甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷中D2—40免疫組化檢測和彩超的價值

王勇炫

[摘要]目的探討甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷中D2-40免疫組化檢測和彩超的診斷效果。方法選取2013年1月～2016年1月廣東省佛山市第二人民醫(yī)院收治的40例甲狀腺癌患者設(shè)為A組，40甲狀腺腺瘤患者設(shè)為B組，40例甲狀腺組織正常者設(shè)為對照組。所有患者均進行D2-40免疫組化檢測和彩超診斷，對比三組患者診斷效果。結(jié)果手術(shù)病理檢查，40例甲狀腺癌患者頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為100.0%。超聲診斷準(zhǔn)確率、靈敏度、特異性與術(shù)前觸診相比明顯較高（P<0.05）。A組患者頸淋巴結(jié)密度與B組、對照組相比明顯較高（P<0.05）。結(jié)論臨床上彩超診斷甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷準(zhǔn)確率高，甲狀腺癌患者D2-40免疫組化染色檢測時患者頸淋巴結(jié)密度明顯高于甲狀腺良性病變患者，臨床可采取D2-40免疫組化染色輔助診斷甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷，提高診斷效果。

[關(guān)鍵詞]甲狀腺癌；頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；D2-40免疫組化檢測；彩超；診斷

甲狀腺癌是發(fā)生于甲狀腺的惡性腫瘤，其在女性中發(fā)病率較高。由于甲狀腺癌分型較多，許多患者發(fā)病較為隱襲，常導(dǎo)致臨床診治不及時，影響患者治療效果。因此，加強對患者的早期診斷，及時對患者進行針對性診治，控制疾病擴展，是保證患者生命安全的基礎(chǔ)。甲狀腺癌患者常出現(xiàn)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況，且常表現(xiàn)為淋巴結(jié)腫大癥狀，而甲狀腺良性腫塊患者淋巴結(jié)腫大發(fā)生率較低，臨床常通過觸診輔助甲狀腺癌診斷。但采取觸診時常出現(xiàn)誤診和漏診狀況。D2-40屬于一種單克隆抗體，可識別特定糖蛋白，其只存在于人體淋巴管內(nèi)皮中。此次研究中探討D2-40免疫組化檢測和彩超診斷的效果，以期提高甲狀腺癌的臨床診斷效果，對患者進行及時有效的治療，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2013年1月～2016年1月廣東省佛山市第二人民醫(yī)院收治的40例甲狀腺癌患者設(shè)為A組，患者符合《甲狀腺疾病的診斷與治療》中關(guān)于甲狀腺癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)手術(shù)病理檢查確診；患者未進行進一步頸淋巴結(jié)清除手術(shù)；無化療和放療史。選取同時期收治的40甲狀腺腺瘤患者設(shè)為B組，將同時期收治的40例甲狀腺組織正常者設(shè)為對照組。所有患者重要器官均無嚴(yán)重?fù)p害；所有患者均無嚴(yán)重精神性疾病，能自主表達意愿。A組患者中男女比為23：17；年齡19～74歲，平均（41.6±6.2）歲；B組患者中男女比為22：18；年齡20～74歲，平均（42.1±6.5）歲；對照組患者中男女比為21：19；患者19～75歲，平均（42.4±6.3）歲。A組、B組、對照組患者的一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

所有患者均采取觸診、彩超檢查，使用多普勒超聲診斷儀（GE公司LOJIQ-P3型）對患者進行術(shù)前檢查，頻率7.5～12MHz，對患者上中下頸、氣管部位對患者頸淋巴結(jié)部位進行觀測。對患者進行手術(shù)，清除患者頸部淋巴結(jié)，并對患者轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)獲取部位進行標(biāo)識，統(tǒng)計轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù)量、分布狀況。取患者轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)標(biāo)本，使用4%甲醛溶液（湖南爾康制藥股份有限公司，H43020198）進行固定，隨后完成脫水，使用石蠟包埋，行切片，厚度4μm，將切片組織進行免疫組化染色后，使用顯微鏡觀測患者標(biāo)記試驗淋巴管狀況。使用SP試劑盒、鼠抗人D2-40單克隆抗體、DBA顯色試劑盒完成染色和顯色過程，所有試劑和材料均由北京中杉金橋生物有限公司生產(chǎn)。陽性標(biāo)本使用已知D2-40陽性乳腺浸潤性導(dǎo)管癌標(biāo)本，陰性標(biāo)本使用PBS代替抗體。

1.3觀察指標(biāo)

統(tǒng)計病理檢查、彩超和頸部觸診對A組患者轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)診斷狀況，對比患者彩超診斷和頸部觸診的診斷效果。對比A組患者不同部位淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況。對比三組患者D2-40免疫組化檢測的效果，對比三組患者標(biāo)記淋巴管數(shù)目。以Weider標(biāo)準(zhǔn)作為計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，首先使用40低倍鏡對患者腫瘤狀況、周邊組織等進行觀測，確定患者淋巴管密度較高的部位，使用200高倍鏡再次進行觀測，統(tǒng)計患者標(biāo)記淋巴管數(shù)目。計數(shù)過程中若出現(xiàn)與周邊組織分開的棕色內(nèi)皮細(xì)胞，也計為一個標(biāo)記頸淋巴管。對比三組患者頸淋巴結(jié)密度狀況：選取5個部位進行頸淋巴管計數(shù)，取平均值。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS19.0對本次研究所統(tǒng)計數(shù)據(jù)進行分析，數(shù)據(jù)資料的表述形式如下：正態(tài)計量資料→均值±標(biāo)準(zhǔn)差；正態(tài)計數(shù)資料→例數(shù)（率）；檢驗方法如下：正態(tài)計量資料→t檢驗；正態(tài)計數(shù)資料→x²檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1超聲診斷和病理診斷A組患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況

采用超聲診斷時，圖像顯示淋巴結(jié)表現(xiàn)為腫大狀況；淋巴結(jié)髓質(zhì)狀況不明顯，皮質(zhì)狀況較多；淋巴結(jié)內(nèi)部回聲強，部分患者表現(xiàn)為鈣化灶；存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的，血液流速快。

手術(shù)病理檢查，40例甲狀腺癌患者中40例患者均存在頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為100.0%。經(jīng)彩超診斷，38例患者存在頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，診斷符合率為95.0%；術(shù)前采取頸部觸診，確定31例患者存在頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，診斷符合率為77.6%，采取超聲診斷準(zhǔn)確率與術(shù)前觸診相比明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x²=5.165，P<0.05）。

病理診斷出轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)43枚，非轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)33枚，超聲診斷轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)44枚（病理確診42枚），非轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)32枚（病理確診31枚），超聲診斷靈敏度為97.7%（42/43），特異性為93.9%（31/33）。觸診轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)42枚（病理確診34枚），非轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)34枚（病理確診25枚），超聲診斷靈敏度為79.1%（34/43），特異性為75.8%（25/33）。采取超聲診斷的靈敏度、特異性與觸診相比明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x²=7.242、4.243，P<0.05）。

采用彩超診斷甲狀腺癌患者時，38例存在頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中，27例患者頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移累及2個或以上區(qū)域，占71.1%，累及一個區(qū)域患者11例，占28.9%。采用彩超診斷甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時，中頸轉(zhuǎn)移檢出率與上、下頸、氣管旁相比均明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x²=5.846、4.828、12.258，P<0.05）。見表1。

2.2D2-40免疫組化檢測效果

A組患者頸淋巴結(jié)密度與B組、對照組相比明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=19.021、24.066，P<0.05）。B組患者頸淋巴結(jié)密度與對照組相比明顯較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=9.454，P<0.05）。見表2。

3討論

甲狀腺癌是臨床常見甲狀腺惡性腫瘤。甲狀腺癌是臨床常見疾病，導(dǎo)致甲狀腺病變的因素較多，缺碘、放射線、相關(guān)激素慢性刺激、生甲狀腺腫物質(zhì)刺激、家族遺傳、甲狀腺疾病等均是引起甲狀腺癌的重要影響因素。甲狀腺癌患者常出現(xiàn)甲狀腺腫塊，增長明顯，部分患者會出現(xiàn)呼吸困難癥狀，由于甲狀腺癌患者臨床表現(xiàn)不具備特異性，使得臨床早期診斷效果不佳，影響患者治療效果。甲狀腺癌患者頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是臨床常見癥狀，其多發(fā)生在未分化癌，部分患者甲狀腺整塊狀況不明顯。因此，發(fā)現(xiàn)患者頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況，也是臨床早期輔助診斷甲狀腺癌的重要檢測方法。甲狀腺癌患者晚期可出現(xiàn)聲音嘶啞、呼吸困難、吞咽困難、交感神經(jīng)壓迫、頸叢疼痛等，治療不及時將導(dǎo)致患者死亡，嚴(yán)重威脅患者生命安全。

以往診斷甲狀腺癌常采取頸部觸診來診斷，但采取頸部觸診時，對于存在淋巴結(jié)腫大患者判定為陽性，若無腫大患者則判定為陰性。因此采取頸部觸診時，對于不同患者診斷效果不同，易受患者體型狀況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移部位、淋巴結(jié)大小等的影響；且醫(yī)生臨床診斷經(jīng)驗也是影響診斷效果的重要影響條件。因此，采取觸診對患者轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)和非轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)狀況判斷效果不佳，易出現(xiàn)漏診和誤診狀況。隨著當(dāng)前醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，彩超技術(shù)在臨床上的運用也越來越廣泛。在姜東升的相關(guān)研究中，對50例甲狀腺癌患者進行檢測，其中彩超診斷的符合率為93%，采取門診觸診的診斷準(zhǔn)確率為85%，采取彩超診斷的符合率與觸診相比明顯較高，此次研究結(jié)果與之相符，進一步肯定了彩超對甲狀腺癌患者的診斷效果。且采取彩超診斷時，患者甲狀腺相關(guān)部位圖像顯現(xiàn)清晰，能直接觀測到患者淋巴腫大狀況，且顯現(xiàn)患者淋巴結(jié)內(nèi)部狀況，出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者淋巴結(jié)內(nèi)部回聲較強，部分患者可顯現(xiàn)微小鈣化狀況。臨床可根據(jù)患者影像學(xué)顯現(xiàn)狀況及血流狀況輔助判定甲狀腺癌，提高診斷效果，因此采取超聲診斷時，能有效減少漏診和誤診狀況，提高診斷靈敏度和特異性。

D2-40屬于單克隆抗體，屬于抗M2A癌胚膜抗體，其可識別相對分子質(zhì)量為40000的糖蛋白，而該糖蛋白主要存在于淋巴管內(nèi)皮。D2-40免疫組化檢測時，主要利用D2-40多在腫瘤外周淋巴管上皮中表達，在腫瘤內(nèi)部間質(zhì)淋巴管中較少，主要因為腫瘤組織中壓力較大，能抑制腫瘤中淋巴管的生長；腫瘤細(xì)胞增生擴散、靜水壓等相關(guān)微環(huán)境等均是影響淋巴管生成的重要因素，因此甲狀腺病變狀況將會影響D2-40分布。且當(dāng)前相關(guān)研究結(jié)果顯示，腫瘤內(nèi)淋巴管屬于無功淋巴管，而腫瘤轉(zhuǎn)移依靠有功淋巴管，有功淋巴管主要存在于外周血管，因此可根據(jù)D2-40分布狀況判定患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況。此次研究中甲狀腺癌組患者頸淋巴結(jié)密度與甲狀腺腺瘤組、對照組相比明顯較高，該研究結(jié)果與上述理論相符，進一步說明隨著患者甲狀腺病變程度增加，患者頸淋巴結(jié)密度將會逐漸升高，說明頸淋巴結(jié)密度可作為臨床診斷頸淋巴結(jié)患者轉(zhuǎn)移的重要診斷指標(biāo)。

綜上所述，臨床上彩超診斷甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷準(zhǔn)確率高，可將其作為臨床診斷甲狀腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要診斷方法。甲狀腺癌患者D2-40免疫組化染色檢測時患者頸淋巴結(jié)密度明顯高于甲狀腺良性病變患者，對于彩超無法診斷患者，臨床可將采取D2-40免疫組化染色輔助診斷，以提高診斷效果。