輔助降血壓類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物檢測技術(shù)的研究進展

徐文峰++徐碩++金鵬飛

[摘要] 查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻資料，歸納和總結(jié)了近年來輔助降血壓類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的概況和檢測技術(shù)，為檢測中成藥和保健食品非法添加化學(xué)藥物提供技術(shù)參考。輔助降血壓類中成藥和保健食品中非法添加的化學(xué)藥物主要有血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素Ⅱ受體抑制劑、利尿劑、鈣拮抗劑、交感神經(jīng)抑制劑、腎上腺素受體阻斷劑和血管擴張藥。涉及的檢測方法包括薄層色譜法、近紅外光譜法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等。

[關(guān)鍵詞] 中成藥；保健食品；非法添加；化學(xué)藥物；檢測技術(shù)

[中圖分類號] R927.1 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2016）11（a）-0061-04

高血壓是最為常見的慢性病之一，是以動脈血壓持續(xù)升高為特征的“心血管綜合征”，是我國心腦血管病最主要的危險因素，同時也是我國心腦血管病死亡的主要原因[1]。由于近年來我國居民不健康生活方式的流行趨勢嚴(yán)重，營養(yǎng)過剩、缺乏運動、精神壓力增大等因素導(dǎo)致高血壓的患病風(fēng)險進一步增加[2]。有效控制血壓不僅可延緩動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展，還能延緩因血壓經(jīng)常升高所引發(fā)的心、腦、腎等重要臟器的病理變化進程，減少高血壓并發(fā)癥的發(fā)生和降低其死亡率[3]。很多高血壓患者擔(dān)心長時間服用西藥不良反應(yīng)較大，這使輔助降血壓類中成藥和保健食品普遍受到患者的青睞。出于利益驅(qū)使，一些不法分子及商家為了增強其產(chǎn)品功效，會在輔助降血壓類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物?；颊咴诓恢榈那闆r下，若同時服用其他降壓類西藥，將會造成肝、腎、心臟的損傷及不良反應(yīng)，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡[4]。

國家相關(guān)部門越來越重視中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物的現(xiàn)象，在國家食品藥品監(jiān)督管理總局的倡議和決策下，各個省市的食品藥品監(jiān)督管理局對市場上流通的中成藥和保健食品開展了一系列專項行動以打擊非法添加現(xiàn)象，并取得了一定的成果[5]。為打擊中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的行為，本文綜述了近年來輔助降血壓類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的現(xiàn)狀及檢測方法，以期引起行業(yè)更多的關(guān)注，為相關(guān)監(jiān)管部門提供文獻支持，保障人們的用藥安全。

1 輔助降血壓類中成藥和保健食品非法添加化學(xué)藥物概況

據(jù)文獻報道，輔助降血壓類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物具有如下特點[6-7]：①添加化學(xué)成分來源多樣，包括處方藥、已撤市藥物、治療藥物的結(jié)構(gòu)修飾物以及學(xué)術(shù)期刊發(fā)表的前期研究結(jié)果等；②所添加化學(xué)藥物的含量在不同批次產(chǎn)品之間相差巨大；③有的批次存在非法添加藥物，而有的批次不存在非法添加藥物以躲避檢查；④減少添加藥物的劑量、增加添加藥物的種類；⑤取得保健食品批準(zhǔn)文號在先，在上市產(chǎn)品中違法添加化學(xué)藥物在后；⑥利用制劑的特點，在膠囊殼中添加違禁藥物以逃避檢測。

目前，已經(jīng)從輔助降血壓類中成藥和保健食品中篩查出的及已經(jīng)建立篩查方法的潛在添加藥物有以下幾種。①血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑：卡托普利、賴諾普利、依那普利、喹那普利、貝那普利；②血管緊張素Ⅱ受體抑制劑：纈沙坦、氯沙坦、厄貝沙坦、替米沙坦、坎地沙坦酯、奧美沙坦酯；③利尿劑：呋塞米、氫氯噻嗪、吲達帕胺、氨苯蝶啶；④鈣拮抗劑：地爾硫卓、尼卡地平、硝苯地平、氨氯地平、尼莫地平、非洛地平、尼群地平、尼索地平、維拉帕米、西尼地平、拉西地平、樂卡西平、氟桂利嗪；⑤交感神經(jīng)抑制劑：可樂定、利血平、甲基多巴；⑥腎上腺素受體阻斷劑：阿替洛爾、美托洛爾、比索洛爾、普萘洛爾、哌唑嗪、特拉唑嗪、多沙唑嗪、妥拉唑林、卡維地洛；⑦血管擴張藥：米諾地爾、肼屈嗪、地巴唑、烏拉地爾。

2 輔助降血壓類中成藥及保健食品非法添加篩查檢測技術(shù)

由于可非法添加的化學(xué)藥物種類、數(shù)量極多，再加上中成藥和保健食品本身化學(xué)成分多樣，物理化學(xué)性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)各異，中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物亟待建立合理、有效的檢測方法。對此，國內(nèi)外科研工作者進行了大量的研究，已報道的檢測方法主要包括薄層色譜法（TLC）、近紅外光譜法（IR）、液相色譜法（LC）、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）等?，F(xiàn)將近年來各類檢測技術(shù)的應(yīng)用實例綜述如下。

2.1 薄層色譜法

薄層色譜法操作簡單、經(jīng)濟、快速，是切實有效的篩查方法。但由于薄層色譜法檢測靈敏度相對較差，易出現(xiàn)假陽性的結(jié)果，需進一步通過高效液相色譜或液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)確證[8]。

吳公平等[9]建立了輔助降壓類保健品中哌唑嗪、硝苯地平、阿替洛爾、卡托普利等7種非法添加化學(xué)藥品的薄層色譜快速檢查方法。供試品以甲醇-乙腈（1∶1）混合溶液超聲提取后，將提取溶液點于硅膠GF254薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-乙醇-濃氨試液（12∶3∶3∶0.2）為展開劑，在紫外光365 nm下檢視，檢查利血平；再置碘缸熏約15 min，在紫外光254 nm下檢視，檢查利血平、硝苯地平、可樂定、哌唑嗪4種成分。另采用硅膠GF254薄層板，展開劑為無水乙醇-氨水（14∶1），展開后，將薄層板置碘缸中約15 min，紫外光254 nm下檢視，檢查氫氯噻嗪、卡托普利、阿替洛爾3種成分。

吳嫣艷等[10]建立檢測降壓保健食品中非法添加氫氯噻嗪的定性、定量薄層色譜檢測方法。精密稱取氫氯噻嗪對照品適量，加50%甲醇溶解并稀釋成每毫升中含1 mg的溶液。精密稱取供試品0.3 g，加50%甲醇10 mL超聲處理20 min作為供試品溶液。吸取對照品及供試品溶液各10 μL點于GF254薄層板上，展開劑為乙酸乙酯-無水乙醇-氨水（50∶5∶0.5）溶液。展開后，薄層板置于紫外燈254 nm波長下檢視，供試品與對照品應(yīng)在Rf值約為0.7處有相同的熒光猝滅斑點。

2.2近紅外光譜法

近紅外光譜分析技術(shù)所具有的分析速度快、樣品處理簡單、無需試劑、無污染、多組分檢測等特點，使之被廣泛應(yīng)用于藥品、食品等的分析測定[11]。

池文杰等[12]建立了能夠快速篩查降壓類中成藥中是否添加氫氯噻嗪的近紅外特征譜段相關(guān)系數(shù)法，采用近紅外光譜儀積分球漫反射測定光譜，以氫氯噻嗪化學(xué)對照品的近紅外光譜為參照光譜，采用二階導(dǎo)數(shù)進行光譜預(yù)處理，選擇6606～6522 cm-1為特定譜段，閾值設(shè)為80%，建立模型，并用25個含氫氯噻嗪的市售樣品驗證該方法，相關(guān)系數(shù)>80%的有21個，準(zhǔn)確率為84.0%；用710個不含氫氯噻嗪的市售樣品驗證該方法，相關(guān)系數(shù)<80%的有709個，準(zhǔn)確率為99.8%，說明該方法可作為市場上氫氯噻嗪非法添加的快速有效的篩查手段。

2.3 液相色譜法

作為檢測中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥物使用最為廣泛的技術(shù)，液相色譜具有分離效率高、分析速度快、自動化操作、重復(fù)性高、靈敏度高等優(yōu)點。可通過比較色譜峰的保留時間和紫外光譜圖來確證供試品中是否含有與對照品一致的化學(xué)成分[13]。

陳林等[14]采用亞3 μm色譜柱建立了降壓類中成藥及保健食品中普萘洛爾、氨苯蝶啶、氯沙坦、纈沙坦等21種非法添加化學(xué)藥物的高效液相色譜快速檢測及液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用確證方法。樣品經(jīng)甲醇-乙腈（5∶5）超聲提取，以甲醇-乙腈（2∶1）-甲酸水溶液（pH 2.5±0.1）為流動相，梯度洗脫，二極管陣列檢測器檢測，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明21種化學(xué)藥物在17 min內(nèi)完成分離，方法的檢出限為0.03～0.50 mg/g，定量限為0.09～1.50 mg/g，平均回收率為82.0%～109.0%。作者采用上述方法對107批從互聯(lián)網(wǎng)收集的樣品進行檢測，陽性檢出率為42.1%。

謝清萍[15]建立了同時測定降壓類中成藥中可能違禁添加的氫氯噻嗪、卡托普利、氨苯蝶啶、呋塞米、貝那普利和硝苯地平的高效液相色譜法。以0.02 mol/L磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調(diào)pH值3.0±0.1）-甲醇為流動相，線性洗脫，檢測波長為220 nm。上述6種藥物的檢測限為4～400 ng，回收率為80.2%～104.3%。

胡青等[16]建立了同時測定中藥及保健食品中可能違禁添加的阿替洛爾、可樂定、哌唑嗪、利血平等7種降壓化學(xué)藥物的高效液相色譜法。采用C18色譜柱，以0.2%磷酸溶液-乙腈為流動相，梯度洗脫，檢測波長為220 nm。上述7種降壓藥物的線性范圍為0.0284～5.45 μg/mL，回收率均>97.8%，RSD均<5.0%。

2.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)兼具液相色譜的分離能力與質(zhì)譜的高專屬性和高靈敏度的特征?？赏ㄟ^對比保留時間、紫外光譜圖、化合物分子量、碎片離子等信息對化合物進行確證[17]。

丁寶月等[18]建立了一種快速、準(zhǔn)確檢測調(diào)節(jié)血壓類中成藥及保健食品中非法添加卡托普利、可樂定、利血平、甲基多巴、氫氯噻嗪等34種化學(xué)藥物的方法。采用超高效液相聯(lián)用三重四級桿串聯(lián)質(zhì)譜儀（UPLC-MS/MS），流動相為0.1%甲酸甲醇溶液（A）-0.1%甲酸水溶液（B），體積流量0.2 mL/min，梯度洗脫，柱溫40℃。選擇電噴霧離子源、正離子掃描、多反應(yīng)監(jiān)測模式測定34種非法添加的化學(xué)藥物，將多反應(yīng)監(jiān)測通道中供試品峰與對照品峰的色譜保留時間、分子離子峰、二級碎片離子峰等信息進行對比，來確定添加的化學(xué)藥物，并以質(zhì)譜峰面積計算添加藥物的準(zhǔn)確含量。結(jié)果顯示，該方法中34種化學(xué)藥物具有良好的分離度，方法檢測限為0.1～0.5 ng/g，定量限均在0.3～1.5 ng/g，標(biāo)準(zhǔn)加樣回收率為81.4%～118.9%。該方法可作為調(diào)節(jié)血壓類中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)降壓藥物的定量測定方法。

王崢帥等[19]建立了降壓類中成藥和保健食品中非法添加阿替洛爾、妥拉唑林、特拉唑嗪、美托洛爾等18種降壓藥物的高效液相色譜聯(lián)用四級桿串聯(lián)飛行時間質(zhì)譜（HPLC-QTOF/MS）快速定性檢測方法。以0.5%甲酸水-乙腈為流動相梯度洗脫，流速為0.2 mL/min，離子源為電噴霧離子源，正離子檢測模式。上述18種化學(xué)藥物的檢出限分別為0.2～2.5 ng/mL，12批供試品中有1批檢測到添加了利血平。

朱慧果等[20]建立了同時測定輔助降血壓類保健食品中非法添加的地爾硫卓、維拉帕米、拉西地平、非洛地平等11種鈣通道阻滯劑的高效液相色譜聯(lián)用離子阱質(zhì)譜的方法。以0.1%甲酸-20 mmol/L甲酸銨（pH=4.8）-乙腈-甲醇為流動相，體積流速為1.0 mL/min，梯度洗脫，柱溫為25℃。采用電噴霧離子源，西布曲明和華法林鈉作為正、負離子模式下的內(nèi)標(biāo)物，0.2 mL/min的分流流速流進離子阱質(zhì)譜，選擇離子模式定量檢測上述藥物。結(jié)果顯示11種化合物都有良好的線性范圍和相關(guān)性（0.029～20.0 μg/mL，R2 ≥ 0.9910），最低檢出限為7.50～73 μg/kg；回收率為64.6%～109.0%。

孫夏榮等[21]建立了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定中成藥與保健食品中違禁添加的肼屈嗪、哌唑嗪、烏拉地爾、卡維地洛等20種降壓類化學(xué)藥物。采用C18色譜柱，以甲醇-0.1%甲酸（75∶25）為流動相，采用電噴霧離子源、多反應(yīng)監(jiān)測掃描方式，20種藥物的檢測限均低于20 ng。通過與標(biāo)準(zhǔn)譜庫中的保留時間和多反應(yīng)監(jiān)測質(zhì)譜圖的對比，可快速鑒別樣品中違禁添加的20種降壓類藥物。作者采用上述方法對50批降壓中成藥及30批保健食品進行定性分析，結(jié)果在3批中成藥、5批保健食品中檢出違禁添加了比索洛爾、氨氯地平、氫氯噻嗪、尼群地平。

2.5 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)兼具氣相色譜的分離能力和質(zhì)譜的高專屬性。特別是在無對照品的情況下，通過70 eV的轟擊能量使化合物電離，采集該化合物的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖，與標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)譜圖庫進行比較，一般可確認該化合物[22]。

李濤等[23]應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法建立了檢測降壓類中成藥及保健食品中非法添加尼群地平、尼莫地平等7種非法添加化學(xué)藥物的方法。作者采用溶劑超聲或液-液萃取方式對樣品進行提取富集，采用Rtx-5 ms毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），程序升溫，選擇EI離子源，溶劑延遲2 min，質(zhì)譜掃描40～350 amu。在30～60 min內(nèi)，本方法能夠快速檢測降壓類中成藥及保健食品中是否添加尼群地平、尼莫地平等7種降壓藥物，在待檢樣品中發(fā)現(xiàn)2批樣品分別非法添加了尼群地平和可樂定。

3 小結(jié)

中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的事件層出不窮，且手段越來越隱蔽，不僅給人們的生命和財產(chǎn)造成了巨大損失，也給社會帶來了嚴(yán)重的負面影響。雖然輔助降血壓類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的檢測篩查技術(shù)和方法的研究和應(yīng)用取得了一定的進展，但是，由于中成藥和保健食品所含成分復(fù)雜，非法添加現(xiàn)象也具有不確定性，對于非法添加的篩查還存在一些問題。這就需要我們在技術(shù)上加強建立廣譜篩查方法的研究與開發(fā)，建立和完善中成藥和保健食品中非法添加的檢測標(biāo)準(zhǔn)和檢驗檢測體系；在管理上，相關(guān)政府部門需要加大監(jiān)管及懲處力度，完善法律法規(guī)，讓唯利是圖的不法廠商無機可乘。

[參考文獻]

[1] 《中國高血壓基層管理指南》修訂委員會.中國高血壓基層管理指南（2014年修訂版）[J].中華高血壓雜志，2015，23（1）：24-43.

[2] 郭藝芳.我國高血壓防控現(xiàn)狀的最新數(shù)據(jù)與啟示[J].中華高血壓雜志，2016，24（6）：504.

[3] 王鴻懿，孫寧玲.《高血壓合理用藥指南》介紹和解讀[J].中華高血壓雜志，2016，24（6）：515-517.

[4] Rocha T，Amaral JS，Oliveira M. Adulteration of dietary supplements by the illegal addition of synthetic drugs：a review [J]. Comprehens Rev Food Sci Food Safety，2016，15（1）：43-62.

[5] 符江，荊文光，章軍，等.中藥中非法添加問題研究現(xiàn)狀與分析[J].中草藥，2014，45（3）：437-442.

[6] 孫麗，譚艷紅.保健食品非法添加物檢測技術(shù)研究進展[J].食品工業(yè)科技，2014，35（12）：398-400.

[7] 王靜文，曹進，王鋼力，等.保健食品中非法添加藥物檢測技術(shù)研究進展[J].藥物分析雜志，2014，34（1）：1-11.

[8] 黃海燕，饒偉文，鐘建理.降糖類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥品的研究概況[J].中國藥業(yè)，2014，23（5）：94-96.

[9] 吳公平，雷玉萍，黎銀波，等.輔助降壓類保健品中非法添加化學(xué)藥品的快速篩選方法[J].中國藥業(yè)，2010，19（14）：42-43.

[10] 吳嫣艷，曹玲，丁安偉.降壓保健食品中非法添加氫氯噻嗪的檢測[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2011，27（1）：92-94.

[11] 陳華才，陳星旦.近紅外光譜在藥物領(lǐng)域的應(yīng)用于研究進展[J].中國計量學(xué)院學(xué)報，2003，14（4）：261-267.

[12] 池文杰，張勛，陳海濱，等.近紅外特征譜段相關(guān)系數(shù)法測定降壓類中成藥中添加氫氯噻嗪[J].藥物分析雜志，2014，34（2）：310-313.

[13] 張健泓，陳優(yōu)生.高效液相色譜法概論[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2008，5（22）：28-29.

[14] 陳林，溫家欣，齊春艷，等.降壓類中成藥及保健食品中21種非法添加化學(xué)藥物的快速檢測與確證方法研究[J].分析測試學(xué)報，2016，35（8）：937-942.

[15] 謝清萍.中成藥中可能違禁添加6種化學(xué)降壓藥物的HPLC法測定[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2010，41（6）：450-452.

[16] 胡青，張甦，王珂，等.中藥及保健食品中違禁添加7種降壓類化學(xué)藥物的HPLC-DAD法測定[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2010，41（8）：601-603.

[17] 徐文峰，金鵬飛.改善睡眠類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物檢測技術(shù)的研究進展[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2016，13（16）：27-30.

[18] 丁寶月，屠婕紅，薛磊冰，等.UPLC-MS/MS法快速測定降壓類中成藥及保健食品中非法添加34種化學(xué)藥的研究[J].中草藥，2015，46（5）：688-696.

[19] 王崢帥，舒展，朱潔，等.中成藥和保健食品中18種非法添加降壓藥物的HPLC-QTOF MS定性檢測[J].中國藥師，2016，19（6）：1084-1087.

[20] 朱慧果，趙勇，吳雙，等.HPLC-MS聯(lián)用測定輔助降血壓保健食品中添加鈣通道阻滯劑類藥物[J].藥物分析雜志，2013，33（7）：1141-1150.

[21] 孫夏榮，李丹，文紅梅，等.中成藥與保健食品中違禁添加的20種降壓類化學(xué)藥物的LC-MS/MS法檢測[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2011，42（12）：941-944.

[22] 張小龍，王昆，吳先富，等.中藥及保健食品中非法添加狀況分析[J].中國藥師，2014，17（10）：1749-1753.

[23] 李濤，朱小紅，林芳.GC-MS聯(lián)用方法檢測降壓類中成藥及保健食品中非法添加的化學(xué)藥物[J].藥物分析雜志，2010，30（11）：2212-2215.

（收稿日期：2016-07-26 本文編輯：李亞聰）