東北迎春花組培快繁試驗

摘 要：本文對東北迎春花的組培快繁技術(shù)進行了研究，結(jié)果表明，取外植體代有腋芽的莖條切段進行組織培養(yǎng)，附加不同量的6-BA和NAA進行分化誘導(dǎo)，可以獲得叢生無根苗；以附加不同濃度的NAA和IBA誘導(dǎo)生根，可以獲得再生植株。

關(guān)鍵詞：東北迎春花；組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基

東北迎春花（又名黃連翹）是具有較高觀賞價值的木本花卉，整個生長季葉色呈金黃色，對豐富城市綠化植物的種類及色彩有重要的作用。為了快速擴大其種群數(shù)量，我們從2005年起對其開展了組培快繁技術(shù)的研究?，F(xiàn)將其快繁技術(shù)總結(jié)如下。

一、試驗材料與方法

1.試驗材料

從生長在溫室的1年生的、生長健壯、無病植株上，選取木質(zhì)比較輕的莖條，用帶有腋芽的莖條切段作為外植體。

2.研究方法

（1）外植體的表面消毒。采回的嫩莖條去葉，先整段用刷子沾適量洗衣粉或者洗潔凈認(rèn)真刷洗后，剪成幾大段。然后在超靜工作臺上用70%酒精浸泡20s，再在0.1%升汞溶液浸泡12～15min，并不斷攪動，無菌水漂洗數(shù)次，最后分切為1.0cm帶莖切段，用無菌濾紙吸干表面水分進行接種。

（2）試驗用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件（激素含量為mg/l）。在初代培養(yǎng)階段，選取MS、WPM、改良WPM為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度的細(xì)胞分裂素6-BA、KT、2-ip及生長素NAA；在繼代與增殖培養(yǎng)階段，選取改良WPM為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度的細(xì)胞分裂素6-BA、生長素NAA；在生根培養(yǎng)階段，選取改良WPM為基本培養(yǎng)基，附加不同濃度的生長素NAA、IBA、IAA。

二、結(jié)果與分析

1.初代培養(yǎng)階段。此階段的目的就是誘導(dǎo)腋芽萌發(fā)，形成無菌苗。這里我們初選用MS、WPM兩種基本培養(yǎng)基作為參試培養(yǎng)基，并附加6-BA3.0mg/l。它們的特點是MS培養(yǎng)基是目前應(yīng)用最廣的，它的含量均較高，微量元素也較齊全，濃度較高。而WPM是專門為木本植物組織而設(shè)計的一種培養(yǎng)基，為中等無機鹽含量培養(yǎng)基，其特點是硝酸鹽含量較低，Ca含量較高 。

實驗表明，不同的培養(yǎng)基對東北迎春花外植體的啟動、褐變、分化反應(yīng)明顯不同，MS對東北迎春花組培不適合，其啟動速度慢，褐變率高，分化率低，生長狀況極其不好，培養(yǎng)一段時間后甚至有死亡植株。WPM較為適宜，外植體啟動快，褐變率低，分化率高，但生長狀況一般，叢生芽形成數(shù)量不十分多，莖條也較細(xì)。我們對WPM進行一些改動，簡稱改良WPM，其啟動、分化、生長狀況都優(yōu)于WPM。實驗結(jié)果見表1。

一般來說，植物的再生過程有三種方式：一是誘導(dǎo)形成大胚狀體；二是誘導(dǎo)形成大量不定芽；三是誘導(dǎo)形成叢生芽。

對東北迎春花，我們采用第三種途徑。此途徑不會產(chǎn)生變異，能保持該品種的優(yōu)良特性。根據(jù)前人的研究的成果 ，我們選取不同濃度的細(xì)胞分裂素6-BA 與生長素NAA來誘導(dǎo)分化。能否誘導(dǎo)腋芽，細(xì)胞分裂素起到關(guān)鍵作用，這主要由于一定濃度細(xì)胞分裂素能有效解除頂端優(yōu)勢，使腋芽不斷分化與生長。這里6-BA和KT能很好的誘導(dǎo)腋芽分化，其中6-BA的誘導(dǎo)分化速率最快。而2-ip誘導(dǎo)分化效果最差。

2.繼代與增殖階段。此階段的目的是在短期內(nèi)獲得大量適合生根的嫩莖條。將上一階段誘導(dǎo)培養(yǎng)的叢生芽切成幾個小部分轉(zhuǎn)接到繼代與增殖培養(yǎng)基中。實驗表明，最初轉(zhuǎn)入增殖時，嫩莖條增加的倍數(shù)比較低，但經(jīng)過多次繼代以后，倍增加大，叢壯苗明顯增加.。而不同濃度的細(xì)胞分裂素6-BA 與生長素NAA對繼代增殖影響效果是不同的。

3.生根培養(yǎng)階段

（1）不同濃度的生長素對試管苗生根率的影響。將繼代增殖形成的2-3cm的嫩莖條切下后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)5-15天讓其生根，從試驗得出，用NAA、IBA 和IAA分別誘導(dǎo)生根，NAA和IBA誘導(dǎo)生根，其生根率很相近，都達到了百分之九十以上；而IAA誘導(dǎo)生根，生根率只有百分之六七十，明顯低于前二者。

（2）不同種類的生長素對根的形態(tài)及根長的影響。附加不同種類的生長素，在相同的培養(yǎng)時間的條件下，誘導(dǎo)生根情況各不相同。

NAA誘導(dǎo)生根，在植株基部形成愈傷組織，繼而產(chǎn)生呈放射狀排列的短粗型根。從愈傷組織產(chǎn)生的不定根，往往與莖之間無維管束組織的直接聯(lián)系。這樣的不定根在移苗時，根易脫落，成活率極低。而分別由NAA和IAA誘導(dǎo)生根，植株基部不形成愈傷組織，根直接由植株基部生出，所誘導(dǎo)的根為細(xì)長型，并具有側(cè)根，在移苗時，根不易脫落，成活率高。綜合NAA和IBA 對生根的作用，我們將它們組合，選取二者最適宜的濃度共同誘導(dǎo)生根，結(jié)果平均每株生根數(shù)為6.9個，根長為1.7，根較粗壯，有側(cè)根，較少產(chǎn)生愈傷組織。

三、結(jié)語

1.在初代培養(yǎng)階段，以改良WPM作為基本培養(yǎng)基，以6-BA1mg/l+NAA0.05mg/l組合最適合東北迎春花外植體誘導(dǎo)分化。

2.在繼代與增殖培養(yǎng)階段，以改良WPM作為基本培養(yǎng)基，以6-BA3mg/l+NAA0.05mg/l組合效果最為理想。

3.在生根培養(yǎng)階段，以NAA0.01mg/l+IBA0.05mg/l組合生根效果最好。

4.利用細(xì)胞分裂素可以促進腋芽的快速形成，從而使嫩莖獲得增殖，這是快繁的一個重要途徑。該途徑速率較快，繁殖系數(shù)較高，遺傳性狀穩(wěn)定。

作者簡介：龐九華（1963-），男，齊齊哈爾籍，大學(xué)本科，高級工程師，主要從事園林規(guī)劃設(shè)計、工程施工管理與技術(shù)推廣工作。

通訊作者：劉炳友（1963-），男，大學(xué)學(xué)歷，現(xiàn)任齊市建華區(qū)人民政府森林防火指揮部常務(wù)副總指揮、區(qū)林業(yè)局局長，研究員級高級工程師，省級高層次農(nóng)村實用人才，享受政府特殊津貼專家，主要從事林業(yè)科研、林業(yè)技術(shù)推廣與林業(yè)工程設(shè)計及管理工作。