異氟醚對(duì)阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響*

趙燕星，蘇殿三，陳 杰，王祥瑞

（1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門(mén)醫(yī)院 麻醉科，北京 100053；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院 麻醉科，上海 200127）

基礎(chǔ)研究·論著

異氟醚對(duì)阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響*

趙燕星1，蘇殿三2，陳 杰2，王祥瑞2

（1.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門(mén)醫(yī)院 麻醉科，北京 100053；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院 麻醉科，上海 200127）

目的 研究異氟醚對(duì)阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因型小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法將轉(zhuǎn)基因小鼠分為轉(zhuǎn)基因異氟醚組（Tg-iso組）及轉(zhuǎn)基因空白對(duì)照組（Tg-con組），野生型分為野生異氟醚組（Wt-iso組）及野生空白對(duì)照組（Wt-con組）。Tg-iso組及Wt-iso組于7個(gè)月齡行異氟醚麻醉，吸入1.1%異氟醚2 h，連續(xù)5 d。同時(shí)Tg-con及Wt-con組吸入30%氧氣與70%氮?dú)獾幕旌蠚怏w。麻醉后48 h各組行水迷宮實(shí)驗(yàn)，麻醉后5個(gè)月各組行Y迷宮實(shí)驗(yàn)。結(jié)果 7個(gè)月齡時(shí)：與Wt-con組比較，Wt-iso組的潛伏期縮短（P= 0.013）；與Tg-con組比較，Tg-iso組的潛伏期縮短（P=0.043）；各組間空間探索實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)象限時(shí)間和路程百分比的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.392和P=0.300）。12個(gè)月齡時(shí)：與Tg-con組比較，Wt-con組和Tg-iso組辨別錯(cuò)誤次數(shù)明顯減少（P=0.044和P=0.020）。結(jié)論 短時(shí)間重復(fù)吸入低濃度的異氟醚不增加阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因型小鼠及野生對(duì)照型小鼠近期及遠(yuǎn)期學(xué)習(xí)記憶能力障礙的風(fēng)險(xiǎn)，反而在一定程度上有減輕的作用。

學(xué)習(xí)記憶；異氟醚；APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠；Y迷宮；Morris水迷宮

隨著人口老齡化的到來(lái)，阿爾茨海默?。╝lzheimer's disease，AD）的發(fā)病率也隨之增高。部分患者，特別是老年患者于手術(shù)和麻醉后會(huì)出現(xiàn)術(shù)后認(rèn)知功能障礙，兩者主要表現(xiàn)為認(rèn)知障礙和記憶力損害及日常生活能力下降。那么，手術(shù)或麻醉是否會(huì)加速AD患者認(rèn)知功能的改變不得而知。針對(duì)AD的發(fā)病機(jī)制存在多種模型，其中轉(zhuǎn)基因小鼠模型以模擬AD患者主要病理改變，如老年斑、神經(jīng)元纖維纏結(jié)，成為研究AD發(fā)病機(jī)制和藥物篩選的理想模型。本實(shí)驗(yàn)采用阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠模擬以上AD病理機(jī)制，以觀察重復(fù)吸入異氟醚在不同時(shí)期對(duì)其學(xué)習(xí)記憶能力的影響，從而為臨床上阿爾茨海默病患者實(shí)施麻醉提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠，由中國(guó)科學(xué)院神經(jīng)科學(xué)研究所段樹(shù)民院士饋贈(zèng)。

1.2 試劑與儀器

引物（上海英駿公司合成），Taq酶（上海申能博彩公司），異氟醚（美國(guó)雅培公司），30%氧氣O2與70%氮?dú)釴2的混合氣體。主要儀器：聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）儀，電泳儀，Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)2.0（上海吉量軟件科技有限公司），Y迷宮，Datex-Ohmeda麻醉氣體監(jiān)測(cè)儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 轉(zhuǎn)基因小鼠的繁殖 C57BL/6J雌鼠與C3H/ HeJ雄鼠交配得到F1代，再將F1代與3個(gè)月齡的阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠交配得到F2代。由于APPswe和PS1dE9是連鎖遺傳，按照孟德?tīng)栠z傳規(guī)律，F(xiàn)2代50%為阿爾茨海默病APP swe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因型小鼠。

1.3.2 轉(zhuǎn)基因小鼠的基因型鑒定 F2代小鼠剪尾，提取鼠尾DNA，紫外分光光度計(jì)分析DNA濃度，PCR擴(kuò)增目的基因APP、PS1，瓊脂糖凝膠電泳分析。PCR反應(yīng)中所用的具體序列為：APP正向引物（P1）：5'-G ACTGACCACTCGACCAGGTTCTG-3'，反向引物（P2）：5'-CTTGTAAGTTGGATTCTCATATCCG-3'；PS1正向引物（P3）：5'-GTGGATAACCCCTCCCCCAGCCTAG ACC-3'，反向引物（P4）：5'-AATAGAGAACGGCAGG AGCA-3'。Prp基因作為內(nèi)參。PCR的反應(yīng)體系為20μl，其中：10×PCR buffer 2μl，25 mmol氯化鎂MgCl21.6μl，2 mmol dNTP 2μl，DNA 100 ng，引物10mmol P1、P2各0.5μl（或P3、P4），Taq 3～5 u，另PS1基因加50%甘油4μl，加水補(bǔ)足20μl。APPswe基因反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性3 min，94℃變性30 s，69℃退火60s，72℃延伸60 s，共35次循環(huán)后72℃再延伸3 min，PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度約為300 bp。PS1基因反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性15 min，94℃變性30 s，55℃退火45 s，72℃延伸90 s，共40次循環(huán)后72℃再延伸5 min，PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度約為1 200 bp。

1.3.3 實(shí)驗(yàn)分組及麻醉方法 繁殖的小鼠根據(jù)是否含APP和PS1基因分為轉(zhuǎn)基因組（以下稱為T(mén)g）和野生對(duì)照組（以下稱為Wt），再將Tg小鼠分為轉(zhuǎn)基因異氟醚組（Tg-iso）及轉(zhuǎn)基因空白對(duì)照組（Tg-con），將Wt小鼠分為野生異氟醚組（Wt-iso）及野生空白對(duì)照組（Wt-con）。于7個(gè)月齡對(duì)Tg-iso組及Wt-iso組行異氟醚麻醉，吸入1.1%異氟醚和O2/N2（FiO230%）的混合氣體，連續(xù)5 d，2 h/d。同時(shí)Tg-con及Wt-con組吸入O2/N2（FiO230%）的混合氣體。氧氣流量2 L/min。Datex-Ohmeda持續(xù)監(jiān)測(cè)異氟醚濃度。電熱毯加熱，維持小鼠體溫（37±0.5）℃（肛溫）。

1.3.4 Morris水迷宮 小鼠于7個(gè)月齡異氟醚麻醉后48 h行水迷宮實(shí)驗(yàn)。水迷宮由直徑100 cm，高50 cm的水池組成，分為4個(gè)象限，水位沒(méi)過(guò)逃生平臺(tái)1 cm，水溫（25±2）℃。水池底及四壁均涂成黑色使平臺(tái)不可見(jiàn)。采用Morris水迷宮視頻分析系統(tǒng)2.0監(jiān)測(cè)并記錄小鼠的游泳軌跡。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)程序包括：①定位航行實(shí)驗(yàn)用于測(cè)量小鼠獲取空間學(xué)習(xí)記憶的能力。歷時(shí)4d，4次/d，每次訓(xùn)練間隔15 s。將小鼠從4個(gè)入水點(diǎn)隨機(jī)地放入水中，通過(guò)自動(dòng)錄像系統(tǒng)記錄小鼠90 s內(nèi)找到平臺(tái)的時(shí)間（逃避潛伏期）。找到平臺(tái)后休息30s，如果90 s內(nèi)找不到平臺(tái)，逃避潛伏期記錄為90 s。然后人為地將小鼠誘導(dǎo)至平臺(tái)休息30s。②空間探索實(shí)驗(yàn)用于測(cè)量小鼠學(xué)會(huì)尋找平臺(tái)后，保持對(duì)平臺(tái)空間位置記憶的能力。即訓(xùn)練第5天拆除平臺(tái)，將小鼠從1、3象限面向池壁放入水中，記錄60 s內(nèi)小鼠在原目標(biāo)象限的路程和時(shí)間百分比，兩次測(cè)量取平均值。認(rèn)知測(cè)試過(guò)程中保持實(shí)驗(yàn)室內(nèi)燈光、物品等空間參照物擺放位置不變，以排除環(huán)境干擾。

1.3.5 Y迷宮 小鼠于12個(gè)月齡時(shí)行Y迷宮實(shí)驗(yàn)。測(cè)試前在迷宮中適應(yīng)5 min，測(cè)試時(shí)調(diào)節(jié)刺激電壓以保證小鼠在5 s內(nèi)進(jìn)入安全臂。小鼠在5 s內(nèi)進(jìn)入安全臂不會(huì)受到電擊，為正確反應(yīng)，否則為錯(cuò)誤反應(yīng)。每7 s進(jìn)行1次電擊，直到進(jìn)入安全臂。記錄訓(xùn)練次數(shù)、正確次數(shù)和辨別錯(cuò)誤次數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用重復(fù)測(cè)量的雙因素方差分析（兩個(gè)控制因素分別為實(shí)驗(yàn)日期與實(shí)驗(yàn)分組）比較定位航行實(shí)驗(yàn)所測(cè)的游泳速度、游泳路程及潛伏期。采用單因素方差分析比較定位航行實(shí)驗(yàn)每天的游泳速度、游泳路程及潛伏期，以及空間探索實(shí)驗(yàn)所測(cè)的時(shí)間與路程百分比，以及Y迷宮的訓(xùn)練次數(shù)、正確次數(shù)和辨別錯(cuò)誤次數(shù)，其中組間兩兩比較采用LSD法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 小鼠的繁殖及基因型鑒定結(jié)果

F2代小鼠91只，其中轉(zhuǎn)基因型49只，野生型42只。PCR結(jié)果顯示 49只小鼠出現(xiàn)APP，PS1陽(yáng)性條帶，見(jiàn)圖1，與預(yù)計(jì)擴(kuò)增目的基因大小一致（APP 300 bp，PS1 1 200 bp）。分別將轉(zhuǎn)基因型49只和野生型42只隨機(jī)分為異氟醚組（Tg-iso組、Wt-iso組）和對(duì)照組（Tg-con組、Wt-con組），12個(gè)月齡存活的Tg-iso組20只、Tg-con組23只、Wt-iso組16只、Wt-con組18只。

2.2 Morris水迷宮結(jié)果

游泳速度是反映各組小鼠運(yùn)動(dòng)能力的指標(biāo)。定位航行實(shí)驗(yàn)期間各組游泳速度比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.525）。見(jiàn)圖2。

隨著訓(xùn)練時(shí)間的延長(zhǎng)，各組小鼠的潛伏期逐漸縮短。定位航行實(shí)驗(yàn)第3天，各組潛伏期比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.781，P=0.015）。整個(gè)過(guò)程Wt-iso組的潛伏期最短，Tg-con組的潛伏期最長(zhǎng)（F=4.944，P=0.004）。與Wt-con組比較，Wt-iso組的潛伏期縮短（P=0.013），與Tg-con組比較，Tg-iso組的潛伏期縮短（P=0.043）。見(jiàn)圖3。

隨著訓(xùn)練時(shí)間的延長(zhǎng)，除Tg-con組游泳路程無(wú)明顯變化，其余各組小鼠的游泳路程逐漸縮短，但各組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=2.727，P=0.052）；定位航行實(shí)驗(yàn)第3天，各組游泳路程比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.128，P=0.032）。與Tg-con組比較，Tg-iso組游泳路程縮短（P=0.027）。見(jiàn)圖4。

目標(biāo)象限時(shí)間百分比和路程百分比各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.392和0.300）。見(jiàn)圖5。

2.3 Y迷宮結(jié)果

圖1 鼠尾PCR檢測(cè)電泳圖

圖2 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中各組小鼠運(yùn)動(dòng)能力的比較

圖3 定位航行實(shí)驗(yàn)中各組小鼠潛伏期的比較

圖4 定位航行實(shí)驗(yàn)中各組小鼠游泳路程的比較

圖5 空間探索實(shí)驗(yàn)中各組小鼠目標(biāo)象限時(shí)間、路程百分比的比較

圖6 Y迷宮實(shí)驗(yàn)中各組小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的比較

如圖6所示，各組辨別錯(cuò)誤次數(shù)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=3.247，P=0.046）。與Tg-con組比較，Wt-con組及Tg-iso組辨別錯(cuò)誤次數(shù)明顯減少（P=0.044和0.020）。

3 討論

有實(shí)驗(yàn)采用的APPswe/PS1AE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠可以模擬AD患者腦內(nèi)β-淀粉樣蛋白沉積所致的老年斑和tau蛋白磷酸化所致的神經(jīng)纖維纏結(jié)等主要病理改變，而且隨著月齡的增加其行為學(xué)方面也表現(xiàn)出不同程度的認(rèn)知功能障礙[1-2]，為研究的實(shí)施提供很好的動(dòng)物模型。

本實(shí)驗(yàn)選擇小鼠7個(gè)月齡時(shí)行異氟醚麻醉，據(jù)報(bào)道此月齡的APPswe/PS1AE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠尚未出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙[1]。而實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)Wt-con組與Tg-con組的潛伏期及游泳路程比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明此時(shí)APPswe/PS1AE9小鼠尚未產(chǎn)生認(rèn)知功能障礙。在定位航行實(shí)驗(yàn)中，與Wt-con組比較，Wt-iso組的潛伏期及游泳路程縮短；與Tg-con組比較，Tg-iso組的潛伏期縮短?？梢?jiàn)不論是APPswe/ PS1AE9小鼠還是野生對(duì)照型小鼠，異氟醚麻醉后在定位航行實(shí)驗(yàn)中的潛伏期均較自身對(duì)照組縮短，且野生型小鼠的游泳路程也明顯較對(duì)照組縮短，表明重復(fù)異氟醚麻醉并未增加轉(zhuǎn)基因型及野生型小鼠近期學(xué)習(xí)記憶功能障礙，與對(duì)照組比較其學(xué)習(xí)記憶能力在某種程度上反而有一定的提高。SU等[3]用C57小鼠行異氟醚重復(fù)麻醉（每天吸入1.4%異氟醚2 h，共5 d），48 h后行水迷宮實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)異氟醚麻醉后的小鼠學(xué)習(xí)能力明顯增強(qiáng)，但麻醉后2周再次行水迷宮實(shí)驗(yàn)，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組空間探索實(shí)驗(yàn)所測(cè)的時(shí)間與路程百分比沒(méi)有區(qū)別，在定位航行實(shí)驗(yàn)中，不論是潛伏期還是游泳路程的比較，統(tǒng)計(jì)差異主要出現(xiàn)于前3天，這說(shuō)明異氟醚可能主要影響學(xué)習(xí)的過(guò)程，一旦形成記憶后異氟醚的影響就變得不明顯。SU等[3]的研究結(jié)果也顯示空間探索實(shí)驗(yàn)中時(shí)間與路程百分比異氟醚組與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。已有大量的臨床及動(dòng)物研究均證實(shí)異氟醚可增加老年患者認(rèn)知功能障礙的風(fēng)險(xiǎn)，但本實(shí)驗(yàn)于小鼠中年時(shí)期進(jìn)行異氟醚重復(fù)麻醉，而且近期的研究表明某些干預(yù)措施可以減輕異氟醚對(duì)這種認(rèn)知功能的損傷[4-7]。LIU等[8]的研究發(fā)現(xiàn)3個(gè)月齡的C57小鼠吸入0.7%異氟醚0.5 h或2 h，其學(xué)習(xí)記憶的能力增強(qiáng)；吸入1.4%的異氟醚2 h，其學(xué)習(xí)記憶能力與對(duì)照組無(wú)差異；而吸入1.4%的異氟醚4 h，其學(xué)習(xí)記憶能力明顯變?nèi)酢EE[9]報(bào)道吸入2%異氟醚20～30 min可以改善缺氧引起的細(xì)胞損傷，而吸入2%異氟醚60 min或者吸入2.5%異氟醚20～30 min對(duì)缺氧引起的細(xì)胞損傷沒(méi)有改善。PAN[10]的研究證實(shí)吸入0.5%異氟醚8 h可以減輕Caspase-3和H4人類神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞天冬氨酰蛋白酶β位點(diǎn)裂解酶的含量，而吸入2%異氟醚8 h可以增加以上2種物質(zhì)的含量?？梢?jiàn)長(zhǎng)時(shí)間高濃度地吸入異氟醚是導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶能力減退及細(xì)胞損傷的重要原因。該研究的結(jié)果表明重復(fù)吸入異氟醚麻醉不增加術(shù)后認(rèn)知功能障礙的風(fēng)險(xiǎn)，可能與吸入異氟醚的濃度及時(shí)間有關(guān)。1.1%異氟醚麻醉2 h，濃度低，時(shí)間短，對(duì)于APP-swe/PS1AE9及野生對(duì)照小鼠的近期認(rèn)知功能均無(wú)損傷，反而在一定程度上有促進(jìn)的作用。

為了觀察異氟醚重復(fù)麻醉對(duì)APPswe/PS1AE9及野生對(duì)照小鼠認(rèn)知功能的遠(yuǎn)期影響，于小鼠12個(gè)月齡時(shí)進(jìn)行了Y迷宮實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明與Wt-con組比較，Tg-con組辨別錯(cuò)誤次數(shù)明顯增加，說(shuō)明此時(shí)APPswe/PS1AE9小鼠已形成認(rèn)知功能障礙。MINKE VICIENE[1]的研究表明APPswe/PS1AE9小鼠在10個(gè)月時(shí)表現(xiàn)出輕度的認(rèn)知功能損壞，至15個(gè)月時(shí)其認(rèn)知功能損壞表現(xiàn)得非常顯著。Wt-con組與Wt-iso組辨別錯(cuò)誤次數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而Tg-con組較Tg-iso組辨別錯(cuò)誤次數(shù)增加，說(shuō)明異氟醚延緩APP swe/PS1AE9小鼠認(rèn)知功能障礙的發(fā)生，但異氟醚所起的作用及持續(xù)時(shí)間不得而知，可能是Wt-con組與Wt-iso組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的原因。關(guān)于引起本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。近期XIONG等[11]的研究顯示長(zhǎng)期的跑臺(tái)實(shí)驗(yàn)可以改善APPswe/PS1dE9小鼠在水迷宮的空間記憶，可能與腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子含量增加同時(shí)激活的小膠質(zhì)細(xì)胞減少有關(guān)，但與APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)β-淀粉樣蛋白含量無(wú)相關(guān)性。TANIUCHI等[12]的研究認(rèn)為APPswe/ PS1dE9小鼠9個(gè)月的時(shí)候表現(xiàn)出認(rèn)知功能障礙，而此時(shí)正是β-淀粉樣蛋白大量堆積的時(shí)候，ORRE[13]同時(shí)證實(shí)是β-淀粉樣蛋白激活腦內(nèi)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的活性，所以β-淀粉樣蛋白可能是導(dǎo)致APP swe/PS1dE9小鼠認(rèn)知功能損傷的原因。而且IZCO[14]的研究表明伴隨APPswe/PS1dE9小鼠月齡增加，其腦內(nèi)不可溶性β-淀粉樣蛋白逐漸增加，血液內(nèi)不可溶性β-淀粉樣蛋白逐漸減少，同時(shí)其學(xué)習(xí)能力也逐漸下降，兩者有相關(guān)性。LAURSEN[15]的研究進(jìn)一步證明APPswe/PS1dE9小鼠腦室內(nèi)注射乙酰膽堿免疫毒素后其認(rèn)知功能減退，且腦組織內(nèi)斑塊堆積增加，腦內(nèi)β-淀粉樣蛋白含量也增加，認(rèn)為膽堿能系統(tǒng)功能減退可促進(jìn)認(rèn)知功能損傷。關(guān)于本實(shí)驗(yàn)上述結(jié)論的機(jī)制有待進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，短時(shí)間重復(fù)吸入低濃度的異氟醚不增加阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉(zhuǎn)基因型小鼠及野生對(duì)照小鼠近期及遠(yuǎn)期學(xué)習(xí)記憶能力障礙的風(fēng)險(xiǎn)，反而在一定程度上有減輕的作用。其機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。本研究結(jié)果為臨床上對(duì)AD患者及普通患者麻醉的實(shí)施提供了參考依據(jù)，可在一定程度上避免術(shù)后認(rèn)知功能障礙的發(fā)生。

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（張蕾 編輯）

Influences of Isoflurane on learning and memory of APPswe/ PS1AE9 double transgenic mice of Alzheimer disease*

Yan-xing Zhao1,Dian-san Su2,Jie Chen2,Xiang-rui Wang2
(1.Department of Anesthesiology,Guang'anmen Hospital,China Academy of Chinese Medical Science,Beijing 100053,China;2.Department of Anesthesiology,Renji Hospital Affiliated to Medical School of Shanghai Jiao Tong University,Shanghai 200127,China)

Objective To study the influences of Isoflurane on learning and memory of APPswe/PS1AE9 double transgenic mice of Alzheimer disease(AD).Methods Transgenic mice were divided into Tg-iso group and Tg-con group,wild-type mice were divided into Wt-iso group and Wt-con group.At the age of seven months,the Tg-iso group and the Wt-iso group were exposed to 1.1%Isoflurane for 2 hours per day for 5 days.Meanwhile,the mice in the Tg-con group and the Wt-con group inhaled oxygen/nitrogen (FiO2=30%).Learning and memory abilities were tested 48 hours and 5 months after Isoflurane exposure using the Morris Water Maze and Y maze,respectively. Results At the age of seven months,mean latency in the Wt-iso group decreased in a place navigation test compared to the Wt-con group(P=0.013);compared to the Tg-con group,the mean latency decreased in the Tgiso group(P=0.043);there was no significant statistical difference in the target quadrant time or distance percentage in probe trials among the groups(P=0.392).At the age of twelve months,compared to the Tg-con group,the discrimination errors of the Wt-con and Tg-iso groups decreased(P=0.044 and 0.020).Conclusions Repeatedlow-dose Isoflurane anaesthesia does not increase the dysfunction of learning and memory of APPswe/PS1AE9 double transgenic mice and wild type mice,to some extent,can even decrease dysfunction of learning and memory in APPswe/PS1AE9 double transgenic mice and wild type mice.

learning and memory;Isoflurane;APPswe/PS1AE9 double transgenic mice;Y-maze;Morris water maze

R-332

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.04.001

1005-8982（2017）04-0001-06

2016-09-05

國(guó)家自然科學(xué)基金（No：30801069）；上海市自然科學(xué)基金（No：08ZR1413700）；教育部博士點(diǎn)基金（No：200802481094）；上海市科技啟明星項(xiàng)目（No：09QA1403800）

蘇殿三，E-mail：diansansu@yahoo.corn