梗阻性黃疸患者血清sCD40L水平的變化及其臨床意義

高偉芳，李曉，桑榮霞，李寧，劉銘，韓占波，萬玲玲

(石家莊市第一醫(yī)院消化二科1、檢驗科2，河北石家莊050011)

梗阻性黃疸患者血清sCD40L水平的變化及其臨床意義

高偉芳1，李曉1，桑榮霞1，李寧1，劉銘1，韓占波1，萬玲玲2

(石家莊市第一醫(yī)院消化二科1、檢驗科2，河北石家莊050011)

目的觀察梗阻性黃疸(OJ)患者血清可溶性CD40配體(sCD40L)水平的變化，并探討其臨床意義。方法選擇2015年4～12月在我院消化二科住院治療的OJ患者35例作為觀察組，另選同期在我院進行健康檢查的志愿者35例作為對照組，檢測對照組在入院時及觀察組治療前、治療后3 d的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)、結(jié)合膽紅素(DBIL)、血清sCD40L、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細胞介素-8(IL-8)的水平，分析OJ患者的sCD40L與其他指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果觀察組患者治療前的血清ALT、AST、TBIL、DBIL、sCD40L、TNF-α和IL-8水平分別為(55.34±10.35)IU/L、(62.19±11.25)IU/L、(35.43±5.22)μmol/L、(8.94±2.58)μmol/L、(3.25±0.27)μg/L、(58.24±10.38)ng/L、(60.23±10.37)ng/L，均高于對照組的(32.17±5.32)IU/L、（36.27±6.78)IU/L、(10.19±4.58)μmol/L、(4.39±1.37)μmol/L、(2.84±0.32)μg/L、(34.52±9.26)ng/L、(43.69±11.26)ng/L，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且觀察組治療后上述指標(biāo)分別為（43.27±9.89）IU/L、(47.25±10.14)IU/L、(13.32±4.19)μmol/L、(6.18±2.97)μmol/L、(2.92±0.25)μg/L、(42.37±8.79)ng/L、(50.14±11.32)ng/L，均明顯低于治療前，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。OJ患者的血清sCD40L與血清TNF-α、IL-8、ALT、AST、TBIL及DBIL之間均呈正相關(guān)(均P＜0.05)。結(jié)論OJ患者血清sCD40L水平明顯上升，且其與炎癥反應(yīng)及肝功能指標(biāo)聯(lián)系緊密，臨床可通過監(jiān)測血清sCD40L變化了解患者病情，評估預(yù)后。

血清sCD40L；梗阻性黃疸；肝損傷；預(yù)后

梗阻性黃疸(obstructive jaundice，OJ)易引發(fā)患者出現(xiàn)膽道壓力上升以及擴張等情況，繼發(fā)膽道感染的可能性非常大。動物研究發(fā)現(xiàn)，OJ所造成的逆行性淤膽會導(dǎo)致肝損傷，同時還會使其他臟器受到一定程度損傷[1]。此外，OJ患者所伴有的例如內(nèi)毒性血癥，同樣對機體內(nèi)多項系統(tǒng)產(chǎn)生不利影響，特別是免疫系統(tǒng)，其所受到的危害最嚴(yán)重。報道指出，OJ造成的肝損傷可能和免疫機能受損直接相關(guān)[2]。因此，找出能夠反映OJ肝損傷嚴(yán)重程度的新指標(biāo)是當(dāng)前工作的重點?？扇苄訡D40配體(soluble CD40 ligand，sCD40L)是能夠促進B細胞形成的一種重要因子，其在多種免疫類疾病患者體內(nèi)均呈高表達狀態(tài)，并具有重要預(yù)測價值[3-5]。而有關(guān)sCD40L和OJ導(dǎo)致的肝損傷發(fā)病之間是否存在一定相關(guān)性，目前尚不明確。鑒于此，本文通過研究分析血清sCD40L在OJ肝損傷患者中的水平變化及其預(yù)后預(yù)測價值，旨在為臨床治療及評估患者的預(yù)后提供參考，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2015年4～12月在我院住院診治的OJ患者35例作為觀察組。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有患者均經(jīng)腹部彩超和電子計算機斷層掃描(computed tomography，CT)、磁共振胰膽管造影(magnetic resonance cholangiopancreatography，MRCP)確診為OJ患者，且均由手術(shù)結(jié)果證實；⑵總膽紅素(total bilirubin，TBIL)水平＞34.2 μmol/L，尿膽紅素(BIL)呈強陽性，糞便呈白陶土樣[2]；(3)對本次研究已簽署了知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在血液疾病；(2)其他心、腎等臟器的嚴(yán)重功能障礙；(3)存在免疫系統(tǒng)類疾病。35例患者中男性24例，女性11例；年齡21～75歲，平均(54.83±2.16)歲；良性病變22例，其中膽總管結(jié)石18例，Mirizzi綜合征4例；惡性病變13例，其中胰頭癌5例，壺腹周圍癌3例，膽管癌5例。另選同期在我院進行健康檢查的志愿者35例作為對照組，其中男性25例，女性10例；年齡20～73歲，平均(55.01±2.18)歲。兩組受檢者的性別與年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究已獲得我院醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 觀察指標(biāo)與檢測方法分別抽取對照組在入院體檢時及觀察組治療前1 d、治療后3 d的晨間空腹靜脈血6 mL，待血液標(biāo)本凝固之后，3 000 r/min離心5 min，取上清液，放于-20℃下保存待測，利用產(chǎn)自美國的Beckman公司的Synehon CXT全自動生化分析儀檢測兩組受試者的肝功能指標(biāo)，包括：(1)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)；(2)谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)；(3)TBIL；(4)結(jié)合膽紅素(DBIL)。腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-8(IL-8)以及sCD40L水平采用ELISA試劑盒(購自上海恒遠生物公司)進行檢測。相關(guān)操作均嚴(yán)格依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書的步驟逐條進行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較采用t檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman分析法進行評價，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者的肝功能指標(biāo)比較觀察組患者治療前的血清ALT、AST、TBIL及DBIL的水平均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組受檢者的肝功能指標(biāo)比較()

表1 兩組受檢者的肝功能指標(biāo)比較()

例數(shù)組別ALT(IU/L)AST(IU/L)TBIL(μmol/L)DBIL(μmol/L) 35 35觀察組對照組t值P值55.34±10.35 32.17±5.32 11.779 0.000 62.19±11.25 36.27±6.78 11.674 0.000 35.43±5.22 10.19±4.58 21.502 0.000 8.94±2.58 4.39±1.37 9.215 0.000

2.2 兩組受檢者的血清sCD40L、TNF-α及IL-8水平比較觀察組患者治療前血清sCD40L、TNF-α以及IL-8的水平均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組受檢者的sCD40L、TNF-α及IL-8水平比較()

表2 兩組受檢者的sCD40L、TNF-α及IL-8水平比較()

組別例數(shù)sCD40L(μg/L)TNF-α(ng/L)IL-8(ng/L)觀察組對照組t值P值35 35 3.25±0.27 2.84±0.32 5.793 0.000 58.24±10.38 34.52±9.26 10.088 0.000 60.23±10.37 43.69±11.26 6.392 0.000

2.3 觀察組患者治療前后的肝功能指標(biāo)及血清sCD40L、TNF-α以及IL-8水平比較觀察組患者治療后的血清sCD40L、TNF-α、IL-8及血清ALT、AST、TBIL、DBIL水平均明顯低于治療前，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 觀察組患者治療前后的肝功能指標(biāo)及sCD40L、TNF-α及IL-8水平比較()

表3 觀察組患者治療前后的肝功能指標(biāo)及sCD40L、TNF-α及IL-8水平比較()

時間治療前治療后t值P值例數(shù)35 35 sCD40L(μg/L) 3.25±0.27 2.92±0.25 5.306 0.000 TNF-α(ng/L) 58.24±10.38 42.37±8.79 6.903 0.000 IL-8(ng/L) 60.23±10.37 50.14±11.32 3.888 0.000 ALT(IU/L) 55.34±10.35 43.27±9.89 4.988 0.000 AST(IU/L) 62.19±11.25 47.25±10.14 5.836 0.000 TBIL(μmol/L) 35.43±5.22 13.32±4.19 16.109 0.000 DBIL(μmol/L) 8.94±2.58 6.18±2.97 4.150 0.000

2.4 觀察組患者的血清sCD40L與其他指標(biāo)的相關(guān)性觀察組患者的血清sCD40L與TNF-α、IL-8、ALT、AST、TBIL及DBIL之間均呈正相關(guān)(r=0.657、0.749、0.688、0.714、0.705、0.579，P=0.001、0.000、0.000、0.000、0.000、0.002)。

3 討論

在臨床上，OJ是一種較為常見的疾病，其多因腫瘤、結(jié)石以及炎癥等因素誘發(fā)，可導(dǎo)致患者機體產(chǎn)生一系列的病理或生理性紊亂。當(dāng)患者發(fā)生OJ后，其網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)相關(guān)功能無法正常發(fā)揮，導(dǎo)致細胞免疫功能受抑，進而使得血液內(nèi)毒素含量上升，是患者出現(xiàn)肝損傷以及其他器官發(fā)生功能衰竭的最主要原因[4]。目前研究已證實，OJ患者血液循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)內(nèi)毒素會對單核細胞以及巨噬細胞等各類細胞進行刺激，并生成TNF及IL等多種細胞因子而影響患者的機體健康[6]。如不及時地解除或緩解梗阻癥狀，則可能危及到患者的生命安全。CD40L是TNF的一個成員，其分子量3.9×107，屬Ⅱ型穿膜糖蛋白，處于活化性CD4+T細胞的表層，并在單核細胞、肥大細胞以及自然殺傷細胞等細胞的表層也存在程度各異的表達。CD40L的受體CD40則是分子量處于(4.5～5.0)×107的一種Ⅰ型跨膜蛋白，可在B細胞和單核巨噬細胞等細胞中表達。在機體的循環(huán)系統(tǒng)當(dāng)中，sCD40L可作為CD40與CD40L的一個重要構(gòu)成部分，并和CD40L存在基本類似的生物學(xué)功能，可發(fā)揮炎癥調(diào)節(jié)作用[7-8]。近年來有報道指出，OJ患者血清sCD40L可能與其肝功能損傷之間存在一定關(guān)系[9]。本研究對兩者間的作用機制，及血清sCD40L的臨床預(yù)后價值進行深入研究。

血清ALT、AST、TBIL及DBIL均為衡量肝功能的重要指標(biāo)，而血清TNF-α及IL-8屬于常用的炎癥因子，對上述指標(biāo)進行聯(lián)合監(jiān)測有利于更加直觀地評價潛在的肝損傷情況。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組治療前的血清ALT、AST、TBIL及DBIL的水平均明顯高于對照組，與有關(guān)研究結(jié)果相似[10-11]，提示在治療前觀察組OJ患者的肝功能遭受了一定的損害。原因在于OJ是發(fā)生在肝內(nèi)外的膽道機械損傷，會引起膽汁排泄不暢及受阻的癥狀，患者的肝臟在受累后導(dǎo)致肝細胞損害，最終影響到肝功能。本研究結(jié)果顯示，觀察組治療前的血清sCD40L、TNF-α以及IL-8的水平均明顯高于對照組，符合Turk等[12]的報道，提示sCD40L、TNF-α以及IL-8三者均可能參與了OJ的形成及進展過程。事實上，已有報道證實，TNF-α及IL-8均存在防御與攻擊的雙重作用，并參與了由多類病因引起的肝損傷進程[13-14]。而在sCD40L方面，可能由于CD40L及CD40相結(jié)合后產(chǎn)生的交聯(lián)作用，可為炎性介質(zhì)、細胞因子、細胞粘附分子及共刺激因子等物質(zhì)的形成提供信號，有利于加速炎性反應(yīng)的發(fā)展，從而間接影響OJ的形成及發(fā)展。經(jīng)過進一步分析發(fā)現(xiàn)，觀察組治療后的sCD40L、TNF-α、IL-8以及ALT、AST、TBIL、DBIL水平均明顯低于治療前，提示治療后患者的肝功能及炎癥情況均有所改善。因此臨床可通過對sCD40L等指標(biāo)的監(jiān)測，輔助預(yù)后評估。且本研究發(fā)現(xiàn)，OJ患者的sCD40L與TNF-α、IL-8、ALT、AST、TBIL及DBIL之間均呈正相關(guān)，可能是因為CD40/CD40L交聯(lián)能夠上調(diào)組織相容型復(fù)合體Ⅱ及CD40的表達，提高sCD40L水平，進而強化抗原呈遞的作用，促使TNF-α及IL-8的分泌[15]，影響OJ患者的肝功能。

綜上所述，OJ患者血清sCD40L水平明顯上升，且其與炎癥反應(yīng)及肝功能損傷有關(guān)。臨床可通過監(jiān)測血清sCD40L變化，了解患者病情，評估預(yù)后。

[1]陳琳,付強,唐強,等.肝臟自然殺傷細胞對梗阻性黃疸小鼠模型急性肝損傷的影響及其機制[J].中華實驗外科雜志,2016,33(3): 659-661.

[2]王文君,于聰慧,楊榮華,等.惡性梗阻性黃疸手術(shù)治療研究進展[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展,2016,16(14):2797-2800.

[3]壯可,林玲,林俊,等.絕經(jīng)前系統(tǒng)性紅斑狼瘡女性患者血清sCD40L水平與頸動脈粥樣硬化關(guān)系的研究[J].華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2010,39(6):840-844.

[4]金秀平,郭維娜,魏劍芬,等.2型糖尿病慢性腎臟疾病患者血清可溶性CD40配體水平的變化及其臨床意義[J].中國糖尿病雜志, 2013,21(10):880-882.

[5]王永翠,劉昌盛,薄通文,等.2型糖尿病患者血清sCD40L與頸動脈粥樣硬化的相關(guān)性[J].海南醫(yī)學(xué),2013,24(1):16-17.

[6]Chowdhury AH,Camara M,Martinezpomares L,et al.Immune dysfunction in patients with obstructive jaundice before and after endoscopic retrograde cholangiopancreatography[J].Clin Sci(Lond), 2011,130(17):1535-1544.

[7]鄒美娜,畢國榮.可溶性CD40配體與心腦血管疾病關(guān)系的研究進展[J].實用心腦肺血管病雜志,2016,24(4):5-8.

[8]鄒青,尤連峰,李偉,等.血清可溶性CD40配體和IL-18水平與腦梗死的關(guān)系分析[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2016,22(13):1361-1364.

[9]李寶,鄧偉.sCD40L在大鼠梗阻性黃疸肝損傷中的作用[J].國際消化病雜志,2014,34(1):63-66.

[10]王晨宇,曹慧芳,李濤,等.紅景天苷對梗阻性黃疸大鼠的肝保護作用及機制探討[J].山東醫(yī)藥,2015,55(46):32-33.

[11]郭強,邵英梅,溫浩,等.終末期肝泡型包蟲病合并梗阻性黃疸55例治療分析[J].中華肝膽外科雜志,2014,20(9):634-638.

[12]Turk O,Badak B,Ates E,et al.The role of growth factors on hepatic damage in rats with obstructive jaundice[J].Springerplus,2016,5 (1):1274-1275.

[13]Kim SS,Cho HJ,Won JH,et al.Interleukin-8 level as a prognostic marker in patients with hepatitis B virus-associated hepatocellular carcinoma treated with transarterial chemoembolization[J].Cytokine,2015,76(2):449-457.

[14]黃智清,張誠華,施建設(shè),等.腸內(nèi)免疫微生態(tài)營養(yǎng)支持對肝癌切除術(shù)后肝損害的影響[J].臨床誤診誤治,2016,29(2):92-96.

[15]Tapan S,Dogru T,Tasci I,et al.Soluble CD40 ligand and soluble P-selectin levels in Gilbert's syndrome:a link to protection against atherosclerosis?[J].Clin Biochem,2009,42(9):791-795.

Change of serum sCD40L in patients with obstructive jaundice and its significance.

GAO Wei-fang1,LI Xiao1, SANG Rong-xia1,LI Ning1,LIU Ming1,HAN Zhan-bo1,WAN Ling-ling2.Second Department of Gastroenterology1, Department of Clinical Laboratory2,Shijiazhuang First Hospital,Shijiazhuang 050011,Hebei,CHINA

ObjectiveTo observe the change of the serum soluble CD40 ligand(sCD40L)in patients with obstructive jaundice(OJ),and explore its significance.MethodsFrom April to December in 2015,35 OJ patients who were treated in Second Department of Gastroenterology in our hospital were selected as the observation group,and meanwhile 35 healthy volunteers were enrolled as the control group.The levels of serum alanine aminotransferase (ALT),aspartate aminotransferase(AST),total bilirubin(TBIL),conjugated bilirubin(DBIL),and serum sCD40L,tumor necrosis factor-α(TNF-α)and interleukin-8(IL-8)at admission in control group and before and 3 d after treatment in the observation group were detected.Then the correlations between sCD40L and above indexes in OJ patients were analyzed.ResultsThe levels of serum ALT,AST,TBIL,DBIL,sCD40L,TNF-α and IL-8 were(55.34±10.35)IU/L, (62.19±11.25)IU/L,(35.43±5.22)μmol/L,(8.94±2.58)μmol/L,(3.25±0.27)μg/L,(58.24±10.38)ng/L,(60.23±10.37)ng/L in observation group before treatment,respectively,which were significantly higher than(32.17±5.32)IU/L,(36.27± 6.78)IU/L,(10.19±4.58)μmol/L,(4.39±1.37)μmol/L,(2.84±0.32)μg/L,(34.52±9.26)ng/L,(43.69±11.26)ng/L in control group(P＜0.05).The above indexes were(43.27±9.89)IU/L,(47.25±10.14)IU/L,(13.32±4.19)μmol/L,(6.18±2.97)μmol/L, (2.92±0.25)μg/L,(42.37±8.79)ng/L,(50.14±11.32)ng/L in observation group after treatment respectively,which were significantly lower than before treatment(P＜0.05).Serum sCD40L was positively correlated with serum TNF-α,IL-8,ALT,AST,TBIL and DBIL respectively(all P＜0.05).ConclusionThe level of serum sCD40L is higher in OJ patients, and it is closely related to the indexes of inflammatory response and liver function.Clinical monitoring of serum sCD40L can be used to understand the patient's condition and prognosis.

Serum sCD40L;Obstructive jaundice;Liver injury;Prognosis

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.08.026

R575

A

1003—6350（2017）08—1280—03

2016-10-26)

2014年度河北省石家莊市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展指導(dǎo)計劃項目（編號：141463143）

高偉芳。E-mail：mqgowe@163.com