涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD、GSH-PX和MDA的影響*

歐陽娟，蔣紹祖

(贛南醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，江西 贛州 341000)

涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD、GSH-PX和MDA的影響*

歐陽娟，蔣紹祖

(贛南醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，江西 贛州 341000)

目的:探討涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD、GSH-PX和MDA的作用。方法:將30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為對照組、模型組、涌泉組，每組10只。對照組每天給予基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，其余2組每天給予高脂飼料喂養(yǎng)。喂養(yǎng)2周后涌泉組給予穴位埋針7天，治療結(jié)束后，檢測肝臟超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性與丙二醛(MDA)含量。結(jié)果:與模型組相比，涌泉穴位埋針可顯著升高肝臟SOD、GSH-PX的活性 (P<0.05)，而肝臟MDA含量明顯降低(P<0.05)。結(jié)論:在高脂血癥情況下，涌泉穴位埋針可調(diào)節(jié)肝臟SOD、GSH-PX與MDA水平，其機(jī)制可能與促進(jìn)特定臟器的自由基代謝有關(guān)。

穴位埋針；高脂血癥；超氧化物歧化酶；谷胱甘肽過氧化物酶；丙二醛

高脂血癥是脂質(zhì)代謝紊亂的結(jié)果，是血漿脂質(zhì)中一種或多種成分的濃度超過正常高限的一種病癥。它是一種常見的多發(fā)性疾病，與冠心病、高血壓病、腦卒中、糖尿病的發(fā)生率有緊密的相關(guān)性，其危害日益受到醫(yī)學(xué)界的注意和重視。祖國醫(yī)學(xué)研究認(rèn)為，高脂血癥主要病機(jī)是痰瘀內(nèi)停[1-4]，而痰邪的形成與中醫(yī)脾、肺、肝、腎等臟器的功能失調(diào)有關(guān)，尤其與脾相關(guān)。目前臨床主要以口服藥物進(jìn)行治療，但長期口服藥物治療，對肝腎功能影響大，不良反應(yīng)多，非藥物治療措施的研究引起人們的關(guān)注。本課題組前期實驗顯示內(nèi)關(guān)穴位埋針可以調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠SOD、GSH-PX和MDA。不少學(xué)者認(rèn)為肝臟功能失調(diào)與高脂血脂有密切關(guān)系，有報道針刺高血脂大鼠的涌泉穴位，可明顯降低TC、TG，有調(diào)節(jié)血脂的作用[5]。因此，本實驗采用“涌泉”穴位埋置皮內(nèi)針(锨針)的方法，觀察其對肝臟的超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性與丙二醛(MDA)含量的影響，探討刺激“涌泉”穴位的降血脂作用，以期進(jìn)一步揭示涌泉穴位降血脂作用的機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 材料 健康SD大鼠30只，雄性，體重180～220 g，由贛南醫(yī)學(xué)院實驗動物室提供，動物合格號(SCXK贛2014-0001)?；A(chǔ)飼料和高脂飼料均由北京科奧協(xié)力有限公司提供，高脂飼料組成：85%基礎(chǔ)飼料、7.5%豬油、2%膽固醇、0.5%去氧膽酸鈉、5%蛋黃粉。皮內(nèi)針(锨針)、MIKR022型臺式冷凍離心機(jī)(Germany)、80-2型離心機(jī)(上海手術(shù)器械廠)、Moae1550型酶標(biāo)儀(美國BIO-RAD公司)、電動勻漿機(jī)、KD-200AW制冰機(jī)(德國FOCUSUN)、九十六孔培養(yǎng)板(costar公司)、蛋白定量試劑盒(北京天根生化科技有限公司)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)與丙二醛(MDA)試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 方法 將SD大鼠30只隨機(jī)分成對照組、模型組、涌泉組，每組10只。對照組每天基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)及普通飲水，不作任何處理；其余各組均喂食高脂飼料及普通飲水。造模時間2周，造模成功后，涌泉組以涌泉穴位埋針7天。治療7天后取材：所有大鼠在取材前稱重，用10%水合氯醛(0.35 mL·100 g-1)腹腔麻醉，無菌取血與摘取肝臟，稱取濕重。不抗凝血通過高速離心(溫度-4 ℃、轉(zhuǎn)速3 500 r·min-1、時間10 min)，取上層血清；肝臟放入勻漿機(jī)中，加入生理鹽水勻漿成10%的組織液，靜置后離心(溫度-4 ℃、轉(zhuǎn)速3 500 r·min-1、時間10 min)。將離心后的上清液移出，放-70 ℃冰箱待測。SOD、GSH-PX與MDA檢測：按照試劑盒說明書，用分光比色法測定。

1.3 統(tǒng)計方法 用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間數(shù)據(jù)比較用單因素方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟SOD作用 結(jié)果顯示：與對照組比較，模型組大鼠肝臟的SOD活性顯著降低(P<0.05)；與模型組比較，涌泉組大鼠肝臟SOD活性明顯升高(P<0.05)(見表1)。

表1 各組大鼠肝臟SOD活性比較±s

與對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，△P<0.05。

2.2 涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟GSH-PX的作用 結(jié)果顯示：與對照組比較，模型組大鼠肝臟的GSH-PX活性顯著降低(P<0.05)；與模型組比較，涌泉組大鼠肝臟GSH-PX活性明顯升高(P<0.05)(見表2)。

表2 各組大鼠肝臟GSH-PX活性

與對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，△P<0.05。

2.3 涌泉穴位埋針對高脂血癥大鼠肝臟MDA的作用 結(jié)果顯示：與對照組比較，模型組大鼠肝臟的MDA含量顯著升高(P<0.05)；與模型組比較，涌泉組大鼠肝臟的MDA含量明顯降低(P<0.05)(見表3)。

表3 各組大鼠肝臟 MDA含量

與對照組比較，*P<0.05；與模型組比較，△P<0.05。

3 討 論

藥物治療與非藥物治療是高脂血癥目前的防治措施，前者主要調(diào)脂藥物有貝特類、他汀類以及中成藥，但是長期服用藥物對肝、腎功能影響大；非藥物治療有針刺治療，它有操作簡單、不良反應(yīng)少等優(yōu)點。超氧化物歧化酶(SOD)是體內(nèi)特異清除氧自由基的抗氧化酶，對機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著重要作用，并能把超氧陰離子自由基歧化生成過氧化氫，過氧化氫則由體內(nèi)的過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為水[6]，丙二醛(MDA)是脂質(zhì)過氧化物的降解產(chǎn)物，反映出機(jī)體脂質(zhì)過氧化的程度。SOD、GSH-PX活性和MDA含量反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化程度，同時也可以間接反映機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度，及清除自由基的能力。

我們發(fā)現(xiàn)，涌泉穴位埋針7天后，肝臟的SOD、GSH-PX活性和MDA含量呈現(xiàn)了一種有意義的變化，即涌泉穴位埋針使肝臟SOD與GSH-PX的活性顯著升高，MDA含量明顯降低，與模型組比較差異有顯著性意義。肝臟是脂類代謝的主要器官，本實驗?zāi)Ｐ蜑楦咧Y模型，自由基的代謝必然旺盛。涌泉穴位埋針后肝臟SOD、GSH-PX活性相應(yīng)多，MDA降解增加。中醫(yī)認(rèn)為高脂血癥主要病機(jī)是痰瘀內(nèi)停，在治療中采用健脾利濕、化痰祛瘀法為指導(dǎo)，滋補(bǔ)肝腎以絕痰生成之。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為肝主情志，所以如果情志失調(diào)、肝失疏泄，可導(dǎo)致氣機(jī)郁滯、血行不暢、津留為痰，不少學(xué)者提出肝臟功能失調(diào)與高脂血癥的形成也有密切關(guān)系[7]。涌泉穴為足少陰經(jīng)之井穴，具有滋腎水、引火下行的作用。我們的實驗結(jié)果提示，涌泉穴位埋針對肝臟SOD、GSH-PX活性與MDA含量是促進(jìn)其自由基代謝的結(jié)果，作用的靶點可能主要在肝臟。

[1] 吳元潔，王正，王玉風(fēng)，等.“痰濁”與高脂血癥相關(guān)性初探[J].中醫(yī)藥臨床雜志，2004，16(3)：201-202.

[2] 尹方,陳學(xué)忠，楊俐.從腎虛血淤辯治高脂血癥[J].四川中醫(yī)，2006，24(1)：25-26.

[3] 王加鋒，郭煒，展照雙,等.茯苓澤瀉加大黃山楂湯對高脂血癥大鼠血脂的影響[J].吉林中醫(yī)藥，2012，32(4)：395-397.

[4] 謝建華.高脂血癥洽痰六法驗案舉隅[J]．江蘇中醫(yī)藥，2010，42(2)234-235.

[5] 陳蓉,王智彪.針刺高血脂大鼠涌泉穴對血脂水平的影響[J].時珍國藥國藥，2011，22(4)：984-986.

[6] 解桔萍，李蔚，農(nóng)艷，等.豐隆穴對高脂血癥大鼠不同臟器SOD、MDA 的影響[J]．中國針灸，2008，4(28)：293-296．

[7] 王劍波,吳克明,陳志霞，等.耳穴辨證配合涌泉穴位磁貼治療輕中度高血壓療效評價[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2014，21(12)：25-26.

Effects of Needle-embedding Therapy of Yong quan on SOD, GSH-PX and MDA in Liver of the Hyperlipemia Rats

OUYANG-Juan,JIANGShao-zu

(Dept.ofPhysiology,GannanMedicalUniversity,GanZhou,Jiangxi341000)

Objective: To probe effects of needle-embedding therapy of Yongquan on SOD, GSH-PX and MDA in liver of the hyperlipemia rats. Methods: Thirty SD rats were randomly divided into 3 groups, a control group, a model group and a Yongquan group; 10 rats in each group. The hyperlipemia rat model was prepared by feeding high fat forage. The control group was fed by basic forage each day, and other 2 groups were fed with high fat forage each day．After the rats were fed for 2 weeks, needle was given at"Yongquan" in the rats of the Yongquan group for 7 days. At the end of the treatment, the SOD and GSH-PX activities and MDA contents in liver were tsted. Results: Compared to the control group, pointing needle at Yongquan significantly increased SOD and GSH-PX activities in liver and significantly decreased MDA content in liver.Conclusion: Pointing needle at Yongquan regulates SOD and GSH-PX activity and MDA content in liver of the hyperlipemia rats. It is related with promoting metabolism of free radiations in special organs.

point needle; hyperlipidemias; Superoxid Dismutase; Glutathione peroxidase; Malondialdehyde

國家自然科學(xué)基金(NO.31060144);江西省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項目(GJJ09326)

蔣紹祖,男，副教授。E-mail:jsz1846_cn@sina.com

R245.3

A

1001-5779(2016)06-0858-03

10.3969/j.issn.1001-5779.2016.06.006

2016-04-07)(責(zé)任編輯：敖慧斌)