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    多肉植物十二卷花影壽離體快繁技術(shù)研究

    2017-05-10 06:11:48俞愛軍張睿婧孫蓮蓮張冬菊吳月琴李春丹
    上海農(nóng)業(yè)科技 2017年2期
    關(guān)鍵詞:花影株型外植體

    楊 娟 俞愛軍 周 燕 張睿婧 孫蓮蓮 張冬菊 吳月琴 李春丹

    (上海種業(yè)(集團(tuán))有限公司,上海市松江區(qū) 201615)

    多肉植物十二卷花影壽離體快繁技術(shù)研究

    楊 娟 俞愛軍 周 燕 張睿婧 孫蓮蓮 張冬菊 吳月琴 李春丹

    (上海種業(yè)(集團(tuán))有限公司,上海市松江區(qū) 201615)

    為穩(wěn)定花影壽的市場價格和滿足多肉愛好者的需求,以百合科十二卷屬植物花影壽葉片為誘導(dǎo)材料,對其進(jìn)行組培快繁技術(shù)研究。結(jié)果表明:利用葉片誘導(dǎo)愈傷分化再生芽,其最佳培養(yǎng)基是MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,最佳芽增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖系數(shù)達(dá)4~5倍,分化的芽較多,質(zhì)量較好。最佳生根壯苗培養(yǎng)基為1/2 M S,組培苗具有較典型的觀賞性;組培苗經(jīng)過煉苗后,移栽成活率達(dá)90%以上。

    多肉植物;花影壽;葉片;快繁

    花影壽是百合科十二卷屬多年生肉質(zhì)植物,株型矮小、無莖。葉短而肥厚,螺旋狀生長,呈蓮座狀排列,頂端呈水平三角形截面,截面平而透明,形成特有的“窗”狀結(jié)構(gòu),“窗”上有明顯脈紋,具有較高的觀賞性,是室內(nèi)觀葉的案頭佳品。目前花影壽市場需求量較大,但其生長緩慢、產(chǎn)量少、價位高,建立組織培養(yǎng)快繁技術(shù),既能解決其種苗數(shù)量少、生長慢等問題,還能降低其價格,滿足眾多多肉愛好者的需求。本研究通過以植株葉片為外植體材料,研究了花影壽組織培養(yǎng)的整套技術(shù),對百合科十二卷屬多肉植物的生長、繁殖以及品種資源的保存具有一定的指導(dǎo)意義。

    1 材料與方法

    1.1 外植體的選擇、滅菌方法

    以花影壽為供試材料,選取植株的外輪、中輪葉片作為外植體,不破壞原植株的生長點,讓其繼續(xù)生長。將取出的葉片先用洗潔劑清洗浸泡10 min,然后用流水沖洗2 h后瀝干備用。在無菌室超凈臺上,用75%酒精表面消毒30 s,再用無菌水清洗1遍;然后用0.1%HgCl2消毒4~6 min,無菌水沖洗3~5遍;最后用無菌濾紙吸干,備用。

    1.2 培養(yǎng)條件

    以MS為基本培養(yǎng)基,分別添加KT(激動素)、6-BA(6-芐基嘌呤)、NAA(奈乙酸),所有培養(yǎng)基均加瓊脂0.6%、蔗糖3%,pH5.8~6.0,培養(yǎng)溫度25~28 ℃,光照12 h/ d,光強度2500~3000 Lx。在超凈臺上將無菌葉片接種于不同的培養(yǎng)基上。

    初始誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方:(1)MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.2 mg/L;(2)MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L;(3)MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L;(4)MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.2 mg/L。每個處理10瓶,每瓶接種2個外植體。

    增殖培養(yǎng)基配方:(5)MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;(6)MS+6-BA 0.2 mg/L+KT 0.5 mg/L +NAA 0.2 mg/L;(7)MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L。每個處理10瓶,每瓶接種4個芽,培養(yǎng)30 d后觀察生長和再生情況。

    生根壯苗培養(yǎng)基配方:(8)1/2 MS;(9)MS培養(yǎng)基。培養(yǎng)20~30 d后觀察生根和株型情況。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同培養(yǎng)基對葉片誘導(dǎo)愈傷組織的影響

    選擇葉片為外植體材料,對無菌材料的獲得雖難度大,但取材方便,沒時間局限性。從誘導(dǎo)結(jié)果看,4種培養(yǎng)基均能誘導(dǎo),在低濃度6-BA的培養(yǎng)基上,接種15 d后葉片慢慢膨大、開裂并愈傷化,再培養(yǎng)15 d后,愈傷表面分化芽,且株型正常。在高濃度6-BA培養(yǎng)基上,只分化愈傷,未分化芽。當(dāng)6-BA濃度高于2 mg/L時,愈傷玻璃化嚴(yán)重。通過對4種培養(yǎng)基的比較發(fā)現(xiàn),配方(1)培養(yǎng)基的效果最佳,芽誘導(dǎo)率為53%,其次是配方(2)培養(yǎng)基,配方(4)培養(yǎng)基效果最差(見表1)。

    表1 不同培養(yǎng)基的芽誘導(dǎo)的效果比較

    2.2 不同培養(yǎng)基對芽增殖的影響

    將誘導(dǎo)出的再生芽接種到增殖培養(yǎng)基中,培養(yǎng)20 d后芽基部形成叢生芽,再經(jīng)10~15 d培養(yǎng)后,對增殖的成型芽進(jìn)行切割、轉(zhuǎn)接。由表2可知,配方7培養(yǎng)基的苗基部誘導(dǎo)出較多小芽,株型較好,且增殖倍數(shù)達(dá)4~5倍。增殖過程中有部分芽,株型緊湊,大部分誘導(dǎo)出的小芽具有典型的形態(tài)特征,生根培養(yǎng)30 d后可直接進(jìn)行移栽。對于較弱小的芽,需進(jìn)一步轉(zhuǎn)接培養(yǎng)。

    表2 不同培養(yǎng)基的芽增殖效果比較

    2.3 生根壯苗

    在培養(yǎng)過程中光照對花影壽的影響較大,光照強度為3 000 Lx時有利于植株成型,光照強度為2 000 Lx時,植株出現(xiàn)徒長現(xiàn)象。試驗還發(fā)現(xiàn),配方(8)培養(yǎng)基上培養(yǎng)的苗比配方(9)培養(yǎng)基上的苗株型緊湊,窗面紋脈更清晰。

    圖1 芽增殖誘導(dǎo)

    圖2 生根壯苗培養(yǎng)

    2.4 煉苗及移栽

    生根壯苗培養(yǎng)30 d后,植株逐漸長大并形成具有典型觀賞特征的組培苗,將瓶苗移出培養(yǎng)室,在常溫室內(nèi)自然光照下培養(yǎng)2~3 d,隨后開瓶煉苗1~2 d,然后取出帶根的小苗,用清水沖洗干凈根部培養(yǎng)基,用低濃度多菌靈浸泡10 min,在陰涼通風(fēng)處自然晾干。隨后均勻插入基質(zhì)中(泥碳∶細(xì)沙∶蛭石=1∶1∶1),發(fā)現(xiàn)組培苗根系處于新鮮狀態(tài)時,緩沖期較短,新根長出僅需15~20 d;而當(dāng)組培苗根系處于干蔫狀態(tài)時,緩沖期較長,需30~50 d長出新根?;ㄓ皦蹖諝鉂穸纫筝^高,移栽過程中空氣濕度達(dá)80%以上時,移栽成活率在90%以上,等植株長出新根后進(jìn)行第1次澆水。

    3 結(jié)論與討論

    目前百合科十二卷屬植物組織培養(yǎng)和快速繁殖研究已有報道,如截形十二卷[1]、康平壽[2]、冰燈玉露[3]、毛玉露[4]、“高地”截形瓦葦[5]、美吉壽[6]、萬象[7]等均用花葶作為誘導(dǎo)材料。而選擇葉片為誘導(dǎo)材料進(jìn)行組織培養(yǎng)的,目前僅有水晶掌[8]、玉扇[9]、巴迪亞壽(Haworthia mirabilis)[10]、點紋十二卷[11]等。本研究采用花影壽葉片誘導(dǎo)再生植株,對母株雖有損傷,但具有一定的時效性,能縮短等待抽花葶的時間。

    不同培養(yǎng)基對花影壽葉片誘導(dǎo)愈傷組織培養(yǎng)時,選擇植株的外輪、中輪葉片為誘導(dǎo)材料,以MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.2 mg/L培養(yǎng)基誘導(dǎo)愈傷分化芽效果最佳,誘導(dǎo)率為53%。用不同培養(yǎng)基進(jìn)行芽增殖培養(yǎng)時,最佳培養(yǎng)基是MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L,在添加KT的培養(yǎng)基上,對芽增殖具有促進(jìn)作用,且增殖芽無玻璃化,增殖倍數(shù)達(dá)4~5倍,分化的小芽培養(yǎng)30 d后株型均較好。生根培養(yǎng)基以1/2MS為最佳,得到的組培苗株型好,“窗”面紋理清晰,具有較好的觀賞價值,移栽成活率達(dá)90%以上。

    [1] 孫濤,李德森.截形十二卷的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].植物生理學(xué)報,2002,38(6):586-586.

    [2] 孫濤,金蕊,李德森.康平壽的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].植物生理學(xué)報,2003,39(3):232.

    [3] 宋揚.冰燈玉露的組織培養(yǎng)與快速繁殖技術(shù)研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2014,(18):164,166.

    [4] 高越,王婭欣,孫濤,等.毛玉露的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].生物學(xué)通報,2010,45(6):54-55.

    [5] 許繼勇,麥瑜玲,鄭添群,等.“高地”截形瓦葦?shù)慕M織培養(yǎng)與快速繁殖技術(shù)研究[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué),2006,12(2):8-10.

    [6] 王泉,左志宇,宋曉濤,等.百合科多肉植物美吉壽的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].植物生理學(xué)報,2008,44(1):123-124.

    [7] 黃清俊,丁雨龍,唐曉英.珍奇多肉植物萬象微型繁殖[J].北方園藝,2007(5):191-193.

    [8] 黃素華,肖惠勻,洪燕萍.水晶掌組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].福建師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2014,30(5):96-100.

    [9] 李劼,長靜,盧濤.玉扇的快速繁殖[J].中國科技信息,2008 (12):78.

    [10] 趙昂,左志宇,宋曉濤,等.Haworthia mirabilis的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].植物生理學(xué)報,2007,43(6):1137-1138.

    [11] 劉春梅,張紅.點紋十二卷的組培與快繁研究[J].安徽農(nóng)學(xué)通報,2012,18(3):32.

    2016-12-01

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