十味百合膠囊制備工藝研究

齊鶴

摘 要：本實(shí)驗(yàn)以多糖為指標(biāo)對(duì)十味百合膠囊提取工藝進(jìn)行研究。十味百合膠囊最佳提取工藝為加入10倍量水，煎煮2小時(shí)，連續(xù)提取3次。本工藝穩(wěn)定、可行、收率高。

關(guān)鍵詞：十味百合膠囊；提取；工藝

百合為十味百合膠囊主要成分之一。百合又名強(qiáng)蜀、番韭、山丹、百合蒜、大師傅蒜、蒜腦薯、倒仙、重邁、中逢花、夜合花等，是百合科百合屬（學(xué)名：Lilium）多年生草本球根植物。百合味甘微苦，性平，入心、肺經(jīng)，可用于熱病后余熱未消、虛煩驚悸、神志恍惚和肺癆久咳、咯血、肺膿瘍等癥。《日華子本草》記載：“安心，定膽，益志，養(yǎng)五藏，治癲邪，啼泣，狂叫，驚悸，殺蠱毒氣，脅癰乳癰發(fā)背及諸瘡腫，并治產(chǎn)后血狂運(yùn)。”百合有潤(rùn)肺止咳、清心安神之功，臨床常用于治療口腔潰瘍、白塞氏綜合征、慢性咽喉炎、肺結(jié)核等。百合主要含生物堿和蛋白質(zhì)、脂肪、多糖、淀粉、鈣、磷、鐵及維生素B1、維生素B2、維生素C、β―胡蘿卜素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有良好的營(yíng)養(yǎng)滋補(bǔ)之功。多糖為百合主要成分之一。百合多糖具有抗腫瘤、抗疲勞、清除自由基、調(diào)節(jié)免疫、降血糖、抗氧化、抑菌等藥理作用[1-5]。本實(shí)驗(yàn)以多糖為指標(biāo)對(duì)十味百合膠囊提取工藝進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

便攜式PH計(jì)（北京恒奧德儀器儀表有限公司）；FA1204CFAC型全自動(dòng)內(nèi)校電子分析天平（北京同德創(chuàng)業(yè)科技有限公司）；實(shí)驗(yàn)室用高純水制備器（北京科譽(yù)興業(yè)科技發(fā)展有限公司）；HH-S型智能恒溫水浴鍋（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；B200迷你型超聲波清洗機(jī)（上海恒奇儀器儀表有限公司）；DR5000臺(tái)式紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（廣州市怡華新電子儀器有限公司）。蒽酮（黃驊市江峰化學(xué)品有限公司）；磷酸（上海拜力生物科技有限公司）；硫酸（黃驊市江峰化學(xué)品有限公司）；乙醇（上海拜力生物科技有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 單因素考察

2.1.1 提取次數(shù)

按處方稱(chēng)取藥材，粉碎為20目，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，分別提取三次，第一次加10倍水，每次煎煮2小時(shí)，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮；第二次加10倍水，每次煎煮2小時(shí)，連續(xù)提取兩次，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮；第三次加10倍水，每次煎煮2小時(shí)，連續(xù)提取三次，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮。采用分光光度計(jì)法測(cè)定濃縮膏中多糖含量并計(jì)算多糖收率。

2.1.2 藥材粉碎目數(shù)

按處方稱(chēng)取藥材，分別粉碎為10目、20目、40目，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，加10倍水，每次煎煮2小時(shí)，連續(xù)煎煮三次，過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮。采用分光光度計(jì)法測(cè)定濃縮膏中多糖含量并計(jì)算多糖收率。

2.1.3 加水倍數(shù)

按處方稱(chēng)取藥材，粉碎為20目，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，分別提取三次，第一次加14倍水，每次煎煮60分鐘，連續(xù)三次，第二次加12倍水，每次煎煮2小時(shí)，連續(xù)三次，第三次加10倍水，每次煎煮2小時(shí)，連續(xù)三次，第四次加8倍水，每次煎煮2小時(shí)，連續(xù)三次，分別過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮。采用分光光度計(jì)法測(cè)定濃縮膏中多糖含量并計(jì)算多糖收率。

2.1.4 提取時(shí)間

按處方稱(chēng)取藥材，粉碎為20目，至于圓底燒瓶?jī)?nèi)，分別提取三次，第一次加10倍水，每次煎煮1小時(shí)，連續(xù)三次，第二次加10倍水，每次煎煮2小時(shí)，連續(xù)三次，第三次加10倍水，每次煎煮3小時(shí)，連續(xù)三次，分別過(guò)濾，合并濾液，減壓濃縮。采用分光光度計(jì)法測(cè)定濃縮膏中多糖含量并計(jì)算多糖收率。

2.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，粉碎目數(shù)對(duì)多糖收率影響不大，提取次數(shù)、加水倍數(shù)和提取時(shí)間對(duì)多糖收率影響較大。選擇提取次數(shù)、加水倍數(shù)和提取時(shí)間作為考察因素，采用正交試驗(yàn)法對(duì)影響提取效率的其它工藝條件進(jìn)行優(yōu)選。采用3個(gè)考察水平，用L9（34）正交表進(jìn)行試驗(yàn)，因素水平表見(jiàn)表1。

3 含量測(cè)定

3.1 供試品溶液的制備

取提取膏適量，精密稱(chēng)取，置100mL量瓶中，加水適量，超聲處理5分鐘使溶解，放置至室溫，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液1.5毫升，加入乙醇7.5毫升，搖勻，離心（3500r/min，30min），傾去上清液，沉淀加水溶解并轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.2 對(duì)照品儲(chǔ)備溶液的制備

精密稱(chēng)取105℃干燥恒重的無(wú)水葡萄糖對(duì)照品10mg，置10mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.3 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各1.0毫升，分置10mL棕色具塞試管中，分別加入0.2%蒽酮一硫酸溶液4.0毫升，混勻，迅速置冰水浴中冷卻6分鐘后，置100攝氏度水浴中加熱10分鐘，取出，置冰水浴中5分鐘，取出，室溫放置10分鐘后，于190～900nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行全波長(zhǎng)光譜掃描，記錄吸收光譜。在580nm處有最大吸收峰，故選用580nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0毫升分別置于50毫升量瓶中，加水至刻度，搖勻。精密吸取上述各溶液1.0毫升置10mL棕色具寒試管中，照3.3項(xiàng)下操作，580nm處測(cè)定吸光度值。以吸光度A為縱坐標(biāo)，濃度C為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。線(xiàn)性范圍0.02～0.12mg/mL。

3.5 回收率試驗(yàn)

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的多糖對(duì)照品，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。平均回收率為9.6%，RSD為1.02%。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

十味百合膠囊最佳提取工藝為加入10倍量水，煎煮2小時(shí)，連續(xù)提取3次。本工藝穩(wěn)定、可行、收率高。

參考文獻(xiàn)

[1]張典，彌曼，姜鳳良，黃黎，李新華，梅其炳.百合多糖對(duì)人肝癌HePG2細(xì)胞CyclinD1和COX-2的影響[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2011（05）.

[2]欒玉泉，董莎莎，方淑環(huán)，萬(wàn)順康，左紹遠(yuǎn).大理百合多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].四川生理科學(xué)雜志，2009（02）.

[3]李新華，彌曼，李汾，任利君，王多寧，楊穎.百合多糖免疫調(diào)節(jié)作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010（14）.

[4]李汾，袁秉祥，彌曼，任利君，李新華，王多寧，王穎.純化百合多糖抗腫瘤作用和對(duì)荷瘤小鼠免疫功能的影響[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2008（02）.

[5]彌曼，李汾，任利君，梅其炳.百合多糖的分離純化及抗腫瘤作用[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2009（02）.