基層動物抗體監(jiān)測采樣注意事項

袁明婭

摘要：對基層動物抗體監(jiān)測采樣注意事項進行了介紹，包括采血前的準備，采樣的時效性，采樣操作方法，采樣樣品的質(zhì)與量分析，樣品的標記，樣品的保存與運送及樣品生物安全防范措施等。

關(guān)鍵詞：動物抗體監(jiān)測；采樣；注意事項

中圖分類號：S851 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X（2016）10-0029-02

抗體監(jiān)測是對免疫工作的一個檢驗，標志著免疫工作的成敗，也是指導養(yǎng)殖場（戶）制定科學合理的免疫程序的一個重要依據(jù)，是動物疫病防控的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，而高質(zhì)量有代表性的樣品是抗體監(jiān)測的基礎(chǔ)。鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）農(nóng)業(yè)綜合服務中心技術(shù)員直接承擔著動物樣品采集的任務。本文對采血前的準備，采樣的時效性，采樣操作方法，采樣樣品的質(zhì)與量分析，樣品的標記以及樣品的保存與運送和樣品生物安全防范措施等整個流程進行了詳細的介紹，希望給養(yǎng)殖場（戶）制定科學合理的免疫程序提供依據(jù)。

1 采樣前準備

（1）器械樣品采集前應準備好采血器、鑷子、酒精棉、碘酒棉、注射器及針頭等。注意采樣器具和樣品容器須無菌。

（2）記錄用品。標簽、簽字筆、記號筆、采樣單、采樣登記表等。

（3）人員防護用具。口罩、防護鏡、一次性手套、乳膠手套、防護服、防護帽、膠靴等。

2 采樣的時效性

在做抗體檢測時，樣品采集時間與免疫日期須有規(guī)定的間隔。疫苗接種畜禽后，在畜禽體內(nèi)產(chǎn)生抗體并達到穩(wěn)定水平需要時間和過程。一般情況下，新城疫、禽流感、豬瘟、口蹄疫等疫苗在免疫21 d后采集樣品，豬繁殖與呼吸綜合征疫苗在免疫28 d后采集樣品。

3 采樣操作方法

（1）采樣的消毒。采血前用75%乙醇局部螺旋消毒，以避免因采血而引起局部感染或污染樣品。對于采血后容易形成血腫的畜禽，采血完畢要及時做好止血工作，即用干棉球輕壓采血部位，防止血流過多。

（2）采血方法。根據(jù)采樣對象、目的、數(shù)量選擇合適的方法。作免疫抗體監(jiān)測采血，豬可選耳緣靜脈采血；牛、羊等大家畜可選用頸靜脈采血或心臟采血，家禽采血常用翅靜脈采血。心臟采血多用于實驗室培養(yǎng)基制備等時的無菌采血。

4 樣品的質(zhì)與量

（1）高質(zhì)量樣品采集的前提。鄉(xiāng)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務中心采血目的多用于疫苗注射后的抗體效價監(jiān)測，采血前選擇適當?shù)牟课?、對采血部位消毒、按照樣品采集方法嚴格無菌操作等是保證獲得高質(zhì)量血清的前提。

（2）樣品的放置與分離。血液在室溫下傾斜放置2～4 h（防止暴曬），放入加有冰袋的保溫箱中24 h內(nèi)（長時間會有溶血現(xiàn)象）帶到實驗室，待血液凝固有血清自然析出后，經(jīng)1 500～2 000 r/min離心5 min，分離血清。

（3）樣品的量。在基層采集樣品主要是為了做抗體效價的監(jiān)測，一份血清有可能做幾種病的抗體效價檢測，另外，有的很可能需要復查，所以血樣的量一定要保證。一般情況下，群體采集量為存欄量的10%左右，個體采集如豬、雞等的采血量每頭（羽）不少于3 mL，保證血清分離量不少于1 mL。

（4）樣品的質(zhì)。抽樣檢測的結(jié)果代表的是整群，從樣品的抗體合格率來反應整群的抗體合格率。在同群中要進行隨機采樣，不要挑著采，更不要一份樣品分為多份樣品，會導致樣品不能代表整群，監(jiān)測結(jié)果就沒有意義。

5 對樣品的標記

（1）試管的標記。采血完畢，立即用標記筆在盛有樣品的試管寫上標記，并與采樣畜禽對應，同時填寫采樣單一式三份，并隨樣品送實驗室。

（2）采樣單的填寫。采樣單是對采樣群基本情況的一個簡要記錄，一定要認真填寫。因疫苗在畜禽體內(nèi)產(chǎn)生的抗體有一個消長規(guī)律，根據(jù)免疫和采樣時間來推測畜禽應該達到的抗體水平，根據(jù)抗體檢測結(jié)果分析，可以更好指導區(qū)域內(nèi)養(yǎng)殖業(yè)，降低養(yǎng)殖成本。

6 樣品的保存與運送

（1）保存。一般情況下，血液樣品分離血清后移到EP管中，蓋緊蓋子防漏，封口，標記、整理、歸類保存。分離后的血清24 h內(nèi)監(jiān)測可冷藏保存，若需長時間保存則將血清置-20 ℃以下保存，但要盡量避免反復凍融。

（2）運送所采集的樣品。以最快最直接的途徑送往實驗室，能在采集后24 h內(nèi)送抵實驗室，則可放在4 ℃左右的容器中運送。若在24 h內(nèi)不能將樣品送往實驗室，可在血清中加入青霉素、鏈霉素防腐敗。并在不致影響檢驗結(jié)果的情況下才可把樣品冷凍，并以此狀態(tài)運送。根據(jù)試驗需要決定送往實驗室的樣品是否放在保存液中運送。

7 生物安全

（1）人員安全。一是采血人員、保定人員要做好個人防護工作，穿戴好防護用品，嚴格消毒，嚴防人畜共患病的發(fā)生；二是要做好采樣、檢測過程中的廢棄物處理、無害化處理等，保護環(huán)境安全，否則都可能引起散毒。

（2）畜禽安全。要做好大家畜的保定工作，防止踢傷、咬傷等意外事故的發(fā)生。采集血樣時應先采集規(guī)模養(yǎng)殖戶，后采集散養(yǎng)戶，防止畜禽疾病的傳播。

8 小結(jié)

抗體監(jiān)測是動物疫病防控的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，所以要求技術(shù)員認真遵循上述操作程序，為免疫工作提供高質(zhì)量的樣品。也為養(yǎng)殖場（戶）制定科學合理的免疫程序提供重要依據(jù)。