大慶市及周邊地區(qū)非免疫豬群豬圓環(huán)病毒感染情況調(diào)查

翟寶庫，譚海東，張冠群

(大慶市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，黑龍江大慶 163311)

大慶市及周邊地區(qū)非免疫豬群豬圓環(huán)病毒感染情況調(diào)查

翟寶庫，譚海東，張冠群

(大慶市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，黑龍江大慶 163311)

為了解大慶市及周邊地區(qū)豬群中PCV的感染情況，應(yīng)用ELISA和PCR技術(shù)對(duì)采自大慶市5區(qū)4縣及周邊地區(qū)55個(gè)村屯/豬場未免疫PCV2疫苗豬血清樣本649份，5家病豬場和6家屠宰場組織樣本448套，進(jìn)行血清學(xué)和分子生物學(xué)檢查，并對(duì)檢測結(jié)果進(jìn)行了比較分析。結(jié)果顯示，大慶市及周邊地區(qū)未免疫PCV2疫苗豬血清樣品PCV2抗體平均陽性率為54.70%，其中斷奶仔豬樣品陽性率為50.68%，育肥豬樣品為70.00%，繁育母豬樣品為54.70%。組織樣品PCV1陽性率為4.46%，PCV2陽性率為22.32%。調(diào)查結(jié)果可為確定地區(qū)流行毒株序列提供原始材料和制定科學(xué)防控措施提供依據(jù)。

豬圓環(huán)病毒； 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ；流行病學(xué)；調(diào)查

豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus，PCV)是無囊膜的單鏈環(huán)狀DNA病毒，屬于圓環(huán)病毒科、圓環(huán)病毒屬成員，是迄今發(fā)現(xiàn)的最小動(dòng)物病毒，有2個(gè)血清型，豬圓環(huán)病毒1型(Porcine circovirus type 1，PCV1)和豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus type 2，PCV2)[1-2]。一般認(rèn)為PCV1是實(shí)驗(yàn)室豬源傳代細(xì)胞污染病毒，在豬群中廣泛存在，對(duì)豬無致病性，但一些國外學(xué)者報(bào)道提示PCV1可能具有潛在的致病性或協(xié)同致病作用[3]，已引起廣泛關(guān)注。PCV2是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(Postweaning multisystemic wasting syndrome，PMWS)的主要病毒，同時(shí)也是豬皮炎與腎病綜合征(Porcine dermatitis and nephropathy syndrome，PDNS)、豬呼吸道綜合征(Porcine respiratory disease complex,PRDC)、新生仔豬先天性震顫(Congenital tremors of piglet，CT)及母豬繁殖障礙等疫病相關(guān)聯(lián)的重要病毒[4]。PCV2還能侵害豬的免疫系統(tǒng)，抑制免疫功能，與豬流感、豬支原體肺炎、豬副嗜血桿菌和豬鏈球菌病等相互作用，加重危害[5]。據(jù)李海超等[6]對(duì)2005年-2012年發(fā)表論文的統(tǒng)計(jì)報(bào)道，2005年P(guān)CV2感染率為52.8%(19/36),至2012年感染率已上升到為71.4%(162/227)，期間雖有波動(dòng)，但總體呈上升趨勢，已嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。

為了解大慶市及周邊地區(qū)豬群中PCV感染情況，特別是PCV2感染情況，2014年1月至2015年12月，筆者組織采集大慶市5區(qū)4縣及周邊地區(qū)村屯或豬場未免疫PCV2疫苗豬血清樣本649份，病豬場和屠宰場組織樣本448套，進(jìn)行PCV2抗體和PCV1、PCV2核酸調(diào)查，為確定地區(qū)流行毒株序列提供原始材料和制定科學(xué)防控措施提供基礎(chǔ)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 待檢樣本

1.1.1.1 血清樣本 2014年1月至2015年12月，對(duì)大慶市5區(qū)4縣及周邊地區(qū)已知未免疫PCV2疫苗的21個(gè)村屯，34個(gè)豬場(包括部分屠宰場)豬只進(jìn)行隨機(jī)采集，根據(jù)飼養(yǎng)數(shù)量多少每地(村屯、豬場和屠宰場)每次采集5份～40份，共采集血清樣本649份，其中斷奶仔豬樣本440份，育肥豬樣本180份，母豬及后備母豬29份。

1.1.1.2 組織樣本 采自5個(gè)疑似斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征發(fā)病豬場病死豬組織樣本13套(肝、脾、肺、扁桃體和淋巴結(jié)等)，6家屠宰場組織樣本435套。

1.1.2 主要試劑 PCV2 ELISA抗體檢測試劑盒由武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司生產(chǎn)(批號(hào)140111)。

1.1.3 引物合成 根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T21674-2008)豬圓環(huán)病毒聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)方法合成2對(duì)特異性引物。PCV1引物序列：P1:5-CCGCGGGCTGGCTGAACTT-3，P2：5-CTCGGCTATGCGCTCCAAAATG-3 ，產(chǎn)物長度為652 bp；PCV2引物序列：P1:5-CCGCGGGCTGGCTGAAC-TT-3，P3：5-ACCCCCGCCACCGCTACC-3，產(chǎn)物長度為1 154 bp，由上海invitrogen生物技術(shù)公司合成。引物工作濃度10 pmol/μL。

1.2 方法

1.2.1 樣品準(zhǔn)備 前腔靜脈或耳靜脈采集豬全血，37℃溫箱放置1 h，4℃靜置過夜，已析出血清的直接吸出，置-20℃保存?zhèn)溆?；未析出血清的，剝離血凝塊，使之與管壁分離，3 000 r/min離心10 min，吸出血清，置-20℃保存?zhèn)溆?。組織樣本無菌采集后置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 血清樣本ELISA檢測 參照試劑盒說明書應(yīng)用洗滌液洗滌包被板2次，拍干；血清樣品按1∶40稀釋，陰、陽對(duì)照血清按1∶4稀釋；取100 μL稀釋好的待檢和陰、陽對(duì)照血清加入到標(biāo)記好的包被板對(duì)應(yīng)孔中，待檢血清各一孔，陰、陽對(duì)照血清各兩孔，37℃溫育30 min；取出包被板洗滌5次，拍干；每孔加100 μL羊抗豬酶標(biāo)二抗， 37℃溫育30 min；取出包被板洗滌5次，拍干；每孔加50 μL底物A液和50 μL底物B液，混勻，室溫避光顯色10 min；取出每孔加50 μL終止液，10 min內(nèi)酶標(biāo)儀上測量各孔OD 630 nm值；陽對(duì)照血清OD值≥0.7，陰對(duì)照血清OD值<0.3試驗(yàn)成立，樣品血清OD值>0.42，判為陽性。

1.2.3 組織樣本PCR方法檢測 參照國家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T21674-2008)豬圓環(huán)病毒聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)方法。

1.2.3.1 樣品處理及DNA模板提取 取待檢組織0.2 g左右加入2 mL消化液研磨，待研磨好后取100 μL置于1.5 mL離心管中，再加入500 μL消化液和10 μL 20 g/L蛋白酶k溶液，混勻后置于55水浴中4 h～6 h。每管加入600 μL 酚-三氯甲烷-異戊醇混合液，用力顛倒混勻，4℃、13 000 r/min離心10 min。取上清500 μL置于新的1.5 mL離心管中，每管加入等體積的異丙醇，混勻后置-70℃冰箱中30 min，取出融化后，4℃、20 000 r/min離心15 min。棄上清，沿管壁緩慢滴加1 mL -20℃預(yù)冷的750 mL/L乙醇，輕輕旋轉(zhuǎn)管壁洗滌1周后倒掉乙醇，倒扣于吸水紙上15 min左右。每管加入50 μL滅菌去離子水溶解沉淀，作模板備用。

1.2.3.2 PCR擴(kuò)增體系及電泳 8 μL滅菌去離子水，2.5 mmol/L dNTP、15 mmol/L氯化鎂、10倍PCR緩沖液、0.5 U/μLTaqDNA聚合酶、10 pmol/μL PCV引物各2 μL，DNA模板2 μL，混勻。94℃ 30 s、62℃ 45 s、72℃ 45 s,35個(gè)循環(huán);延伸10 min。取15 μL擴(kuò)增產(chǎn)物加3 μL上樣緩沖液混勻，點(diǎn)到10 g/L瓊脂糖凝膠板中， 5 V/cm電壓40 min左右觀察。被檢樣品出現(xiàn)652 bp擴(kuò)增帶判為PCV1陽性，出現(xiàn)1 154 bp擴(kuò)增帶判為PCV2陽性。

2 結(jié)果

2.1 血清樣本ELISA檢測結(jié)果

2.1.1 總樣本ELISA檢測結(jié)果 2014年1月至2015年12月共采集大慶市5區(qū)4縣總血清樣本649份，經(jīng)豬PCV2 ELISA抗體檢測，陽性樣本355份，平均陽性率54.70%，陽性村屯/豬場35個(gè)，平均陽性率63.64%。感染范圍包括5區(qū)4縣所有抽檢的9個(gè)地區(qū)，說明大慶市豬PCV2感染已經(jīng)較為普遍。

2.1.2 不同地區(qū)樣本ELISA檢測結(jié)果 本次血清樣品按地區(qū)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，LDX和SET陽性率較高，ZYX和DMX相對(duì)較低，見表1。

表1 不同地區(qū)PCV2抗體檢測結(jié)果

由表1可知，大慶市豬PCV2感染很不均衡，除ZYX外，其他地區(qū)已經(jīng)有超過50%的檢測村屯/豬場被感染，且樣品陽性率較高，進(jìn)一步說明大慶市豬PCV2自然感染較為普遍。

2.1.3 不同日齡樣本ELISA檢測結(jié)果 根據(jù)不同日齡把豬群分成斷奶仔豬、育肥豬和母豬，據(jù)此進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，育肥豬陽性率最高，仔豬最低，見表2。

由表2可知，無論村屯/豬場陽性率，還是樣品陽性率，育肥豬都明顯高于斷奶仔豬和繁殖母豬，且育肥豬村屯/豬場陽性率已達(dá)到80%，樣品陽性率達(dá)到70%。斷奶仔豬和繁殖母豬與育肥豬相比，雖然相對(duì)較低，但村屯/豬場陽性率也在60%左右，樣品陽性率也已超過了50%。

2.1.4 不同時(shí)間樣本ELISA檢測結(jié)果 按時(shí)間統(tǒng)計(jì)，村屯/豬場陽性率和樣品陽性率都在逐年增加，見表3。

表2 不同日齡PCV2抗體檢測結(jié)果

表3 不同年份PCV2抗體檢測結(jié)果

由表3可知，2015年大慶市豬群PCV2樣品陽性率已達(dá)60%以上，村屯/豬場陽性率更已超過70%，都明顯高于2014年，感染強(qiáng)度呈逐年遞增趨勢。

2.2 組織樣本PCR檢測結(jié)果

2.2.1 總樣本PCR檢測結(jié)果 2014年1月至2015年12月共采樣31次，采集6家屠宰場和5家病豬場組織樣本448套，經(jīng)PCR擴(kuò)增檢測，PCV1陽性組織樣本20套，平均陽性率4.46%，陽性次數(shù)8次，次平均陽性率25.81%。PCV2陽性組織樣本100套，平均陽性率22.32%，陽性次數(shù)25次，次平均陽性率80.65%，見圖1、表4和表5。

PCV1是非致病性病毒，一般認(rèn)為豬群帶毒較為普遍。由表4可知，本次分子流行病學(xué)調(diào)查表明，PCV1陽性批次只有25.81%，樣品陽性率更少，只有4.46%，都明顯低于PCV2，說明大慶市及周邊地區(qū)PCV1感染率不高，群內(nèi)感染更低，這與傳統(tǒng)看法不符。

PCV2是致病性病毒，呈世界分布，世界各地及我國部分地區(qū)流調(diào)表明，豬群感染較為普遍，由表5可知，本次分子流調(diào)顯示，大慶市及周邊地區(qū)PCV2陽性批次高達(dá)80.65%，樣品陽性率也達(dá)到22.32%，都明顯高于PCV1感染，說明大慶市及周邊地區(qū)PCV2感染已較為普遍。

2.PCV1陽性樣本；5、8、9.PCV2陽性樣本；1、3、4、6、7.陰性樣本；M.DNA標(biāo)準(zhǔn)DL 2 000

2.Positive sample of PCV1; 5,8,9.Positive samples of PCV2；1,3,4,6,7.Negative control; M.DNA Marker DL 2 000

圖1 豬圓環(huán)病毒PCR擴(kuò)增結(jié)果

Fig.1 PCR amplification results of PCV

2.2.2 不同地區(qū)樣本PCR檢測結(jié)果 本次組織樣品按地區(qū)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，各地PCV1樣品陽性率普遍較低，但批次陽性率差別較大，見表6；各地PCV2樣品陽性率雖高低不等，但批次陽性率普遍較高，見表7。

由表6可知，大慶市及周邊地區(qū)PCV1感染并不普遍，有些地區(qū)并未檢出陽性樣品，批次陽性率較高的地區(qū)只有DMX、ZZX和LFQ，平均陽性率只有25.81%；樣品陽性率更低，平均陽性率只有4.46%，但本表并未表現(xiàn)出單群陽性率，本次組織樣品流調(diào)，大慶市PCV1單群陽性率最高達(dá)40%。

由表7可知，大慶市及周邊地區(qū)PCV2感染已較普遍，只有SET未檢出，其他地區(qū)豬群基本都被感染，且批次陽性率普遍較高，有4個(gè)地區(qū)批次陽性率達(dá)100%。樣品陽性率也較不平衡，雖然平均陽性率達(dá)22.32%，但周邊地區(qū)陽性率高達(dá)69.23%，顯著高于大慶市。

表4 PCV1總樣本PCR檢測結(jié)果

表5 PCV2總樣本PCR檢測結(jié)果

表6 不同地區(qū)PCV1 PCR檢測結(jié)果

表7 不同地區(qū)PCV2 PCR檢測結(jié)果

2.2.3 不同時(shí)間樣本PCR檢測結(jié)果 本次組織樣品按時(shí)間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，2年間PCV1和PCV2陽性率變化不大，見表8和表9。

由表8可知，本次組織樣品流行病學(xué)調(diào)查，大慶市及周邊地區(qū)PCV1批次陽性率不高，只有25.81%，樣品陽性率更低，只有4.46%，且兩年間沒有明顯變化。

由表9可知，2014年和2015年，大慶市及周邊采樣，PCV2批次陽性率和樣品陽性率都有所下降，與血清學(xué)流調(diào)結(jié)果不一致。樣品陽性率與血清學(xué)流調(diào)比較，也明顯低于血清學(xué)流調(diào)。

表8 不同時(shí)間PCV1 PCR檢測結(jié)果

表9 不同時(shí)間PCV2 PCR檢測結(jié)果

3 討論

豬PCV1是從污染的豬腎傳代細(xì)胞系(PK-15)中發(fā)現(xiàn)的，一般認(rèn)為不引起細(xì)胞變化，對(duì)豬無致病性，在其它多種病毒感染的的情況下有無協(xié)同致病性目前尚不十分清楚，研究報(bào)道也較少。但Krakowka等[7]用體外細(xì)胞傳代的PCV1和豬細(xì)小病毒(PPV)混合感染1日齡新生仔豬，有1頭仔豬出現(xiàn)了PPV血癥，結(jié)腸袢出現(xiàn)肉芽腫性淋巴結(jié)炎，提示PCV1在混合感染中可能有一定作用。Saha D等[8]報(bào)道，PCV1感染能引起豬胚胎肺出現(xiàn)病理變化，同樣提示PCV1可能具有潛在的致病性[3]。而Allang G M等[9]報(bào)道，可在流產(chǎn)與死亡的胎兒中檢到PCV1，更提示其可垂直傳播。因此，豬群PCV1感染已引起人們廣泛關(guān)注。另外，一般認(rèn)為豬群PCV1帶毒比較普遍，陽性率從10%到100%不等[3]，但本次調(diào)查，PCV1陽性批次不高，只有25.81%，樣品平均陽性率更少，僅為4.46%，與傳統(tǒng)看法不符，更遠(yuǎn)低于PCV2感染。

進(jìn)入21世紀(jì)以來，我國學(xué)者開始關(guān)注豬PCV2在豬群中的感染情況，并對(duì)部分地區(qū)做了流行病學(xué)調(diào)查。2007年，熊江林等[10]對(duì)鄂西北地區(qū)豬群進(jìn)行了血清檢測，樣品陽性率為73.4%(207/282)，豬場陽性率為82.9%(29/35)；2008年李龍等[11]對(duì)重慶武隆縣豬群進(jìn)行了血清檢測，斷奶仔豬陽性率為76.6%(36/47)，育肥豬陽性率為74.2%(92/124)經(jīng)產(chǎn)母豬陽性率為86.2%(75/87)；2009年，廖榮斌等[12]對(duì)湖北、湖南等十多個(gè)省送檢的病料和血清進(jìn)行了病原學(xué)和血清學(xué)檢測，樣品陽性率為35.05%(687/1 960)，豬場陽性率為58.86%(249/423)。以上調(diào)研說明我國豬場PCV2感染已較普遍，群內(nèi)感染密度較大，已嚴(yán)重威脅畜牧業(yè)生產(chǎn)。在國外，20世紀(jì)90年代，Edwards S等[13]報(bào)道，英國和北愛爾蘭豬血清抗體陽性率分別為86%和92%；Ellis J等[14]報(bào)道，德國屠宰場和2歲～3歲繁殖豬，血清抗體陽性率達(dá)85%，感染密度更大。本次調(diào)查，共采集大慶市5區(qū)4縣55個(gè)未免疫PCV2疫苗村屯/豬場豬只血清樣本649份，平均陽性率54.70%(355/649)，村屯/豬場陽性率為63.64%(35/55)，雖然沒有達(dá)到國外那么高的陽性率，與熊江林和李龍等報(bào)道相比，也有明顯降低，但與廖榮斌報(bào)道相比，陽性率明顯增高，說明大慶市豬群PCV2感染已比較普遍。

關(guān)于豬PCV2感染分子生物學(xué)(PCR)檢測，2008年至2010年，吳璦等[15]對(duì)江蘇金華地區(qū)疑似組織病料進(jìn)行了檢測，樣品感染率為59.8%(61/102)；2011年，劉濤等[16]對(duì)河南信陽地區(qū)220份(50份是血清)病料進(jìn)行了檢測，感染率36.8%(81/220)；2012年，李海超等[6]對(duì)山東、廣西等八個(gè)省送檢的病料進(jìn)行了檢測，樣品總感染率為71.4%(162/227)，其中安徽最高，達(dá)100%(11/11)，山東最低，為50%(8/16)。本次調(diào)查448套組織樣品中，PCR擴(kuò)增陽性率僅為22.32%(100/448)，明顯低于上述報(bào)道，但本次檢測樣品中，只有13套來自臨床疑似斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征發(fā)病豬群，其他來源于屠宰場的臨床健康豬，在13套有臨床癥狀的組織樣品中，有3套陽性，陽性率為23.08%，較接近劉濤的檢測結(jié)果，明顯低于吳璦和李海超的報(bào)道。分子生物學(xué)檢測也充分說明大慶市及周邊地區(qū)豬群中，豬PCV2感染已比較普遍。

本次流行病學(xué)調(diào)查按時(shí)間比較，2014年與2015年P(guān)CV2組織樣品陽性率雖無明顯差異，但血清樣品陽性率有逐年遞增趨勢，2015年血清樣品陽性率已達(dá)60%以上，這在日常防控工作應(yīng)引起高度重視。當(dāng)然對(duì)單純的病原來說，做適當(dāng)?shù)闹鲃?dòng)免疫，防控效果明顯，但由豬PCV2參與引起的疾病癥候群較為復(fù)雜，人們對(duì)于PCV2的致病機(jī)理、免疫抑制機(jī)理以及引起的各種臨床癥狀的機(jī)理尚未達(dá)成統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)，對(duì)其他疾病發(fā)生的促進(jìn)作用尚有爭議[17]，也尚未完全了解，因此不能單純依賴特定疫苗。而且目前疫苗免疫，雖在一定程度上降低了PCV2感染豬群的臨床癥狀，提高了豬的生產(chǎn)性能，但疫苗免疫并不能完全阻斷傳播，亦不能清除體內(nèi)已感染的病毒[18]。因此，在豬群PCV2感染防控工作中，應(yīng)建立綜合性防控機(jī)制，加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生消毒工作，適當(dāng)增加藥物預(yù)防，控制混合感染和繼發(fā)感染，只有在污染嚴(yán)重的區(qū)域才建議有針對(duì)性的實(shí)施疫苗免疫防控?？傊鰪?qiáng)整體防控意識(shí)，對(duì)穩(wěn)定疫情，控制擴(kuò)散有重要的指導(dǎo)意義。

[1] Ellis J,Krakiwka S,Lairmore M,et al.Reproduction of lesion of postweaning multisystemic wasting syndrome in gnotobioti piglets[J].J Vet Diagn Invest,1999,11(1):3-14.

[2] Meehan B M,Meneilly F,Todd D,et al.Characterzation of novel circovirus DNAs associate with wasting syndromes in pigs[J].J Gen Virol,1998,79(Pt9):2171-2179.

[3] 于紅欣，王立嬌，孟凡偉，等.豬圓環(huán)病毒1型real-time PCR檢查方法的建立[J].中國獸醫(yī)科學(xué)，2014,44(10):1036-1041.

[4] 梁望旺，曾 政，吳勝昔，等.重慶地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型的分離鑒定與序列分析[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013,34(12):55-59.

[5] 葛 猛，楊 陽，蔣重合，等.豬圓環(huán)病毒2抗體水平的監(jiān)測及意義[J].湖南畜牧獸醫(yī)， 2009(3)：8-10.

[6] 李海超，王 娟，李一經(jīng)，等.八省份豬圓環(huán)病毒2型與豬細(xì)環(huán)病毒混合感染的調(diào)查[J].中國獸醫(yī)科技，2013,43(12):1313-1319.

[7] Krakowka S,Ellis J A,Meehan B,et al.Viral wasting syndrome of swine:experimental reproduction of postweaning multisystemic wasting syndrome in gnotobiotic swine by coinfection with porcine circovirus 2 and porcine parvovirus 1[J].Vet Pathol,2000,37(3):254-263.

[8] Saha D,Lefebvre D J,Ducatelle R,et al.Outcome of experimental porcine circovirus type 1 infections in mid-gestational porcine foetuses[J].BMC Vet Res,2011,7(1):64.

[9] Allan G M,Mcneilly Y F,Cassidy J P,et al.Pathogenesis of porcine circovirus:experimental infection of colostrums deprived piglets and examination of pig foetal material[J].Vet Microbiol,1995,44(1):49-64.

[10] 熊江林，周華林，王長義，等.鄂西北地區(qū)豬圓環(huán)病毒2型抗體水平監(jiān)測[J].中國畜牧獸醫(yī)，2008,35(9)：96-97.

[11] 李 龍，張 奎.豬圓環(huán)病毒2型的血清流行病學(xué)調(diào)查[J].中國畜牧獸醫(yī)，2010,37(1)：182-183.

[12] 廖榮斌，趙洪翠，李文濤，等.豬圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)調(diào)查[J].養(yǎng)豬,2011(1)：81-82.

[13] Edwards S,Sandsj J.Evidence of circovirus infection in British pigs[J].Vet Rec,1994,134:680-681.

[14] Ellis J,Hassard L,Clark E,et al.Isolation of circovirus from lesions of pigs with postweaning multisystemic wasting syndrome[J].Can Vet J,1998,39:44-51.

[15] 吳 璦，范紅結(jié)，李君榮，等.金華地區(qū)豬圓環(huán)病毒病病原流行病學(xué)調(diào)查[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，2010,31(6)：79-82.

[16] 劉 濤，王 瑞，曲哲會(huì)，等.信陽地區(qū)豬圓環(huán)病毒病流行病學(xué)調(diào)查[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013,3(上)：101-102.

[17] 李海超，王 娟，黃秀梅，等.豬圓環(huán)病毒2型免疫應(yīng)答機(jī)制研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014,35(2):105-109.

[18] 劉建波，張 輝，劉長明.豬圓環(huán)病毒的流行趨勢與防控對(duì)策[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014,35(1):111-115.

Study on PCV Infection Situation of Non Immune Pigs in Daqing City and Surrounding Areas

ZHAI Bao-ku，TAN Hai-dong，ZHANG Guan-qun

(DaqingCenterforAnimalDiseaseControlandPrevention,Daqing,Heilongjiang，163311,China)

The experiment was conducted to detect the infection situation of PCV in pigs in Daqing city and surrounding areas.649 serum samples from 55 villages or pig farms (non-immune pigs) were used to test PCV2 antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the 488 tissue samples from 5 sick-pig farms and 6 slaughterhouses (PCV2 immune pigs) were used to test PCV1 or PCV2 by polymerase chain reaction (PCR). The results showed that the average positive rate of PCV2 antibodies was 54.70% in the PCV2 non-immune pigs, including the positive rates of sera of weaned piglets, finishing pigs and breeding sows with 50.68%, 70.00% and 54.70%, respectively. The positive rate of PCV1 in tissues of pigs was 4.46%, that of PCV2 in tissues of pigs was 22.32%. The survey was likely to determine pandemic strain sequence and provide evidences for taking scientific prevention in Daqing area.

Porcine circovirus; enzyme-linked immunosorbent assay; polymerase chain reaction; epidemiology;investigation

2016-06-17

2014年黑龍江省級(jí)領(lǐng)軍人才梯隊(duì)后備帶頭人資助項(xiàng)目

翟寶庫(1965-)，男，黑龍江大慶人，研究員級(jí)高級(jí)獸醫(yī)師，主要從事動(dòng)物疫病預(yù)防與控制工作。

S852.659.2;S858.28

B

1007-5038(2017)01-0119-06