)計學意義(t=2.660，P=0.012)，第14天組間比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=1.670，P=0.105)。詳見表3。

表3 3組血清Hcy水平比較(±s) mg/L

2.4 試驗組和對照組NHISS評分比較 試驗組和對照組NIHSS評分2周內(nèi)均呈下降趨勢，兩組組內(nèi)第7天、第14天和第1天NIHSS評分比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；兩組組間NIHSS評分第1天比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=1.028，P=0.312)；第7天比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=0.924，P=0.362)；第14天比較，差異有統(tǒng)計學意義(t=2.380，P=0.024)。詳見表4。

表4 試驗組和對照組 NHISS評分比較(±s) 分

2.5 相關(guān)性分析 試驗組和對照組MMP-9水平與缺血性腦卒中NIHSS評分相關(guān)性檢驗，分別為r=0.034，P=0.862；r=0.140，P=0.446，提示MMP-9水平與缺血性腦卒中嚴重程度無顯著相關(guān)性；試驗組和對照組血清Hcy水平與缺血性腦卒中NIHSS評分相關(guān)性檢驗，分別是(r=0.507，P=0.002；r=0.206，P=0.025)，提示Hcy水平增高與缺血性腦卒中嚴重程度有顯著相關(guān)性。

3 討 論

據(jù)2010年統(tǒng)計，全球腦卒中的發(fā)病人數(shù)為3 300萬人，其中死亡人數(shù)為1 690萬，大約三分之一是致命的，占全世界死亡總數(shù)的11%，也是全球死亡和殘疾的主要原因之一[3-4]。

MMP-9又叫做92kDa酶，是Destin Beach在基質(zhì)金屬蛋白酶學術(shù)會議上提出并命名的[5]。MMP-9是調(diào)節(jié)細胞外基質(zhì)(extracellular ma-trix，ECM)動態(tài)平衡的最主要酶系，發(fā)揮降解和再塑造血管壁分泌細胞外基質(zhì)的作用。MMP-9失衡導致血管壁結(jié)構(gòu)變化[6-8]，該變化超過血管代償能力引起斑塊不穩(wěn)定，進而破裂形成附壁血栓，最終導致缺血性腦卒中的發(fā)生。本研究試驗組和對照組第1天MMP-9水平明顯高于健康組，其產(chǎn)生機制如上所述，也與Zhao等[9]研究腦卒中病人血清基質(zhì)金屬蛋白酶大量表達的結(jié)果一致。進一步證據(jù)表明，MMP-9局部過量表達是通過增加細胞因子的刺激和組織因子介導的凝血級聯(lián)反應實現(xiàn)的[10]?；A(chǔ)試驗及臨床觀察均提示一些藥物不僅可降低不同細胞MMP-9的表達及活性，且影響MMP-9釋放[11-13]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過脈血康軟膠囊治療腦卒中干預的試驗組MMP-9水平較對照組下降明顯，試驗組第7天與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.018)；兩組第7天、第14天MMP-9水平呈下降趨勢，且第14天MMP-9水平與健康組比較，差異無統(tǒng)計學意義。脈血康可顯著降低MMP-9，機制可能如上述所述，但具體途徑尚待進一步研究。

大量研究實驗及流行病學調(diào)查顯示，Hcy升高是心血管疾病的一個重要獨立的危險因素，且進一步證明Hcy可擾亂銅(Cu)穩(wěn)態(tài)，降低Cu利用率，嚴重引起線粒體Cu-依賴酶(CCO)活性下降，使參與線粒體呼吸鏈反應電子傳遞無法進行，進而伴隨線粒體膜電位Hcy處理細胞的崩潰，導致內(nèi)皮細胞的裂解，使細胞內(nèi)Hcy大量釋放到血液中，引起Hcy水平升高[14]。一項薈萃分析研究報告說明空腹Hcy每升高3 μmol/L，缺血性心臟疾病發(fā)病率增加11%和中風發(fā)病率增加19%，同型半光氨酸血癥增加中風風險5倍，且Hcy每增加2.5 μmol/L中風風險可增加約20%[15-17]。本研究試驗組和對照組第1天血清Hcy含量顯著高于健康組，并且隨著神經(jīng)功能缺損程度減少，血清Hcy水平明顯下降，且血清Hcy與神經(jīng)功能缺損有相關(guān)性(r=0.347，P=0.004)，提示Hcy水平升高與腦卒中病情發(fā)生及進展密切相關(guān)，進一步提示Hcy可作為腦卒中的預警因子，其水平升高可能是導致腦卒中病人血液黏度升高的主要原因。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，試驗組與對照組第1天Hcy水平雖然均在正常范圍內(nèi)，但是通過藥物干預后，兩組Hcy水平在兩周內(nèi)仍呈逐漸下降趨勢，且相關(guān)性檢驗顯示Hcy水平增高與NIHSS評分顯著相關(guān)，提示目前臨床使用的正常值范圍可能不適于腦卒中的風險評估，選擇更低的目標值可能有利于卒中的預防，同時Hcy水平高低與卒中的嚴重程度呈正相關(guān)，提示該指標可能預測進展性卒中，其有待進一步擴大研究樣本量證實。試驗組和對照組第14天Hcy水平與健康組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；試驗組與對照組第7天組間Hcy水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；試驗組與對照組第14天組間Hcy水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，提示脈血康膠囊可能更有效下調(diào)血清Hcy水平，從而改善腦卒中的臨床癥狀。

綜上所述，根據(jù)本研究結(jié)果認為MMP-9、Hcy水平增高與缺血性腦卒中發(fā)生密切相關(guān)，提示MMP-9、Hcy聯(lián)合監(jiān)測可比單一指標監(jiān)測更有效預測腦卒中，Hcy水平高表達與缺血性腦卒中嚴重程度呈正相關(guān)，提示其更有效地預測病情的進展，反映病情的嚴重程度，預測和判斷預后。MMP-9水平變化與腦卒中的評分雖表現(xiàn)出一致性，但無統(tǒng)計學意義，提示其可能參與缺血性腦卒中發(fā)生的慢性病理生理過程，與腦卒中發(fā)生有一定的關(guān)聯(lián)，但不是腦卒中急性期病理生理變化的主要炎癥介質(zhì)。通過藥物干預后兩組NHISS評分在治療周期內(nèi)逐漸下降，表明降低Hcy、MMP-9水平可改善缺血性腦卒中病人臨床癥狀。本研究試驗組NIHSS評分下降程度明顯高于對照組，說明試驗組比對照組能更顯著降低Hcy、MMP-9水平，提示中藥脈血康膠囊可通過降低上述指標從而改善缺血性腦卒中病人臨床癥狀。

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(本文編輯薛妮)

廈門市科技局立項課題(No.3502Z20139013)

福建省廈門市第二醫(yī)院(福建廈門 361021)

牛建平，E-mail：549872685@qq.com

R743 R289.5

B

10.3969/j.issn.1672-1349.2017.08.030

1672-1349(2017)08-0994-04

2016-10-12)

引用信息：胡萍，牛建平，宋葉華，等.脈血康軟膠囊對缺血性腦卒中病人MMP-9、Hcy表達的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2017，15(8)：994-997.