不同時(shí)間嫁接對(duì)桑樹成活率的影響試驗(yàn)初報(bào)

冉瑞法，劉淑娟，李平平，儲(chǔ)一寧，李鎮(zhèn)剛

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 蠶桑蜜蜂研究所,云南 蒙自 661101)

不同時(shí)間嫁接對(duì)桑樹成活率的影響試驗(yàn)初報(bào)

冉瑞法，劉淑娟，李平平，儲(chǔ)一寧，李鎮(zhèn)剛*

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 蠶桑蜜蜂研究所,云南 蒙自 661101)

桑樹嫁接是良種推廣和品種改良的有效途徑之一。目前傳統(tǒng)的桑樹種質(zhì)資源主要采用嫁接進(jìn)行保存且大多在冬末春初進(jìn)行，這導(dǎo)致桑樹種質(zhì)資源收集的有效時(shí)期較短且集中于秋冬季，不利于野生桑樹性狀考察和資源收集。為了拓寬野生資源的考察收集時(shí)期，2013～2015年，采用不同的嫁接方式在不同時(shí)間對(duì)不同木質(zhì)化程度的穗條進(jìn)行嫁接試驗(yàn)。結(jié)果表明：3月冬芽不同方式嫁接的成活率無顯著差異，6月鮮芽和冬芽不同嫁接方式的桑苗成活率呈極顯著差異，新鮮穗條木質(zhì)化程度與嫁接成活率密切相關(guān)，7芽位以上的鮮芽其嫁接成活率在85%以上，且其簡易芽接在嫁接時(shí)間上沒有太大限制，可以延長桑樹的嫁接時(shí)間。為桑樹資源搜集拓寬了嫁接時(shí)間，以及快速推廣桑樹良種提供了一定的理論依據(jù)。

桑樹；嫁接；種質(zhì)資源；簡易芽接；鋸樁芽接

種質(zhì)是決定生物“種性”，并將其豐富的遺傳信息從親代傳遞給后代的遺傳物質(zhì)總體，種質(zhì)資源是泛指已用于或可用于育種的各種栽培、半野生、野生植物的總稱，它的收集保存為品種改良提供了必要的物質(zhì)基礎(chǔ)，世界各國對(duì)種質(zhì)資源的調(diào)查、收集、保存、利用都極為重視。其中植物種質(zhì)資源的保存主要包括原地保存、異地保存和設(shè)施保存3種方式[1]，但就目前而言，桑樹資源的保存主要是采取異地保存。嫁接是桑樹良種繁育的有效途徑之一，同時(shí)也是桑樹資源保存的主要方式，也有些桑樹資源(滇桑)在嫁接過程中不能成活，只能原地保存[2]。而影響桑樹嫁接成活率的因素也比較多，對(duì)它們的報(bào)道較少，但對(duì)果樹橄欖的研究較多，主要集中在枮?zāi)镜拇旨?xì)程度、嫁接時(shí)間以及嫁接方法等方面[3]，由于桑樹嫁接最佳時(shí)間的限制導(dǎo)致了桑樹穗條的采集時(shí)間相對(duì)較短[4]，不利于野生資源性狀鑒定及保存。

我國對(duì)桑樹的嫁接技術(shù)研究已有很長時(shí)間，最早的洛浦縣對(duì)實(shí)生桑進(jìn)行了換種試驗(yàn)，其成活率達(dá)98%[5]，應(yīng)用的是“T”形芽接，而發(fā)展到現(xiàn)在桑樹的嫁接在江浙一帶還是采用袋接方式的較多，并且為此還發(fā)明了相應(yīng)的機(jī)器[6-7]。在云南早些時(shí)候也引進(jìn)浙江的袋接技術(shù)，但是因地理氣候環(huán)境因素的影響，其成活率普遍較低，現(xiàn)今云南大多采用貼皮芽接，即簡易芽接。鋸樁芽接也在云南多地進(jìn)行，不過嫁接時(shí)間窗口短，只能在樹液充分流動(dòng)的情況下才能進(jìn)行[8]。

目前，國內(nèi)生產(chǎn)上桑樹嫁接主要集中在春節(jié)前后，時(shí)間窗口較短，接穗采集于桑樹休眠期的1年生冬條[9]，國外學(xué)者早已探索了夏季桑樹嫁接的可能[10]。王力等[11]利用未入冬的止芯芽條作為穗條進(jìn)行了試驗(yàn)，拓寬了桑樹的嫁接時(shí)間[12-13]，但采用兩削面嫁接方法相比簡易芽接較復(fù)雜，不能節(jié)約穗芽而減少嫁接株數(shù)，不利于良種的快速推廣。有人嫁接前一天在家把穗芽切好裝進(jìn)罐頭瓶中密封，第二天按需進(jìn)行嫁接，但這也只能在冬季進(jìn)行[14]，也有人把嫁接分為冬接和春接，其實(shí)質(zhì)還是桑樹休眠期嫁接[15]。本文旨在研究增加桑樹嫁接時(shí)間窗口，突破良種繁育初期穗條較少的限制，快速獲得良種推廣所需要的穗條，從而加快桑樹的良種繁育和品種改良。本文對(duì)穗條的種類和老嫩程度以及不同嫁接時(shí)間對(duì)桑樹嫁接成活率的影響進(jìn)行了研究，以期在桑樹種質(zhì)資源的保存及育種過程中，為良種提前大量繁育提供一定的理論依據(jù)，結(jié)果表明：桑樹資源考察收集可以從5月開始持續(xù)到10月并當(dāng)年進(jìn)行嫁接保存，10月以后搜集的資源可以保存到次年春節(jié)進(jìn)行嫁接保存，也為桑樹良種的擴(kuò)繁提供了一年多次嫁接的經(jīng)驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 穗條的采集與保存

冬季穗條：上年12月采集桑枝條，經(jīng)冷藏次年作為嫁接穗條。

新鮮穗條：直接采集自生長3個(gè)月以上的當(dāng)年生枝條。

搜集穗條的要求：桑枝條髓部要明顯、枝(芽)沒有損傷、沒有病蟲害、當(dāng)年生粗細(xì)適中。

嫁接用桑種：魯桑(MorusmulticaulisPerr.)、白桑(MorusalbaLinn.)、山桑(MorusbombycisKoidz.)、廣東桑(MorusatropurpureaRoxb.)、長果桑(MoruslaevigataWall.)、長穗桑(MoruswittiorumHand.-Mazz.)、瑞穗桑(MorusmizuhoHotta.)、華桑(MoruscathayanaHemsl.)、蒙桑(MorusmongollcaSchneid.)。

砧木：雜交桑苗購于浙江桐鄉(xiāng)，第一年栽種次年進(jìn)行嫁接試驗(yàn)，桑園為夏伐栽培形式，鋪設(shè)滴管以保證全年桑樹不缺水。

試驗(yàn)地點(diǎn)：云南省紅河州蒙自市草壩鎮(zhèn)，海拔1260 m，年平均氣溫18.8 ℃，屬南亞熱帶氣候類型。

1.2 試驗(yàn)方法

冬季穗條采集后，用保鮮膜將枝條包封起來，防止水分散失，置于低溫冰箱箱中；新鮮穗條隨剪隨嫁。夏季嫁接時(shí)用塑料薄膜將砧木上端傷口進(jìn)行包扎，減少砧木的水分蒸發(fā)，可以提高其成活率。

將新鮮剪取的穗條進(jìn)行不同木質(zhì)化程度的芽分類，從梢部進(jìn)行3～4位芽、5～6位芽、7～8位芽、9位以上分為4個(gè)類別，冬季穗條由于生長期足夠而未進(jìn)行不同木質(zhì)化程度芽的分類。

2013～2015年的3月和6月，以魯桑種(農(nóng)桑14號(hào))的冬芽(選擇穗條粗細(xì)一致，削取芽位相同的芽)進(jìn)行簡易芽接和鋸樁芽接，6月以不同木質(zhì)化程度的農(nóng)桑14號(hào)的新鮮芽進(jìn)行簡易芽接，因夏季氣溫高蒸騰量大而很少采用鋸樁芽接。

2013～2015年6月，以魯桑種(農(nóng)桑14號(hào))7芽位以上的冬芽和鮮芽進(jìn)行簡易芽接和鋸樁芽接。

2015年6月到10月,以不同桑種的新鮮芽(7芽位以上)為材料進(jìn)行簡易芽接。

以上各種方式嫁接30個(gè)芽，設(shè)3個(gè)重復(fù)，45 d后統(tǒng)計(jì)各處理的成活率。

2 結(jié)果與分析

2.1 魯桑冬芽不同嫁接方式的成活率比較

通常情況下，桑樹的嫁接均集中在春季之前，隨著春雨的下降及氣溫的上升，有利于嫁接芽與砧木的融合以及萌發(fā)，進(jìn)而提高其嫁接成活率(表1和表2)。不管是簡易芽接或者鋸樁芽接，在3月份的嫁接成活率均高于6月份，而且冬芽保存到6月份進(jìn)行簡易芽接，其成活率與3月份的簡易芽接和鋸樁芽接無顯著性差異，由于6月份氣溫高蒸騰量大，樹液流動(dòng)較快，使得此時(shí)鋸樁芽接的成活率很低，因此不適合采取此種方式進(jìn)行桑樹良種的嫁接擴(kuò)繁。

表1 魯桑冬芽嫁接的成活率比較

2.2 6月魯桑新鮮芽不同木質(zhì)化程度穗條簡易芽接的成活率比較

根據(jù)筆者多年的嫁接經(jīng)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)新鮮芽在夏季進(jìn)行鋸樁芽接時(shí)成活率非常低，因而將農(nóng)桑14號(hào)的新鮮芽進(jìn)行不同木質(zhì)化程度分類后，僅進(jìn)行了簡易芽接試驗(yàn)(表3和表4)。分別在2013年、2014年和2015年的6月份進(jìn)行簡易芽接，6芽位以下的鮮芽嫁接成活率均較低，且顯著低于7芽位以上的芽。由此可知，新鮮芽在具有3個(gè)月以上生長量時(shí)，隨著木質(zhì)化程度的加深，其嫁接成活率不斷提高，并且7芽位以上鮮芽的嫁接成活率之間沒有顯著差異，因此在常規(guī)的生產(chǎn)上可以在6月份選擇7芽位以上的鮮芽進(jìn)行簡易芽接來擴(kuò)繁優(yōu)良桑品種，而大多數(shù)地方均在6月份左右進(jìn)行夏伐，由此表明，此時(shí)嫁接苗完全有足夠的時(shí)間進(jìn)行生長，由此縮短了良種擴(kuò)繁的時(shí)間，提高了生產(chǎn)效率。

表2 多重比較

注：同列字母相同則差異不顯著，不同則顯著。下同。

表3 6月魯桑新不同芽位鮮芽嫁接的成活率

表4 多重比較

2.3 6月份魯桑7芽位以上的冬芽和鮮芽嫁接的成活率比較

由表5和表6可知，6月份進(jìn)行嫁接時(shí)不管是鮮芽還是冬芽，其簡易芽接的成活率均顯著高于鋸樁芽接，并且鮮芽和冬芽的簡易芽接之間無顯著差異，但是冬芽還需要進(jìn)行冷藏保存，并且保存期間有部分枝條會(huì)霉?fàn)€而損失掉，無形中增加了良種擴(kuò)繁的成本和降低了擴(kuò)繁的速度。因此，在春季嫁接時(shí)最好采用冬芽，而到了6月份可以采取新鮮芽進(jìn)行嫁接，嫁接的方式最好采用簡易芽接。不管鮮芽還是冬芽采取鋸樁芽接，其成活率均比較低，不利于在生產(chǎn)上使用。

2.4 2015年6～10月份不同桑種鮮芽嫁接的平均成活率比較

由圖1可知，不同桑種7芽位以上的鮮芽在6～9月份，其嫁接成活率趨于平緩且變化不大，其中嫁接成活率最高的是魯桑，最低的是華桑，兩者成活率差異顯著。并且各桑種在10月份的嫁接成活率都顯著下降，尤其是長穗桑下降得更厲害，說明10月份以后由于各種因素的限制使得桑樹良種擴(kuò)繁受限，此時(shí)亦可以進(jìn)行桑樹種質(zhì)資源的保存，不過須提高嫁接數(shù)量以保證能夠完成資源的保存，但即使10月份嫁接成活后，由于氣溫下降及休眠而導(dǎo)致生長期變短，不利于穗條的萌發(fā)和生長，此時(shí)用于特殊資源的保存較合適。

圖1 不同桑種鮮芽在不同時(shí)間的嫁接成活率比較

3 討論

通過不同方式不同時(shí)間的嫁接試驗(yàn)表明，7芽位以上鮮芽的簡易芽接在嫁接時(shí)間上沒有太大限制，6～10月都可以進(jìn)行鮮芽的簡易芽接，但10月嫁接的成活率顯著低于其他月份。在鮮芽簡易芽接時(shí)芽位在6個(gè)以下時(shí)成活率均很低，而芽位在7個(gè)以上時(shí)成活率較高且各桑種之間的差異不大，這與日本學(xué)者的研究結(jié)果一致[16]，能用于桑樹良種的擴(kuò)繁推廣。對(duì)枮?zāi)静恍枰崆?～5 d的剪伐，隨剪隨接，綁扎簡單，嫁接后也不需要特別管理[11]，也為從野外采集的桑枝條資源進(jìn)行適時(shí)嫁接提供理論指導(dǎo)。而鋸樁芽接在時(shí)間上要求嚴(yán)格，只有在樹液充分流動(dòng)的情況下才能進(jìn)行，在6月的冬芽鋸樁芽接中成活率極低而完全不能用于生產(chǎn)。因此可以采取將上年收集的穗條冷藏至次年，在桑樹萌芽前進(jìn)行冬芽的簡易芽接或者鋸樁芽接，待其生長量超過3個(gè)月時(shí)，可以對(duì)良種進(jìn)行擴(kuò)繁；而平時(shí)收集的野生桑資源在鑒定其性狀后，6月份開始持續(xù)到9月份采取鮮芽的簡易芽接進(jìn)行資源的保存，有利于新培育的桑品種或良種進(jìn)行大面積快速繁殖而應(yīng)用于生產(chǎn)，可以縮短良種繁育的時(shí)間，并且鮮芽嫁接不經(jīng)過冷藏保存可以為嫁接降低生產(chǎn)成本。

桑樹的嫁接成活主要是接穗和砧木的形成層細(xì)胞分裂產(chǎn)生愈傷組織，填滿穗芽和砧木之間的空隙，然后逐步溝通接穗和砧木間的輸導(dǎo)系統(tǒng)而成為一個(gè)共同生長的整體。在接穗和砧木具有親和力的情況下，接穗的削面光滑、與砧木的形成層接觸面大以及接合緊密的則愈合快而成活率高[3]。冬芽夏季鋸樁芽接的成活率較低，主要是由于鋸樁以后桑樹的水分流失過多，造成芽穗和砧木的水勢不相適應(yīng)，穗芽不能正常生長，并且由于夏季日照光太強(qiáng)，溫度過高，鋸樁芽接用繃帶包裹的面積較大不利于散熱而將穗芽燙死，因此不能很好地形成愈傷組織而很難成活。

在鮮芽的簡易芽接中最嫩的芽不能成活，這可能是頂部的枝條還沒有木質(zhì)化，大部分還是髓部，在切芽的過程中無法切到形成層，因而對(duì)于6位芽以下的無法很好地利用起來。有人按鮮芽的品種固有色程度進(jìn)行分類[17-18]，說明穗條木質(zhì)化程度與成活率密切相關(guān)。在所有的嫁接技術(shù)中，遵循切芽的要求是“三點(diǎn)一粒米”、“見木不傷木”[19]。在本試驗(yàn)中所有的嫁接削芽均由同一個(gè)具有10多年經(jīng)驗(yàn)的科技人員進(jìn)行操作，避免了因不同人員削芽而造成的誤差。對(duì)于5～6位的芽嫁接后出現(xiàn)不死也不活的現(xiàn)象，但砧穗之間也已產(chǎn)生愈傷組織，目前還不清楚是什么原因。經(jīng)過后續(xù)的觀察出現(xiàn)了2種情況：一種是皮結(jié)合良好，芽枯死；一種是緩慢發(fā)芽并且長勢較慢。推測其原因可能是穗芽沒有真正與枮?zāi)镜男纬蓪咏佑|到，只與枮?zāi)竞S富層接觸，穗芽在水分充足的情況下，利用自身的營養(yǎng)而發(fā)芽，或者只有很少一點(diǎn)形成層接觸，它們接觸的部分無法提供營養(yǎng)滿足穗芽的正常生長。

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(責(zé)任編輯：曾小軍)

Preliminary Report on Effect of Grafting in DifferentTime on Survival Rate of Mulberry

RAN Rui-fa, LIU Shu-juan, LI Ping-ping, CHU Yi-ning, LI Zhen-gang*

(Sericultural and Apicultural Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Mengzi 661101, China)

Grafting is one of the effective ways to popularize and improve mulberry varieties. At present, the traditional mulberry germplasm resources are preserved mainly through the grafting conducted from the end of winter to the beginning of spring, which causes the effective period of collecting and investigating wild mulberry germplasm resources is short. In order to broaden the effective period of wild mulberry resources collection and investigation, the author carried out mulberry grafting tests with different grafting methods, different grafting time and different lignified cuttings during 2013～2015. The results showed that there was no significant difference in the survival rate of mulberry seedlings among different grafting methods for winter buds in March, but there was a very significant difference in the survival rate among different grafting methods for both fresh buds and winter buds in June. The lignified degree of fresh cuttings was closely related to the survival rate of grafted mulberry seedlings. The survival rate of grafting with fresh buds above the seventh bud-position reached more than 85%, and their simple budding did not be too limited by grafting time.

Mulberry; Grafting; Germplasm resource; Simple budding; Pile-sawing budding

2016-11-17

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31360190)；云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2013FZ149)。

冉瑞法(1976─)，男，助理研究員，主要從事桑樹資源與育種研究。*通訊作者：李鎮(zhèn)剛。

S718.46

A

1001-8581(2017)04-0040-04