加味苓桂術(shù)甘顆粒提取工藝研究*

田莉婷， 劉雪萍，呂 媛， 傅琪琳

陜西省中醫(yī)醫(yī)院 (西安 710003)

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加味苓桂術(shù)甘顆粒提取工藝研究*

田莉婷， 劉雪萍，呂 媛， 傅琪琳△

陜西省中醫(yī)醫(yī)院 (西安 710003)

目的:研究加味苓桂術(shù)甘顆粒的制備工藝。方法：采用正交實(shí)驗(yàn)，選用三因素、三水平即 L9(34)試驗(yàn)表安排實(shí)驗(yàn)，以芍藥苷含量和干浸膏得率為指標(biāo)，確定了最佳提取工藝，對(duì)干顆粒的吸濕性、流動(dòng)性研究，確定了成型工藝。結(jié)論：對(duì)提取工藝和成型工藝進(jìn)行相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究，為大生產(chǎn)提供了科學(xué)依據(jù)。

加味苓桂術(shù)甘顆粒由茯苓、桂枝、炒白術(shù)、生麻黃、白芍、炙甘草六味藥材組成，具有溫陽化飲，宣肺利水的功效，用于肝硬化失代償期并肝性胸水患者，癥見胸脅脹滿，胸悶氣短，活動(dòng)受限。是名老中醫(yī)支軍宏主任醫(yī)師專治肝性胸水的經(jīng)驗(yàn)方，臨床以湯劑應(yīng)用，一日一劑，應(yīng)用中未見不良反應(yīng)及毒副作用，效果顯著，安全可靠。我們對(duì)加味苓桂術(shù)甘顆粒工藝制備進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

儀器與試藥

1 儀 器 日本島津LC-2010液相色譜儀，色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱C18。

2 試 藥 水為純凈水，所用化學(xué)試劑均為分析純。對(duì)照品鹽酸麻黃堿(171241-201007，供含量測(cè)定用)、甘草次酸(110703-200612)、芍藥苷(110736-200934)均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。所用中藥材經(jīng)檢驗(yàn)，均符合2010年版《中華人民共和國(guó)藥典藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》[1]。

方法與結(jié)果

1 提取正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)[2]正交實(shí)驗(yàn)因素為提取次數(shù)、提取時(shí)間及加水量，每因素選三個(gè)水平[3]。見表1。

表1 煎煮工藝條件正交試驗(yàn)因素水平表

2 供試品的處理 按處方比例稱取茯苓、桂枝、炒白術(shù)等六味藥材，共9份，隨機(jī)編成①～⑨號(hào)，按L9(34)正交表安排試驗(yàn)，提取液濾過，定容。

3 干浸膏制備 精密量取上述各提取液100 ml，分別置于已恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上濃縮至干，于105℃下干燥3 h，取出，置干燥器中放置30 min，迅速精密稱定重量，計(jì)算出膏率，結(jié)果見表2。

4 芍藥苷含量測(cè)定[4]

4.1 儀器：島津LC-2010液相色譜儀，色譜柱：十八烷基鍵合硅膠C18條件：柱溫 30℃，λ=230nm，流速 1.000ml/min,流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)。

4.2 供試品制備：取正交實(shí)驗(yàn)①—⑨各濾液一定量(約相當(dāng)于0.1 g白芍藥材)，水浴蒸干，加稀乙醇溶解轉(zhuǎn)移至25 ml容量瓶中，超聲處理30 min，放冷，加稀乙醇定容至25 ml，搖勻，過濾，取續(xù)濾液，作為供試品。

4.3 對(duì)照品溶液的制備：精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量(m=4.54 μmg),加甲醇制成每1 ml含45.4 μg的溶液，即得。測(cè)定：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μl,注入液相色譜儀，測(cè)定，即得,結(jié)果見表2～4。

表2 L9(34)水煎正交試驗(yàn)安排及數(shù)據(jù)分析表

表3 干浸膏得率方差分析

注： F0.05(2,2)=19 F0.01(2,2)=99

表4 芍藥苷含量方差分析

注：F0.1(2，2)=9 F0.05(2,2)=19 F0.01(2,2)=99

5 驗(yàn)證試驗(yàn) 根據(jù)上述確定條件(藥材飲片加水10倍量，煎煮3次，每次1.5 h)，取藥材3份，進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，見表5。

表5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

從上述結(jié)果可知，芍藥苷含量及浸膏率均高于正交表中最優(yōu)值，說明選擇提取條件合理，工藝基本穩(wěn)定。

從表3～5可知： 以干浸膏得率為指標(biāo)：直觀分析結(jié)果，各因素順序?yàn)镃(次數(shù))>A(倍數(shù))>B(時(shí)間)；方差分析：從表2可知，C因素影響顯著，A、B因素影響不顯著，最佳工藝為A3B3C3.以芍藥苷含量為指標(biāo)：直觀分析結(jié)果，各因素順序?yàn)镃(次數(shù))>A(倍數(shù))>B(時(shí)間)，方差分析：C因素影響顯著，A因素與其接近，B因素影響不顯著。綜上，最佳工藝為A3B2C3。

6 成型工藝 無糖顆粒：選糊精和乳糖作輔料，從浸膏吸濕性來看，吸濕不是很顯著，糊精與乳糖相比，廉價(jià)，但抗?jié)裥圆蝗绾笳摺?/p>

6.1 糊精：制得干浸膏共105.7 g，按1∶1的比例加糊精105.7 g，抗?jié)裥Ч^差。

6.2 乳糖：為使制得顆粒有更好的抗?jié)裥?，按膏粉∶糊精∶乳?1∶1∶0.5的比例加乳糖52 g，拌勻，干燥。將上述混合均勻的細(xì)粉于105℃干燥，稱得重量為245 g，取80%乙醇作粘合劑，與藥粉拌勻，使之成為“握之成團(tuán)，觸之即散”的團(tuán)塊狀，迅速過篩，干燥。發(fā)現(xiàn)80%乙醇作粘合劑時(shí)，效果不理想，稍硬，故成品率低(60%)。將藥粉干燥，粉碎，用95%乙醇作粘合劑，方法同上，所制團(tuán)塊稍軟。成品率合格，但總體顆粒偏小。 綜合考慮，用90%乙醇作潤(rùn)濕劑效果最佳。

6.3 干顆粒吸濕性試驗(yàn)：取制備干顆粒，置溫度25 ℃，相對(duì)濕度70%～75%的環(huán)境下，每間隔一定時(shí)間進(jìn)行水分測(cè)定(照中國(guó)藥典2010年版一部附錄ⅨH水分測(cè)定法第一法烘干法)以觀察干顆粒的水分變化情況，放置時(shí)間 0、 6、12、24、48、 96、168h時(shí)，水分吸濕率分別是4.2%、4.4%、4.6%、4.8%、 4.8%、 5.0%、5.0%、 5.4%。試驗(yàn)結(jié)果表明干顆粒在25 ℃，相對(duì)濕度70～75%的環(huán)境下裸放1周，其水分基本保持一致，變化不明顯。

干顆粒流動(dòng)性的測(cè)定 :顆粒流動(dòng)性大小會(huì)直接影響顆粒分裝時(shí)裝量差異的大小，相對(duì)而言。流動(dòng)性大時(shí)裝量差異小，反之則大。顆粒流動(dòng)性可用休止角來表示。休止角越大流動(dòng)性越差。休止角的測(cè)定采用漏斗法，以堆高與堆面半徑的函數(shù)值來表示，見表6。

表6 干顆粒休止角測(cè)定結(jié)果(n=3)

經(jīng)測(cè)定其平均休止角為34.57度，表明干顆粒流動(dòng)性尚好。

綜合考慮顆粒吸濕性和流動(dòng)性，成型工藝為∶按膏粉∶糊精∶乳糖=1∶1∶0.5混合，用90%乙醇作潤(rùn)濕劑效果最佳。顆粒粒度及吸濕性、流動(dòng)性均達(dá)到要求。

討 論

肝性胸水屬急癥范疇[5-6]，加味苓桂術(shù)甘顆粒作為醫(yī)院制劑研究應(yīng)選擇溶出吸收快，載藥量大，與原臨床應(yīng)用湯劑一致的劑型，通過本文設(shè)計(jì)的提取工藝，以芍藥苷含量和水提出膏率兩個(gè)指標(biāo)作為正交實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)指標(biāo)，客觀、全面的篩選出最佳工藝。通過驗(yàn)證試驗(yàn)及成型工藝吸濕性、流動(dòng)性研究，證明該提取工藝的試驗(yàn)性實(shí)驗(yàn)，顆粒劑最為合適，其制備工藝簡(jiǎn)單，質(zhì)量可控，且藥品性質(zhì)基本穩(wěn)定，攜帶和服用方便，為臨床大生產(chǎn)用提供理論依據(jù)，但加味苓桂術(shù)甘顆粒治療肝性胸水機(jī)理需要進(jìn)一步研究。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì)．中國(guó)藥典[S]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：291．

[2] 王 凌，白吉慶，李 芳，等．正交試驗(yàn)法優(yōu)選養(yǎng)心開郁片的水提取工藝[J]．陜西中醫(yī)，2013，33(1)：1666-1667.

[3] 李 馨，王 金 宏．HPLC法測(cè)定龍膽中龍膽苦苷的含量[J]．黑龍江醫(yī)藥，2010,(23)：319-320．

[4] 張治軍，覃 曉，周文杰.HPLC測(cè)定肝補(bǔ)腎顆粒中芍藥苷的含量[J]．中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析.2016,(1)：29-31．

[5] 田莉婷,傅琪琳,李興國(guó),等. 麻芪桂術(shù)湯配合西藥治療陽虛水停型肝性胸水臨床觀察[J]. 陜西中醫(yī)， 2016，37(7)：860-861.

[6] 李煜國(guó)， 田莉婷.宣肺發(fā)汗法治療肝性胸水83例[J]. 陜西中醫(yī)， 2009，30(1)：10-11.

(收稿：2016-08-26)

*陜西省中醫(yī)藥管理局課題(13-LC121)

@加味苓桂術(shù)甘顆粒 提取工藝 成型工藝

R94

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.01.060

△通訊作者