孕婦B群無乳鏈球菌篩查及藥敏對比分析

吉彤珍，劉 晶

(首都醫(yī)科大學附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院 檢驗科,北京100026)

孕婦B群無乳鏈球菌篩查及藥敏對比分析

吉彤珍，劉 晶*

(首都醫(yī)科大學附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院 檢驗科,北京100026)

B群無乳鏈球菌(GBS)是孕婦圍產(chǎn)期和新生兒感染的重要病原菌。該菌可寄居于婦女陰道和直腸，可引起婦女生殖道感染，尤其婦女在圍產(chǎn)期感染可導致胎膜早破、早產(chǎn)、流產(chǎn)及宮內(nèi)感染等一系列妊娠并發(fā)癥；在分娩時新生兒經(jīng)過產(chǎn)道可引起肺炎、腦膜炎、敗血癥等感染，嚴重者可造成新生兒死亡。因此如何合理選用抗生素治療顯得尤為重要。為此我們對來我院做妊娠檢查的婦女在35-37周時進行B群無乳鏈球菌篩查，并將藥敏結(jié)果做了對比性分析，希望能對臨床用藥起到很好的指導作用。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 2014年3月-2015年4月來我院就診孕婦，孕期在35-37周，標本為陰道直腸聯(lián)合取分泌物。

1.2 儀器與試劑 采用法國梅里埃公司VITEK2compact全自動細菌鑒定藥敏儀器及配套鑒定卡。5%哥倫比亞羊血瓊脂平板、MH血平板均使用Oxoid公司產(chǎn)品。B-群鏈球菌顯色平板使用安圖生物工程股份有限公司產(chǎn)品。

1.3 實驗方法 將臨床送檢標本按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》規(guī)定的方法進行分離培養(yǎng)[1]，選取可疑菌落做初步鑒定(在血平板上的革蘭氏陽性球菌，β溶血，觸酶陰性，CAMP試驗陽性菌落)。CAMP試驗用金黃色葡萄球菌ATCC25923。

1.4 細菌鑒定 取初步鑒定的菌落在VITEK2compact全自動細菌鑒定藥敏儀器上做鑒定，試驗過程嚴格按操作說明進行。質(zhì)控菌株為ATCC700327鉛黃腸球菌，購于衛(wèi)生部臨檢中心。

1.5 藥敏試驗 用紙片擴散法(Kirby-Bauer,KB法)，挑取37°C培養(yǎng)18-24 h生長良好菌落配成濃度0.5麥氏單位的菌懸液，接種于MH血平板，將藥敏紙片貼于平皿上，37°培養(yǎng)18-24 h后測量抑菌環(huán)直徑，結(jié)果按2010年美國臨床和實驗室標準協(xié)會(CLSI)藥物敏感性判定標準判定藥敏結(jié)果。對紅霉素耐藥、克林霉素敏感或中介株做D試驗，按上述方法進行細菌接種，將紅霉素、克林霉素貼在間隔12 mm相鄰位置，培養(yǎng)18-24 h。紅霉素耐藥，紅霉素相鄰側(cè)的克林霉素抑菌環(huán)出現(xiàn)”截平”現(xiàn)象，報告D試驗陽性，提示克林霉素存在誘導型耐藥。質(zhì)控菌株為ATCC25923。

2 結(jié)果

2.1 在2014年3月-2015年4月間我院做GBS篩查標本共3095份，分離出B群無乳鏈球菌119株，分離率3.8%。藥敏結(jié)果顯示119株無乳鏈球菌對青霉素、氨芐西林、萬古霉素、利奈唑胺敏感性均為100%，對紅霉素、克林霉素、左氧氟沙星耐藥率分別為77.3%、61.3%、44.5%。藥敏結(jié)果見表1。

2.2 D試驗結(jié)果 119株無乳鏈球菌中對紅霉素耐藥、克林霉素敏感或中介共24株，D試驗陽性9株,陽性率47.4%。結(jié)果見表2。

表1 119株無乳鏈球菌對7種抗菌藥物敏感性結(jié)果

表2 D試驗結(jié)果

S：敏感、I：中介、R：耐藥

3 討論

無乳鏈球菌常寄居于女性生殖道，幾乎是圍產(chǎn)期感染的首要致病菌[2]。本次分析中無乳鏈球菌的分離率為3.8%，低于我院以往感染率[3]。原因可能為針對人群不同，培養(yǎng)方法差異且GBS為間歇性帶菌造成。GBS可通過產(chǎn)道上行引起宮內(nèi)感染，也可通過垂直傳播引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等嚴重感染。因此實驗室及時報告無乳鏈球菌的檢出及藥敏結(jié)果可為臨床提供產(chǎn)時治療和用藥依據(jù)。通過對119株無乳鏈球菌的藥敏分析，GBS對青霉素、氨芐西林敏感率為100%，對比我院劉晶2013年的報道[4]青霉素、氨芐西林均未出現(xiàn)耐藥株。根據(jù)CLSI指南無乳鏈球菌對青霉素、氨芐西林敏感可判定對頭孢唑啉，頭孢曲松，頭孢噻肟，頭孢吡肟，阿莫西林/克拉維酸，亞胺培南及美洛培南敏感。青霉素由于副作用小，依然是孕婦及新生兒治療無乳鏈球菌感染的首選藥物。對青霉素輕度過敏患者建議使用第一、第二代頭孢菌素。第三、四代頭孢菌素長期使用容易引起菌群失調(diào)，造成細菌耐藥性增加，同時增加患者的經(jīng)濟負擔，建議慎重選用。對青霉素嚴重過敏患者建議使用紅霉素或克林霉素。本次藥敏結(jié)果GBS對紅霉素耐藥率已高達77.3%，對克林霉素耐藥為61.3%，均高于我院以往的報道[4]?？赡芘c長期經(jīng)驗用藥有關(guān)。GBS有兩種耐藥機制，一種是erm基因編碼的靶位修飾引起的大環(huán)內(nèi)酯類，林可霉素類，鏈陽霉素B耐藥(MLS型耐藥)，另一種是mefA基因編碼外排蛋白使細菌僅對大環(huán)內(nèi)酯類耐藥(MS型耐藥)[5]。MLS型耐藥分為誘導型耐藥(iMLS)和組合型(cMLS)。iMLS型耐藥表型對紅霉素耐藥對克林霉素敏感，cMLS型耐藥表型對紅霉素、克林霉素均耐藥。本實驗測得紅霉素誘導克林霉素耐藥占47.4%，提示臨床醫(yī)生當孕婦有GBS感染且對青霉素嚴重過敏時，應先對紅霉素和克林霉素進行藥敏試驗，根據(jù)藥敏結(jié)果選用抗菌藥物。切實達到及時、有效的治療結(jié)果。無乳鏈球菌對萬古霉素、利奈唑胺敏感率也為100%，但是萬古霉素有腎毒性，還可以導致耳聾，新生兒要慎用。左氧氟沙星耐藥率為44.5%與以往的45.3%的耐藥率相近。由于左氧氟沙星對孕婦及新生兒都有較大的副作用，因此治療GBS時不宜選用。

綜上所述，加強孕婦GBS的篩查工作，及時準確的報告藥敏結(jié)果有助于GBS的早發(fā)現(xiàn)、早治療，從而減少新生兒GBS感染，提高新生兒的出生質(zhì)量。

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程．第3版.南京：東南大學出版社，2006:737-753.

[2]Baker CJ,Byington CL,polin RA.Policy statement - Recommendations for the prevention of perinatal group B streptococcal (GBS) disease[J].Pediatrics,2011,128(3):611.

[3]馬延敏，吳連方，黃醒華，等．孕婦B組溶血性鏈球菌帶菌與母嬰預后的探討[J].北京醫(yī)學，2005,27(9)：516.

[4]劉 晶，吉彤珍，趙 娟．孕婦感染B群無乳鏈球菌的耐藥性分析[J]．中國衛(wèi)生檢驗雜志，2013,23(16)：3298.

[5]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing (S).Sixteenth informational supplement M100-S16.Wayne,Pennsylivania,2006,26(3).

首都醫(yī)科大學附屬北京婦產(chǎn)醫(yī)院中青年學科骨干培養(yǎng)專項(課題編號fcyy201505)

1007-4287(2016)12-2072-02

2015-10-11)

*通訊作者