電針對(duì)雌雄兩性實(shí)驗(yàn)肥胖大鼠血清Ins及脂肪含量的影響

田玲,張書義,高飛,孫小雪,杜瀟怡,孫立虹,梁玉磊

(1.河北中醫(yī)學(xué)院,石家莊 050200;2.北京市豐臺(tái)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心,北京 100071;3.河北醫(yī)科大學(xué),石家莊050017)

·動(dòng)物實(shí)驗(yàn)·

電針對(duì)雌雄兩性實(shí)驗(yàn)肥胖大鼠血清Ins及脂肪含量的影響

田玲1,張書義2,高飛3,孫小雪3,杜瀟怡3,孫立虹1,梁玉磊1

(1.河北中醫(yī)學(xué)院,石家莊 050200;2.北京市豐臺(tái)社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心,北京 100071;3.河北醫(yī)科大學(xué),石家莊050017)

目的 探討電針刺激對(duì)雌、雄兩性單純性肥胖大鼠血清胰島素(Ins)調(diào)節(jié)及脂肪消耗的差異性及其可能作用機(jī)制。方法采用谷氨酸鈉的方法制造單純性肥胖大鼠模型,隨機(jī)分為模型組(雌、雄)、電針組(雌、雄),并設(shè)正常組(雌、雄)進(jìn)行對(duì)照,每組10只。電針組取曲池、中脘、關(guān)元、后三里、豐隆、三陰交穴,針刺后采用2 Hz低頻刺激,每日1次,連續(xù)治療28 d。觀察電針治療前后雌、雄大鼠血清ins含量及大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量的變化情況,并進(jìn)行比較。結(jié)果電針組雄性與雌性大鼠血清Ins含量及大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪的重量分別較模型組同性大鼠顯著降低(P＜0.01),且電針組雄性大鼠各項(xiàng)指標(biāo)較電針組雌性大鼠降低更明顯(P＜0.05)。結(jié)論電針刺激對(duì)雌、雄兩性肥胖性大鼠均有不同程度的減肥作用,在降低血清Ins及大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量方面,雄性大鼠療效更顯著。

電針;肥胖癥;大鼠 ;血清Ins;大網(wǎng)膜脂肪;心周脂肪;腎周脂肪

隨著人們生活水平的不斷提高,肥胖癥患者越來(lái)越多。有研究[1-3]發(fā)現(xiàn),針灸療法能有效防治肥胖癥的發(fā)生,降低其患病率,從而提高人們的生活質(zhì)量。近年來(lái),筆者發(fā)現(xiàn)針刺對(duì)雌雄兩性減肥效應(yīng)方面亦存在差異[4-6],在降低Lee's指數(shù)、血清及下丘腦神經(jīng)肽Y (neuropeptide Y, NPY)含量方面,電針刺激對(duì)雄性效果明顯;在降低血清總膽固醇、甘油三酯含量及調(diào)節(jié)血清和下丘腦瘦素(leptin)方面,電針刺激對(duì)雌性效果顯著。由于胰島素(insulin, Ins)與脂肪形成關(guān)系密切,同時(shí)內(nèi)臟脂肪組織對(duì)血壓、血脂、血糖具有明顯的影響,是高血壓、Ⅱ型糖尿病及其他心腦血管疾病的潛在危險(xiǎn)因素[7-9]。本實(shí)驗(yàn)觀察電針刺激前后大鼠血清Ins含量及大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量變化的情況,探討其對(duì)雌雄兩性大鼠減肥效應(yīng)及并發(fā)癥的防治方面的異同,以期為臨床有效提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù),現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物造模及分組

選取出生1 d的清潔級(jí)SD大鼠60只(分別取自10窩,平均每窩6只,雌雄各半,由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,合格證號(hào)1007003)。適應(yīng)性喂養(yǎng)1 d后造模,造模方法參照相關(guān)文獻(xiàn)[10-11]復(fù)制單純性肥胖模型。36 d后測(cè)量模型大鼠和正常大鼠體重、體長(zhǎng)(鼻至肛門的長(zhǎng)度),并計(jì)算其體重指數(shù)(Lee's指數(shù)), Lee's指數(shù)＝體質(zhì)量(g)1/3×103/體長(zhǎng)(cm)[12],其數(shù)值大小反映大鼠體脂含量。模型大鼠Lee's指數(shù)＞正常大鼠30以上為造模成功[13]。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組和電針組,每組10只;將正常大鼠皮下注射0.9%氯化鈉溶液,作為正常組,每組10只。3組大鼠均雌雄各半。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處置經(jīng)河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 儀器與試劑

一次性無(wú)菌針灸針(0.22 mm×13 mm,蘇州醫(yī)療用品廠有限公司);WQ1002F型韓氏電針儀(北京華衛(wèi)產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)公司);FA2004型上皿電子天平(上海精科天秤儀器廠);MSE-25型高速冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);FJ-2021γ放射免疫計(jì)數(shù)器(國(guó)營(yíng)二六二廠)。

谷氨酸鈉注射液(上海旭東海普藥業(yè)有限公司);Ins放射免疫分析藥盒(北京普爾偉業(yè)生物科技有限公司)。

1.3 治療方法[4]

電針組取曲池、中脘、關(guān)元、后三里、豐隆、三陰交穴。穴位定位參照《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物針灸穴位圖譜》。常規(guī)消毒后,采用0.22 mm×13 mm毫針進(jìn)行針刺,針刺后各穴連接WQ1002F型韓氏電針儀,采用2 Hz低頻刺激30 min。每日1次,連續(xù)治療28 d。模型組及正常組大鼠不予以任何治療措施。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 血清Ins含量的測(cè)定

治療結(jié)束后各組大鼠禁食12 h,用10%水合氯醛(1 mL/100 g)腹腔注射麻醉后股動(dòng)脈采血6 mL,加入預(yù)冷的并加有抗凝劑(1%肝素,每毫升全血20 μL)和抑肽酶(每毫升全血500單位)的塑料試管中,4℃、3 000 r/min,離心半徑5.5cm,離心5 min,提取上清液測(cè)定血清指標(biāo)。采用放射免疫分析方法測(cè)定血清Ins的含量。

1.4.2 大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量的測(cè)定

由專人操作,快速完整地摘取大鼠的大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、右腎周脂肪組織,稱其濕重。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,多組間比較采用方差分析和多重比較q檢驗(yàn),方差不齊采用t’檢驗(yàn)。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠血清Ins含量比較

表1 各組大鼠血清Ins含量比較 (±s,uIU/mL)

表1 各組大鼠血清Ins含量比較 (±s,uIU/mL)

注:與正常組比較1)P＜0.01;與模型組比較2)P＜0.01;與同組雄性比較3)P＜0.05

組別 例數(shù) 雄性(n=5) 雌性(n=5)正常組 10 26.01±2.10 27.33±2.86模型組 10 37.41±2.191) 38.19±3.141)電針組 10 28.55±2.572) 31.29±2.112)3)

由表1可見(jiàn),模型組雄性和雌性大鼠血清Ins含量分別與正常組同性大鼠比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。正常組和模型組雄性大鼠血清Ins含量分別與同組雌性大鼠比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。電針組雄性與雌性大鼠血清Ins含量分別與模型組同性大鼠比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。電針組雄性大鼠血清Ins含量與同組雌性大鼠比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

2.2 各組大鼠大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量比較

由表2可見(jiàn),模型組雄性與雌性大鼠各項(xiàng)指標(biāo)(大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量)分別與正常組同性大鼠比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。正常組和模型組雄性大鼠各項(xiàng)指標(biāo)分別與同組雌性大鼠比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。電針組雄性與雌性大鼠各項(xiàng)指標(biāo)分別與模型組同性大鼠比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。電針組雄性大鼠各項(xiàng)指標(biāo)與同組雌性大鼠比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表2 各組大鼠大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量比較(n=5)(±s,mg)

表2 各組大鼠大網(wǎng)膜脂肪、心周脂肪、腎周脂肪重量比較(n=5)(±s,mg)

注:與正常組比較1)P＜0.01;與模型組比較2)P＜0.01;與同組雄性比較3)P＜0.05

組別 性別 大網(wǎng)膜脂肪 心周脂肪 腎周脂肪正常組 雄性 1.19±0.21 0.55±0.13 0.24±0.06雌性 1.33±0.27 0.60±0.22 0.23±0.06模型組 雄性 2.93±0.311)2.12±0.551)0.42±0.051)雌性 2.77±0.431)2.00±0.391)0.39±0.071)電針組 雄性 1.33±0.292)1.12±0.122)0.26±0.022)雌性 1.62±0.292)3)1.42±0.182)3)0.31±0.022)3)

3 討論

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為肥胖患者體內(nèi)的“脂肪-胰島內(nèi)分泌軸”紊亂[14-15],leptin不能抑制胰島β細(xì)胞Ins分泌,導(dǎo)致Ins分泌過(guò)多,Ins刺激脂肪組織分泌leptin,導(dǎo)致高Ins血癥、高leptin血癥[16-19]。此外,leptin作用障礙或中樞l(wèi)eptin缺乏使下丘腦分泌NPY增多,可導(dǎo)致高皮質(zhì)醇血癥、高Ins血癥,進(jìn)而形成胰島素抵抗(insulin resistance, IR)。IR是指機(jī)體內(nèi)胰島素的效應(yīng)器官對(duì)正常劑量的胰島素產(chǎn)生低于正常生物學(xué)效應(yīng)的一種病理狀態(tài)[20-23]。這種不敏感狀態(tài)導(dǎo)致機(jī)體不能維持正常的血糖水平,為了改善這一狀況,機(jī)體將會(huì)分泌出大量Ins來(lái)代償這種Ins的相對(duì)不足。實(shí)驗(yàn)表明,低頻電針刺激曲池、中脘等6穴能健脾益腎、消脂降濁[24],可有效改善肥胖者體內(nèi)異常的Ins水平,糾正肥胖者體內(nèi)的IR狀態(tài),增加脂肪消耗,有效抑制肥胖。

另外研究發(fā)現(xiàn)減肥效果與性別生理差異有關(guān)。電針對(duì)雄性大鼠血清Ins含量和大網(wǎng)膜、心周、腎周脂肪濕重的影響均優(yōu)于雌性。在調(diào)節(jié)血清Ins方面,分析可能是由于雄性激素可有效調(diào)節(jié)胰島素敏感性的重要因素[25],其可促進(jìn)leptin與胰島β細(xì)胞leptin受體的結(jié)合,抑制胰島β細(xì)胞分泌Ins,從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性。同時(shí),較低的血清Ins水平可誘導(dǎo)男性血清性激素結(jié)合球蛋白合成的改變,增強(qiáng)性激素的運(yùn)輸能力[26],兩者相互影響,共同作用。在調(diào)節(jié)大網(wǎng)膜、心周、腎周脂肪方面,筆者認(rèn)為可能是由于雄性激素參與腎周脂肪腎素-血管緊張素系統(tǒng),激活了一磷酸腺苷活化蛋白激酶[27-28];而在雌性體內(nèi),卵巢是leptin作用的靶器官[29],出于機(jī)體的自我保護(hù)作用影響療效,其與“肥胖與高血壓的患病差異僅在于女性”的研究報(bào)道一致[30]。由于性腺軸差異,電針通過(guò)對(duì)下丘腦-垂體-卵巢軸和下丘腦-垂體-睪丸軸對(duì)機(jī)體脂肪代謝的影響也存在一定差異性。通過(guò)研究,本實(shí)驗(yàn)初步探明了低頻電針對(duì)雌雄兩性單純性肥胖大鼠血清Ins及脂肪細(xì)胞的影響,為今后臨床治療以及在防治并發(fā)癥方面提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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Effect of Electroacupuncture on Serum Ins and the Fat Content in Male and Female Experimental Obesity Rats

TIAN Ling1, ZHANG Shu-yi2, GAO Fei3, SUN Xiao-xue3, DU Xiao-yi3, SUN Li-hong1, LIANG Yu-lei1.1.Hebei College of T raditional Ch inese Medicine,Shijiazhuang 050200,China; 2.Beijing Fen gtai Commun ity Hea lth Cen ter,Beijing 100071,China; 3.Hebei Medical University,Shijiazhuang 050017,China

Objective To explore the difference in the regulating effect of electroacupuncture on serum insulin (Ins) and fat consumption between male and female simple obesity rat and the possible mechanism of its action.MethodsA rat model of simple obesity was made by induction with sodium glutamate.The rats were randomized into model and electroacupuncture groups (male and female), 10 rats each.A normal group of 10 rats (male and female) was established as a control.Points Quchi, Zhongwan, Guanyuan, Housanli, Fenglong and Sanyinjiao were selected in the electroacupuncture group.Stimulation with a low frequency of 2 Hz was provided after needle insertion.The treatment was given once daily for 28 consecutive days.Serum Ins content, and greater omentum, pericardiac and perirenal fat weights were measured in the male and female groups of rats before and after electroacupuncture intervention.The comparisons were made.ResultsSerum Ins content, and greater omentum, pericardiac and perirenal fat weights were significantly lower in the electroacupuncture male and female groups of rats than in the model male and female groups of rats (P＜0.01) and also in the electroacupuncture male group of rats than in the electroacupuncture female group of rats (P＜0.05).ConclusionsElectroacupuncture has different degrees of weight-reducing effect in both male and female obesity rats.The reducing effect on serum Ins content, and greater omentum, pericardiac and perirenal fat weights is better in male obesity rats.

Electroacupuncture; Obesity; Rats; Serum Ins; Greater omentum fat; Pericardiac fat; Perirenal fat

R2-03

A

10.13460/j.issn.1005-0957.2017.01.0094

2016-09-08

1005-0957(2017)01-0094-04

河北省中醫(yī)藥管理局科學(xué)研究計(jì)劃項(xiàng)目(2010002)

田玲(1955—),女,副主任醫(yī)師

梁玉磊(1985—),男,2009級(jí)碩士生,講師,Email:liangyulei136@163.com