乳糜血樣對(duì)血液分析儀測(cè)定血紅蛋白結(jié)果的影響及消除

左春磊，汪海清，孫召東，劉 波，蔣紅周，朱學(xué)濤

(連云港市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇連云港222002)

乳糜血樣對(duì)血液分析儀測(cè)定血紅蛋白結(jié)果的影響及消除

左春磊，汪海清，孫召東，劉 波，蔣紅周，朱學(xué)濤

(連云港市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇連云港222002)

目的探討乳糜血樣的脂濁程度對(duì)血液分析儀測(cè)定血紅蛋白（Hb）結(jié)果的影響及相關(guān)分析，對(duì)乳糜血樣采取血漿置換的方法，使血液分析儀能夠準(zhǔn)確測(cè)定血紅蛋白。方法健康體檢者75例并隨機(jī)分成3組，每組25例，血漿置換等量的25μl，50μl，75μl脂肪乳，模擬不同程度的乳糜標(biāo)本，觀察脂肪乳對(duì)血液分析儀測(cè)定Hb的影響；臨床輸入脂肪乳住院患者乳糜血樣70例，分別直接上機(jī)測(cè)定和低速離心后進(jìn)行血漿置換后上機(jī)測(cè)定，觀察血漿置換等量生理鹽水的方法，消除乳糜因素對(duì)血液分析儀測(cè)定Hb的影響。結(jié)果本次實(shí)驗(yàn)中75例健康體檢者加入不同量的脂肪乳后引起Hb假性增高，置換后增加比為3.77%、6.41%、10.73%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，隨著脂肪乳含量的增加，對(duì)Hb的影響也增大。70例乳糜血樣患者，低速離心進(jìn)行血漿置換前后檢測(cè)Hb，降低比例4.25%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論血液分析儀測(cè)定乳糜血樣血紅蛋白假性增高，隨著脂肪乳含量的增加對(duì)Hb的影響也增大，可用生理鹽水置換等量血漿的方法消除脂濁影響，保證血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

乳糜血樣；血液分析儀；血紅蛋白；消除

血常規(guī)檢測(cè)是一項(xiàng)幾乎所有患者到醫(yī)院常做的常規(guī)檢查，其檢測(cè)結(jié)果直接對(duì)患者的治療起到關(guān)鍵作用，因此血常規(guī)項(xiàng)目檢測(cè)的準(zhǔn)確性非常重要，值得臨床上引起高度重視。隨著血細(xì)胞分析儀使用的逐步普及，血液分析儀的精密度和準(zhǔn)確度亦不斷提高，對(duì)于采集靜脈血標(biāo)本，是否需要空腹和血漿渾濁對(duì)血常規(guī)測(cè)定結(jié)果是否有影響，加之由于這些標(biāo)本是血細(xì)胞與血漿混懸液，因此血漿渾濁與否不易被發(fā)現(xiàn)，所以血漿渾濁對(duì)血常規(guī)測(cè)定結(jié)果的影響一直被人們所忽視。引起血漿渾濁最常見(jiàn)原因是餐后標(biāo)本，特別是高脂肪、高蛋白飲食后。另外調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，脂肪乳是醫(yī)院住院病人常用的營(yíng)養(yǎng)劑，特別是消耗性疾病、不能進(jìn)食病人等營(yíng)養(yǎng)不良病人常需輸脂肪乳。脂肪乳是由大豆油與卵磷脂合成，臨床上主要用于手術(shù)后營(yíng)養(yǎng)失調(diào)、急性消化道疾病、燒傷和創(chuàng)傷、腎功能損害、早產(chǎn)兒、虛弱性疾病等，其可供給人體足夠熱量和必需脂肪酸的較為理想的靜脈營(yíng)養(yǎng)液，能促進(jìn)氨基酸的吸收，節(jié)省蛋白質(zhì)，以利患者維持身體能量和體力恢復(fù)，進(jìn)而促進(jìn)傷口愈合[1]。一直以來(lái)，輸入脂肪乳是否引起血常規(guī)項(xiàng)目測(cè)定結(jié)果的改變尚未引起實(shí)驗(yàn)室工作者和臨床醫(yī)生的重視。但有相關(guān)研究表明[2，3]，血脂升高對(duì)血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果存在一定的影響。為探討脂肪乳對(duì)Hb檢測(cè)結(jié)果的影響，因此本研究擬選取75例健康體檢者作為研究對(duì)象，通過(guò)加入不同量的脂肪乳的方法模擬不同程度的乳糜標(biāo)本，分析其對(duì)邁瑞B(yǎng)C－6800血液分析測(cè)定血紅蛋白的不同影響，同時(shí)選取70例輸注脂肪乳患者，用血漿置換等量生理鹽水的方法，消除乳糜因素對(duì)血液分析儀測(cè)定Hb的影響，從而得到更準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，為臨床診斷提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料收集2015年10月至2016年2月期間，本院健康體檢者75例，男性40例，女性35例，年齡25～56歲；本院住院患者70例，其中男40例，女30例，年齡28～61歲，三酰甘油在8.71±1.61mmol/L以上。所有受試對(duì)象均排除高膽紅素血癥、白細(xì)胞增高、異常血漿蛋白癥。

1.2 儀器與試劑使用邁瑞B(yǎng)C－6800全自動(dòng)血液分析儀，邁瑞公司提供配套試劑和質(zhì)控品每日進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。力保脂寧中/長(zhǎng)脂脂肪乳注射液（C8－24Ve）德國(guó)制造貝朗醫(yī)療（蘇州）有限公司分裝，產(chǎn)品批號(hào)：144918082。

1.3 方法

1.3.1 75例新鮮的體檢血標(biāo)本均用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA－K2)抗凝管靜脈采血2ml，并隨機(jī)分成3組，每組25例，混勻2h內(nèi)完成全血細(xì)胞分析，所有標(biāo)本均無(wú)溶血、凝集、脂血。標(biāo)本以800r/min離心半徑13cm離心10min避免紅細(xì)胞發(fā)生變形破壞[4]，隨機(jī)分成3組，每組25例，分別置換等量的25μl，50μl，75μl脂肪乳，充分混勻后再進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.2 70例乳糜血樣均用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA－K2)抗凝管靜脈采血2ml混勻2h內(nèi)完成全血細(xì)胞分析，所有標(biāo)本均無(wú)溶血、凝集。標(biāo)本以800r/min離心半徑13cm離心10min，吸掉上層渾濁血漿部分，用等量生理鹽水進(jìn)行替換，充分混勻后再進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析檢驗(yàn)結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0處理，通過(guò)配對(duì)χ2檢驗(yàn)對(duì)置換等量脂肪乳前后各組Hb測(cè)定結(jié)果增加比進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 置換等量脂肪乳前后各組Hb測(cè)定結(jié)果增加比較75例健康體檢者隨機(jī)分成3組，每組25例，分別置換等量的25μl、50μl、75μl脂肪乳，模擬不同程度的乳糜標(biāo)本，邁瑞B(yǎng)C－6800血液分析儀測(cè)定Hb，置換后增加比為3.77%、6.41%、10.73%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，隨著脂肪乳含量的增加，對(duì)Hb的影響也越大，見(jiàn)表1。

表1 置換等量脂肪乳前后各組Hb測(cè)定結(jié)果增加比較

2.2 乳糜血樣置換生理鹽水前后Hb測(cè)定的比較70例乳糜血樣住院患者，分別直接上機(jī)測(cè)定和低速離心后進(jìn)行血漿置換后上機(jī)測(cè)定，吸掉上層渾濁血漿部分，用等量生理鹽水進(jìn)行替換，充分混勻后檢測(cè)Hb結(jié)果降低明顯，降低比例4.25%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 乳糜血樣置換生理鹽水前后Hb測(cè)定的比較（x±s）

3 討論

血細(xì)胞分析作為檢驗(yàn)科最基本的檢測(cè)項(xiàng)目之一，現(xiàn)在大多數(shù)醫(yī)院采用全血標(biāo)本，因此血漿渾濁與否不容易被發(fā)現(xiàn)。臨床工作中，高脂血標(biāo)本很常見(jiàn)，當(dāng)血清三酰甘油水平大于4.0mmol/L時(shí)，血清外觀可呈現(xiàn)不同程度的渾濁，影響血紅蛋白的檢測(cè)[5]，脂濁可散射光線，對(duì)吸光度產(chǎn)生正干擾，導(dǎo)致某些測(cè)定結(jié)果升高[6]。從而對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。高脂血癥是引起Hb測(cè)定假性增高的主要病理因素之一[7]。檢測(cè)過(guò)程中血漿渾濁引起血紅蛋白結(jié)果升高，MCH、MCHC結(jié)果亦升高，而MCV結(jié)果不升高，這是因?yàn)镸CV、MCH、MCHC均為計(jì)算值，前者Hb不參與計(jì)算，后二者Hb參與計(jì)算，當(dāng)臨床上用這些錯(cuò)誤結(jié)果在臨床用作貧血分類(lèi)時(shí)，會(huì)影響臨床的貧血類(lèi)型診斷。

臨床上氰化高鐵紅蛋白法測(cè)定測(cè)定Hb，出現(xiàn)WBC過(guò)多引起的比色液渾濁可離心后取上清液比色；若因球蛋白異常增高引起的渾濁，可向比色液中加入少許固體氯化鈉或碳酸鉀，混勻后可使溶液澄清再測(cè)定。但目前隨著全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的不斷普及應(yīng)用，在全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀中比色液渾濁與否，不易被實(shí)驗(yàn)室工作者所發(fā)現(xiàn)。本研究表1顯示健康體檢者血樣分別置換等量的25μl、50μl、75μl脂肪乳，血液分析儀測(cè)定Hb隨著脂肪乳含量的增加，對(duì)Hb的影響也越大，說(shuō)明是單純渾濁引起測(cè)定結(jié)果的升高。特別是臨床上因治療營(yíng)養(yǎng)不良及消耗性疾病輸入脂肪乳而導(dǎo)致高脂血癥的患者，脂肪乳中的中/長(zhǎng)鏈脂肪乳主要成份為乳糜微粒和極低密度脂蛋白的懸浮顆粒，當(dāng)檢測(cè)光通過(guò)時(shí)，會(huì)產(chǎn)生散射或衍射的現(xiàn)象。

輸入脂肪乳后的6h內(nèi)或餐后尤其是高脂、高蛋白飲食后不應(yīng)急于采集血常規(guī)標(biāo)本，建議待脂肪乳代謝后再采血，但此時(shí)有急需檢測(cè)血常規(guī)，可采取用生理鹽水置換的方法消除乳糜血樣對(duì)Hb干擾。從表2可見(jiàn)70例乳糜血樣住院患者，分別直接上機(jī)測(cè)定和低速離心后進(jìn)行血漿置換后上機(jī)測(cè)定，檢測(cè)Hb結(jié)果降低明顯，降低比例－4.25%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，通過(guò)用等量生理鹽水置換血漿，一方面避免了標(biāo)本發(fā)生容量改變和溶血造成的測(cè)定誤差，同時(shí)消除高脂血標(biāo)本對(duì)血紅蛋白測(cè)定的干擾，這種方法簡(jiǎn)便易行。所以實(shí)驗(yàn)室工作者在審核結(jié)果時(shí)，應(yīng)特別重視血漿是否有渾濁現(xiàn)象，可以在血樣檢測(cè)后20min后肉眼觀察血漿外觀，排除乳糜血樣對(duì)檢測(cè)Hb的假性增高。

有學(xué)者認(rèn)為可以采取稀釋血液樣本的方法，以減小乳糜血樣對(duì)血液分析儀測(cè)定Hb影響[8，9]，但往往血液樣本的脂血程度不一，采取多大的稀釋比例一直困擾著臨床應(yīng)用，需進(jìn)一步研究；也有作者建議血液分析儀測(cè)定Hb無(wú)吸收處的波長(zhǎng)空白比濁，并將此處濁度與測(cè)定波長(zhǎng)的濁度進(jìn)行比較，然后在測(cè)定血紅蛋白時(shí)減去合適的吸光度，排除比色液渾濁對(duì)測(cè)定結(jié)果影響的方法[10]。

輸脂肪乳的同時(shí)輸入大量的其他液體，由于渾濁和稀釋的共同作用，對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響較為復(fù)雜，需結(jié)合與Hb有關(guān)的MCH、MCHC等指標(biāo)仍可發(fā)現(xiàn)渾濁的影響。脂肪乳在體內(nèi)的代謝一般為5～6h，個(gè)別病人可能更長(zhǎng)，因此輸注脂肪乳的同時(shí)輸入大量的其他液體的患者，建議一定要在輸液6h以后檢查血液常規(guī)，才能得出較為準(zhǔn)確的結(jié)果。

[1]錢(qián)小敏，張曉杰.病人輸入脂肪乳后血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性的探討[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2010，18(11)：156-159.

[2]陳海濤，林明輝，趙琪琪，等.現(xiàn)代血細(xì)胞分析技術(shù)與臨床[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2010，11(23)：112-115.

[3]呂斌斌，梁海麗，王湛國(guó).黃疸、乳糜對(duì)血液分析儀結(jié)果的影響[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2003，21(21)：38.

[4]馬驥，楊游萍，陳煒燁，等.高脂血對(duì)兩種方法測(cè)定血紅蛋白的影響及其校正[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(9)：321-322.

[5]曾素根，曾婷婷，江虹，等.不同脂血濃度對(duì)血液分析儀的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2013，28（2）：131-133.

[6]高杰.檢驗(yàn)科應(yīng)重視分析前標(biāo)本因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30(5)：461-462.

[7]馬書(shū)麗，徐龍強(qiáng).高脂血癥致血紅蛋白測(cè)定假性增高1例[J].青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，43(6)：548.

[8]張輝亮，黃樹(shù)華，劉健玲.重度乳糜血標(biāo)本對(duì)三種常見(jiàn)類(lèi)型生化檢測(cè)方法的影響[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(1)：128-130.

[9]朱如月，柯敏.稀釋液置換法在HmX血細(xì)胞分析儀脂血檢測(cè)中的應(yīng)用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，11(22)：3000-3001，3003.

[10]滕龍，金美琴，蔣曉東.輸脂肪乳引起血紅蛋白測(cè)定結(jié)果假性升高[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2008，26(2)：196，199.

R446.11+1

A

1674－1129(2017)01－0073－03

10.3969/j.issn.1674－1129.2017.01.022

2016-07-27；

2016-11-25)

朱學(xué)濤，電子信箱：zxtdoctor@126.com