E-cad和EphA2在膀胱癌患者癌組織中的表達及臨床意義

蘆淑娟

（沈陽市第五人民醫(yī)院病理科，遼寧 沈陽 110023）

E-cad和EphA2在膀胱癌患者癌組織中的表達及臨床意義

蘆淑娟

（沈陽市第五人民醫(yī)院病理科，遼寧 沈陽 110023）

目的 研究E-cad以及EphA2在膀胱癌患者癌組織中的表達與臨床意義。方法 收集2015年5月至2016年5月納入治療的膀胱癌患者共40例作為研究對象，其中25例患者為膀胱浸潤性尿路上皮癌，10例患者為膀胱非浸潤性尿路上皮癌，5例患者為膀胱尿路上皮原位癌，設(shè)置為癌變組。另選擇同期經(jīng)健康體檢中檢查排除膀胱癌變的正常人20例作為正常組。取癌變組以及正常組膀胱組織免疫組化標(biāo)本進行處理，對兩組膀胱組織免疫組化標(biāo)本的陽性表達情況進行對比觀察。結(jié)果 正常膀胱黏膜組織E-cad呈陽性表達，癌性病變膀胱組織E-cad呈低表達或不表達。膀胱癌患者中E-cad陽性表達率為22.50%（9/40），顯著低于正常組（P＜0.05）；正常膀胱組織EphA2呈陰性表達，癌性病變膀胱組織EphA2呈高表達或陽性表達。膀胱癌患者中EphA2陽性表達率為80.00%（32/40），顯著高于正常組（P＜0.05）。結(jié)論 臨床可以通過對E-cad以及EphA2表達水平的變化為膀胱癌變的診斷、轉(zhuǎn)移、治療提供一定依據(jù)，有臨床應(yīng)用價值。

膀胱癌患者；E-鈣黏素；酪氨酸蛋酶受體A2；癌組織；表達

既往報道中指出：E-cad（E-鈣黏素）在人體各類上皮細胞中廣泛分布，對上皮極性以及上皮組織完整性的維持有重要意義，且能夠發(fā)揮對鈣離子起來性細胞與細胞間黏附的介導(dǎo)功能，屬于人體非常重要的跨膜糖蛋白成分[1]。EphA2（酪氨酸蛋酶受體A2）同樣在人體多種細胞系以及組織中存在，基因定位染色體為1p36.1，外顯子為17個。有關(guān)報道中認(rèn)為本區(qū)在人體的多種腫瘤病變中有明顯缺失，且EphA2對細胞增生有一定的調(diào)節(jié)作用[2-4]。上述研究結(jié)論提示E-cad以及EphA2在腫瘤病變的組織表達中具有一定特異性[5]。為進一步研究E-cad以及EphA2在膀胱癌患者癌組織中的表達與臨床意義，本研究收集2015年5月至2016年5月納入治療的膀胱癌患者共40例作為研究對象，另選擇同期經(jīng)健康體檢中檢查排除膀胱癌變的正常人20例作為正常組，對兩組E-cad以及EphA2的陽性檢出情況進行對比，現(xiàn)將研究結(jié)果總結(jié)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2015年5月至2016年5月納入治療的膀胱癌患者共40例作為研究對象，其中25例患者為膀胱浸潤性尿路上皮癌，10例患者為膀胱非浸潤性尿路上皮癌，5例患者為膀胱尿路上皮原位癌，設(shè)置為癌變組。另選擇同期經(jīng)健康體檢中檢查排除膀胱癌變的正常人20例作為正常組。兩組基線資料分別為：正常組方面，男性共14例，女性共6例，年齡區(qū)間為38～70周歲，平均年齡為（51.2±2.9）歲；癌變組方面，男性共29例，女性共11例，年齡區(qū)間為41～75周歲，平均年齡為（53.6±1.8）歲。對比兩組基線資料，未見顯著差異（P＞0.05），有可比性。

1.2 方法：取癌變組以及正常組膀胱組織免疫組化標(biāo)本，在室溫條件下用濃度10.0%甲醛溶液完全浸泡（維持24.0 h以上），脫水后石蠟包埋并切片。用甲醛-H2O2封閉組織內(nèi)源性過氧化物，梯度乙醇水化反應(yīng)后用磷酸鹽緩沖液進行沖洗。然后進行微波修復(fù)，并加入濃度5.0%小牛血清覆蓋組織，在水浴箱中進行加熱。加入一抗試劑，于4.0 ℃冰箱中靜置過夜保存。然后用磷酸鹽緩沖液進行沖洗，加二抗試劑，水浴箱中加熱，磷酸鹽緩沖液再次沖洗后加入鏈霉親和素-生物素復(fù)合物試劑盒，再次于水浴箱中進行加熱并用磷酸鹽緩沖液二次沖洗。加入二氨基聯(lián)苯胺顯色劑，靜置并等待上色，然后入水阻斷反應(yīng)，并用蘇木素復(fù)染。入水，入鹽酸酒精，入水進行酚化反應(yīng)，去蘭。梯度乙醇脫水處理后用二甲苯處理，經(jīng)樹脂封片后即可保存觀察[6-7]。

1.3 觀察指標(biāo)：對兩組膀胱組織免疫組化標(biāo)本的陽性表達情況進行對比觀察。E-cad陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為：細胞膜或細胞質(zhì)呈棕黃色，細胞膜染色呈線狀或顆粒狀，陽性細胞數(shù)＞10%；EphA2陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為：細胞陽性根據(jù)細胞質(zhì)內(nèi)可見棕黃色染色進行判定，陽性細胞低于10%計1分，陽性細胞10%～50%計2分，陽性細胞高于50%計3分，染色為陰性計0分，染色為淡黃色計1分，染色為中度黃色計2分，染色為棕黃色計3分。根據(jù)陽性細胞計分×染色強弱計分標(biāo)準(zhǔn)計算總評分，以總評分＞3分為陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)[8]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析：全部數(shù)據(jù)采用EXCEL和SPSS17.0版統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)錄入和統(tǒng)計分析。所有計量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用配對或完全隨機設(shè)計的兩樣本均數(shù)比較的t檢驗或非參統(tǒng)計；計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

正常膀胱黏膜組織E-cad呈陽性表達，癌性病變膀胱組織E-cad呈低表達或不表達。膀胱癌患者中有9例E-cad表達為陽性，E-cad陽性表達率為22.50%（9/40），顯著低于正常組（P＜0.05）；正常膀胱組織EphA2呈陰性表達，癌性病變膀胱組織EphA2呈高表達或陽性表達。膀胱癌患者中有32例EphA2表達為陽性，EphA2陽性表達率為80.00%（32/40），顯著高于正常組（P＜0.05）。

3 討 論

近年來的臨床報道中認(rèn)為，E-cad在膀胱組織中有一定的黏附性，對于正常人膀胱黏膜組織而言，E-cad多呈現(xiàn)出高表達狀態(tài)，陽性表達率可達到95%～100%，而對于膀胱癌變組織而言，E-cad陽性表達減弱，多呈現(xiàn)出低表達或不表達的狀態(tài)。也有相關(guān)報道中認(rèn)為，E-cad參與了細胞遷移的抑制反應(yīng)中，多種癌變組織中細胞表面E-cad的減少或消失會導(dǎo)致癌細胞從瘤塊脫落，成為癌變細胞侵襲、轉(zhuǎn)移的前提，可作為轉(zhuǎn)移抑制的重要標(biāo)志。有研究表明EphA2促發(fā)了某些致癌信號級聯(lián)，阻礙了EphA2的配體結(jié)合及降解，其表達與癌癥分級、分期以及轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系[9-14]。本研究中觀察結(jié)果顯示：正常膀胱黏膜組織E-cad呈陽性表達，癌性病變膀胱組織E-cad呈低表達或不表達。膀胱癌患者中E-cad陽性表達率為22.50%（9/40），顯著低于正常組（P＜0.05），與既往研究結(jié)論基本一致。而EphA2在正常膀胱組織以及膀胱癌變患者膀胱組織中的表達則有負(fù)相關(guān)關(guān)系，即正常膀胱組織EphA2呈陰性表達，癌性病變膀胱組織EphA2呈高表達或陽性表達。膀胱癌患者中EphA2陽性表達率為80.00%（32/40），顯著高于正常組（P＜0.05）。以上研究結(jié)果提示：E-cad在膀胱組織中的低表達以及EphA2在膀胱組織中的高表達可作為膀胱癌變臨床診斷的重要依據(jù)之一。而從預(yù)防、治療膀胱癌疾病的角度上來說，可以嘗試以影響E-cad以及EphA2表達的方式進行干預(yù)，并將其作為膀胱癌變的診斷、轉(zhuǎn)移、治療的重要依據(jù)。

綜上所述，臨床可以通過對E-cad以及EphA2表達水平的變化為膀胱癌變的診斷、轉(zhuǎn)移、治療提供一定依據(jù)，有臨床應(yīng)用價值。

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