馬來(lái)酸羅托沙敏緩釋混懸液的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)Δ

王伊凡，樓姝含，王永祿，顧曉彤，李學(xué)明（南京工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，南京 211816）

馬來(lái)酸羅托沙敏緩釋混懸液的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)Δ

王伊凡＊，樓姝含，王永祿，顧曉彤，李學(xué)明#（南京工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，南京 211816）

目的：制備馬來(lái)酸羅托沙敏緩釋混懸液并評(píng)價(jià)其質(zhì)量。方法：以馬來(lái)酸羅托沙敏為原料，采用陽(yáng)離子交換樹脂制備載藥樹脂；并通過(guò)表面包衣法，以Eudragit RS100為包衣材料制備緩釋微粒，最終制成緩釋混懸液。采用高效液相色譜法測(cè)定馬來(lái)酸羅托沙敏的含量，計(jì)算載藥量，比較原研制劑與自制混懸液的釋放度。結(jié)果：載藥樹脂制備時(shí)藥物用量為2%、反應(yīng)溫度為25℃、反應(yīng)時(shí)間為4 h，表面包衣時(shí)載藥量為35%、包衣材料的用量為10%、反應(yīng)溫度為40℃。緩釋微粒包衣前、后的載藥量分別為35.23%和32.72%，收率為96.82%；所制緩釋混懸液中馬來(lái)酸羅托沙敏占標(biāo)示量的98.76%，10 h的累積釋放度達(dá)80%左右，與原研制劑比較的相似因子f2為65.73。結(jié)論：成功制得馬來(lái)酸羅托沙敏緩釋混懸液，其釋放特性與原研制劑相似。

馬來(lái)酸羅托沙敏；緩釋混懸液；陽(yáng)離子交換樹脂；表面包衣；高效液相色譜法

離子交換樹脂緩釋混懸劑是一種采用離子交換技術(shù)制備載藥樹脂，再對(duì)載藥樹脂進(jìn)行包衣后，混懸于適宜介質(zhì)中制成的一種口服長(zhǎng)效制劑。該劑型的特點(diǎn)為流動(dòng)性好、便于服用、易于分劑量、掩味效果好[1]，適用于吞咽困難的患者；藥物在胃腸道內(nèi)分布面積大而均勻，刺激性小；藥物釋放不受胃排空影響、釋藥平穩(wěn)，個(gè)體差異小[2]。

馬來(lái)酸羅托沙敏（Carbinoxamine maleate）是一種輕度鎮(zhèn)靜抗組胺藥，具有顯著的鎮(zhèn)靜和抗膽堿作用，胃腸道副作用較低。其口服緩釋混懸液由美國(guó)Tris Pharma公司研制，是第一種用于治療2歲及以上兒童季節(jié)性和長(zhǎng)期過(guò)敏性鼻炎的緩釋組胺受體抑制劑，已于2013年在美國(guó)批準(zhǔn)上市[3]。據(jù)美國(guó)FDA資料（http：//101.110.118. 24/www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/nda/2013/ 022556Orig1soooclinpharmR.pdf）顯示，原研制劑除主藥外的輔料組成為無(wú)水檸檬酸、草莓-香蕉香精、甘油、果葡糖漿、羥苯甲酯、羥苯丙酯、預(yù)膠化淀粉、聚山梨酯80、聚醋酸乙烯酯、聚維酮、焦亞硫酸鈉、聚苯乙烯磺酸鈉樹脂、蔗糖、三醋酸甘油酯和黃原膠。原研制劑所采用的包衣方法是流化床包衣法，該方法包衣膜增質(zhì)量較大，導(dǎo)致復(fù)合物粒徑較大；而國(guó)內(nèi)常用的流化床多為布袋式，容易吸附，易導(dǎo)致收率相對(duì)較低。本研究采用陽(yáng)離子交換樹脂為藥物載體，以表面包衣法制備了馬來(lái)酸羅托沙敏緩釋混懸液，并評(píng)價(jià)了其質(zhì)量。

1 材料

1.1 儀器

Waters 1525高效液相色譜（HPLC）儀（美國(guó)Waters公司）；PHSJ-5 pH計(jì)（上海儀點(diǎn)科學(xué)儀器股份有限公司）；TDL-50B離心機(jī)（上海書培實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司，離心半徑：5.5 cm）；ZRS-8G智能溶出試驗(yàn)儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）。

1.2 藥品與試劑

馬來(lái)酸羅托沙敏對(duì)照品（南京工業(yè)大學(xué)藥學(xué)院自制，批號(hào)：20150403，純度：99.8%）；Amberlite IRP-69陽(yáng)離子交換樹脂（美國(guó)陶氏公司）；Eudragit RS100[丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸氯化三甲胺基乙酯（1∶2∶0.1）共聚物，贏創(chuàng)德固賽特種化學(xué)有限公司，批號(hào)：B120308514]；聚乙二醇（PEG）4000（中國(guó)醫(yī)藥上?；瘜W(xué)試劑有限公司，化學(xué)純）；黃原膠（江蘇神華藥業(yè)有限公司）；預(yù)膠化淀粉（海鹽六和藥業(yè)有限公司）；無(wú)水檸檬酸（上海凌峰化學(xué)試劑有限公司）；焦亞硫酸鈉（四川金山制藥有限公司）；色素和香精（杭州雪松香精香料有限公司）；甲醇為化學(xué)純，乙醇為分析純，水為去離子水。

2 方法與結(jié)果

2.1 馬來(lái)酸羅托沙敏的含量測(cè)定

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Venusil XBP CN（250 mm× 4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-甲醇-0.01 mol/L磷酸二氫鉀[100∶170∶80，用磷酸調(diào)pH至（5.40±0.05）]，流速：1 mL/min；柱溫：40℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：263 nm；進(jìn)樣量：20 μL。該色譜條件下，馬來(lái)酸羅托沙敏檢測(cè)質(zhì)量濃度的線性范圍為0.129～0.194 mg/mL（r＝0.999 8），平均回收率為97.32%（RSD＝0.98%，n＝3），穩(wěn)定性RSD＝0.51%（n＝6）。

2.1.2 載藥量的測(cè)定 精密稱取供試品（載藥微粒、緩釋微?；蚓忈尰鞈乙海┻m量（約相當(dāng)于馬來(lái)酸羅托沙敏16 mg），置于100 mL量瓶中，加入10 mL無(wú)水甲醇，振搖5 min，再加入1 mol/L KCl溶液20 mL，搖勻，置于60℃水浴60 min，取出放冷，用60%甲醇定容，離心；精密量取上清液20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜。另取馬來(lái)酸羅托沙敏對(duì)照品適量，精密稱定，用甲醇-1 mol/L KCl溶液（1∶2）溶解并用60%甲醇定量稀釋制成約含馬來(lái)酸羅托沙敏0.16 mg/mL的溶液，注入液相色譜儀，記錄色譜，計(jì)算載藥量。

2.1.3 釋放度的測(cè)定 取馬來(lái)酸羅托沙敏緩釋混懸液5 mL，照釋放度測(cè)定法（2015年版《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅩD第一法）測(cè)定。采用溶出度測(cè)定法第二法裝置，釋放介質(zhì)為900 mL的0.4 mol/L KH2PO4，轉(zhuǎn)速為50 r/min，溫度為25℃，依法操作。分別在0.25、0.5、1、1.5、2、3、6、12 h時(shí)取樣5 mL，同時(shí)補(bǔ)充等量釋放介質(zhì)。樣液用0.8 μm濾膜濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液20 μL，進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜。另取馬來(lái)酸羅托沙敏對(duì)照品適量，精密稱定，用釋放介質(zhì)溶解并定量稀釋制成0.001 6 mg/mL的溶液，進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算釋放度。

2.2 載藥樹脂的制備

取處方量的馬來(lái)酸羅托沙敏對(duì)照品，加去離子水溶解，作為藥物溶液。然后加入處方量的陽(yáng)離子交換樹脂，混合，勻速攪拌，靜置，濾過(guò)。加去離子水充分振搖清洗至洗液基本無(wú)藥物檢出為止，將載藥樹脂轉(zhuǎn)移至50℃烘箱中干燥3 h，取出，200目篩整粒。

2.2.1 藥物用量對(duì)樹脂載藥量的影響 取陽(yáng)離子交換樹脂約10 g，分別加到500 mL 0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%的藥物溶液中，在室溫（25℃）下恒溫?cái)嚢? h，測(cè)定樹脂載藥情況。結(jié)果表明，隨著藥物用量的增加，樹脂的載藥量也增加；但當(dāng)藥物用量超過(guò)2%后，樹脂的載藥量不再增加，表明載藥已達(dá)飽和。確定載藥樹脂的最佳藥物用量為2%。

2.2.2 反應(yīng)時(shí)間對(duì)樹脂載藥量的影響 取陽(yáng)離子交換樹脂約10 g，分別加到2%藥物溶液中，在室溫（25℃）下分別攪拌1、2、3、4、5、6、8 h，測(cè)定樹脂載藥情況。結(jié)果表明，隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)，樹脂的載藥量也增加；但當(dāng)反應(yīng)時(shí)間超過(guò)4 h后，樹脂的載藥量不再增加，表明反應(yīng)達(dá)到平衡。確定載藥樹脂的最佳反應(yīng)時(shí)間為4 h。

2.3 載藥樹脂的浸漬

取載藥樹脂，加適量40%PEG4000水溶液，攪拌30 min，濾過(guò)，移至50℃烘箱中干燥3 h，取出，200目篩整粒。稱取干燥后的陽(yáng)離子交換樹脂、載藥樹脂和浸漬后的載藥樹脂各30 g，分別置于相同規(guī)格的量筒中，振實(shí)，記錄干態(tài)體積（V0，以高度表示）；然后分別加入過(guò)量純化水，浸泡24 h，使樹脂樣品充分溶脹，記錄溶脹后的濕態(tài)體積（V1）。比較前后體積變化，計(jì)算溶脹度（P＝V1/V0）。結(jié)果顯示，3種樣品的V0分別為42.5、43.4、58.8 cm，V1分別為59.1、58.6、48.2 cm，P分別為1.39、1.35、0.82，表明PEG浸漬技術(shù)處理樹脂后，溶脹度明顯減小。這說(shuō)明PEG浸漬技術(shù)確實(shí)能抑制羅托沙敏樹脂復(fù)合物的吸水膨脹，有利于羅托沙敏樹脂復(fù)合物在包衣和釋放過(guò)程中保持其原有的幾何形狀，以防止羅托沙敏樹脂復(fù)合物的衣膜崩裂而出現(xiàn)藥物“突釋”現(xiàn)象。

2.4 緩釋微粒的制備

取浸漬后的載藥樹脂，置于三角燒瓶中，加入處方量的Eudragit RS100-乙醇溶液，置于40℃水浴中攪拌4 h，然后冷卻至室溫，靜置，濾過(guò)，加去離子水洗滌，移至50℃烘箱中干燥過(guò)夜，取出，200目篩整粒。

2.4.1 包衣方法的選擇 對(duì)載藥樹脂進(jìn)行包衣的常見方法有流化床包衣法、噴霧干燥包衣法[4]、乳化溶劑揮發(fā)包衣法[5-6]、表面包衣法等。流化床包衣技術(shù)盡管能夠制備出粒徑在100 μm左右的緩釋微粒，但由于包衣膜增質(zhì)量較大，導(dǎo)致微囊粒徑過(guò)度增大，生產(chǎn)成本較高。噴霧干燥包衣法由于樹脂粒徑較小，容易出現(xiàn)各種堵塞問(wèn)題。乳化溶劑揮發(fā)法，其衣膜增質(zhì)量小于5%，所需設(shè)備簡(jiǎn)單，但其使用較多有機(jī)溶劑和乳化劑，而原研制劑中并無(wú)這些輔料，且溶劑后期處理較麻煩。表面包衣法不僅操作簡(jiǎn)單、工藝重現(xiàn)性好、容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，而且制備的藥物樹脂復(fù)合物微囊的粒徑較小，適合后期進(jìn)一步的制劑加工。綜合考慮選擇表面包衣法。

2.4.2 載藥量的選擇 取3份同一批次的載藥樹脂10 g，加入10%Eudragit RS100-乙醇溶液200 mL，分別按載藥量25%、35%、44%對(duì)藥物樹脂復(fù)合物進(jìn)行表面包衣。取所得樣品適量進(jìn)行釋放度測(cè)定，繪制釋放曲線見圖1。

圖1 載藥量、Eudragit RS100用量、介質(zhì)用量、反應(yīng)溫度對(duì)緩釋混懸液釋放度的影響Fig 1 Effects of drug-loading capacity，Eudragit RS100 amount，media amount and reaction temperature on the release degree of sustainedrelease suspension

由圖1可知，隨著載藥量的增加，藥物緩釋范圍逐漸減小，并較快趨于平衡。這是由于隨著樹脂載藥量的增大，陽(yáng)離子交換樹脂交換藥物離子后剩余的磺酸基減少，導(dǎo)致與丙烯酸樹脂分子中的季胺基結(jié)合減少，包衣效果欠佳，緩釋范圍減小。綜合考慮選擇表面包衣的最佳樹脂載藥量為35%。

2.4.3 Eudragit RS100用量的影響 取3份同一批次的載藥樹脂（載藥量為35%）10 g，分別加入不同用量（10%、5.0%、2.5%）Eudragit RS100-乙醇溶液200 mL，在40℃水浴條件下進(jìn)行表面包衣。取所得樣品適量進(jìn)行釋放度測(cè)定，繪制釋放曲線見圖1。

由圖1可知，Eudragit RS100的用量越低，藥物釋放越快。Eudragit RS100用量為2.5%和5.0%時(shí)，載藥樹脂經(jīng)表面包衣后所得微粒的緩釋范圍只有5 h，5 h后藥物基本釋放平衡；而Eudragit RS100用量為10%時(shí)，載藥樹脂經(jīng)表面包衣后所得微粒的緩釋范圍將近10 h。綜合考慮選擇表面包衣的最佳Eudragit RS100用量為10%。2.4.4 介質(zhì)用量的影響 取2份同一批次的載藥樹脂（載藥量為35%）10 g，分別加入10%Eudragit RS100-乙醇溶液100 mL和200 mL，在40℃水浴條件下進(jìn)行表面包衣。取所得樣品適量進(jìn)行釋放度測(cè)定，繪制釋放曲線見圖1。

由圖1可知，100 mL介質(zhì)用量比200 mL介質(zhì)用量所得微粒的釋藥速度明顯加快。這是由于隨著介質(zhì)用量的加大，表面包衣材料與載藥樹脂的結(jié)合交換增多，從而使藥物的釋放減慢。綜合考慮選擇表面包衣的最佳介質(zhì)用量為200 mL。

2.4.5 反應(yīng)溫度的影響 取3份同一批次的載藥樹脂（載藥量為35%）10 g，加入10%Eudragit RS100-乙醇溶液200 mL，分別在20、40、50℃水浴條件下進(jìn)行表面包衣。取所得樣品適量進(jìn)行釋放度測(cè)定，繪制釋放曲線見圖1。

由圖1可知，反應(yīng)溫度越高，藥物釋放速度越慢。原因是Eudragit RS100與陽(yáng)離子交換樹脂反應(yīng)是一個(gè)吸熱過(guò)程，溫度越高越有利于Eudragit RS100與載藥樹脂結(jié)合，從而導(dǎo)致藥物釋放緩慢。綜合考慮選擇表面包衣的最佳反應(yīng)溫度為40℃。

2.5 緩釋混懸液的制備

在燒杯中加入適量去離子水，再依次加入處方量的黃原膠、預(yù)膠化淀粉、甘油、蔗糖、高果糖玉米糖漿、無(wú)水檸檬酸、焦亞硫酸鈉、防腐劑等，攪拌、充分混勻，然后加入處方量的緩釋微粒，攪拌混勻，即得緩釋混懸液。其分散性良好，沉降體積比＞0.90。

2.6 載藥樹脂、緩釋微粒和緩釋混懸液中馬來(lái)酸羅托沙敏的含量測(cè)定

分別精密稱取供試品（載藥樹脂、緩釋微?；蚓忈尰鞈乙海?，按“2.1.2”項(xiàng)下方法檢測(cè)載藥量。結(jié)果表明，載藥樹脂的最大載藥量為44.89%；緩釋微粒包衣前、后的載藥量分別為35.23%、32.72%，收率達(dá)96.82%；緩釋混懸液中馬來(lái)酸羅托沙敏占標(biāo)示量的98.76%。

2.7 緩釋混懸液的釋放度研究

分別繪制自制緩釋混懸液與原研制劑混懸液（參考美國(guó)FDA資料）的釋放曲線。結(jié)果顯示，2種樣品的釋放情況相似，均為前期釋放較快、后期釋放較緩，整體緩釋效果良好、釋放平穩(wěn)，10 h累積釋放度達(dá)到80%左右；計(jì)算相似因子f2為65.73（f2＞50，兩者相似）。自制緩釋混懸液與原研制劑的釋放曲線見圖2。

3 討論

本研究采用表面包衣法，系利用丙烯酸樹脂分子中的季胺基與離子交換樹脂中剩余的磺酸基結(jié)合而起到包衣的作用。丙烯酸樹脂的長(zhǎng)鏈包覆在樹脂的外表面起屏蔽作用，以減緩反離子的進(jìn)入，從而調(diào)節(jié)藥物的釋放速度。相比于Eudragit RS100的用量、介質(zhì)用量、反應(yīng)溫度等因素，載藥樹脂的載藥量對(duì)整個(gè)工藝的影響較大。其主要表現(xiàn)在隨著樹脂載藥量的增大，陽(yáng)離子交換樹脂交換藥物離子后剩余的磺酸基減少，導(dǎo)致與丙烯酸樹脂分子中的季胺基結(jié)合減少，包衣效果欠佳，進(jìn)而緩釋范圍縮小。因此需要合理分配磺酸基的兩種結(jié)合情況，兼顧載藥量和緩釋效果，同時(shí)優(yōu)化表面包衣的工藝參數(shù)，以制得優(yōu)質(zhì)的緩釋混懸液。

圖2 自制緩釋混懸液與原研制劑混懸液的釋放曲線Fig 2 The release curves between self-made sustainedrelease suspension and original preparation suspension

該緩釋混懸液要得到進(jìn)一步應(yīng)用，離不開體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。參考相關(guān)資料[7-8]，發(fā)現(xiàn)可以考慮在比格犬體內(nèi)進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)特征的研究，并進(jìn)行生物等效性評(píng)價(jià)。此外，這類劑型還具有較好的掩味效果，可大大提高患者用藥的順應(yīng)性。不過(guò)，陽(yáng)離子交換樹脂交換容量不大，這使得適用藥物在一定程度上受到了限制。該制劑要得到更廣泛的發(fā)展，還有待于進(jìn)一步研究開發(fā)。

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Preparation and Quality Evaluation of Carbinoxamine Maleate Sustained-release Suspension

WANG Yifan，LOU Shuhan，WANG Yonglu，GU Xiaotong，LI Xueming（School of Pharmacy，Nanjing University of Technology，Nanjing 211816，China）

OBJECTIVE：To prepare Carbinoxamine maleate sustained-release suspension，and evaluate its quality.METHODS：Using carbinoxamine maleate as raw material，drug-loaded resin was prepared by cation exchange resin；surface coating method was used to finally prepare sustained-release suspension，using Eudragit RS100 as sustained-release coating material to prepare sustained-release microparticles.HPLC was conducted to determine the content of carbinoxamine maleate，release degree oforiginal preparations and self-made suspensions was compared，drug-loading capacity was calculated.RESULTS：The drug amount in preparing drug-loaded resin was 2%，reaction temperature was 25℃，and reaction time was 4 h；the drug-loading capacity in surface coating was 35%，amount of coating material was 10%，and reaction temperature was 40℃.The drug-loading capacities of sustained particles before and after coating were 35.23%，32.72%，respectively；the yield was 96.82%.The carbinoxamine maleate in prepared sustained-release suspension accounted for 98.76%of the labeled amount；release degree in 10 h reached about 80%，f2was 65.73.CONCLUSIONS：Carbinoxamine maleate sustained-release suspension is prepared successfully，and its release is similar to the original preparation.

Carbinoxamine maleate；Sustained-release suspension；Cation exchange resin；Surface coating；HPLC

R943；R927

A

1001-0408（2017）07-0947-04

2016-07-16

2016-09-04）

（編輯：鄒麗娟）

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.81170492）；江蘇省高校自然科學(xué)研究面上項(xiàng)目（No.10KJB350002）；江蘇省普通高校研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目（No.KYLX15_0816）

＊碩士研究生。研究方向：藥物制劑。電話：025-58139399。E-mail：771815727@qq.com

#通信作者：教授，碩士生導(dǎo)師。研究方向：藥物分析、制劑研究。電話：025-58139399。E-mail：xuemingli@njut.edu.cn

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.07.24