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    EGFR、nm23、p53、Ki—67在乳腺浸潤性導管癌中的表達及臨床意義

    2017-02-27 00:24:42曾祥美張力斌
    中外醫(yī)學研究 2016年32期
    關(guān)鍵詞:浸潤性乳腺導管

    曾祥美 張力斌

    【摘要】 目的:探討EGFR、nm23、p53、Ki-67在乳腺浸潤性導管癌中的表達及臨床意義。方法:納入筆者所在醫(yī)院收治的106例乳腺浸潤性導管癌患者作為研究對象,按照乳腺浸潤性導管癌的三級分級法,將106例患者分為A組(Ⅰ級)、B組(Ⅱ級)、C組(Ⅲ級),采用免疫組織化學檢測法檢測三組研究對象乳腺癌組織中EGFR、nm23、p53、Ki-67的表達情況。結(jié)果:EGFR、Ki-67、p53陽性表達率由高至低的順序為C組、B組、A組,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。nm23陽性表達率由高至低的順序為A組、B組、C組,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結(jié)論:nm23、EGFR、p53、Ki-67在不同分級的乳腺浸潤性導管癌組織中均具有一定的表達特征,可作為臨床評估乳腺癌患者疾病進展和預后的參考指標。

    【關(guān)鍵詞】 乳腺浸潤性導管癌; EGFR; nm23; p53; Ki-67; 表達; 臨床意義

    doi:10.14033/j.cnki.cfmr.2016.32.031 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805(2016)32-0057-02

    乳腺癌是一種以女性為主要發(fā)病群體的惡性腫瘤疾病,具有發(fā)病率高、治療難度大等臨床特點,嚴重威脅患者生命健康??偨Y(jié)乳腺癌的長期診治經(jīng)驗發(fā)現(xiàn),在發(fā)病早期明確患者的診斷結(jié)果,及時對患者實施有效治療是改善患者預后的關(guān)鍵。近年來,不斷有臨床研究發(fā)現(xiàn),檢測多種腫瘤標志物在乳腺癌組織中的表達情況,可為臨床診斷乳腺癌及評估乳腺癌患者病情進展提供較為客觀的參考依據(jù)[2]。ER、PR、CerbB-2在乳腺癌中的研究已經(jīng)非常成熟,為乳腺癌患者在內(nèi)分泌治療及分子靶向藥物的選用上發(fā)揮了巨大的作用。除此之外,利用免疫組織化學檢測另外一些腫瘤標記物也對乳腺癌的診治發(fā)揮了積極的作用。浸潤性導管癌是乳腺癌最常見的類型,筆者所在醫(yī)院本次對EGFR(表皮生長因子)、nm23(腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因)、p53(突變型人體抑癌基因)、Ki-67(增殖細胞核抗原)在乳腺浸潤性導管癌組織中的表達情況及臨床意義進行了研究,旨在明確上述四種腫瘤標志物在此類患者疾病診斷及評估中的應用價值。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    本次研究選擇筆者所在醫(yī)院2012年3月-2015年9月收治的106例女性原發(fā)性乳腺癌患者為研究對象,所有病例術(shù)前均未經(jīng)過放療、化療及其他治療,術(shù)后經(jīng)病理診斷為浸潤性導管癌。年齡30~75歲,平均(47.9±1.8)歲。按照乳腺浸潤性導管癌的三級分級法,將106例患者分為A組(Ⅰ級)、B組(Ⅱ級)、C組(Ⅲ級),A組18例,B組53例,C組35例。A組患者無發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;B組患者有13個發(fā)生腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,兩年內(nèi)有2例發(fā)現(xiàn)肺部轉(zhuǎn)移(年齡分別為31歲及58歲);C組患者有14例發(fā)生腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,且有4例2年內(nèi)復發(fā)或發(fā)生肺或骨轉(zhuǎn)移。

    1.2 三級分級法

    腺管形成:大于75%計1分,10%~75%計2分,小于10%計3分;細胞核:相當于正常導管上皮,規(guī)則,一致計1分,中間大小、中度多形和異型計2分,大于正常導管上皮2.5倍,明顯多形和異型計3分;每10個高倍視野(40倍鏡)核分裂計數(shù):0~5個計1分,6~10個計2分,大于11個計3分。Ⅰ級,分化好3~5分;Ⅱ級,中分化,6~7分;Ⅲ級,差分化,8~9分[1]。

    1.3 研究方法

    1.3.1 檢驗試劑 本次研究過程中使用的鼠抗人EGFR、p53、Ki-67單克隆抗體、兔抗人多克隆抗體nm23、DAB-酶底物顯色劑、S-P法顯色試劑盒等試劑均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

    1.3.2 檢驗方法 本次研究采用免疫組化S-P法檢測三組患者乳腺癌組織中EGFR、nm23、p53、Ki-67的表達情況。所有標本離體30 min內(nèi)均經(jīng)過10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋制成蠟塊。行4 μm連續(xù)切片,玻片經(jīng)過多聚賴氨酸預處理以防止脫片。切片常規(guī)脫蠟后分別做HE染色及免疫組織化學染色,用已知陽性標本做陽性對照,用PBS代替一抗作為陰性對照,具體操作步驟按照說明書進行。

    1.3.3 結(jié)果判斷 p53、Ki-67表達于乳腺癌細胞的細胞核中,EGFR定位于細胞漿,nm23定位于細胞質(zhì),目標著色部位著棕黃色判定為陽性,無著色判定為陰性。EGFR、nm23陽性判定標準,(+):腫瘤細胞著色<25%;(++):腫瘤細胞著色26%~50%,(+++):腫瘤細胞著色51%~75%;(++++):腫瘤細胞著色>75%。陽性率=(+)%+(++)%+(+++)%+(++++)%。p53、Ki-67陽性判定標準:計腫瘤細胞核陽性率,選取陽性率高的范圍選取10個高倍視野,數(shù)100個腫瘤細胞,計數(shù)陽性細胞數(shù),取其平均值即為其陽性值。

    1.4 統(tǒng)計學處理

    所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計學軟件SPSS 21.0處理,計量資料以(x±s)表示,采用t檢驗,計數(shù)資料以率(%)表示,采用字2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

    2 結(jié)果

    EGFR、Ki-67、p53陽性表達率由高至低的順序均為C組、B組、A組,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。nm23陽性表達率由高至低的順序為A組、B組、C組,組間比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

    3 討論

    大量臨床研究報道已經(jīng)證實惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機體內(nèi)多種基因和分子的表達存在相關(guān)性,故將這些基因和分子統(tǒng)稱為腫瘤標志物[2]。近年來,伴隨著臨床對基因和分子生物學性質(zhì)的深入研究,多種基因和分子在惡性腫瘤疾病的診斷、治療和預后評估中發(fā)揮著重要作用。在乳腺癌方面,ER、PR、CerbB-2在乳腺癌中的研究已經(jīng)非常深入及成熟,為乳腺癌患者術(shù)后的輔助治療,如內(nèi)分泌治療及分子靶向藥物的應用提供了極大的幫助。除了ER、PR、CerbB-2外,有一部分臨床研究發(fā)現(xiàn)EGFR、nm23、p53、Ki-67在乳腺癌患者病理組織中具有明顯的表達特征。為明確乳腺癌患者病理組織中EGFR、nm23、p53、Ki-67表達變化的臨床意義,筆者所在醫(yī)院開展了臨床研究。

    EGFR屬于表皮生長因子家族的一員,國內(nèi)外大量臨床研究均證實惡性腫瘤組織中有該因子存在,且該因子的表達水平越高,發(fā)生轉(zhuǎn)移的風險越大。在本試驗中,乳腺浸潤性導管癌Ⅲ級EGFR的陽性表達率高于Ⅱ級和Ⅰ級,在一定程度上說明腫瘤分化越差,EGFR的陽性率越高,患者的預后越不好。另一些研究也顯示,EGFR在乳腺癌中高表達可能提示患者的預后不良[3]。筆者所在醫(yī)院采用的EGFR檢測法為免疫組織化學法,因其易受外界因素干擾,且敏感性欠穩(wěn)定,目前提倡用分子病理檢測EGFR基因,將更有利于評估患者的預后,進而提供積極的治療方案。

    nm23為腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因,存在于細胞膜和細胞質(zhì)上,維持細胞的正常分裂,具有抑制腫瘤細胞入侵潛力及能動性的作用,抑制癌細胞的轉(zhuǎn)移,是現(xiàn)階段我國臨床常用的評估惡性腫瘤疾病患者預后狀況的指標。筆者所在醫(yī)院本次研究nm23在乳腺浸潤性導管癌Ⅲ級中的表達明顯低于在浸潤性導管癌Ⅰ級、Ⅱ級,故筆者認為nm23基因的表達與乳腺癌的分化程度呈負相關(guān),分化越差的腫瘤表達率越低,越容易發(fā)生轉(zhuǎn)移。馬燕飛等[4]的研究也證實nm23在乳腺癌中具有抑制腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的作用。臨床醫(yī)生可以根據(jù)nm23的表達情況來篩查出高危患者,從而幫助制定治療方案,改善預后。

    p53為人體抑癌基因,分為野生型p53和突變型p53。野生型p53具有激活細胞內(nèi)DNA修復功能,調(diào)節(jié)細胞分裂失常,穩(wěn)定基因組的作用,可以抑制腫瘤細胞的增殖,因其半衰期短,很難測出。突變型p53卻失去了野生型p53的作用,影響細胞的正常分裂,促進腫瘤細胞異常增殖,最終引發(fā)癌變。筆者所在醫(yī)院本次研究的是突變型p53。有臨床數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果顯示70%的乳腺癌患者,乳腺癌組織中的p53表達發(fā)生改變[5]。本次研究發(fā)現(xiàn)乳腺浸潤性導管癌分級為Ⅲ級的患者,p53的表達水平明顯高于分級為Ⅱ級和Ⅰ級的患者,因此推測乳腺癌患者該蛋白表達水平升高是癌細胞產(chǎn)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移的體現(xiàn),可作為評估乳腺患者預后的指標。李新軍等[6]的研究結(jié)果與本次研究結(jié)果具有一致性。

    Ki-67是一種與增殖細胞相關(guān)的核抗原,為現(xiàn)階段我國臨床檢測腫瘤細胞增殖活性的常用指標。該指標陽性表達率越高,表示患者腫瘤更易發(fā)生侵襲和遠處轉(zhuǎn)移。本次研究發(fā)現(xiàn)乳腺浸潤性導管癌分級為Ⅲ級的患者,Ki-67的陽性表達率明顯高于分級為Ⅱ級和Ⅰ級的患者,這一檢測結(jié)果可能說明腫瘤細胞分化越差,腫瘤的增殖活性越高,更容易復發(fā)或轉(zhuǎn)移,同時提示這一指標也可用于判斷乳腺癌患者預后狀況[7]。

    本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)EGFR、nm23、p53、Ki-67在乳腺癌組織中的表達會隨著患者疾病的進展出現(xiàn)一定的規(guī)律。綜上所述,本研究認為EGFR、nm23、p53、Ki-67在不同分級的乳腺浸潤性導管癌組織中均具有一定的表達特征,可作為臨床評估乳腺癌患者疾病進展和預后的參考指標。

    參考文獻

    [1]陳竺,黃潔夫.臨床診療指南病理學分冊[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2009:836-837.

    [2]徐旭東,吳亞群,張林,等.信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活子3、nm23、CXCR4在原發(fā)性乳腺癌組織中的表達及其意義[J].中華實驗外科雜志,2011,28(5):659-661.

    [3]李珊珊.EGFR在乳腺癌中的表達及意義[J].山東醫(yī)藥,2012,52(20):89-90.

    [4]馬燕飛,浦澗.nm23基因在原發(fā)性乳腺癌組織中的表達及意義[J].醫(yī)學臨床研究,2015,32(8):1582-1583.

    [5]楊麗麗,梁莉萍,趙峰,等.ER、PR、HER-2、Ki67、Nm23、P53在多中心性乳腺癌中的表達及臨床意義[J].重慶醫(yī)科大學學報,2012,37(11):964-967.

    [6]李新軍,付麗梅,付明霞,等.聯(lián)合檢測乳腺癌組織中 PTEN、p53和 EGFR表達的臨床病理意義[J].臨床與實驗病理學雜志,2015,11(9):986-990.

    [7]管小青,鄭向欣,顧書成,等.三陰性乳腺癌組織中Ki67、p53的表達及臨床意義[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學,2015,23(6):786-791.

    (收稿日期:2016-07-26)

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