miRNA—204和miRNA—672熱性驚厥患兒血清中的表達(dá)及臨床意義

徐健+劉金龍+江嬌

【中圖分類號】R72.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2095-6851（2017）02--01

熱性驚厥（Febrile seizures， FS）是小兒時(shí)期較常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能異常的緊急癥狀[1] ， 如果反復(fù)發(fā)生，具有發(fā)展成癲癇的可能性，導(dǎo)致智力低下，增加死亡的危險(xiǎn)。隨著對非編碼RNA的深入研究，尤其MicroRNA（miRNA）在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的作用日益受到重視。miRNA在神經(jīng)系統(tǒng)中特異表達(dá)，與神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、生長等相關(guān)[1]。miR-204和672是研究較為廣泛的一種miRNA，它們大鼠海馬和皮層中都有著豐富的表達(dá)，參與了神經(jīng)元存活與凋亡、軸突延伸及重塑及突觸形成過程的調(diào)控。本研究通過檢測FS患兒血清中miRNA-204和miRNA-672表達(dá)情況，探討miRNA在FS中的臨床價(jià)值，提供更好的臨床指導(dǎo)。

1資料與方法

1.1 研究對象

（1）FS組：選取2016年5月—2016 年12月來我院就診的50例FS兒童（不包括新生兒）， 根據(jù)病史及臨床特征， 男25例， 女25例， 年齡1-5歲。（2）對照組： 25例為健康體檢者兒童， 男15例，女10例。既往均無FS及癲癇病史。所有FS患兒治療方案均告知家長，并在家長簽署同意書的情況下執(zhí)行。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床血液樣本收集

抽取FS患兒靜脈血5 ml， 3000rpm/min， 離心10 min，取上清凍存于-80℃，準(zhǔn)備PCR表達(dá)檢測。對照組樣本按上述方法進(jìn)行同樣的處理。

1.2.2 熒光定量PCR檢測 PCR擴(kuò)增反應(yīng)參數(shù)：預(yù)變性95℃、10min， 變性95℃、15s，退火60℃、15s，延伸72℃、30s ，40個(gè)循環(huán)。β-actin基因?yàn)閮?nèi)參基因。根據(jù)公式2-△△ct=[ct（target）-ct（actin）]A -[ct（target）- ct（actin）]B，分析兩組間相對表達(dá)量。引物序列如表1所示

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

各組數(shù)據(jù)均以 （ x ± s） 表示，采用SPSS 17. 0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。兩組間統(tǒng)計(jì)分析采用t檢驗(yàn)，P<0.05具有顯著性差異。

2.結(jié)果

2.1 miRNA-204在FS患兒血清中的表達(dá)檢測

FS組患者血清中miRNA-204表達(dá)水平顯著高于正常對照組，具有顯著性差異（P<0.01），如圖1所示。

2.2 miRNA-672在FS患兒血清中的表達(dá)檢測

FS組血清中miRNA-627表達(dá)水平顯著高于正常對照組，具有顯著性差異（P<0.01），如圖2所示。

3.討論

本臨床實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，miRNA-204和miRNA-672在FS組中表達(dá)水平呈現(xiàn)高表達(dá)模式，說明它們參與了FS疾病的發(fā)生發(fā)展過程。miRNA在神經(jīng)元發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用，包括神經(jīng)元存活、突觸可塑性，參與癲癇、腦卒中等疾病發(fā)生過程。研究發(fā)現(xiàn)，miR-204在神經(jīng)元具有高表達(dá)現(xiàn)象，可能在維持神經(jīng)元功能發(fā)揮重要作用。miRNA通過對靶基因進(jìn)行調(diào)控實(shí)現(xiàn)生物學(xué)功效，而靶基因的篩選是探索miRNAs具體功能的關(guān)鍵。研究表明，miR-204可以通過影響其靶基因SIRT1表達(dá)影響驚厥發(fā)生。SIRT1高表達(dá)可以阻止神經(jīng)元死亡，對神經(jīng)系統(tǒng)起到一種保護(hù)作用[2]。

綜上所述，本文通過檢測FS患兒血清中miRNA-204miRNA-672的臨床表達(dá)情況，提示miRNA-204miRNA-672在FS中的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用。miRNA可能會成為一種新的潛在的臨床干預(yù)靶點(diǎn)，希望能夠?yàn)榕R床FS的治療提供更可靠的臨床依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] Smith B，et al. Large-Scale Expression Analysis Reveals Distinct MicroRNA Profiles at Different Stages of Human Neurodevelopment[J]. Plos One， 2010， 5（6）：e11109.

[2]Wang J， et al. Protective effects of resveratrol through the up-regulation of SIRT1 expression in the mutant hSOD1-G93A-bearing motor neuron-like cell culture model of amyotrophic lateral sclerosis[J]. Neuroscience Letters， 2011， 503（3）：250-255.。