• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于水煎液中揮發(fā)性成分含量變化規(guī)律探索銀翹散“香氣大出即取服”的科學(xué)內(nèi)涵

    2017-05-17 01:23羅云楊明李舒宇游雅麗張婧廖正根
    中國中藥雜志 2016年18期
    關(guān)鍵詞:揮發(fā)性成分水煎液銀翹散

    羅云+楊明+李舒宇+游雅麗+張婧+廖正根

    [摘要]建立銀翹散水煎液中3種揮發(fā)性成分薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的含量測定方法,探索銀翹散水煎液煎煮過程揮發(fā)性成分的變化規(guī)律,為闡明銀翹散“香氣大出即取服”的科學(xué)內(nèi)涵提供研究基礎(chǔ)。制備不同煎煮時(shí)間銀翹散水煎液,采用GC-MS定性分析其中揮發(fā)性成分的組成并測定薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的含量,考察不同煎煮時(shí)間對(duì)銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分含量的影響。結(jié)果顯示,銀翹散水煎液中的揮發(fā)性成分主要來源于薄荷、荊芥、連翹3味藥材;隨著煎煮時(shí)間的延長,銀翹散水煎液中3種揮發(fā)性成分的濃度均先增大后逐漸減??;浸泡30min后,剛煮沸時(shí),煮沸5,10,15,20,30,40,50,60 min時(shí),銀翹散水煎液中薄荷酮的質(zhì)量濃度分別為0.058,0.268,0.216,0.073,0.065,0.048,0.048,0.041,0.038,0.034 mg·L-1,薄荷腦的質(zhì)量濃度分別為0.965,2.847,3.633,2.420,1.539,1.189,1.273,1.188,0.905,0.663 mg·L-1。,胡薄荷酮的質(zhì)量濃度分別為0.355,0.522,0.598,0.477,0.374,0.374,0.339,0.355,0.248,0.251 mg·L-1,3種成分總濃度分別為1.377,3.637,4.446,2.970,1.979,1.611,1.660,1.583,1.191,0.947 mg·L-1。結(jié)果表明,煎煮時(shí)間對(duì)銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分含量影響較大,煮沸約5min時(shí),香氣大出,水煎液中3種揮發(fā)性成分的濃度較大,煮沸15min后,香氣變淡,水煎液中3種揮發(fā)性成分濃度明顯變小,提示銀翹散“香氣大出即取服”傳統(tǒng)煎煮方法具有一定的科學(xué)依據(jù)。

    [關(guān)鍵詞]銀翹散;水煎液;揮發(fā)性成分;香氣大出;科學(xué)內(nèi)涵;含量測定

    中藥煎煮方法和提取工藝的合理性對(duì)保證中藥的臨床療效至關(guān)重要,提取終點(diǎn)的判斷一直是困擾研究者的技術(shù)難題,尤其對(duì)于含揮發(fā)性組分的解表類中藥。銀翹散為辛涼解表的中醫(yī)經(jīng)典名方,由金銀花、連翹、薄荷、荊芥、牛蒡子、桔梗、淡竹葉、淡豆豉、甘草、蘆根等組成,具有疏風(fēng)解表、清熱解毒功效,用于風(fēng)熱感冒、發(fā)熱頭痛、咳嗽口干、咽喉疼痛。原方作者吳鞠通認(rèn)為“香氣”是銀翹散的主要有效成分之一,長時(shí)間的煎煮可能會(huì)使“香氣”大量揮發(fā),導(dǎo)致臨床療效降低,故特別強(qiáng)調(diào)其煎煮方法為“香氣大出,即取服,勿過煮,肺藥取輕清,過煮則味厚而人中焦矣”。然而,銀翹散類方現(xiàn)代中藥制劑大多需要長時(shí)間煎煮提取,這與其傳統(tǒng)煎煮用藥經(jīng)驗(yàn)相悖而受到較多質(zhì)疑。那么,銀翹散原方所強(qiáng)調(diào)的“香氣大出即取服”科學(xué)內(nèi)涵何在?如何將其傳統(tǒng)煎煮方法轉(zhuǎn)化用于類方制劑的提取工藝?這些均是當(dāng)前亟待解決的關(guān)鍵問題。

    銀翹散為煮散劑,臨床服用其水煎液,水煎液中香氣和非香氣成分的濃度變化對(duì)臨床療效均有較大的影響。因此,研究銀翹散水煎液在煎煮過程中化學(xué)成分的變化規(guī)律,可為闡明銀翹散“香氣大出即取服”的科學(xué)內(nèi)涵和合理制定銀翹散煎煮工藝提供科學(xué)依據(jù)。根據(jù)菲克擴(kuò)散理論,揮發(fā)性組分蒸發(fā)速度與濃度成正比,藥液中揮發(fā)性組分濃度越大,揮發(fā)性組分蒸發(fā)速度越大,故推測“香氣大出”之時(shí),藥液中“香氣”的濃度也最大,但目前尚未有相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)這一假說。

    “香氣”主要是指揮發(fā)性成分,銀翹散中含有“香氣”的藥材主要有薄荷、荊芥、連翹、金銀花等,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮是薄荷、荊芥等揮發(fā)油中的主要成分。本研究在前期研究了銀翹散煎煮過程水煎液化學(xué)特征圖譜和5種非揮發(fā)性成分含量變化規(guī)律以及3種揮發(fā)性成分蒸發(fā)規(guī)律的基礎(chǔ)上,建立GC-MS測定銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的含量測定方法,研究不同煎煮時(shí)間銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分的變化規(guī)律,為闡明銀翹散“香氣大出即取服”的科學(xué)內(nèi)涵提供研究基礎(chǔ)。

    1材料

    Agilent 7890A氣相色譜儀-5975C質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Agilent公司);BT25S電子分析天平(1/10萬),BSAl24S電子分析天平(1/1萬)(德國Sartofi-us公司);MH-2000型可調(diào)式電熱套(北京科偉永興儀器有限公司);JK-5200型超聲波清洗器(功率200w,頻率40kHz,合肥金尼克機(jī)械制造有限公司)。

    薄荷酮對(duì)照品(批號(hào)111705-201105,純度為99.8%)、薄荷腦對(duì)照品(批號(hào)110728-00506,純度為100.0%)、胡薄荷酮對(duì)照品(批號(hào)111706.201205,純度為99.8%)購自中國食品藥品檢定研究院;銀翹散(自制,批號(hào)151125),高純氦氣(江西省南昌市宏偉氣體有限公司);水為雙蒸餾水;其他試劑均為分析純。

    2方法與結(jié)果

    2.1GC-MS分析條件

    2.1.1色譜條件HP-5MS石英毛細(xì)管柱(0.25μmx0.25mmx30m);載氣為高純度氦氣;體積流量1.0mL·min-1;進(jìn)樣量1.0μL;模式為不分流;進(jìn)樣口溫度250℃;接口溫度280℃;程序升溫:50℃保持2min,以2℃·min-1。升至80℃,再以3℃·min-1升至180℃。

    2.1.2質(zhì)譜條件EI電離源;電子能量70 eV;離子源溫度230℃;四級(jí)桿溫度150℃;掃描范圍m/z35~500。

    2.2對(duì)照品溶液的制備

    2.2.1薄荷酮對(duì)照品溶液的制備精密稱取薄荷酮對(duì)照品7.35mg,置10mL量瓶中,加入乙醚使溶解,并定容至刻度,搖勻,即得每1 mL含薄荷腦0.735mg對(duì)照品溶液。

    2.2.2薄荷腦對(duì)照品溶液的制備精密稱取薄荷腦對(duì)照品4.76mg,置10mL量瓶中,加入乙醚使溶解,并定容至刻度,搖勻,即得每1mL含薄荷腦0.476mg對(duì)照品溶液。

    2.2.3胡薄荷酮對(duì)照品溶液的制備精密稱取胡薄荷酮對(duì)照品15.37mg,置10mL量瓶中,加入乙醚使溶解,并定容至刻度,搖勻,即得每1mL含薄荷腦1.537mg對(duì)照品溶液。

    2.2.4混合對(duì)照品溶液的制備取薄荷酮對(duì)照品溶液0.4mL,薄荷腦對(duì)照品溶液3.2mL,胡薄荷酮對(duì)照品溶液0.4mL,混勻,即得混合對(duì)照品溶液,再用乙醚等比稀釋制成不同濃度的混合對(duì)照品溶液,備用。

    2.3不同煎煮時(shí)間銀翹散水煎液樣品的制備

    按照《中國藥典》2015年版一部銀翹散的處方和制法,稱取金銀花100g、連翹100g、桔梗60g、薄荷60g、淡豆豉50g、淡竹葉40g、牛蒡子60g、荊芥40g、蘆根100g、甘草40g,粉碎成細(xì)粉,過篩,混勻,制成銀翹散。稱取銀翹散110.0g,置2000mL燒瓶中,加入1100mL(10倍量)水,浸泡30min后取樣10mL(S1),加熱提取,約20min后開始沸騰,立即取樣10mL(S2),繼續(xù)加熱,于煮沸后5min(S3),10min(S4),15min(S5),20min(S6),30min(S7),40min(S8),50min(S9),60min(S10)分別取樣10mL,放冷,加乙醚5mL振搖萃取,即得。

    2.4銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分的定性分析

    銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分的GC-MS總離子流色譜圖見圖1。經(jīng)計(jì)算機(jī)貯存信號(hào)的檢索及質(zhì)譜圖進(jìn)行解析確定化合物,對(duì)GC-MS總離子流色譜圖進(jìn)行了初步指認(rèn),去除可能為乙醚溶劑中的抗氧劑2,6.二叔丁基對(duì)甲苯酚(BHT,tR=37.14min),采用峰面積歸一化法測定各成分相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù),共確定色譜峰19個(gè),其中相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于1.5%的色譜峰13個(gè),占93.29%。結(jié)合單味藥材揮發(fā)油的色譜圖和質(zhì)譜圖,初步確定了銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分的來源,見表1。其中,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮3個(gè)指標(biāo)成分相對(duì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)較大,分別為1.89%,20.53%,3.27%,可以較好地反映銀翹散水煎液揮發(fā)性成分的變化規(guī)律,故選擇其作為指標(biāo)成分。

    2.5分析方法驗(yàn)證

    2.5.1系統(tǒng)適用性試驗(yàn)按2.1項(xiàng)下分析條件進(jìn)行檢測,以薄荷腦計(jì)算理論塔板數(shù)大于3000,分離度大于1.5?;旌蠈?duì)照品溶液、銀翹散供試品溶液的色譜圖見圖1。結(jié)果表明,在上述色譜條件下,各所測成分分離度良好。

    2.5.2線性關(guān)系考察取不同濃度的混合對(duì)照品溶液,按上述色譜條件進(jìn)樣1μL,記錄色譜峰面積,以進(jìn)樣量x(μg)為橫坐標(biāo),峰面積Y為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并擬合回歸方程,分別為薄荷酮:Y=2953548317X-173781,r=0.999 5;薄荷腦:Y=3064262418X-989 782,r=0.9991;胡薄荷酮:Y,=2839280 785X7-67 237,r=0.9997。結(jié)果表明,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮分別在0.0718~2.30,0.186~11.9,0.150~19.2ng線性關(guān)系良好。2.5.3精密度試驗(yàn)精密吸取混合對(duì)照品溶液1μL,重復(fù)進(jìn)樣6次,測定峰面積積分值,結(jié)果薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮峰面積的RSD分別為1.6%,0.93%,0.59%,表明儀器的精密度良好。

    2.5.4穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液1μL,進(jìn)樣測定峰面積,每4h測定1次,結(jié)果薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮峰面積的RSD分別為1.6%,1.1%,1.2%(n=7),表明樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.5.5重復(fù)性試驗(yàn)取同一銀翹散水煎液6份,按2.3項(xiàng)下的方法制備供試品溶液,精密吸取1μL,注入氣相色譜儀,測得薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的平均濃度為0.216,3.633,0.598mg·L-1,RSD分別為0.64%,0.95%,1.3%,表明方法的重復(fù)性良好。

    2.5.6加樣回收試驗(yàn)取同一已知含量的銀翹散水煎液6份,按照100%樣品含量精密加入薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮對(duì)照品溶液,混勻,按2.3項(xiàng)下的方法制備供試品溶液,進(jìn)樣1μL,測定峰面積,計(jì)算回收率,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的平均回收率為96.9%,98.4%,97.7%,RSD分別為1.6%,1.8%,2.3%,結(jié)果表明加樣回收率良好,方法可行。

    2.5.7不同煎煮時(shí)間銀翹散水煎液中薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的含量測定取不同煎煮時(shí)間所得銀翹散水煎液樣品,按2.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液,在2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定,每份進(jìn)樣2次,以外標(biāo)一點(diǎn)法計(jì)算樣品中薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的平均含量,結(jié)果見表2。

    由表2可見,隨著煎煮時(shí)間的延長,水煎液中3種揮發(fā)性成分的濃度均先增大后逐漸減小。浸泡30min后,銀翹散3種揮發(fā)性成分均有不同程度的溶出,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮分別達(dá)到最大濃度的21.6%,26.6%,59.3%,此時(shí)香氣較淡,揮發(fā)性成分并沒有大量揮發(fā);剛煮沸時(shí),薄荷酮的濃度達(dá)到最大值,薄荷腦、胡薄荷酮分別達(dá)到最大濃度的78.4%,87.3%,香氣漸濃,揮發(fā)性成分開始揮發(fā);煮沸5min時(shí),水煎液中薄荷酮的濃度下降至最大濃度的80.4%,而薄荷腦、胡薄荷酮濃度以及3種成分總濃度均達(dá)到最大;此時(shí)通過嗅覺判斷香氣也最濃,提示揮發(fā)性成分蒸發(fā)速度達(dá)到最大;煮沸10min時(shí),薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的濃度分別下降至最大濃度的27.1%,66.6%,79.7%;煮沸15min時(shí),香氣變淡,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的濃度分別下降至最大濃度的24.3%,42.4%,62.6%,3種成分總濃度降至最大濃度的44.5%,提示揮發(fā)性成分已大量蒸發(fā)散失;至煮沸60min時(shí),薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的濃度分別下降至最大濃度的12.6%,18.2%,41.9%,3種成分總濃度降至最大濃度的21.3%,提示揮發(fā)性成分已蒸發(fā)殆盡。

    結(jié)果表明,隨著煎煮時(shí)間的延長,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮溶出越來越多,到煮沸5min時(shí),香氣大出,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮大量溶出并揮發(fā),水煎液中濃度達(dá)到最大;隨著煎煮時(shí)間的再延長,薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮大量揮發(fā)散失,至煮沸15min時(shí),香氣變淡,銀翹散水煎液中3種揮發(fā)性成分總濃度降至最大濃度的45%以下??梢姡逯髸r(shí)間對(duì)銀翹散水煎液中揮發(fā)性成分含量影響較大,煮沸5min時(shí),香氣大出,水煎液中揮發(fā)性成分的濃度最大,銀翹散“香氣大出即取服”傳統(tǒng)煎煮方法具有一定的科學(xué)依據(jù)。

    3討論

    金銀花、連翹、薄荷、荊芥等含揮發(fā)性成分的藥材,煎煮時(shí)有效成分易揮發(fā),入藥宜后下,不宜久煎。銀翹散為煮散劑,用的是經(jīng)過粉碎后的藥材飲片,與原藥材飲片相比,粒度更小,擴(kuò)散面積增大,溶出速度加快,溶出物質(zhì)增加,縮短了煎煮時(shí)間,能較好地保留揮發(fā)性成分,有利于提高藥材的利用率和療效。本研究結(jié)果顯示,在同時(shí)入藥的情況下,銀翹散不經(jīng)煎煮,浸泡30min后,揮發(fā)性成分薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮均有一定程度的溶出,此時(shí)香氣較淡,揮發(fā)性成分并沒有大量揮發(fā);隨著煎煮時(shí)間的延長,3種揮發(fā)性成分溶出越來越多,到煮沸5min時(shí),香氣大出,3種揮發(fā)性成分大量溶出并揮發(fā),水煎液中濃度也達(dá)到最大;隨著煎煮時(shí)間的再延長,3種揮發(fā)性成分大量揮發(fā)散失,至煮沸15min時(shí),銀翹散水煎液中3種揮發(fā)性成分的濃度已降至最大濃度的44.5%,香氣變淡,提示揮發(fā)性成分已大量蒸發(fā)散失。結(jié)果表明,銀翹散作為煮散劑,在保證揮發(fā)性成分大量溶出的情況下,縮短了煎煮時(shí)間,較好地保留了揮發(fā)性有效成分,有利于提高藥材的利用率和臨床療效。

    “香氣大出”是指煎煮藥味最濃郁時(shí),是提取終點(diǎn)的嗅覺判斷標(biāo)準(zhǔn),有人認(rèn)為以煮沸20min為宜,也有人認(rèn)為煮沸10~15min為好,還有人認(rèn)為煮沸3~5min最佳。劉亞嫻等以銀翹散為主方治療小兒外感高熱125例,以急性上呼吸道感染最多(95例),煎煮時(shí)間為煮沸后3min即可,一般1~2d即可退熱,并進(jìn)行了免疫調(diào)節(jié)和解熱等相關(guān)藥理實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,煮沸3~6min,銀翹散的作用最強(qiáng)。筆者前期研究發(fā)現(xiàn),銀翹散煮沸約5min時(shí),香氣大出,水煎液中5種非揮發(fā)性成分綠原酸、連翹苷、牛蒡苷、甘草苷、甘草酸的濃度均較大,3種揮發(fā)性成分薄荷酮、薄荷腦、胡薄荷酮的蒸發(fā)速度也達(dá)到最大。本研究結(jié)果表明,銀翹散煮沸約5min時(shí),水煎液中3種揮發(fā)性成分的濃度也較大,驗(yàn)證了“香氣大出”之時(shí),水煎液中“香氣”的濃度也最大的推測。研究結(jié)果還表明,銀翹散煮沸約5min時(shí),香氣大出,水煎液中揮發(fā)性成分的濃度較大,蒸發(fā)速度也較大,同時(shí)非揮發(fā)性成分濃度也較大,提示銀翹散“香氣大出即取服”傳統(tǒng)煎煮方法具有一定的科學(xué)依據(jù)。

    關(guān)于銀翹散的煎煮方法,還有很多文獻(xiàn)從不同角度進(jìn)行了研究,主要集中在藥效和化學(xué)成分2個(gè)方面。束雅春等以綠原酸、蘆丁、橙皮苷、連翹苷、牛蒡苷5種成分及浸出物含量為指標(biāo),通過單因素考察確定了適宜工藝水平后,采用正交試驗(yàn)優(yōu)選銀翹散傳統(tǒng)煎煮最佳工藝,為規(guī)范臨床中藥湯劑煎煮方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù);同時(shí),通過比較銀翹散在不同煎煮方式下對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物抗炎解熱作用的影響,探討最佳煎煮方式,結(jié)果表明,傳統(tǒng)砂鍋煎煮藥效優(yōu)于常壓煎藥機(jī)和高壓煎藥機(jī)煎煮,這與5種藥效成分與浸出物含量測定結(jié)果一致,為準(zhǔn)確合理地使用銀翹散湯劑最佳煎煮方式、發(fā)揮最佳臨床療效提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。采用傳統(tǒng)砂鍋煎藥,具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、傳熱快、導(dǎo)熱均勻、散熱慢、火候大小可隨意調(diào)節(jié)、水分蒸發(fā)量小等特點(diǎn)。由于實(shí)驗(yàn)室條件的限制,本研究采用可調(diào)溫電熱套加熱玻璃燒瓶替代傳統(tǒng)砂鍋煎藥方式,玻璃燒瓶化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、傳熱快,可調(diào)溫電熱套導(dǎo)熱均勻、散熱慢,且火候大小可隨意調(diào)節(jié),先大功率煮沸,再調(diào)小加熱功率,保持微沸,水分蒸發(fā)量小,兩者聯(lián)合使用可較好地模擬傳統(tǒng)的砂鍋煎煮。

    此外,銀翹散揮發(fā)性成分的組成和香味的構(gòu)成均極為復(fù)雜,低含量成分可能對(duì)香氣的貢獻(xiàn)值較大,由于實(shí)驗(yàn)條件的局限,本研究僅以其中的3種指標(biāo)性成分薄荷酮、薄荷腦和胡薄荷酮含量變化來表征香氣濃淡變化尚有不足之處,有待進(jìn)一步完善,筆者將采用電子鼻等技術(shù)手段量化香氣,為進(jìn)一步闡明銀翹散“香氣大出即取服”的科學(xué)內(nèi)涵提供科學(xué)依據(jù)。

    猜你喜歡
    揮發(fā)性成分水煎液銀翹散
    銀翹散加減治療兒科疾病驗(yàn)案舉隅
    銀翹散泡浴方治療小兒外感發(fā)熱風(fēng)熱證的臨床觀察
    Based on FP-Growth Algorithm to Excavate Medication Rule of Chinese Materia Medica for Radiation Esophagitis
    玉屏風(fēng)散水煎液HPLC指紋圖譜的建立及9種成分測定
    3種補(bǔ)骨脂炮制品水煎液中4種成分含量的比較
    炙甘草水煎液的HPLC-MS分析
    五味子水煎液對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)電生理特性的影響
    銀翹散對(duì)內(nèi)毒素血癥兔早期IL-1β、IL-10含量及WBC計(jì)數(shù)的影響
    麻豆成人午夜福利视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久精品国产亚洲av天美| 尾随美女入室| 欧美又色又爽又黄视频| АⅤ资源中文在线天堂| 国产精华一区二区三区| 三级毛片av免费| 国产一级毛片在线| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产久久久一区二区三区| 尾随美女入室| 免费观看a级毛片全部| 激情 狠狠 欧美| 久99久视频精品免费| 国产高清三级在线| 一级毛片aaaaaa免费看小| 成年av动漫网址| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲在线自拍视频| 高清在线视频一区二区三区 | 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲成人精品中文字幕电影| 99热网站在线观看| 天堂√8在线中文| 欧美一区二区亚洲| 99国产精品一区二区蜜桃av| 午夜福利视频1000在线观看| 久久精品久久久久久久性| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 欧美一级a爱片免费观看看| 日韩在线高清观看一区二区三区| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 深夜精品福利| а√天堂www在线а√下载| 91久久精品国产一区二区成人| 夜夜爽天天搞| 日本一二三区视频观看| 床上黄色一级片| 久久精品国产自在天天线| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 美女大奶头视频| 黄片wwwwww| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 我的女老师完整版在线观看| 色哟哟·www| 国产淫片久久久久久久久| 国产在线精品亚洲第一网站| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产乱人偷精品视频| 波野结衣二区三区在线| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲欧美日韩高清专用| 97超碰精品成人国产| 此物有八面人人有两片| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲图色成人| 天堂中文最新版在线下载 | 欧美极品一区二区三区四区| 小说图片视频综合网站| 黑人高潮一二区| 禁无遮挡网站| 天堂网av新在线| 热99re8久久精品国产| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 成年版毛片免费区| 日本色播在线视频| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 中文字幕制服av| 99精品在免费线老司机午夜| 国产精品1区2区在线观看.| 最好的美女福利视频网| 国产av不卡久久| 一级毛片久久久久久久久女| 久久久色成人| 久久人妻av系列| 黄色配什么色好看| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲自偷自拍三级| av卡一久久| 中出人妻视频一区二区| 少妇的逼水好多| 欧美最新免费一区二区三区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲乱码一区二区免费版| 一区福利在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 国产精品久久视频播放| 欧美色欧美亚洲另类二区| 91狼人影院| 哪个播放器可以免费观看大片| 乱人视频在线观看| 内地一区二区视频在线| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲欧美成人精品一区二区| 黄片wwwwww| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 亚洲第一电影网av| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲欧美精品综合久久99| 看十八女毛片水多多多| 天堂√8在线中文| 午夜激情福利司机影院| 亚洲国产精品合色在线| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 伦精品一区二区三区| 五月伊人婷婷丁香| 精品欧美国产一区二区三| av专区在线播放| 只有这里有精品99| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 最好的美女福利视频网| 最后的刺客免费高清国语| 国产色婷婷99| 欧美日韩在线观看h| 久久韩国三级中文字幕| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品无大码| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 最近视频中文字幕2019在线8| 久久精品久久久久久久性| 少妇高潮的动态图| 国产亚洲91精品色在线| 51国产日韩欧美| 麻豆成人av视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 插阴视频在线观看视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 免费观看a级毛片全部| 午夜福利在线观看吧| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| av天堂在线播放| 欧美激情在线99| 久久人妻av系列| 日韩av不卡免费在线播放| 免费观看人在逋| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 毛片一级片免费看久久久久| 麻豆一二三区av精品| 深夜a级毛片| 在线观看午夜福利视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 亚洲人成网站高清观看| 精品人妻视频免费看| 免费搜索国产男女视频| 久久久欧美国产精品| 国产一区二区在线观看日韩| 熟女人妻精品中文字幕| 三级经典国产精品| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产极品精品免费视频能看的| 一级毛片电影观看 | 丝袜喷水一区| 少妇人妻一区二区三区视频| 老司机影院成人| 亚洲无线观看免费| 久久久久久久久久黄片| 日本黄色片子视频| .国产精品久久| 国产成人福利小说| 日本在线视频免费播放| 欧美又色又爽又黄视频| 毛片女人毛片| 久久鲁丝午夜福利片| 我的女老师完整版在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 我的老师免费观看完整版| 欧美一区二区亚洲| 国产成人精品一,二区 | 国产乱人偷精品视频| 国产爱豆传媒在线观看| 97热精品久久久久久| 欧美潮喷喷水| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 亚洲国产色片| 国语自产精品视频在线第100页| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 久久欧美精品欧美久久欧美| 亚洲四区av| 伦精品一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 精品无人区乱码1区二区| 白带黄色成豆腐渣| 淫秽高清视频在线观看| 日本一本二区三区精品| 亚洲欧洲国产日韩| 久久精品久久久久久久性| 欧美区成人在线视频| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 欧美精品一区二区大全| 嫩草影院入口| 亚洲性久久影院| 国产精品一及| 婷婷色av中文字幕| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| kizo精华| 床上黄色一级片| 国产91av在线免费观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 麻豆一二三区av精品| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 成人av在线播放网站| 亚洲国产精品合色在线| 青春草亚洲视频在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲va在线va天堂va国产| 中国美白少妇内射xxxbb| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲高清免费不卡视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久久精品94久久精品| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 国产精品福利在线免费观看| 久99久视频精品免费| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产三级在线视频| 久久九九热精品免费| 国产伦一二天堂av在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 尤物成人国产欧美一区二区三区| www日本黄色视频网| 在线免费十八禁| 婷婷精品国产亚洲av| 久久久久久大精品| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲av免费在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 99国产极品粉嫩在线观看| 插阴视频在线观看视频| 亚洲av二区三区四区| 中文字幕熟女人妻在线| 国产激情偷乱视频一区二区| 爱豆传媒免费全集在线观看| 在线播放国产精品三级| 国产精品无大码| 成人性生交大片免费视频hd| 不卡一级毛片| 性色avwww在线观看| 一个人看视频在线观看www免费| 国产黄a三级三级三级人| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 精品久久久久久久久亚洲| av女优亚洲男人天堂| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 一个人看视频在线观看www免费| 国产一区二区激情短视频| 国产久久久一区二区三区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 一级毛片我不卡| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 黄色视频,在线免费观看| 成人综合一区亚洲| 亚州av有码| 欧美极品一区二区三区四区| 2022亚洲国产成人精品| 最近的中文字幕免费完整| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 亚洲美女搞黄在线观看| 欧美bdsm另类| 国产视频内射| 日日啪夜夜撸| 精品无人区乱码1区二区| 国内精品美女久久久久久| 亚洲国产精品成人综合色| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产精品三级大全| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产男人的电影天堂91| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲美女视频黄频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲国产色片| 国产高潮美女av| 中国美女看黄片| www.av在线官网国产| a级毛片a级免费在线| 亚洲人成网站高清观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 五月伊人婷婷丁香| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产亚洲5aaaaa淫片| 欧美色视频一区免费| 国产老妇女一区| 色播亚洲综合网| 91狼人影院| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产色爽女视频免费观看| 一区福利在线观看| 日本熟妇午夜| 99久久精品热视频| 欧美一区二区精品小视频在线| av在线蜜桃| 久久久久久大精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 赤兔流量卡办理| 神马国产精品三级电影在线观看| 91久久精品国产一区二区三区| 人妻系列 视频| av在线亚洲专区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久国内精品自在自线图片| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 国产在视频线在精品| 精品久久久久久成人av| 日韩欧美在线乱码| 国产一区二区在线观看日韩| 国产淫片久久久久久久久| 波野结衣二区三区在线| 丰满乱子伦码专区| 免费黄网站久久成人精品| 永久网站在线| 91久久精品国产一区二区三区| 又爽又黄a免费视频| 精品人妻视频免费看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 熟女电影av网| 欧美在线一区亚洲| 亚洲丝袜综合中文字幕| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 少妇人妻精品综合一区二区 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 99热这里只有精品一区| 三级国产精品欧美在线观看| av在线天堂中文字幕| 内地一区二区视频在线| 亚洲电影在线观看av| 乱人视频在线观看| 国产av一区在线观看免费| 午夜福利高清视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 中文字幕久久专区| 蜜臀久久99精品久久宅男| 插阴视频在线观看视频| 人人妻人人看人人澡| 久久久久久伊人网av| 桃色一区二区三区在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 国产精品女同一区二区软件| 国产日韩欧美在线精品| 国产成人精品婷婷| 99热这里只有精品一区| 男人舔奶头视频| 午夜精品在线福利| 99在线视频只有这里精品首页| 成人午夜精彩视频在线观看| 免费观看在线日韩| 免费观看人在逋| 观看免费一级毛片| 哪个播放器可以免费观看大片| 亚洲最大成人手机在线| 有码 亚洲区| 99热这里只有是精品在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 看片在线看免费视频| 热99在线观看视频| 精品一区二区三区视频在线| 国产免费男女视频| 长腿黑丝高跟| 国产单亲对白刺激| 国产免费一级a男人的天堂| 69av精品久久久久久| 午夜视频国产福利| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 国产黄色小视频在线观看| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久精品国产亚洲网站| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 亚洲精品国产成人久久av| 日本三级黄在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 免费看a级黄色片| 九九热线精品视视频播放| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 只有这里有精品99| 国产成人aa在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产成人影院久久av| 国语自产精品视频在线第100页| 一级毛片久久久久久久久女| 99热这里只有是精品50| 免费电影在线观看免费观看| 99久久人妻综合| 亚洲欧美精品专区久久| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲成人av在线免费| 免费人成视频x8x8入口观看| 在线播放无遮挡| 久久久久久久午夜电影| 国产精品电影一区二区三区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 成年av动漫网址| 日韩欧美精品v在线| 桃色一区二区三区在线观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产片特级美女逼逼视频| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美日本视频| 色综合站精品国产| 国产在线精品亚洲第一网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 欧美3d第一页| 2022亚洲国产成人精品| 男人的好看免费观看在线视频| 黄色日韩在线| 91久久精品国产一区二区成人| 免费av观看视频| 亚洲精品色激情综合| 午夜久久久久精精品| 亚洲精品成人久久久久久| 干丝袜人妻中文字幕| 免费看a级黄色片| 久久久色成人| 成人特级黄色片久久久久久久| 一边摸一边抽搐一进一小说| 看免费成人av毛片| 一级毛片久久久久久久久女| 免费人成在线观看视频色| 亚洲18禁久久av| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲精品成人久久久久久| 精品久久久久久久末码| 久久精品国产亚洲网站| 少妇丰满av| 在线播放国产精品三级| 亚洲内射少妇av| 日韩成人伦理影院| 夜夜爽天天搞| 我的老师免费观看完整版| 99热全是精品| 少妇丰满av| 男女那种视频在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 国产精品乱码一区二三区的特点| 一本久久精品| 亚洲精品自拍成人| 中文字幕免费在线视频6| 国产成人91sexporn| 99热精品在线国产| 亚洲精品国产成人久久av| 99精品在免费线老司机午夜| АⅤ资源中文在线天堂| 国产精品99久久久久久久久| av视频在线观看入口| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 日本免费a在线| 一个人看的www免费观看视频| 日本欧美国产在线视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 精品午夜福利在线看| 国产精品人妻久久久久久| 丝袜美腿在线中文| 1000部很黄的大片| 男人狂女人下面高潮的视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 一个人免费在线观看电影| 欧美区成人在线视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美日韩精品成人综合77777| 级片在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 色综合色国产| 男人和女人高潮做爰伦理| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲人成网站在线播| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲,欧美,日韩| 国模一区二区三区四区视频| 日韩av不卡免费在线播放| 人妻久久中文字幕网| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产精品国产高清国产av| 在现免费观看毛片| 精品人妻视频免费看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 乱人视频在线观看| 欧美区成人在线视频| 一级黄片播放器| 国产精品av视频在线免费观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 嫩草影院新地址| 天堂中文最新版在线下载 | ponron亚洲| 99久国产av精品| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久精品国产亚洲网站| 久久久久久伊人网av| 日韩欧美在线乱码| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久精品人妻少妇| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲精品粉嫩美女一区| 99久久九九国产精品国产免费| 在线免费十八禁| eeuss影院久久| 观看免费一级毛片| 亚洲av一区综合| 免费观看在线日韩| 国产单亲对白刺激| 国产亚洲91精品色在线| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 一本一本综合久久| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 天堂网av新在线| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 国产色爽女视频免费观看| 最近视频中文字幕2019在线8| 女同久久另类99精品国产91| 久久99热6这里只有精品| 久久中文看片网| 国产伦一二天堂av在线观看| 日本欧美国产在线视频| 精品久久久久久久久亚洲| 天堂网av新在线| 五月伊人婷婷丁香| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲国产精品成人综合色| 22中文网久久字幕| 99热这里只有精品一区| 91久久精品国产一区二区三区| 国产高清不卡午夜福利| 久久99热6这里只有精品| 亚州av有码| 日本熟妇午夜| 人妻少妇偷人精品九色| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美高清成人免费视频www| 99riav亚洲国产免费| 中文欧美无线码| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 日日摸夜夜添夜夜爱| 男女啪啪激烈高潮av片| 级片在线观看| 亚洲av一区综合| 精品一区二区三区人妻视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产一区二区激情短视频| 免费av不卡在线播放| 99热这里只有是精品在线观看| 久久久久久久久久黄片| 亚洲无线观看免费| 卡戴珊不雅视频在线播放| 人体艺术视频欧美日本| 国产视频内射| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲无线观看免费| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲一区二区三区色噜噜| 99久国产av精品| 国产精品日韩av在线免费观看| 欧美日韩综合久久久久久| 干丝袜人妻中文字幕| 国产av不卡久久| 亚洲av二区三区四区| 国产精品一二三区在线看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| av在线亚洲专区| 麻豆国产av国片精品| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 日韩成人伦理影院| 亚洲欧美日韩高清专用| 久久亚洲精品不卡| 色5月婷婷丁香| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲欧洲国产日韩| 中文资源天堂在线| 亚洲欧美日韩高清专用| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲性久久影院| 成人av在线播放网站| 美女国产视频在线观看| 特级一级黄色大片| 简卡轻食公司| 91麻豆精品激情在线观看国产| 天天一区二区日本电影三级| 51国产日韩欧美| 深夜精品福利| h日本视频在线播放| 欧美丝袜亚洲另类| 日日撸夜夜添| 看免费成人av毛片| 韩国av在线不卡| 天堂√8在线中文|