射血分數(shù)保留的心力衰竭患者血清MMP_2,NT-proBNP與HCY的表達變化

郭建峰，朱嬋虹，鄭錦利，王若濤，陳宏斌

(福建醫(yī)科大學附屬閩東醫(yī)院 檢驗科，福建 福安355000)

射血分數(shù)保留的心力衰竭患者血清MMP_2,NT-proBNP與HCY的表達變化

郭建峰，朱嬋虹，鄭錦利，王若濤，陳宏斌

(福建醫(yī)科大學附屬閩東醫(yī)院 檢驗科，福建 福安355000)

目的 探討射血分數(shù)保留的心力衰竭(HF-PEF)與血清基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP_2)、B型鈉尿肽前體N端(NT-proBNP)及血清同型半胱氨酸(HCY)之間的相關(guān)性。方法 通過臨床病例整體抽樣選取射血分數(shù)保留的心力衰竭患者72例，作為HF-PEF組，按照紐約心臟病協(xié)會(NYHA)心功能分級分為Ⅱ-Ⅳ級，同期從體檢中心體檢者中選取心功能正常者作為對照組，26例，兩組均采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定MMP_2，同時測定血清中NT-proBNP及HCY水平，并對HF-PEF組與對照組之間三項指標進行分析比較。結(jié)果 1.與心功能正常者對照組相比，HF-PEF組中的MMP_2，NT-proBNP與HCY水平均有顯著性升高(P<0.05)，且不同NYHA心功能分組中，三者水平也存在顯著性差異(P<0.05)；2.HF-PEF組患者血清中MMP_2與NT-proBNP、HCY呈明顯正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.842、0.650(P<0.01)，NT-proBNP與HCY之間呈明顯正相關(guān)(r=0.592，P<0.01)。結(jié)論 HF-PEF患者血清中MMP_2,NT-proBNP與HCY水平與心功能分級與疾病的發(fā)展呈正相關(guān)，聯(lián)合檢測三者對HF-PEF患者的診斷和心衰程度的評估具有指導意義。

射血分數(shù)保留；心力衰竭；基質(zhì)金屬蛋白酶2；B型鈉尿肽前體N端；同型半胱氨酸

(ChinJLabDiagn,2016,20:2052)

舒張性心力衰竭(DHF)是指由于左室松弛性不良、順應(yīng)性下降導致心室充盈壓升高,肺靜脈或體循環(huán)靜脈淤血而收縮功能正常的一組臨床綜合征其射血分數(shù)正?；蜉p度降低，存在左室舒張功能異常，因此可稱為射血分數(shù)保留的心力衰竭。有研究顯示[1,2]， HF-PEF約占心力衰竭患者的50%，且發(fā)病率逐年增長、再住院率高、生存率低，預(yù)后差，近年來，國內(nèi)外對此類型的心力衰竭的研究日趨重視。左心室重構(gòu)是心衰的病理基礎(chǔ)，心肌細胞外基質(zhì)(ECM)成分的改變是心室重構(gòu)的重要表現(xiàn)，而高同型半胱氨酸血癥是心血管疾病的獨立危險因素[3]。本文對不同心功能分級的HF-PEF患者血清中MMP_2，NT-proBNP與HCY的水平及相關(guān)性進行探討。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2015年1月-2015年9月期間入住我院心血管內(nèi)科的射血分數(shù)保留的心力衰竭患者72例，作為HF-PEF組，其中男性39例，女性33例，平均年齡63.7±11.6歲。所有入選患者心功能按照NYHA分級：Ⅱ級22例，Ⅲ級27例，Ⅳ級23例。另同期從體檢中心選取心功能正常的健康體檢者26例，作為對照組，其中男性13例，女性13例，平均年齡61.2±9.8歲，排除近期有感染性疾病、惡性腫瘤、糖尿病、嚴重肝腎功能損傷、結(jié)締組織類疾病、自身免疫疾病、及最近有手術(shù)史者。

1.2 診斷標準 所有HF-PEF組病例符合歐洲心臟協(xié)會2007年頒布的HF-PEF診斷標準[4]：①具有心力衰竭的癥狀和(或)體征或臨床癥狀僅表現(xiàn)為呼吸困難；②左室收縮功能正?；蜉p度異常[LVEF>(45%-50%)]，左室舒張末容積指數(shù)(LVEDVI)<97 mL/m2；③具有左室舒張功能異常的證據(jù)：包括有創(chuàng)評價左室舒張功能不全的指標，如左心室舒張末壓或平均肺毛細血管楔壓等；以及相關(guān)無創(chuàng)性評價指標，如超聲心動圖等；④心電圖證明的房顫；⑤排除心臟瓣膜病、限制型心肌病或肥厚型心肌病、心包炎、甲狀腺疾病、慢性阻塞性肺疾患(COPD)和大量分流的先天性心臟病等相關(guān)疾病

1.3 儀器和試劑 貝克曼AU5821全自動生化分析儀、羅氏COBAS e601電化學發(fā)光儀與BIO-RAD680酶免分析儀；北京利得曼HCY體外診斷試劑盒，NT-proBNP使用的試劑為羅氏COBAS e601電化學發(fā)光儀原裝配套試劑，武漢Elabscience公司購買的人基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP_2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒。1.4 方法 所有研究對象空腹靜脈采血，嚴格按照SOP與試劑說明書操作。HCY采用循環(huán)酶法測定，NT-proBNP采用電化學發(fā)光法測定，HCY與NT-proBNP在采血后當日檢測，而后將標本血清分離，EP管分裝后置于-80℃保存，在所有樣本收集完畢，常溫復溶半小后時，使用ELISA方法檢測MMP_2。

2 結(jié)果

2.1HF-PEF組與對照組血清中MMP_2,NT-BNP與HCY水平比較

HF-PEF組(含NYHAⅡ級、Ⅲ級、Ⅳ級)血清中MMP_2、NT-proBNP、HCY水平均高于對照組(P<0.05)；HF-PEF組中，不同心功能NYHA分級患者血中MMP_2、NT-proBNP、HCY水平均存在差異，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2HF-PEF組患者血清中MMP_2、NT-proBNP、HCY相關(guān)性分析

采用Pearson相關(guān)分析，MMP_2與NT-proBNP、HCY均呈明顯正相關(guān)(P<0.01),相關(guān)系數(shù)分別為0.842、0.650，NT-proBNP與HCY也呈明顯正相關(guān)(P<0.01)，相關(guān)系數(shù)分別為0.592。

表1 兩組血清中MMP_2,NT-BNP與HCY水平比較

注：與對照組比較aP<0.05;與NYHAⅡ級組比較bP<0.05；與NYHAⅢ級組比較cP<0.05。

3 討論

因舒張概念障礙導致的心衰是近年臨床研究的熱點,過去稱之為舒張性心力衰竭 (DHF),其傳統(tǒng)定義是指由于左室松弛性不良、順應(yīng)性下降導致心室充盈壓升高,肺靜脈或體循環(huán)靜脈淤血而收縮功能正常的一組臨床綜合征。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)DHF存在輕度收縮功能不全[5],只是程度較HF-REF輕，其射血分數(shù)(EF)不完全正常(35-50%之間)，因此稱為射血分數(shù)保留的心力衰竭更符合其臨床特征。有研究顯示[6]，HPFEF的發(fā)病機制是左心向心性重構(gòu)、舒張功能不全、左心房擴大、血管僵硬度及其和左心室的相互作用、心肌收縮功能異常等多因素作用引起，其在心力衰竭患者中所占比例大，預(yù)后差，臨床表現(xiàn)多變，常見于婦女、肥胖患者、老年人和患有糖尿病或高血壓的病人，己經(jīng)越來越引起醫(yī)學界的關(guān)注和研究。

心肌細胞外基質(zhì)(ECM)是由纖維蛋白、彈性蛋白、蛋白多糖及基層膜蛋白組成的網(wǎng)絡(luò)。心肌發(fā)生纖維化是心室重構(gòu)的病理因素，任何改變心肌纖維化的干預(yù)措施，包括同型膠原的含量、分布、性狀、超微結(jié)構(gòu)、膠原纖維的破壞以及Ⅰ型和Ⅳ型膠原的比例均會導致心肌僵硬度的增加而出現(xiàn)舒張功能不全?；|(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP) 是一組能特異地降解ECM成分的Zn2+依賴的酶家族,能溶解纖維膠原,在組織重構(gòu)中起重要作用，其中MMP_2 是血管壁細胞表達和分泌的最主要的MMP，可以高效降解基底膜的主要成分-Ⅰ和IV型膠原，并促使EMC釋放胰島素樣生長因子、成纖維細胞生長因子等生物活性因子，介導心肌重構(gòu)過程[7]，其濃度的增高與心力衰竭的發(fā)展呈相關(guān)性。本文研究結(jié)果顯示，與心功能正常對照組相比，HF-PEF患者血清中的MMP_2水平顯著性升高(P<0.05)，說明在HF-PEF患者中，MMP_2水平升高，對左心ECM成分降解與改變，致心肌僵硬度的增加而出現(xiàn)舒張功能不全與介導的左心室與左心房的重構(gòu)[8]方面起重要作用。

proBNP由心室肌細胞分泌產(chǎn)生，該物質(zhì)降解可產(chǎn)生腦鈉肽(BNP)及無活性的NT-proBNP，NT-proBNP的產(chǎn)生與心室壁壓力及牽張刺激有密切關(guān)系，可作為心功能損傷的血清學標志物，也是判斷心衰嚴重程度及預(yù)后的重要指標[9-10]。HF-PEF患者因其左室舒張功能減退，心室壁壓力及牽張刺激導致proBNP分泌增多。從而可在血液中檢測到較高水平的NT-proBNP。同型半胱氨酸(HCY)即2-氨基-4-羥基丁酸，參與甲硫氨酸的代謝過程，是S-甲基甲硫氨酸代謝過程中的重要中間產(chǎn)物，高HCY血癥可誘導體內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生過氧化氫，后者對血管內(nèi)皮細胞有強烈的毒性損傷作用，隨著血漿HCY濃度的升高或作用時間延長，血管內(nèi)皮細胞凋亡數(shù)量明顯增加，細胞損傷程度也明顯增強，誘導內(nèi)溶能力破壞機體凝血和纖溶之間的平衡，引起血管內(nèi)皮功能紊亂[11]，內(nèi)皮分泌的血管舒張因子一氧化氮(CO)減少，血管收縮反應(yīng)增強，血壓增高，HCY在損傷內(nèi)皮細胞的同時，還刺激血管平滑肌細胞生長導致血流通路受阻，使外周阻力增加，心臟射血阻力加重,致使心肌肥厚、心肌氧耗增加,左室舒張末壓上升，心室僵硬程度增加，進一步加重后負荷，使心肌能量儲備減少，惡化舒張功能，加重心衰的程度。因此，血漿HCY水平是心衰的預(yù)測因子，高HCY是心衰的危險因素[12]。從實驗結(jié)果顯示，與心功能正常對照組相比，HF-PEF患者血清中的NT-proBNP與HCY水平顯著性升高(P<0.05)，說明兩者在HF-PEF疾病過程中呈現(xiàn)高表達，提示NT-proBNP與HCY在HF-PEF疾病中具有的診斷價值。

綜合上述結(jié)果，血清中MMP_2、NT-proBNP與HCY水平在HF-PEF疾病中均呈現(xiàn)不同程度的高表達，具有一定的診斷價值。三者在HF-PEF組患者血清中的水平相互之間呈現(xiàn)明顯正相關(guān)(P<0.01)，且血清中MMP_2、NT-proBNP與HCY水平在不同的心功能NYHA分級患者中，各組間存在差異，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，三者水平隨NYHA心功能分級呈遞增趨勢，提示MMP_2、NT-proBNP與HCY的升高與心力衰竭的進展及嚴重程度具有相關(guān)性。利用MMP_2、NT-proBNP與HCY的檢測，可良好地反應(yīng)射血分數(shù)保留的心力衰竭的嚴重程度及預(yù)后。

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Expressions of serum MMP_2,NT-proBNP and HCY in heart failure with preserved ejection fraction Patients

GUOJian-feng,ZHUChan-hong,ZHENGJin-li,etal.

(DepartmentofClinicalLaboratory,MingdongHospital,Fuan355000,China)

Objective To study the relationship between the heart failure with preserved ejection fraction and serum Matrix Metalloproteinase 2 (MMP_2),N-terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide (NT-proBNP) and homocysteine (HCY).Methods The patients (n=72) with HF-PEF were chosen as HF-PEF group by using cluster sampling method,and then HF-PEF group was divided grade Ⅱ-Ⅳ by NYHA.Meanwhile the persons having physical examination with normal heart function were chosen as control group (n=26).MMP_2 were determined by ELISA,and NT-proBNP,HCY were determined simultaneously,the results were analyzed and compared between the HF-PEF group and control group.Results 1.Compared with the control group,the levels of MMP_2,NT-proBNP and HCY rised significantly in HF-PEF group (P<0.05),and there were significant difference among grade Ⅱ-Ⅳ groups by NYHA with these three items.2.MMP_2 was positively correlated to NT-proBNP and HCY (r=0.842,r=0.650,P<0.01),NT-proBNP and HCY were positively correlated to each other(r=0.592,P<0.01).Conclusion The level of serum MMP_2,NT-proBNP and HCY were positively correlated to cardiac functional grading and disease development,The combined detection of these three items has guiding significance in the diagnosis and severity of HF-PEF.

Preserved ejection fraction;Heart failure;Matrix Metalloproteinase 2;N-terminal Pro-Brain Natriuretic Peptide;homocysteine

1007-4287(2016)12-2052-03

R446.1

A

2016-02-17)