血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶與2型糖尿病及并發(fā)糖尿病腎病的相關(guān)性研究

魏 卓，劉雅文，程 熠，楊廣民

(1.吉林省人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 長春130021;2.吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院；3.吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室)

血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶與2型糖尿病及并發(fā)糖尿病腎病的相關(guān)性研究

魏 卓1*，劉雅文2，程 熠3，楊廣民1

(1.吉林省人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，吉林 長春130021;2.吉林大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院；3.吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室)

目的 探討血清中γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)與單純2型糖尿病(T2DM)及糖尿病性腎病(DN)的相關(guān)性。方法 收集健康者(對照組)54例、2型糖尿病患者(T2DM組)73例和糖尿病腎病患者(DN組)73例的相關(guān)資料，并測定其血清中γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)、肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、空腹血糖(FPG)含量以及24小時尿蛋白定量(24 h U-Pro)，并進(jìn)行比較分析。結(jié)果 與健康對照組相比，T2DM組GGT、ALT、AST水平和FPG明顯升高(P<0.05)，DN組的各項觀察指標(biāo)均明顯高于健康對照組(P<0.05)；與T2DM組相比，DN組ALT、AST水平無明顯差異(P>0.05)，而SOD、GSH明顯降低(P<0.05)，其它指標(biāo)均明顯升高(P<0.05)。T2DM患者血清GGT水平與FPG、AST、ALT具有相關(guān)性，其中與FPG關(guān)系最密切(r=0.927)；DN患者GGT水平與所有檢測指標(biāo)均具有相關(guān)性，其中與24 h U-Pro關(guān)系最密切(r=0.973)。結(jié)論 血清GGT與T2DM、DN有一定相關(guān)性，可能是導(dǎo)致這兩種疾病發(fā)生的危險因素。

谷氨酰轉(zhuǎn)移酶；2型糖尿??；糖尿病性腎?。幌嚓P(guān)性

(ChinJLabDiagn,2017,21:0066)

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)是非胰島素依賴型糖尿病(noninsulin-dependent diabetes mellitus，NIDDM)，其患病率逐年上升，已成為影響我國乃至全球居民健康的主要慢性非傳染性疾病，約占糖尿病病例85%-95%[1]。糖尿病的慢性并發(fā)癥致死、致殘的主要原因是血管病變，其中糖尿病性腎病(diabetic nephropathy，DN)引起的危害性最大，是導(dǎo)致糖尿病患者死亡的主要原因之一[2]。隨著糖尿病治療手段及技術(shù)的不斷進(jìn)步，死于糖尿病急性并發(fā)癥的患者越來越少，而糖尿病并發(fā)慢性腎病最終發(fā)展為DN的患者約占我國患糖尿病總?cè)藬?shù)的20%-40%[3]。近年研究發(fā)現(xiàn)，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(gammaglutamyitransferase，GGT，EC2.3.2.2)與諸多疾病具有一定的相關(guān)性，可作為預(yù)測疾病發(fā)生、發(fā)展的重要指標(biāo)[4,5]。目前，血清GGT水平與T2DM和DN關(guān)系的研究很少，本研究擬探討血清GGT水平與T2DM和DN之間的相關(guān)性，為臨床防治工作提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象

2014年6月至2015年10月來我院就診的患者(包括門診、住院)200例，年齡在18-90歲之間，平均(60±15)歲。診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合1999年19屆世界糖尿病大會世界衛(wèi)生組織(WHO)發(fā)布的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)24 h小時尿微量蛋白>150 mg及臨床癥狀將就診人群分為健康對照組、T2DM組和DN組，基礎(chǔ)資料見表1。

表1 測試樣本來源的基礎(chǔ)資料

1.2 方法

1.2.1 血清標(biāo)本的制備 空腹8-10 h以上，抽取患者肘正中靜脈血約5 ml，注入肝素抗凝的玻璃試管中，4 000 r/min離心5 min，分離出待測血清。

1.2.2 指標(biāo)測定 取待測的血清，采用葡萄糖氧化酶法測定空腹血糖(fasting plasma glucose，F(xiàn)PG)，采用化學(xué)法測定GGT、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase，AST)、血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、肌酐(creatinine，Cre)、尿酸(uric acid,UA)，采用焦酚紅比色法測定24小時尿蛋白(24-hour urine protein，24hU-Pro)，采用酶聯(lián)免疫試劑盒檢測谷胱甘肽(glutathione，GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)，采用高效液相色譜分離后電化學(xué)方法檢測8-羥化脫氧鳥苷(8-hydroxydeoxyguanosine，8-OHdG)。

1.3 統(tǒng)計分析

2 結(jié)果

2.1 各項觀察指標(biāo)比較

健康對照組、T2DM組和DN組各項觀察指標(biāo)比較見表2。與健康對照組相比，T2DM組GGT、ALT、AST水平和FPG明顯升高(P<0.05)，其他各項指標(biāo)雖有不同程度升高，但均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；DN組各項觀察指標(biāo)均明顯高于健康對照組(P<0.05)。與T2DM組相比，DN組SOD、GSH明顯降低(P<0.05)；ALT、AST水平與T2DM組相近(P>0.05)；其它指標(biāo)均明顯升高(P<0.05)。

表2 健康者與T2DM、DN患者各項觀察指標(biāo)比較

*P<0.05，與健康對照組相比；#P<0.05，與T2DM組相比。

2.2 Pearson相關(guān)分析

T2DM患者血清GGT與FPG、AST、ALT具有相關(guān)性(P<0.05)，其中GGT與FPG關(guān)系最密切(表3)，而與24 h U-Pro、BUN、Cre、UA、SOD、GSH、8-OHdG不具有相關(guān)性(P>0.05)；DN患者GGT與所有檢測指標(biāo)均具有相關(guān)性(P<0.05)，其中GGT與24 h U-Pro關(guān)系最密切(表4)。

表3 T2DM患者血清GGT與各項指標(biāo)的Pearson相關(guān)分析

表4 DN患者血清GGT與各項指標(biāo)的Pearson相關(guān)分析

3 討論

GGT在1950年首先被Hanes等發(fā)現(xiàn)，是一種廣泛分布于哺乳動物組織中的膜結(jié)合糖蛋白，腎內(nèi)最多，其次為胰和肝[6]。GGT是γ-谷氨?；h(huán)的關(guān)鍵酶，在體內(nèi)參與GSH的合成與分解代謝，是細(xì)胞內(nèi)源性抗氧化系統(tǒng)的重要部分，隨著對GGT研究的不斷深入，其臨床應(yīng)用價值倍受關(guān)注。當(dāng)機(jī)體在需要清除體內(nèi)老化的細(xì)胞時，體內(nèi)高活性分子產(chǎn)生過多，從而導(dǎo)致組織損傷，此時GGT可協(xié)同多種抗氧化酶維持機(jī)體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)的平衡[7]。大量研究顯示GGT可預(yù)測代謝綜合癥、高血壓、心肌梗死、慢性腎病、腫瘤等的發(fā)生[8-12]，這些疾病的發(fā)生、發(fā)展均與機(jī)體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)的平衡有著密不可分的聯(lián)系。盡管T2DM的發(fā)病機(jī)制還不清楚，可能涉及遺傳因素、糖代謝紊亂、血流動力學(xué)改變等很多復(fù)雜因素[13]，而氧化應(yīng)激(oxidative stress，OS)與T2DM的關(guān)系越來越受到關(guān)注，T2DM及其并發(fā)癥的產(chǎn)生可能與氧化及抗氧化系統(tǒng)失衡關(guān)系密切[14]。有研究顯示OS對細(xì)胞的損害可能是發(fā)生在高血糖出現(xiàn)之前導(dǎo)致抗氧化系統(tǒng)失衡，從而誘發(fā)T2DM發(fā)生的重要機(jī)制之一，而在罹患T2DM的人群中，DN的發(fā)病也與氧化還原系統(tǒng)的失衡有關(guān)[15]。GGT作為一項重要的OS指標(biāo)，明確其與T2DM和DN的相關(guān)性的研究勢在必行。

本研究結(jié)果顯示，T2DM患者的GGT、ALT、AST水平和FPG明顯升高，而其他各項指標(biāo)雖有不同程度升高，但均無統(tǒng)計學(xué)差異，說明單純T2DM患者沒有明顯的腎損傷，同時機(jī)體內(nèi)的氧化還原平衡得以維持，而血清ALT、AST水平的升高說明患者已發(fā)生一定的肝損傷。DN患者的各項指標(biāo)均明顯高于健康人群，其肝、腎均已發(fā)生損傷，其中SOD、GSH明顯降低、OS標(biāo)志物8-OHdG顯著升高，說明DN患者機(jī)體內(nèi)的氧化還原系統(tǒng)已經(jīng)失衡。而腎對OS損傷高度敏感，OS產(chǎn)物可攻擊腎小球毛細(xì)血管基底膜，增加微血管通透性、破壞足細(xì)胞、誘導(dǎo)系膜細(xì)胞內(nèi)纖溶酶原抑制物的表達(dá)、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的沉積，最終導(dǎo)致DN的發(fā)生[16]。然而，T2DM和DN患者血清中GGT升高的機(jī)制尚不是完全清楚。目前推測的機(jī)制是：GGT是催化γ-谷氨?；鶑腉SH或其它含γ-谷氨?；镔|(zhì)中轉(zhuǎn)移到另一肽或氨基酸分子上的酶，主要負(fù)責(zé)細(xì)胞外GSH代謝。OS在T2DM中有著重要的作用，OS條件下GGT通過分解細(xì)胞外的GSH為細(xì)胞內(nèi)合成新的GSH提供半胱氨酸，從而幫助調(diào)節(jié)氧化還原狀態(tài)，在T2DM合并DN的情況下OS也更嚴(yán)重，所以誘導(dǎo)了GGT的表達(dá)[17]。相關(guān)性研究也反映了相似的結(jié)果，T2DM患者血清GGT與FPG、AST、ALT具有相關(guān)性，當(dāng)T2DM患者并發(fā)DN時，GGT與所有檢測指標(biāo)均具有相關(guān)性，說明GGT與T2DM和DN均有密切的關(guān)聯(lián)，可能是導(dǎo)致這兩種疾病發(fā)生的危險因素。尤其是血清GGT與T2DM患者的FPG關(guān)系最密切，與DN患者24h U-Pro關(guān)系最密切的結(jié)果提示，血清GGT的檢測可以反映T2DM和DN的發(fā)病情況，可作為這兩種疾病診斷和預(yù)測的指標(biāo)，但還需進(jìn)一步大量的臨床檢驗(yàn)來進(jìn)一步證實(shí)。如能采用血清GGT水平作為T2DM和DN臨床早期發(fā)現(xiàn)的指標(biāo)，其經(jīng)濟(jì)和簡便的優(yōu)勢無疑可以帶來巨大的社會效益和經(jīng)濟(jì)價值。

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Research on correlations between serum gamma glutamyltransferase and type 2diabetes mellitus complicated with diabetic nephropathy

WEIZhuo，LIUYa-wen,CHENGYi,etal.

(Departmentofclinicallaboratory,JilinProvincialPeople'sHospital,Changchun,Jilin130021,China)

Objective To investigate the correlations between serum gamma glutamyltransferase (GGT) and type 2 diabetes mellitus (T2DM) complicated with diabetic nephropathy (DN).Methods The informationof healthy people (Control group) 54 cases,type 2 diabetic mellitus patients (T2DMgroup) 73 cases and diabetic nephropathy patients (DN group) 73 cases was collected.The serum levels of gammaglutamyltranspeptidase (GGT),alanine aminotransferase (ALT),aspartate aminotransferase (AST),superoxide dismutase (SOD),glutathione (GSH),8-hydroxy deoxy guanosine (8-OHdG),creatinine (CRE),blood urea nitrogen (BUN),uric acid (UA) and fasting plasma glucose (FPG) were detected and 24 h urinary protein (24 h U-Pro)was determinedquantitatively.Finally,thedata of three groups were analyzed.Results Compared with the Control group,the levels of GGT,ALT,AST and FPG were significantly higher in the T2DM group(P<0.05),and allthe observation indexes of DN group were significantly higher than those in Control group;compared with the T2DM group,AST,ALT levels of DN groupwere not significantly different(P>0.05),while SOD and GSH were significantly lower(P<0.05),and other indexes were significantly higher(P<0.05).The level of GGT in T2DM group was correlated with FPG,AST and ALT,which is most closely related to FPG (r=0.927);The level of GGT in DNgroup was correlated with all the observation indexes,which is most closely related to 24h U-Pro FPG (r=0.973).Conclusion There is a certain correlation between serum GGT and T2DM complicated with DN,which may be the risk factors of these two diseases.

gamma glutamyltransferase;type 2 diabetes mellitus;diabetic nephropathy;correlation

1007-4287(2017)01-0066-04

吉林省衛(wèi)生計生青年科研課題(2014Q009)

R587.1

A

魏卓(1982-)，女，碩士，中級檢驗(yàn)師，從事分子生物學(xué)診斷方面的研究。

2016-04-10)

*通訊作者