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    淺談如何提取檢測微量元素硒

    2017-04-20 23:48:48張艷秋韓永超尹桂麗
    科學與財富 2016年35期
    關鍵詞:原子吸收光譜法分光光度法熒光法

    張艷秋+韓永超+尹桂麗

    摘 要:微量元素在人們的身體中是十分重要的,雖然微量元素在人體中的含量較少,但是卻是人和動物生存的必需元素,硒作為微量元素中十分重要的組成部分,可以提高人們的身體機能,在增強身體的免疫力上也至關重要。硒含量過高會引起機體中毒,但長期缺失卻又會引起缺硒的疾病。并且硒的毒性以及營養(yǎng)性僅在一個較小的含量變化范圍中變動,所以提取檢測以及分析研究硒元素已為越來越多的人們所重視。本文就是對如何提取檢測微量元素硒進行分析,為相關的研究提供借鑒。

    關鍵詞:微量元素;標準硒溶液;分光光度法;熒光法;原子吸收光譜法;色譜法

    1 分光光度法

    分光光度法在進行硒檢測的時候使用是非常廣泛的,在硒檢測的過程中,使用分光光度法可以使用較為低廉的設備,在這樣的情況下就可以降低成本,在降低成本的過程中可以將整個檢測的速度提高到一定的水平,這樣的檢測方式是非常重要的,需要得到我們的重視。這種方式在水樣和含硒藥品中進行硒含量的檢測使用的頻率較多,因為進行含硒藥品的檢測是十分復雜的,需要的成本較高,如果使用這種方式就可以將成本問題解決,但是這種檢測方式在選擇性較高的檢測中使用的較少。經(jīng)常使用的分光光度法有兩種,一種是二氨基聯(lián)苯胺法,另一種是苯肼催化法,這兩種方式在使用的過程中都會產(chǎn)生較大的誤差,這樣就會給檢測帶來極大的困擾,對檢測是非常不利的,在檢測的過程中會出現(xiàn)控制困難的問題。采用2,3二氨基萘顯色法檢測藥品中硒的含量重現(xiàn)性好,檢測誤差小。下面對本廠硒酵母3批次產(chǎn)品進行試驗,硒的檢測過程可控,誤差小,重現(xiàn)性好。

    (1)檢測原理: 采用氧瓶燃燒法將供試品經(jīng)燃燒分解,使結合在骨架上或被吸附的微量硒成為硒的氧化物,利用鹽酸羥胺,將Se6+還原為Se4+,在pH2.0±0.1的條件下與二氨基萘作用,生成4,5-苯并苯硒二唑,用環(huán)已烷提取后,用紫外-可見分光光度計在378nm處測定其吸光度,并與硒對照溶液同法測得的吸光度進行比較。

    (2)操作方法

    硒對照紙的制備:精密量取標準硒溶液(100μg/ml)200μl,滴加到3x3cm定量色譜濾紙上,吹干,折好后備用。

    標準溶液、供試品溶液、空白溶液的制備:取粉末適量,精密稱定(約相當于含硒20μg,用3x3cm定量色譜濾紙包好,另取硒對照紙和3x3cm的空白定量色譜濾紙,按折疊后,固定于鉑絲下端的螺旋處,露出濾紙條。分別用1000ml氧氣燃燒瓶,以硝酸溶液(1→30)25ml為吸收液,急速通氧約1分鐘,立即用表面皿覆蓋瓶口。點燃包有供試品的濾紙尾部,迅速將瓶塞插入燃燒瓶中,按緊瓶塞,并用少量水封閉瓶口,燃燒完畢(應無灰色、黑色碎片或顆粒,若燃燒后留有灰色、黑色碎片或顆粒,表示供試品燃燒不完全,遇此情況應重新取樣燃燒),立即充分振搖,使生成的煙霧完全吸入吸收液中放置15分鐘,開啟瓶塞,用少量水沖洗瓶塞及鉑絲載樣器,合并洗液及吸收液,分別移至100ml燒杯中,用水30ml分次洗滌燃燒瓶及鉑絲、洗液分別并入各燒杯中,即得供試品溶液、標準溶液,空白溶液。

    將上述三種溶液分別用濃氨溶液調PH值至2.0±0.1,各加鹽酸羥胺溶液(1→2)1ml,搖勻,精密加2,3-二氨基萘試液5ml,搖勻,在水浴中加熱5分鐘,冷卻后,分別移至分液漏斗,加少量的水,分次洗滌燒杯,洗滌液并入分液漏斗中,加水使總體約為70ml,各加入環(huán)已烷10ml,強力振搖2分鐘,放置,分層后棄去水層,分出環(huán)已烷層,用1g無水硫酸鈉脫水,用紫外-可見分光光度法在378nm的波長處分別測定吸光度,計算,即得。

    檢測結果:

    此方法可用于含量硒藥品的檢測。

    2 熒光法

    熒光法也是一種對微量元素硒進行檢測的方法,利用這種方法在檢測的過程中,應用的范圍也較為廣泛,尤其是在硒化合物的分析中,這種方法是非常重要的。隨著生物化學技術的不斷發(fā)展,在進行硒檢測的過程中,對水樣也有著一定的要求,水樣中硒的含量不能夠大于1μg,在這樣的情況下才能進行檢測。

    利用熒光法進行硒的檢測,在發(fā)射的波長上有著要求,波長必須要大于390nm,還要小于600nm。這種方式存在一個不可避免的缺陷,無法排除干擾物的影響。因此結果往往會比實際含量偏高。

    3 原子吸收光譜法

    原子吸收光譜法是利用自身的特性進行測量,利用這種方法對硒含量進行測量,這種方法是活躍度較高的一種方式,在靈敏度上也有著嚴格的要求,在準確性上也需要人們的關注。這種方法被廣泛的應用于生物、水樣和食品的檢測中,靈芝孢子粉的測定主要是利用原子吸收光譜法,這種方法在進行靈芝孢子粉的使用上,需要使用石墨爐的吸收方法,在檢測的過程中,需要嚴格控制每一個環(huán)節(jié),避免在檢測的過程中出現(xiàn)問題。

    4 色譜法

    色譜法在醫(yī)藥、食品、化工、石油、農(nóng)藥和環(huán)境檢測硒含量的測定中應用較為廣泛,主要原因為色譜法效能高、選擇性好、靈敏度高、速度快,僅需少量樣品、簡單的設備,便可以獲得準確含量。近年來飼料、生物材料的硒檢測中色譜法得到了廣泛的應用。但色譜法在進行硒測定中需要進行衍生,例如對環(huán)境樣品陰離子進行離子色譜測定,通過高效液相色譜法對魚中含量硒進行測定。研究者提出通過使用ICP-MS以及高效液相分離和FAAS做為硒化學形態(tài)測定中的元素專一檢測設備。在優(yōu)化的HPLC條件下,用ESAIII陰離子色譜柱(250*4.6mm),以檸檬酸銨為流動相(5.5mol/L,pH5.5),流速為1.5mL/min,進樣量為100μL,分離和測定三甲基硒離子、硒代蛋氨酸、亞硒酸和硒酸鹽只需8min。

    5 其他分析法

    隨著測定方式和研究方法的發(fā)展進步,提取分析方式不斷的發(fā)生變化,在凈水劑、頭發(fā)以及水樣的微量硒檢測中,越來越多的分析方式不斷涌現(xiàn),這些方法都具有一定的特色,在精度、準度以及靈敏度和選擇性上都各有優(yōu)勢。例如,在頭發(fā)、指甲的硒含量測定中通過使用中子活化法進行測定。通過該種方法測定出的結果被人們看做是標準精度值,但是由于設備投入較高因此該方式應用范圍較為狹窄。

    結束語

    通過以上分光光度法、熒光法、原子吸收分光光度法、色譜法等對微量元素硒的提取檢測方法的分析,可以看出,紫外分光光度法中2.3-二氨基萘顯色法對藥品中微量硒的檢測操作簡便、重現(xiàn)性好、準確度高,可用于一般富硒藥品的檢測。熒光法對海藻類產(chǎn)品進行檢測,回收率可達97.7%。原子吸收光譜法以其靈敏度高,結果準確,預處理簡單的特點,廣泛應用于食品、生物以及水樣檢測。色譜法在飼料、生物材料等的硒檢測中得到廣泛應用。但是目前對于微量硒的提取仍存在較大的困難,所以具體的提取、分析方法選擇還需要根據(jù)測定的樣品實際數(shù)量、性質以及測定要求,進行適當?shù)倪x擇。同時,通過科學的方式進行富硒動植物的培育,開發(fā)出相應的生物制品,用以滿足人們對健康的硒含量的要求。

    參考文獻

    [1]吳夢雅.淺談原子吸收光譜法[J].化工設計通訊.2016(02).

    [2]孫丹陵.流動注射氫化物發(fā)生原子吸收分光光度法測定硒[J].微量元素與健康研究.2012,19(2).

    [3]袁作友.原子吸收光譜法的應用及干擾排除[J].中小企業(yè)管理與科技(下旬刊).2014(03).

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