隴馬陸配伍中藥抑制幽門螺桿菌作用的實(shí)驗(yàn)研究

趙曰超　王禮　徐媛媛

【摘要】 目的：探討隴馬陸分別與紅芪、黃連、紅景天、馬齒莧、蒲公英配伍后的抗幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）作用以及藥物間是否有協(xié)同效應(yīng)。方法：采用水提法和醇提法提取上述藥物配方及隴馬陸、紅景天和黃連單藥的有效成分，應(yīng)用紙片瓊脂擴(kuò)散法篩選上述配方對Hp的抑制作用；建立Hp液體培養(yǎng)模型，采用稀釋法測定隴馬陸、黃連、紅景天單藥及復(fù)方提取物的抗Hp最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC），并比較藥物間配伍后的協(xié)同效應(yīng)。結(jié)果：隴馬陸與紅芪、紅景天、黃連、馬齒莧、蒲公英藥配伍后對Hp均有抑制作用，以與黃連配伍后抑制作用最強(qiáng)；隴馬陸、黃連、紅景天、隴馬陸-黃連、隴馬陸-紅景天對Hp的MIC分別為20～40、0.63～1.25、1.25～2.50、1.25～2.50、10～20 mg/mL；與隴馬陸配伍后，黃連和紅景天的抗Hp MIC僅為單藥的1/2倍。結(jié)論：隴馬陸分別與紅芪、紅景天、黃連、馬齒莧、蒲公英配伍對Hp均有一定的抑菌作用；隴馬陸與黃連、紅景天配伍后可產(chǎn)生抗Hp的協(xié)同效應(yīng)；Hp液體培養(yǎng)稀釋法可以有效判斷中藥的抗Hp效能。

【關(guān)鍵詞】 隴馬陸； 黃連； 紅景天； 幽門螺桿菌； 最小抑菌濃度； 協(xié)同效應(yīng)

【Abstract】 Objective：To study the bacteriostasis against Helicobacter pylori（Hp） of the compounds of Kronopolites Svenhedini with Hedysarum polybotrys，Rhodiola Rosea，Rhizoma Coptidis，Portulaca Olerace，Taraxacum Mongolicum respectively and the synergies among these Chinese Medicines.Method：The effective ingredients of the several Kronopolites Svenhedini compounds and the single drug of Kronopolites Svenhedini，Rhizoma Coptidis，Rhodiola Rosea were extracted by water decoction extraction and ethanol extraction respectively.The bacteriostasis of the mentioned compounds against Hp were screened by disc agar diffusion.The liquid model for Hp culturing was established.Minimum inhibitory concentration（MIC） of the Kronopolites Svenhedini，Rhizoma Coptidis，Rhodiola Rosea and the formulations mentioned above against Hp were mearsured by serial dilution method and the synergies between two drugs of the compounds were compared.Result：The compounds of Kronopolites Svenhedini with Hedysarum Polybotrys，Rhodiola Rosea，Rhizoma Coptidis，Portulaca Olerace，Taraxacum Mongolicum respectively all exhibited bacteriostasis against Hp and the most powerful compound among them was Kronopolites Svenhedini accompanied with Rhizoma Coptidis.MIC of Kronopolites Svenhedini，Rhizoma Coptidis，Rhodiola Rosea，Kronopolites Svenhedini-rhizoma Coptidis，Kronopolites Svenhedini-rhodiola Rosea were respectively 20-40，0.63-1.25，1.25-2.50，10.00-20.00 mg/mL.When combined with Kronopolites Svenhedini，MIC against Hp of Rhizoma Coptidis，Rhodiola Rosea were half lower than those of the single herbs.Conclusion：Compounds of Kronopolites Svenhedini with Hedysarum Polybotrys，Rhodiola Rosea，Rhizoma Coptidis，Portulaca Oleracea，Taraxacum Mongolicum respectively all have bacteriostasis against Hp.Kronopolites Svenhedini companied with Rhizoma Coptidis or Rhodiola Rosea can produce synergy when they are used to eliminate Hp.Hp liquid culture dilution method can effectively determine the anti-Hp potency of traditional Chinese medicine.

【Key words】 Kronopolites Svenhedini； Rhizoma Coptidis； Rhodiola Rosea； Helicobacter pylori； Minimum inhibitory concentration； Synergy

First-authors address：The Second Clinical Medical College of Lanzhou University，Lanzhou 730030，China；Department of Pathogenic Biology of Lanzhou University Lanzhou 730000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.04.011

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）感染是引發(fā)胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素，而且與胃惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[1]。Hp在人群中的感染率很高，我國人群Hp的現(xiàn)癥感染率為42%～64%[2]。第四次全國Hp感染處理共識報告指出，Hp陽性的消化性潰瘍（不論是否活動和有無并發(fā)癥史）與胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤（MALT）強(qiáng)烈推薦根除Hp[3]。有研究表明，在根除Hp的治療中，使用含克拉霉素的三聯(lián)療法的根除率為78.3%，使用含鉍劑的四聯(lián)療法的根除率為77.0%[4]，并且耐藥率呈現(xiàn)上升趨勢[5]。亟待尋找新的有效根除Hp的藥物以應(yīng)對Hp的耐藥。

中藥在治療慢性胃炎和消化性潰瘍中的療效早已確認(rèn)。隴馬陸[Kronopolites Svenhedini（Verhoeff）]為甘肅省道地藥材，具有利濕止痛、和中開胃的功效[6]，隴馬陸胃藥片治療胃潰瘍效果顯著[7]，動物實(shí)驗(yàn)證明有抑制胃酸及保護(hù)胃黏膜的作用[8-9]。中藥在臨床上往往以復(fù)方的形式使用，藥物間的協(xié)同作用在治療中發(fā)揮重要作用。本文通過篩選隴馬陸分別與紅芪、紅景天、黃連、馬齒莧、蒲公英配伍后對Hp的抑制作用后，將隴馬陸與黃連或紅景天進(jìn)行單藥及復(fù)方抗Hp最低抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC）測定，準(zhǔn)確判斷上述中藥的抗Hp作用效能及藥物間的協(xié)同作用，為開發(fā)抗Hp中藥、中藥臨床抗Hp治療提供理論支持，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株 Hp J99，來源于蘭州大學(xué)菌種保藏中心。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)用中藥材 隴馬陸（產(chǎn)地甘肅），紅芪（產(chǎn)地甘肅），紅景天（產(chǎn)地西藏），黃連（產(chǎn)地四川），馬齒莧（產(chǎn)地安徽），蒲公英（產(chǎn)地甘肅）。隴馬陸購自蘭州大學(xué)第二醫(yī)院藥房，紅芪、紅景天、黃連、蒲公英均購自蘭州百寶藥業(yè)有限公司。

1.1.3 主要儀器與試劑 HERAcell?240iCO2培養(yǎng)箱（Thermo）；生物安全柜（HFsafe-1200）；水平搖床（IKA-KS260）；調(diào)溫型電熱套（北京科偉永興儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（BUCHI）；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水真空泵（鄭州英峪予華儀器有限公司）；快速混勻器（常州國華電器有限公司）；高速冷凍離心機(jī)（Thermo BIOFUGE STRATOS）；紫外分光光度計(jì)（Thermo Scientific BioMate 3S）；手提式多功能粉碎機(jī)（上海長沙工貿(mào)有限公司）；數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；-80 ℃冰箱（Thermo）；電子天平（Sartorius）。Hp快速尿素酶診斷試劑盒（福建三強(qiáng)）；羊血（南京便診）；新生牛血清（浙江天杭生物科技股份有限公司）；哥倫比亞瓊脂（BD）；腦心浸液（BD）；革蘭染色液（海博生物）。

1.2 方法

1.2.1 中藥配伍 以隴馬陸為基礎(chǔ)藥物，依據(jù)臨床用中藥量，分別按如下比例進(jìn)行藥物配伍，隴馬陸與紅芪2∶3，隴馬陸與紅景天1∶1，隴馬陸與黃連1∶1，隴馬陸與馬齒莧1∶2，隴馬陸與蒲公英1∶2。

1.2.2 中藥提取與濃縮 采用水提法和醇提法提取中藥的有效成分。（1）水提法：采用加熱回流法提取。將每味中藥使用粉碎機(jī)粉碎后，按照前述配伍原則進(jìn)行混合，稱取每個配方藥物混合物5 g，加入40 mL超純水，浸泡約12 h后使用回流法加熱1 h，離心后取上清，向藥渣中再加入40 mL超純水，再次回流法加熱1 h，離心后取上清，合并兩次藥液，蒸發(fā)濃縮后用超純水定容至25 mL，使每毫升液體含生藥0.2 g。單味藥物的水提法提取同前。（2）醇提法：采用超聲萃取法。將每味中藥使用粉碎機(jī)粉碎，同前按比例進(jìn)行混合，稱取配方藥物混合物5 g，加入75%酒精40 mL，浸泡約12 h后置超聲波清洗器中（25 ℃，80 W）1 h，使用循環(huán)水真空泵抽濾，去除藥渣，將藥液蒸發(fā)濃縮，超純水定容至10 mL，使每毫升藥液含生藥0.5 g。

1.2.3 中藥的滅菌 水提物使用0.22 μm濾器除菌；醇提物采用100 ℃，加熱1 h除菌后，吸取少量醇提物加入營養(yǎng)肉湯中，振蕩培養(yǎng)48 h后觀察滅菌效果，以培養(yǎng)液清亮為滅菌。

1.2.4 培養(yǎng)基制備 （1）Hp固體平板培養(yǎng)基：稱取4.25 g哥倫比亞瓊脂（BD），溶于100 mL超純水中，高壓滅菌后，加入10%葡萄糖5 mL及無菌脫纖維綿羊血7 mL，混勻后倒入無菌平皿，凝固后使用封口膜封口，置4 ℃冰箱備用。（2）Hp液體培養(yǎng)基：稱取3.7 g腦心浸液干粉（BD），溶于100 mL超純水中，高壓滅菌后，加入10%葡萄糖5 mL及滅活的新生牛血清10 mL，混勻后置4 ℃冰箱備用。

1.2.5 Hp復(fù)蘇、鑒定和液體培養(yǎng) 將-80 ℃凍存Hp J99分區(qū)劃線接種Hp固體平板培養(yǎng)基上，置三氣培養(yǎng)箱中（10%CO2，5%O2，85%N2）37 ℃培養(yǎng)3 d。經(jīng)Hp快速尿素酶試驗(yàn)和革蘭染色形態(tài)觀察鑒定后，挑取單菌落接種至Hp液體培養(yǎng)基，置三氣培養(yǎng)箱中，37 ℃，振蕩（100 轉(zhuǎn)/min）培養(yǎng)。

1.2.6 紙片瓊脂擴(kuò)散法篩選有抑制Hp作用的中藥配伍 將液體培養(yǎng)48 h的Hp均勻涂布于Hp固體平板培養(yǎng)基表面后，將直徑6 mm的無菌濾紙片貼至平板表面。吸取已提取藥液10 μL滴至紙片中央，同時設(shè)置未加藥的空白紙片對照，平板加樣后置三氣培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)72 h，測量抑菌圈直徑大小。

1.2.7 有抑菌作用中藥對Hp的MIC測定 將1.2.6篩選出的有一定抑菌作用的配方及單味藥提取物進(jìn)行MIC測定。配置Hp液體培養(yǎng)基，按照倍比稀釋法將藥物濃度逐層稀釋同時設(shè)不含藥的空白培養(yǎng)基作對照。由于藥液自身顏色等因素的影響，同一藥物濃度梯度設(shè)置接種Hp及不接種Hp的對照（以隴馬陸MIC測定為例，見表1）。將培養(yǎng)至穩(wěn)定期的Hp菌液1∶100接種至培養(yǎng)基中，使Hp初始濃度控制在106～107 cfu/mL范圍，將接種Hp后的培養(yǎng)基放入三氣培養(yǎng)箱中37 ℃振蕩培養(yǎng)48 h，以未接種Hp含藥對應(yīng)濃度培養(yǎng)基調(diào)零后，測定同一藥物濃度梯度接種Hp后培養(yǎng)液的光密度（optical density，OD）600值，若OD值變化明顯，則證明有Hp生長。以此來判斷藥物干預(yù)Hp的MIC。

1.2.8 隴馬陸與黃連素或紅景天的抗Hp協(xié)同作用測定 向液體培養(yǎng)基中加入低于MIC濃度的隴馬陸水提物，測在此條件干預(yù)下的黃連、紅景天水提物對Hp的MIC范圍（以隴馬陸與黃連協(xié)同性測定為例，見表2）。測定方法如1.2.7中所述。

2 結(jié)果

2.1 隴馬陸配伍不同中藥抑制Hp作用的初篩結(jié)果 隴馬陸與以上5種中藥配伍，經(jīng)過水煎提取或醇提取后提取物均顯示出對Hp抑菌效果（隴馬陸與紅景天醇提取物對抑菌圈結(jié)果有干擾）。為進(jìn)一步明確上述中藥的抑制Hp作用及抑菌效力，進(jìn)行了隴馬陸、黃連、紅景天單藥及不同配伍的抑制Hp MIC測定。見表3。

2.2 隴馬陸、黃連、紅景天單藥及配伍水提物對Hp的MIC測定 無論隴馬陸、黃連、紅景天單藥還是隴馬陸與黃連或紅景天的配伍水提物，均對Hp有一定抑制作用，且以黃連提取物的抑菌效力最好，見表4。

2.3 隴馬陸配伍黃連素或紅景天的抑制Hp的協(xié)同作用測定 在含有抗Hp1/2MIC濃度的隴馬陸液體培養(yǎng)基中，黃連水提物、紅景天水提取物對Hp的MIC均低于空白液體培養(yǎng)基中對Hp的MIC，表明隴馬陸和黃連素或紅景天配伍抗Hp均具有協(xié)同作用，見表5。

3 討論

幽門螺桿菌（Helicobacter pylow，Hp）感染是引發(fā)上消化道疾病的重要原因，根除Hp已成為治療慢性胃炎、消化性潰瘍的重要措施。目前根除Hp方案中所用抗生素許多易產(chǎn)生耐藥性。許多中藥具有廣譜的抗菌成分，從中藥中可以發(fā)掘抗Hp的藥物，不同中藥的配伍使用是中藥臨床用藥的重要特征。在本次研究中，使用了兩味藥物的聯(lián)合配伍篩選抗Hp作用，兩味中藥的配伍易于探明不同中藥的抗Hp作用，同時兼顧藥物復(fù)方的特點(diǎn)。臨床實(shí)踐已經(jīng)證明，隴馬陸分別與紅芪、紅景天、黃連、馬齒莧、蒲公英適量配伍可用于治療胃炎及消化性潰瘍。本文的研究發(fā)現(xiàn)，隴馬陸分別與紅芪、黃連、馬齒莧、蒲公英適量配伍后的水提取物和醇提取物，隴馬陸與紅景天的水提取物均顯示出一定的抗Hp活性，上述結(jié)果間接驗(yàn)證隴馬陸與相應(yīng)中藥配伍治療胃部疾病可能與清除Hp感染相關(guān)。

隴馬陸是一味常見動物藥，其中的成分苦杏仁味苯甲醛具有廣譜的抗菌作用[6]，提取出的殼聚糖對部分革蘭陽性和革蘭陰性細(xì)菌有著不同程度的抑菌作用[10]。有研究表明，由隴馬陸中提取的隴馬陸素或者殼聚糖對Hp有抑制作用[11-12]。紅芪歸肺、脾經(jīng)，具有補(bǔ)氣升陽、固表止汗、利水消腫、生津養(yǎng)血、行滯通痹、托毒排膿以及斂瘡生肌等功能[13]，有抗炎、抗病毒作用[14]，有關(guān)抗菌方面的功能研究較少，其同科不同屬的黃芪具有一定的抑菌作用[15]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隴馬陸與紅芪配伍后對Hp有一定的抑制作用，可為Hp感染相關(guān)性疾病的治療提供參考。紅景天在某些方劑中作為清熱、滋補(bǔ)元?dú)獾墓π褂肹16]，現(xiàn)代藥理學(xué)研究其具有抗氧化[17]、抗病毒的作用[18]，其脂溶性成分對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽胞桿菌、白假絲酵母菌等具有良好的抑菌殺菌作用[19]，且副作用較小，于1991年被衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新食品資源[20]。本研究發(fā)現(xiàn)紅景天對Hp也有較強(qiáng)的抑殺作用。黃連具有清熱解毒、燥濕殺蟲等功效，蒲公英具有清熱解毒，消腫散結(jié)，清利濕熱的功效[21]，兩者均歸胃經(jīng)[22]，有實(shí)驗(yàn)證實(shí)均有廣譜抑菌效果，黃連對革蘭陽性球菌及腸道菌的抑菌作用較強(qiáng)[23]，蒲公英有效抑制炎癥作用的成分可能為黃酮類、多糖類以及酚酸類物質(zhì)[24]。有方劑含黃連、蒲公英等治療Hp感染患者有效[25]。本實(shí)驗(yàn)從體外實(shí)驗(yàn)角度證實(shí)黃連、蒲公英與隴馬陸配伍后均有抑制Hp的作用，尤其黃連的抑菌效果明顯。馬齒莧具有清熱解毒、涼血止血的功效，用于治療熱毒血痢、癰腫疔瘡、濕疹、丹毒等[26]，其含有的黃酮類物質(zhì)對熱穩(wěn)定[27]，對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、酵母菌等均有較好的抑制效果[28]。有動物實(shí)驗(yàn)表明，馬齒莧通過抑制胃蛋白酶活性、減少胃酸分泌等因素來起到抗胃潰瘍的作用[29]。本實(shí)驗(yàn)表明其與隴馬陸配伍后也有抗Hp的作用，可能也是促進(jìn)胃潰瘍治愈的機(jī)制之一。

為進(jìn)一步探討隴馬陸、黃連、紅景天單藥及配伍后復(fù)方的抗菌效能，本文采用了稀釋法測定了三種藥物單藥及配伍后對Hp的MIC。Hp為微需氧菌，液體培養(yǎng)難度較大，本文在建立了Hp在液體培養(yǎng)基中良好的生長條件后，采用國際上常用抗菌藥物MIC測定的稀釋法，評價了目的藥物的抗Hp效能，進(jìn)一步證明三種藥物單藥及其不同的配伍均具有一定的抗Hp作用。同時本實(shí)驗(yàn)所用方法為今后篩選和鑒定中藥抗Hp的效能提供了參考依據(jù)。

配伍藥物之間可在藥代動力學(xué)效應(yīng)及藥效動力學(xué)效應(yīng)的影響下[30]，實(shí)現(xiàn)比單藥使用時更優(yōu)的功效或者更低的副作用。本文的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在含有低于抗Hp1/2MIC的隴馬陸液體培養(yǎng)基中，黃連或紅景天單藥的抗Hp效能顯著增加，表現(xiàn)為MIC明顯低于在Hp空白液體培養(yǎng)基中抗Hp的MIC，表明隴馬陸與黃連及隴馬陸與紅景天之間在抑制Hp時有一定的協(xié)同效應(yīng)。

綜上所述，隴馬陸分別與紅芪、紅景天、黃連、馬齒莧、蒲公英配伍對Hp均有一定的抑菌作用；隴馬陸與黃連、紅景天之間存在抗Hp的協(xié)同效應(yīng)。中藥治療胃炎、消化性潰瘍機(jī)制復(fù)雜，本研究通過對Hp的抑制作用方面為臨床用藥提供了一定的理論基礎(chǔ)。

致謝：衷心感謝蘭州大學(xué)第二醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科的劉寶厚教授提供的中藥配伍方劑。

參考文獻(xiàn)

[1] Kawakubo M，Ito Y，Okimura Y，et al.Natural Antibiotic Function of a Human Gastric Mucin Against Helicobacter pylori Infection[J].Science，2004，305（5686）：1003-1006.

[2]張萬岱，胡伏蓮，蕭樹東，等.中國自然人群幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查[J].現(xiàn)代消化及介入診療，2010，15（5）：265-270.

[3]劉文忠，謝勇，成虹，等.第四次全國幽門螺桿菌感染處理共識報告[J].現(xiàn)代消化及介入診療，2012，17（6）：358-363.

[4] Luther J，Higgins P D，Schoenfeld P S，et al.Empiric quadruple vs. triple therapy for primary treatment of Helicobacter pylori infection：Systematic review and meta-analysis of efficacy and tolerability[J].Am J Gastroenterol，2010，105（1）：65-73.

[5]謝昆華，農(nóng)兵.幽門螺桿菌耐藥現(xiàn)狀及臨床治療對策[J].中國臨床新醫(yī)學(xué)，2011，4（1）：90-93.

[6]王明偉，李成義.甘肅道地藥材隴馬陸研究進(jìn)展[J].甘肅中醫(yī)，2007，20（8）：66-67.

[7]王素萍.隴馬陸胃藥片聯(lián)合護(hù)理干預(yù)治療胃潰瘍55例[J].中國藥業(yè)，2015，24（24）：234-236.

[8]何素萍.復(fù)合隴馬陸片對大鼠胃潰瘍愈合的影響[J].蘭州大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2011，37（3）：30-32.

[9]周南進(jìn)，謝勇，郭小白，等.殼聚糖對大鼠實(shí)驗(yàn)性潰瘍愈合的影響[J].中國生化藥物雜志，2005，26（1）：35-37.

[10] Sudarshan N R，Hoover D G，Knorr D.Antibacterial action of chitosan[J].Food Biotechnology，1992，6（3）：257-272.

[11]滕寶霞，劉邁發(fā).復(fù)合隴馬陸片對幽門螺桿菌的影響[J].中成藥，2008，30（6）：916-917.

[12]謝勇，周南進(jìn)，謝正興，等.殼聚糖體內(nèi)外抗幽門螺桿菌的實(shí)驗(yàn)研究[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2006，26（3）：193-198.

[13]朱冉，郭玫.紅芪有效成分及“入脾經(jīng)”相關(guān)藥理研究[J].西部中醫(yī)藥，2012，25（1）：27-30.

[14]金智生，汝亞琴.中藥紅芪的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2003，20（4）：52-56.

[15]段琦梅，梁宗鎖，楊東風(fēng)，等.黃芪、黨參乙醇提取物抗菌活性研究[J]. 中成藥，2012，34（11）：2220-2222.

[16]王強(qiáng)，阮曉，李荷迪，等.珍稀藥用資源植物紅景天研究現(xiàn)狀、問題與對策[J].自然資源學(xué)報，2007，22（6）：880-889.

[17]馬天翔，史寧，陳乾，等.紅景天中8種成分體外抗氧化作用的比較[J].中國藥理學(xué)通報，2012，28（9）：1224-1228.

[18]孫非，王秀清，許守民，等.高山紅景天多糖對小鼠抗柯薩奇B5病毒感染能力的研究[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志，1995，9（4）：361-363.

[19]王莉，趙樺.小叢紅景天脂溶性成分及抗菌活性分析[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（16）：127-132.

[20]李鳳林.紅景天苷藥理作用的研究現(xiàn)狀[J].現(xiàn)代食品科技，2013，29（4）：916-920.

[21]陳麗麗.中醫(yī)治療幽門螺桿菌相關(guān)的消化性疾病的近況[J].工企醫(yī)刊，2013，26（4）：350-351.

[22]劉清華，林淵，邱頌平.單味中藥散劑清除幽門螺桿菌的實(shí)驗(yàn)研究[J].福建中醫(yī)藥，2011，42（2）：49.

[23]李福娟，石學(xué)魁，張曉莉，等.苦參、黃連及其配伍的體外抑菌研究[J].牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2010，31（3）：17-19.

[24]杜軍英，姜東伯，狄柯坪，等.蒲公英抑菌抗炎作用的研究進(jìn)展[J].白求恩軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，10（2）：128-131.

[25]黃水源.中西醫(yī)結(jié)合治療幽門螺旋桿菌感染123例分析[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2007，27（4）：311.

[26]楊子娟，鄭毅男，向蘭.馬齒莧的化學(xué)成分研究[J].中藥材，2007，30（10）：1248-1250.

[27]朱丹，牛廣財(cái)，孫希云，等.馬齒莧黃酮類物質(zhì)抑菌作用的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006，34（1）：7-8.

[28]陳國妮，孫飛龍，閆亞茹.馬齒莧類黃酮提取工藝及抑菌效果的研究[J].包裝與食品機(jī)械，2016，34（1）：6-10.

[29]黃賽金，尹愛武，劉芳玉，等.馬齒莧抗大鼠乙醇型胃潰瘍作用研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2016，28（5）：781-785.

[30] Liu Y，Hu B，F(xiàn)u C，et al.DCDB：drug combination database[J].Bioinformatics，2010，26（4）：587-588.

（收稿日期：2016-12-12） （本文編輯：程旭然）